Annexin V-FITC/PI双标记与Hoechst33342/PI双标记流式细胞术检测细胞凋亡的比较 被引量：49

1

作者 张伟 梁智辉 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第11期1209-1212,共4页

目的比较annexin V-FITC/PI双标记与Hoechst33342/PI双标记流式细胞术检测细胞凋亡的优缺点。方法用DEX诱导胸腺细胞凋亡和H2O2诱导K562细胞系细胞凋亡,应用Hoechst33342/PI和annexin V-FITC/PI双色标记流式细胞术检测体系检测细胞凋亡... 目的比较annexin V-FITC/PI双标记与Hoechst33342/PI双标记流式细胞术检测细胞凋亡的优缺点。方法用DEX诱导胸腺细胞凋亡和H2O2诱导K562细胞系细胞凋亡,应用Hoechst33342/PI和annexin V-FITC/PI双色标记流式细胞术检测体系检测细胞凋亡情况。结果 Annexin V-FITC/PI双标记法能准确地反映2种模型中的细胞凋亡情况,与其检测原理一致;而Hoechst33342/PI双标记法虽能准确反映DEX诱导胸腺细胞的凋亡情况,但在检测H2O2诱导的K562细胞凋亡时,其早期凋亡细胞的分布与其检测原理明显不符。结论与annexin-V-FITC/PI双标记法相比,Hoechst33342/PI双标记法有一定的局限性。 展开更多

关键词 凋亡 annexin v-fitc/pi Hoechst33342/pi 流式细胞术

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Annexin V FITC/PI流式细胞术检测姜黄素诱导的肝星状细胞凋亡 被引量：13

2

作者 何雅军 舒建昌 +1 位作者 吕霞 沈雁 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2009年第1期28-30,共3页

目的:探讨Annexin V FITC/PI流式细胞术在检测姜黄素诱导的肝星状细胞(HSC)凋亡中的应用。方法:不同浓度姜黄素作用肝星状细胞株HSC-T6 24h,用Annexin V FITC/PI流式细胞术检测HSC凋亡。结果:姜黄素浓度为10μmol/L时,早期凋亡细胞开始... 目的:探讨Annexin V FITC/PI流式细胞术在检测姜黄素诱导的肝星状细胞(HSC)凋亡中的应用。方法:不同浓度姜黄素作用肝星状细胞株HSC-T6 24h,用Annexin V FITC/PI流式细胞术检测HSC凋亡。结果:姜黄素浓度为10μmol/L时,早期凋亡细胞开始增多,至30μmol/L时,坏死细胞开始增多,随姜黄素浓度增高,各组凋亡细胞随之增多。0、10、20、30、40μmol/L5组的凋亡率分别是(3.81±0.64)%、(6.52±1.88)%、(11.61±2.79)%、(52.03±4.38)%、(87.11±12.62)%,与0μmol/L组比较,20、30、40μmol/L3组的凋亡率差异有统计学意义(P<0.05)。结论:Annexin V FITC/PI流式细胞术可定量检测姜黄素诱导的HSC早期凋亡。 展开更多

关键词 细胞凋亡 流式细胞术 姜黄素 annexin v 肝星状细胞

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流式细胞术定量检测细胞凋亡3种方法的比较研究 被引量：36

3

作者 郑骏年 谢叔良 +1 位作者 陈家存 黄键 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第10期467-469,共3页

目的：探讨流式细胞术定量检测细胞凋亡３ 种方法的价值。方法：同时使用ＰＩ染色、ＴＵＮＥＬ及Ａｎｎｅｘｉｎ ＶＰＩ３ 种方法定量检测地塞米松处理小鼠的胸腺细胞凋亡发生率。结果：ＰＩ染色、Ａｎｎｅｘｉｎ ＶＰＩ、ＴＵＮＥ... 目的：探讨流式细胞术定量检测细胞凋亡３ 种方法的价值。方法：同时使用ＰＩ染色、ＴＵＮＥＬ及Ａｎｎｅｘｉｎ ＶＰＩ３ 种方法定量检测地塞米松处理小鼠的胸腺细胞凋亡发生率。结果：ＰＩ染色、Ａｎｎｅｘｉｎ ＶＰＩ、ＴＵＮＥＬ３ 种方法凋亡检出率分别为２７．１９％ 、３２ ．２８％ 、５０ ．１７ ％ ，两两之间均有显著差异（ Ｐ＜ ０ ．０１） 。但仅Ａｎｎｅｘｉｎ ＶＰＩ法可将正常细胞、凋亡细胞、死亡细胞区分开来。结论：Ａｎｎｅｘｉｎ ＶＰＴ法是目前最为理想的凋亡定量检测方法。 展开更多

