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口蹄疫病毒Asia1/JS/China/2005株基因组全长感染性克隆的构建
被引量：
4
1
作者
李平花
白兴文
+6 位作者
卢曾军
孙普
郭建宏
曹伟军
刘湘涛
殷宏
刘在新
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第5期706-711,共6页
利用长距离RT-PCR技术扩增病毒基因组3′端覆盖口蹄疫病毒Asia1/JS/China/2005株近全长的3个片段(共约7.5 kb),并利用单一酶切位点将其分别克隆到pBluescriptSK+载体上。利用融合PCR扩增到基因组5′端含有15个C碱基的基因片段(约700 bp)...
利用长距离RT-PCR技术扩增病毒基因组3′端覆盖口蹄疫病毒Asia1/JS/China/2005株近全长的3个片段(共约7.5 kb),并利用单一酶切位点将其分别克隆到pBluescriptSK+载体上。利用融合PCR扩增到基因组5′端含有15个C碱基的基因片段(约700 bp),并将其连接至pGEM-T载体。最后将这4个片段的阳性克隆装配至剔除T7启动子的低拷贝载体pcDNA3.1/Zeo(+)中构建该病毒株的全长cDNA克隆。以构建的FMDV Asia1/JS/China/2005株全长cDNA为模板,使用T7RNA聚合酶在体外转录得到病毒RNA,通过脂质体将其导入BHK细胞获得拯救病毒。对收获的病毒分别用RT-PCR、间接免疫荧光、电子显微镜观察和乳鼠致病性分析结果证实,通过体外转录获得了具有感染性的口蹄疫病毒。该株感染性克隆的构建为深入研究口蹄疫病毒的致病机制及研制新型疫苗等奠定了基础。
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关键词
口蹄疫病毒
asia
1
/js
/china
/2005
株
全长CDNA
转录物RNA
病毒拯救
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职称材料
Asia1型口蹄疫病毒基因组的测序分析
被引量：
2
2
作者
王琳萱
陈思敏
+1 位作者
张印红
孙东杰
《浙江农业学报》
CSCD
北大核心
2014年第2期290-296,共7页
对中国口蹄疫病毒Asia1/JS/2005毒株的全基因组进行了分段扩增并测序。结果表明,该毒株的基因组全长为8 174 nt,其中5’UTR为1 092 nt;ORF为6 990 nt;3’UTR为92 nt。利用DNAstar软件对该毒株和Asia1型其他24毒株基因组序列进行同源性...
对中国口蹄疫病毒Asia1/JS/2005毒株的全基因组进行了分段扩增并测序。结果表明,该毒株的基因组全长为8 174 nt,其中5’UTR为1 092 nt;ORF为6 990 nt;3’UTR为92 nt。利用DNAstar软件对该毒株和Asia1型其他24毒株基因组序列进行同源性分析表明,该毒株的非结构蛋白和5’UTR比较保守。研究还发现了可能与生物学功能相关的新的保守和变异区域。系统树分析表明Asia1/JS/2005,Asia1/1/YZ/2006,Asia1/WHN/2006,Asia1/HN/2006和Asia1/YS/2005属于同一分支,表明这些毒株间有着紧密的遗传关系,其中与其亲缘关系最为密切的是Asia1/YS/2005。
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关键词
口蹄疫病毒
asia
1
js
2005
基因组
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职称材料
题名
口蹄疫病毒Asia1/JS/China/2005株基因组全长感染性克隆的构建
被引量：
4
1
作者
李平花
白兴文
卢曾军
孙普
郭建宏
曹伟军
刘湘涛
殷宏
刘在新
机构
中国农业科学院兰州兽医研究所
甘肃农业大学
出处
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第5期706-711,共6页
基金
国家“973”项目(2005CB523201)
文摘
利用长距离RT-PCR技术扩增病毒基因组3′端覆盖口蹄疫病毒Asia1/JS/China/2005株近全长的3个片段(共约7.5 kb),并利用单一酶切位点将其分别克隆到pBluescriptSK+载体上。利用融合PCR扩增到基因组5′端含有15个C碱基的基因片段(约700 bp),并将其连接至pGEM-T载体。最后将这4个片段的阳性克隆装配至剔除T7启动子的低拷贝载体pcDNA3.1/Zeo(+)中构建该病毒株的全长cDNA克隆。以构建的FMDV Asia1/JS/China/2005株全长cDNA为模板,使用T7RNA聚合酶在体外转录得到病毒RNA,通过脂质体将其导入BHK细胞获得拯救病毒。对收获的病毒分别用RT-PCR、间接免疫荧光、电子显微镜观察和乳鼠致病性分析结果证实,通过体外转录获得了具有感染性的口蹄疫病毒。该株感染性克隆的构建为深入研究口蹄疫病毒的致病机制及研制新型疫苗等奠定了基础。
关键词
口蹄疫病毒
asia
1
/js
/china
/2005
株
全长CDNA
转录物RNA
病毒拯救
Keywords
foot-and-mouth disease virus
asia1/js/china/2005 strain
full-length cDNA
transcript RNA
virus rescues
分类号
S852.659.6 [农业科学—基础兽医学]
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
Asia1型口蹄疫病毒基因组的测序分析
被引量：
2
2
作者
王琳萱
陈思敏
张印红
孙东杰
机构
兰州大学公共卫生学院营养与食品卫生研究所
中国农业科学院兰州兽医研究所/家畜疫病病原生物学国家重点实验室
出处
《浙江农业学报》
CSCD
北大核心
2014年第2期290-296,共7页
基金
中央级公益性科研院所基本科研业务费专项基金项目(1610322013023)
文摘
对中国口蹄疫病毒Asia1/JS/2005毒株的全基因组进行了分段扩增并测序。结果表明,该毒株的基因组全长为8 174 nt,其中5’UTR为1 092 nt;ORF为6 990 nt;3’UTR为92 nt。利用DNAstar软件对该毒株和Asia1型其他24毒株基因组序列进行同源性分析表明,该毒株的非结构蛋白和5’UTR比较保守。研究还发现了可能与生物学功能相关的新的保守和变异区域。系统树分析表明Asia1/JS/2005,Asia1/1/YZ/2006,Asia1/WHN/2006,Asia1/HN/2006和Asia1/YS/2005属于同一分支,表明这些毒株间有着紧密的遗传关系,其中与其亲缘关系最为密切的是Asia1/YS/2005。
关键词
口蹄疫病毒
asia
1
js
2005
基因组
Keywords
foot-and-mouth disease virus
asia
1
/js
/2005
genome
分类号
S852.659.6 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
口蹄疫病毒Asia1/JS/China/2005株基因组全长感染性克隆的构建
李平花
白兴文
卢曾军
孙普
郭建宏
曹伟军
刘湘涛
殷宏
刘在新
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009
4
在线阅读
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职称材料
2
Asia1型口蹄疫病毒基因组的测序分析
王琳萱
陈思敏
张印红
孙东杰
《浙江农业学报》
CSCD
北大核心
2014
2
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职称材料
已选择
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引证文献
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