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AFLP分析中多态性扩增产物的回收、克隆及鉴定 被引量：31
1
作者 李传友 伏健民 +2 位作者 金德敏 翁曼丽 王斌 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 1998年第4期1-4,共4页
本研究在摸索和优化了水稻ＡＦＬＰ分析体系的基础上，发展了多态性ＡＦＬＰ产物的高效克隆方法。特异ＡＦＬＰ扩增产物直接从变性聚丙烯酰胺凝胶上分离纯化，再经过一至二轮ＰＣＲ扩增，即可高效地克隆于ｐＧＥＭ－Ｔｅａｓｙｖｅｃｔ... 本研究在摸索和优化了水稻ＡＦＬＰ分析体系的基础上，发展了多态性ＡＦＬＰ产物的高效克隆方法。特异ＡＦＬＰ扩增产物直接从变性聚丙烯酰胺凝胶上分离纯化，再经过一至二轮ＰＣＲ扩增，即可高效地克隆于ｐＧＥＭ－Ｔｅａｓｙｖｅｃｔｏｒ系统中。本实验利用该方法成功地克隆了水稻温敏核不育等位突变系５４６０Ｓ和５４６０Ｆ间的４个多态性ＡＦＬＰ产物，Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔｉｎｇ分析证明其中３个产物在水稻基因组中为单拷贝序列，另一个为低拷贝序列。ＡＦＬＰ技术强有力的多态性检出能力再结合多态性扩增产物的高效克隆方法，为寻找与目标基因紧密连锁的分子标记提供了有力工具。 展开更多
关键词 水稻 aflp 分子标记
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舞毒蛾不同地理种群基于AFLP分子标记的遗传分析 被引量：7
2
作者 钱路 安榆林 +2 位作者 徐梅 杨晓军 朱宏斌 《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2011年第10期104-110,共7页
舞毒蛾是一种食性很广、危害很大的世界性林木害虫,根据其地理分布和生活特性,现在被分为亚洲型和欧洲型2种。对来自俄罗斯远东地区、蒙古、日本、美国和中国5个地理种群,共26份舞毒蛾样品进行AFLP分子标记研究。成功建立并优化舞毒蛾A... 舞毒蛾是一种食性很广、危害很大的世界性林木害虫,根据其地理分布和生活特性,现在被分为亚洲型和欧洲型2种。对来自俄罗斯远东地区、蒙古、日本、美国和中国5个地理种群,共26份舞毒蛾样品进行AFLP分子标记研究。成功建立并优化舞毒蛾AFLP分析体系,从16对引物组合中筛选出3对扩增条带多、多态检出率高的荧光标记引物组合,利用CEQ-8000遗传分析仪进行毛细管电泳及数据分析,共检测到507个多态性位点。通过PAUP软件对AFLP数据进行UPGM和NJ树的聚类分析以及遗传距离分析,结果表明:5个地理种群舞毒蛾明显分成欧洲型(美国种群)和亚洲型,其中亚洲型又可分成俄罗斯、日本、中国及蒙古3个类群。美国种群间遗传变异比其他种群较大,中国种群与美国种群遗传距离最大,而与蒙古种群遗传分化最小。从分子水平上研究舞毒蛾不同种群的遗传分类情况,揭示利用AFLP分子标记技术可以区分舞毒蛾不同地理种群的基因型,为研究舞毒蛾的起源、入侵与扩散、遗传与变异以及检疫措施的制定等方面提供科学依据。 展开更多
关键词 舞毒蛾 aflp 分子标记 遗传多样性
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乌鳢一个养殖群体中性别连锁AFLP标记的筛选 被引量：11
3
作者 姜龙 王忠卫 +1 位作者 周莉 桂建芳 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期1174-1178,共5页
许多经济鱼类的雌雄个体生长和成体规格存在明显的差异，性别控制在这些鱼中往往能产生很高的经济效益吧例如全雌鲤鱼的培育和全雄罗非鱼的培育。最近，在全雄黄颡鱼的培育方面，我们实验室开发出了若干与黄颡鱼性染色体相连锁的DNA标记，
关键词 乌鳢 aflp 性别连锁DNA标记 佛山群体
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我国紫薇属植物AFLP分子标记体系的优化 被引量：5
4
作者 顾翠花 王守先 张启翔 《浙江林学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期298-303,共6页