关键词 流式细胞术 annexin v TUNEL pi 细胞凋亡

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黄芪甲苷对缺氧缺糖/复氧复糖PC12细胞凋亡的影响 被引量：10

4

作者 靳晓飞 张颖 +3 位作者 周晓红 武密山 赵艳萌 高维娟 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第10期1411-1415,共5页

目的观察黄芪甲苷对缺氧缺糖/复氧复糖PC12细胞凋亡的影响。方法取对数生长期的PC12细胞,随机分为4组:正常对照组、缺氧缺糖/复氧复糖组、黄芪甲苷组和黄芪甲苷溶剂对照组。其中缺氧缺糖/复氧复糖组、黄芪甲苷组和黄芪甲苷溶剂对照组进... 目的观察黄芪甲苷对缺氧缺糖/复氧复糖PC12细胞凋亡的影响。方法取对数生长期的PC12细胞,随机分为4组:正常对照组、缺氧缺糖/复氧复糖组、黄芪甲苷组和黄芪甲苷溶剂对照组。其中缺氧缺糖/复氧复糖组、黄芪甲苷组和黄芪甲苷溶剂对照组进行缺氧缺糖3h后再复氧复糖12 h,并于复氧复糖的同时加入黄芪甲苷。用倒置显微镜观察细胞形态,MTT法检测细胞活性,TUNEL染色和Annexin V-FITC/PI流式细胞术检测细胞凋亡情况。结果正常对照组PC12细胞贴壁生长,呈多角形,突起明显,突起之间交织成网状,细胞膜光滑且完整,胞体折光性较强。与正常对照组相比,缺氧缺糖/复氧复糖组细胞变圆或肿胀,突起回缩或消失,细胞膜破损,胞体折光性差,细胞活性明显下降(P<0.05),细胞凋亡率和凋亡指数明显升高(P<0.05)。与缺氧缺糖/复氧复糖组相比,黄芪甲苷组细胞生长状态见好转,突起较为明显,胞体折光性较好,细胞活性升高(P<0.05),细胞凋亡率和凋亡指数下降(P<0.05)。黄芪甲苷溶剂对照组与缺氧缺糖/复氧复糖组相比无明显差异(P>0.05)。结论黄芪甲苷可减轻缺氧缺糖/复氧复糖引起的PC12细胞损伤,提高细胞活性,抑制细胞凋亡。 展开更多

关键词 缺氧缺糖/复氧复糖 黄芪甲苷 PC12细胞 细胞凋亡 TUNEL染色 annexinv-fitc/pi流式细胞术

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猪繁殖与呼吸综合征病毒实验感染SPF猪外周血单核细胞和肺泡巨噬细胞早期凋亡细胞的观察 被引量：8

5

作者 张晓梅 杨汉春 +3 位作者 李华 任慧英 高齐瑜 陈艳红 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 1999年第11期11-13,共3页

采用Ａｎｎｅｘｉｎ ＶＦＩＴＣ／ＰＩ双染色法，用流式细胞仪检测了猪繁殖与呼吸综合征病毒（ＰＲＲＳＶ）实验感染ＳＰＦ猪不同时期外周血单核细胞和肺泡巨噬细胞感染Ａｎｎｅｘｉｎ ＶＦＩＴＣ＋ ／ＰＩ－ 细胞群（早期凋亡细胞... 采用Ａｎｎｅｘｉｎ ＶＦＩＴＣ／ＰＩ双染色法，用流式细胞仪检测了猪繁殖与呼吸综合征病毒（ＰＲＲＳＶ）实验感染ＳＰＦ猪不同时期外周血单核细胞和肺泡巨噬细胞感染Ａｎｎｅｘｉｎ ＶＦＩＴＣ＋ ／ＰＩ－ 细胞群（早期凋亡细胞群）。结果显示，ＰＲＲＳＶ 感染猪外周血单核细胞和肺泡巨噬细胞Ａｎｎｅｘｉｎ ＶＦＩＴＣ＋ ／ＰＩ－ 细胞群的表达率均明显高于正常对照猪（ｐ＜ ０．０１），感染后２４ｈ 表达率达最高值。结果提示，ＰＲＲＳＶ 感染早期可以诱导受感染猪单核巨噬细胞凋亡。 展开更多

关键词 PRRSv感染 细胞凋亡 猪 流式细胞术

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采用EDTA-胰酶处理难消化细胞株在凋亡检测分析中的可行性 被引量：4

6

作者 符蓉 赵犇鹏 +1 位作者 杨洁 田烨 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期1422-1425,共4页

目的研究细胞胰酶消化液中有无EDTA对流式细胞术检测细胞凋亡率的影响。方法以7种难消化细胞株作为实验对象,分为对照组和H2O2组(加H2O2促凋亡)。采用不同方法(不含EDTA的0.25%胰酶、含EDTA的0.25%胰酶、含EDTA的0.25%胰酶消化离心弃上... 目的研究细胞胰酶消化液中有无EDTA对流式细胞术检测细胞凋亡率的影响。方法以7种难消化细胞株作为实验对象,分为对照组和H2O2组(加H2O2促凋亡)。采用不同方法(不含EDTA的0.25%胰酶、含EDTA的0.25%胰酶、含EDTA的0.25%胰酶消化离心弃上清之后用1×PBS洗1次)对细胞进行消化处理,利用Annexin V-FITC荧光抗体标记细胞,流式细胞术检测细胞凋亡率。计算相同消化细胞条件下两组细胞的凋亡率差值。结果统计学分析结果显示:7种细胞株在3种消化细胞条件下的细胞凋亡率差值比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论胰酶中含EDTA对流式细胞术检测细胞凋亡无显著影响;因此可以利用EDTA抗凝集这一特性,将其加入胰酶消化液中,用于某些难消化细胞株凋亡样品的制备。 展开更多

关键词 流式细胞术 EDTA 凋亡 annexin v 胰酶

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慢性肾衰竭病人红细胞表面磷脂酰丝氨酸的表达 被引量：3

7

作者 孔庆瑜 黄玉娴 +2 位作者 吴杏 彭文兴 汪涛 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期498-498,502,共2页

目的 :研究血液透析 (HD)、腹膜透析 (CAPD)、无透析慢性肾衰竭 (Non -D)病人及正常人红细胞表面磷脂酰丝氨酸 (PS)的表达情况 ,以探讨PS的表达对红细胞功能影响的关系。方法 :采用对PS有高度亲和力的磷脂结合蛋白annexinV检测技术 ,利... 目的 :研究血液透析 (HD)、腹膜透析 (CAPD)、无透析慢性肾衰竭 (Non -D)病人及正常人红细胞表面磷脂酰丝氨酸 (PS)的表达情况 ,以探讨PS的表达对红细胞功能影响的关系。方法 :采用对PS有高度亲和力的磷脂结合蛋白annexinV检测技术 ,利用流式细胞仪对细胞进行荧光测定。结果 :HD病人红细胞PS的表达较高 ( 2 13± 1 12 ) %,CAPD组 ( 1 35± 0 84) %和Non -D病人 ( 1 39± 0 70 ) %相对较低 ,但都明显高于正常人对照组 ( 0 71±0 34) %。结论 :慢性肾衰竭 (CRF)病人PS的高表达与尿毒症之间有明显的相关性。 展开更多

关键词 慢性肾衰竭 病人 红细胞表面 磷脂酰丝氨酸 表达 血液透析 腹膜透析 流式细胞术

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流式细胞术三种染色方法检测体外纯化扩增的NK细胞的细胞毒作用比较 被引量：5

8

作者 郭继强 韩亚萍 +4 位作者 李芳 赵晴 贾原 靳保利 张俊萍 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期1691-1697,共7页