以采自广西、云南和河南等地的紫薇属Lagerstroemia植物紫薇L.indica,南紫薇L.subcostata,福建紫薇L.limii和桂林紫薇L.guilinensis叶片为材料,利用改良CTAB(十六烷基三甲基溴化铵)法提取叶片基因组DNA,获得了高质量的紫薇叶片DNA,并以... 以采自广西、云南和河南等地的紫薇属Lagerstroemia植物紫薇L.indica,南紫薇L.subcostata,福建紫薇L.limii和桂林紫薇L.guilinensis叶片为材料,利用改良CTAB(十六烷基三甲基溴化铵)法提取叶片基因组DNA,获得了高质量的紫薇叶片DNA,并以其基因组DNA为模板进行了酶切连接,利用酶切连接的产物稀释一定倍数作为预扩增的模板,最后以稀释一定倍数的预扩增产物进行选择性扩增,进行紫薇和南紫薇的AFLP(扩增片段长度多态性)银染反应体系的优化。AFLP体系中每一步反应都设置了不同的反应体系,采用了160对引物作为初选引物,筛选出了10对适合紫薇基因组扩增的引物。结果表明,适宜紫薇基因组扩增的最佳酶切、预扩增和选择性扩增体系为:酶切连接体系1;预扩体系3;选扩体系3,反应体系中Mg2+质量浓度为1.2×10-6kg.L-1时扩增效果较好。 展开更多
关键词 植物学 紫薇 DNA提取 aflp 分子标记
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AFLP分子标记在香菇F_1代群体中的多态性及分离方式 被引量：3
5
作者 程水明 干建平 +1 位作者 刘世旺 王蔚新 《湖北农业科学》 北大核心 2009年第12期2922-2926,共5页
利用8对引物组合对AFLP标记在两个香菇菌株间(IB01×IB15)杂交F1代的多态性及分离方式进行研究,结果显示,AFLP标记在该F1代群体中的多态性较高,分离位点出现的平均频率是32.55%,分离方式有孟德尔分离、偏孟德尔分离及异常分离3种方... 利用8对引物组合对AFLP标记在两个香菇菌株间(IB01×IB15)杂交F1代的多态性及分离方式进行研究,结果显示,AFLP标记在该F1代群体中的多态性较高,分离位点出现的平均频率是32.55%,分离方式有孟德尔分离、偏孟德尔分离及异常分离3种方式,3种分离位点出现的数量与平均频率分别为602、28.86%,271、12.99%,49、2.35%,其中孟德尔分离位点占分离位点总数的53.99%。15.34%的AFLP标记表现了偏分离,偏离的方向趋于亲本。 展开更多
关键词 香菇 扩增片段长度多态性分子标记 多态性 分离方式 偏分离
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大麻雄性基因连锁AFLP分子标记的筛选及鉴定 被引量：5
6
作者 郭丽 张海军 +6 位作者 王明泽 车野 刘德泉 陈井生 刘德福 于吉东 吴耀坤 《中国麻业科学》 2015年第1期5-8,共4页
为建立一种大麻早期性别筛选及鉴定方法,利用AFLP标记技术,筛选了64对Eco RI-NNN/Mse I-NNN引物组合,对11个不同大麻品种雌﹑雄植株的混合DNA池进行了性别连锁特异性条带的筛选。结果表明,6对引物组合表现出多态性,其中,Eco RI-ACA/Mse ... 为建立一种大麻早期性别筛选及鉴定方法,利用AFLP标记技术,筛选了64对Eco RI-NNN/Mse I-NNN引物组合,对11个不同大麻品种雌﹑雄植株的混合DNA池进行了性别连锁特异性条带的筛选。结果表明,6对引物组合表现出多态性,其中,Eco RI-ACA/Mse ICTG在雄性DNA池中扩增出1条特异条带,经各品种单株DNA验证,该条带只在雄性单株稳定出现,回收﹑克隆﹑测序后获得1条可用于大麻早期田间性别鉴定的734bp雄性特异条带。 展开更多
关键词 大麻 雄性 aflp 分子标记
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甘薯β-胡萝卜素含量相关AFLP分子标记的开发 被引量：1
7
作者 靳容 后猛 +2 位作者 马代夫 谢世清 李强 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2013年第2期266-271,共6页
为了提高高β-胡萝卜素食用型甘薯品种的选育效果,本试验利用徐薯25(低胡萝卜素品种)和徐22-5(高胡萝卜素品系)及其杂交F1代分离群体,开发与甘薯β-胡萝卜素合成基因相关的AFLP分子标记。采用Logis-tic向前逐步回归法(P<0.05)引入AFL... 为了提高高β-胡萝卜素食用型甘薯品种的选育效果,本试验利用徐薯25(低胡萝卜素品种)和徐22-5(高胡萝卜素品系)及其杂交F1代分离群体,开发与甘薯β-胡萝卜素合成基因相关的AFLP分子标记。采用Logis-tic向前逐步回归法(P<0.05)引入AFLP标记,建立Logistic回归模型,检验41个甘薯杂交后代是否符合根据β-胡萝卜素含量高低进行的表型分组,并利用5个高胡萝卜素含量和5个低胡萝卜素含量甘薯品种(系)验证Logistic回归模型的可靠性。检测结果显示,41个杂交后代中仅有2个供试材料不符合预期分组,准确率高达95.1%,10个验证材料完全符合预期分组。表明在甘薯生长发育早期,可以通过该模型对高β-胡萝卜素性状进行辅助选择。 展开更多
关键词 甘薯 β-胡萝卜素含量 aflp分子标记 LOGISTIC回归模型
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与抗TYLCV基因连锁的AFLP标记筛选及CAPS标记的转化 被引量：3
8
作者 侯富恩 杨玛丽 +3 位作者 赵统敏 余文贵 沈新莲 赵丽萍 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2011年第5期1047-1052,共6页
为加快番茄黄化曲叶病抗病品种培育进程,阻止该病蔓延,以抗病亲本CLN2777A和感病亲本TMXA48-4-0及其F2分离群体为材料,应用分子标记辅助选择技术进行抗TYLCV(番茄黄化曲叶病毒)基因连锁标记的筛选。通过对亲本及F2分离群体进行TYLCV接种... 为加快番茄黄化曲叶病抗病品种培育进程,阻止该病蔓延,以抗病亲本CLN2777A和感病亲本TMXA48-4-0及其F2分离群体为材料,应用分子标记辅助选择技术进行抗TYLCV(番茄黄化曲叶病毒)基因连锁标记的筛选。通过对亲本及F2分离群体进行TYLCV接种,发现F2代抗感病分离比率接近3∶1,抗性受单个显性基因控制。用512对MseⅠ/PstⅠ引物组合对亲本及F2代抗感基因池进行AFLP分析,最终引物组合P15M28在亲本及抗感组间表现多态性,回收并克隆测序,片段大小为106 bp,重新设计引物,将其成功转化为CAPS(酶切扩增多态性序列)标记,命名为P15M28,遗传距离为6.7 cM。P15M28标记可以应用于标记辅助选择育种。 展开更多
关键词 番茄黄化曲叶病毒 aflp CAPS 分子标记
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多花黑麦草遗传连锁图的构建 被引量：6
9
作者 丁成龙 沈益新 +1 位作者 顾洪如 三浦优一 《草地学报》 CAS CSCD 2006年第3期223-230,共8页
利用多花黑麦草(Loliummu ltiflorum)细胞质雄性不育(CMS)F1群体(124个个体),以来自父本和母本的分离位点采用SSR、AFLP、EST-CAPS(表达序列标签酶切扩增多态性)和RGA-CAPS(抗病基因类似物酶切扩增多态性)等标记方法进行多态性的选择并... 利用多花黑麦草(Loliummu ltiflorum)细胞质雄性不育(CMS)F1群体(124个个体),以来自父本和母本的分离位点采用SSR、AFLP、EST-CAPS(表达序列标签酶切扩增多态性)和RGA-CAPS(抗病基因类似物酶切扩增多态性)等标记方法进行多态性的选择并对父、母本分别构建遗传连锁图。母本连锁图包含362个标记位点,分别包含SSR标记240个、AFLP标记84个、EST-CAPS标记24个和RGA-CAPS标记14个,由7个连锁群组成,覆盖全长776.4cM,各连锁群长度在85.8至135 cM之间,相邻标记之间的平均距离为2.14 cM;父本7个连锁群,包含376个标记,其中SSR标记252个、AFLP标记82个、EST-CAPS标记29个和RGA-CAPS标记13个,连锁图全长710.0 cM,相邻标记之间的平均距离为1.89 cM;标记密度高、标记分布均匀、连锁图长度中等。 展开更多
关键词 多花黑麦草(Lolium multiflorum) 遗传连锁图 SSR(简单重复序列) aflp(扩增片段长度多态性)
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药用植物研究中的分子标记技术应用进展 被引量：8
10
作者 陈红波 余金芮 +1 位作者 杨春先 钱刚 《湖北农业科学》 2017年第13期2401-2405,共5页
通过对近年来常用分子标记技术的原理、技术特点及其在药用植物研究领域中应用现状的总结,以期为药用植物资源开发与评价提供参考,也进一步为药用植物功能基因的筛选和验证提供思路。
关键词 分子标记 药用植物 简单序列重复(SSR) 扩增片段长度多态性(aflp) 单核苷酸多态性分析技术(SNPs)
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