目的:比较流式细胞术3种不同染色方法检测体外诱导扩增后NK细胞的细胞毒活性效果。方法:收集健康志愿者外周血,体外诱导扩增NK细胞,在培养第17天后分为3组,每组按10∶1、20∶1、40∶1 3个效靶比混合,共同培养4 h,并分组用3种不同方法染... 目的:比较流式细胞术3种不同染色方法检测体外诱导扩增后NK细胞的细胞毒活性效果。方法:收集健康志愿者外周血,体外诱导扩增NK细胞,在培养第17天后分为3组,每组按10∶1、20∶1、40∶1 3个效靶比混合,共同培养4 h,并分组用3种不同方法染色后经流式细胞术检测。A组:CFSE/Annectin-V/7-AAD三色荧光染色法;B组:Annectin-V/PI双色荧光染色法;C组:CFSE/PI双色荧光染色法。结果:培养17 d后,NK细胞(CD3-CD56+)由培养第0天(16.34±10.51)%增加到(83.63±10.63)%(P<0.05)。3种染色方法检测结果均显示,扩增后NK细胞对K562细胞具有显著细胞毒活性:A组NK细胞对K562细胞的细胞毒活性均明显高于B和C组(P<0.05),当效靶比为10∶1时,A、B和C 3个组细胞毒活性分别为(36.56±3.69)%、(22.35±2.71)%和(10.85±2.09)%;当效靶比为20∶1时细胞毒活性分别为(47.83±5.52)%、(39.07±5.55)%和(29.61±4.81)%;当效靶比为40∶1时细胞毒活性则分别为(67.7±4.77)%、(51.51±4.43)%和(44.12±5.62)%,差异均有显著统计学意义(P<0.05)。结论:健康者外周血经体外分离培养,可得到高纯度NK细胞;流式细胞检测技术CFSE/Annectin-V/7-AAD三色荧光染色法能特异性地和灵敏地检测NK细胞的细胞毒活性。 展开更多

关键词 流式细胞技术 细胞毒作用 NK细胞 CFSE annexin-v/7-AAD

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荧光显微镜法检测小鼠胸腺细胞凋亡的染料选择 被引量：3

9

作者 苗苗 郭茜茜 +1 位作者 吴丹丹 于广 《电子显微学报》 CAS CSCD 2015年第3期272-276,共5页

目的:通过荧光显微镜检测对比不同染料的特点,并找出最佳染料组合用于胸腺细胞凋亡检测。方法:PI,7-AAD,Annexin V-Alexa Flour 488(AF488)分别单染胸腺细胞,Annexin V-AF488与PI/7-AAD双染胸腺细胞在荧光显微镜下观察,Annexin V-APC与7... 目的:通过荧光显微镜检测对比不同染料的特点,并找出最佳染料组合用于胸腺细胞凋亡检测。方法:PI,7-AAD,Annexin V-Alexa Flour 488(AF488)分别单染胸腺细胞,Annexin V-AF488与PI/7-AAD双染胸腺细胞在荧光显微镜下观察,Annexin V-APC与7-AAD双染胸腺细胞在流式细胞仪下观察。结果:采用荧光显微镜检测,PI单染后在绿色模块下能够看到阳性信号,而7-AAD单染后在绿色模块下不会出现阳性信号;三种染料中,PI与7-AAD单染细胞涂片后随着时间的延长阳性信号逐渐增多,Annexin V-AF488单染细胞涂片后随着时间的延长阳性信号稍微减弱;7-AAD与Annexin V-AF488双染胸腺细胞在荧光显微镜下检测的结果和7-AAD与Annexin V-APC双染胸腺细胞流式细胞仪检测的结果无差异。结论:采用荧光显微镜法检测胸腺细胞凋亡,7-AAD与Annexin V-AF488结合最佳。 展开更多

关键词 pi 7-AAD annexin v-AF488 胸腺细胞凋亡 荧光显微镜 流式细胞仪

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双标记流式细胞术定量分析5-FU诱导胃癌细胞早期凋亡 被引量：9

10

作者 雷晓 余佩武 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第7期855-857,共3页

目的　以AnnexinV FITC/PI双标记流式细胞术检测 5 FU诱导胃癌细胞株SCG790 1早期凋亡。方法　 2 50、1 2 5、50以及2 5mg/L不同浓度 5 FU处理SCG790 1胃癌细胞 0、6、1 2、1 8、2 4、30h ,AnnexinV FITC/PI双标记流式细胞术检测肿瘤细... 目的　以AnnexinV FITC/PI双标记流式细胞术检测 5 FU诱导胃癌细胞株SCG790 1早期凋亡。方法　 2 50、1 2 5、50以及2 5mg/L不同浓度 5 FU处理SCG790 1胃癌细胞 0、6、1 2、1 8、2 4、30h ,AnnexinV FITC/PI双标记流式细胞术检测肿瘤细胞凋亡。结果　早期 (0～ 2 4h)瘤细胞凋亡比例随 5 -FU作用剂量增加和时间延长而显著提高 (P <0 0 1 ) ;后期 (2 4～30h)瘤细胞以坏死增加为主(P <0 0 1 )而凋亡比例反而降低。结论　 5 FU诱导细胞凋亡呈时间以及剂量依赖关系。AnnexinV/PI双标记法可以清楚区分正常、坏死、机械损伤以及凋亡细胞群落 。 展开更多

关键词 双标记流式细胞术 胃癌 细胞凋亡 5-氟尿嘧啶

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淫羊藿素对大鼠软骨细胞作用的实验研究 被引量：10

11

作者 何李乐 王万春 《中南大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期517-521,共5页

目的:研究淫羊藿素对大鼠软骨细胞增殖、凋亡的影响。方法:将细胞随机分为6组,分别予以浓度为0,4,8,16,32,64μmol/L的淫羊藿素(纯度为99%)处理不同时间组。药物作用于细胞后,MTT比色法检测大鼠软骨细胞的增殖,Annexin V/PI双染色流式... 目的:研究淫羊藿素对大鼠软骨细胞增殖、凋亡的影响。方法:将细胞随机分为6组,分别予以浓度为0,4,8,16,32,64μmol/L的淫羊藿素(纯度为99%)处理不同时间组。药物作用于细胞后,MTT比色法检测大鼠软骨细胞的增殖,Annexin V/PI双染色流式细胞术检测细胞的凋亡。结果:MTT实验结果显示,4和8μmol/L的淫羊藿素作用于大鼠软骨细胞72 h,大鼠软骨细胞的增殖能力高于对照组(P<0.05);16,32,64μmol/L的淫羊藿素作用于大鼠软骨细胞72 h,大鼠软骨细胞的增殖能力低于对照组(P<0.05)。流式细胞仪检测结果显示,在药物处理24 h和48 h后,4μmol/L的淫羊藿素所引起的细胞凋亡率较对照组明显降低(P<0.05);8,16,32μmol/L的淫羊藿素则会增加细胞的凋亡率(P<0.05)。结论:淫羊藿素在低浓度(4,8μmol/L)时能促进大鼠软骨细胞的体外增殖和抑制凋亡,而过高浓度的淫羊藿素反会抑制细胞增殖和促进凋亡。 展开更多

关键词 大鼠软骨细胞 淫羊藿素 MTT比色法 annexin v/pi双染色流式细胞术

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快速诱导细胞凋亡方法探讨 被引量：3

12

作者 朱雪梅 李艳梅 卫林 《河南师范大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2021年第2期80-86,共7页

[目的]利用流式细胞仪检测细胞凋亡在基础研究、疾病诊断及预后预测及评价中具有重要的应用价值.补偿调节所需的单阳染色管的制备,是流式细胞术检测凋亡过程的一个重要步骤.探讨了快速诱导不同细胞系和原代细胞凋亡的方法,优化用于检测... [目的]利用流式细胞仪检测细胞凋亡在基础研究、疾病诊断及预后预测及评价中具有重要的应用价值.补偿调节所需的单阳染色管的制备,是流式细胞术检测凋亡过程的一个重要步骤.探讨了快速诱导不同细胞系和原代细胞凋亡的方法,优化用于检测细胞凋亡的流式单阳染色管快速制备.[方法](1)分别用100μmol/L H_(2)O_(2)、体积分数4%多聚甲醛、75%乙醇和反复冻融的方法处理293T细胞15 min、30 min、1 h,Annexin V-PE/7-AAD双标记流式检测293T细胞凋亡率.(2)体积分数1%乙醇、5%乙醇、10%乙醇和20%乙醇处理293T细胞、RAW264.7细胞、HeLa细胞、T细胞和B细胞1 min,流式细胞仪检测细胞凋亡情况.[结果](1)293T细胞经100μmol/L H_(2)O_(2)、体积分数4%多聚甲醛、75%乙醇和反复冻融法处理后,几乎所有细胞均处于凋亡状态.(2)293T细胞、RAW264.7细胞、T细胞和B细胞用1%乙醇处理1 min,HeLa细胞用20%乙醇处理1 min,可出现较明显的凋亡现象.[结论]细胞凋亡实验时,根据细胞的生长特性,可选择体积分数1%~20%的乙醇诱导1 min,作为制备单阳染色管的最佳方案. 展开更多

关键词 细胞凋亡 流式细胞术 annexin v-PE/7-AAD

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