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茶树根系Actin基因克隆及表达分析 被引量:5
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作者 李远华 陆建良 +1 位作者 范方媛 石玉涛 《茶叶科学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期336-346,共11页
采用SSH技术分析了VA菌根处理后福鼎大白茶根系基因差异表达情况,获得了差异序列,序列比对显示,在下调表达序列中可能包含了10种未知功能的基因;在上调表达序列中可能包含了5种可能的基因。采用RACE技术获得了Actin基因全长序列,Actin... 采用SSH技术分析了VA菌根处理后福鼎大白茶根系基因差异表达情况,获得了差异序列,序列比对显示,在下调表达序列中可能包含了10种未知功能的基因;在上调表达序列中可能包含了5种可能的基因。采用RACE技术获得了Actin基因全长序列,Actin基因长1 606 bp(Gen Bank,登录号KJ946252),具有1 131bp开放阅读框(1st^1 131st),编码377个氨基酸。分子生物信息学分析表明,Actin蛋白分子量约30.69 k D,等电点为5.27,定位于细胞核等亚细胞区位。研究还显示,Actin在不同品种中表达无显著差异,对非生物性胁迫响应也较弱。 展开更多
关键词 茶树 actin 基因克隆 表达
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松材线虫actin基因全长cDNA的克隆 被引量:3
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作者 沈卫锋 牛宝龙 +4 位作者 翁宏飚 何丽华 刘岩 齐晓朋 孟智启 《浙江农业学报》 CSCD 2007年第6期399-403,共5页
借助电子克隆和RACE方法,克隆了松材线虫生长发育关键基因actin的全长cDNA序列(登陆号:EU100952)。该序列共1 296个碱基,有一个完整ORF,起始密码子在48位,终止密码子在1 176位,编码376个氨基酸。
关键词 松材线虫 actin基因 全长CDNA
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仿刺参β-actin基因的克隆及在各组织中的表达 被引量:7
3
作者 段晶晶 李霞 +2 位作者 周伯文 姜泽东 周贺 《大连水产学院学报》 CSCD 北大核心 2009年第2期176-180,共5页
参考海葵Nematostella vectensis在GenBank中的β-actin基因mRNA部分序列(XM_001630533)设计引物,对仿刺参Apostichopus japonicus进行特异的PCR扩增,将扩增产物测序分析,再根据测序结果设计仿刺参专用β-actin引物ACT1/ACT2,对不同退... 参考海葵Nematostella vectensis在GenBank中的β-actin基因mRNA部分序列(XM_001630533)设计引物,对仿刺参Apostichopus japonicus进行特异的PCR扩增,将扩增产物测序分析,再根据测序结果设计仿刺参专用β-actin引物ACT1/ACT2,对不同退火温度和循环次数条件下的该基因RT—PCR产物进行了对比。本研究中首次克隆了仿刺参的β-actin基因,为今后仿刺参目的基因表达的半定量分析研究奠定了基础。 展开更多
关键词 仿刺参 Β-actin 分子内标
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扁穗牛鞭草actin基因克隆及荧光定量PCR的建立 被引量:2
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作者 陈永霞 《广东农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第16期158-161,共4页
搜索GenBank中禾本科植物actin基因序列进行同源性比对,选择保守区段设计简并引物,利用RT-PCR方法从扁穗牛鞭草中克隆获得actin基因cDNA片段。该基因片段长度为773 bp,编码257个氨基酸残基。根据此actin基因序列设计引物,建立了基于SYBR... 搜索GenBank中禾本科植物actin基因序列进行同源性比对,选择保守区段设计简并引物,利用RT-PCR方法从扁穗牛鞭草中克隆获得actin基因cDNA片段。该基因片段长度为773 bp,编码257个氨基酸残基。根据此actin基因序列设计引物,建立了基于SYBR Green I染料技术的实时荧光定量PCR方法。该方法扩增效率高,检测范围广(R2=0.995,E=101.3%),为actin基因作为内参基因进行扁穗牛鞭草功能基因的定量分析奠定了基础。 展开更多
关键词 扁穗牛鞭草 actin基因 克隆 荧光定量PCR
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中华羊茅Epichloё内生真菌的actin序列分析 被引量:7
5
作者 旷宇 汪建军 +1 位作者 许文博 田沛 《草业学报》 CSCD 北大核心 2016年第9期125-131,共7页
Epichloё内生真菌与禾本科植物很常见。现已有大量关于禾草Epichloё内生真菌系统演化研究的报道,但是尚未发现中华羊茅所带Epichloё内生真菌系统演化方面的研究。本研究经过检测采自青海、甘肃、四川等地中华羊茅8个种群的Epichloё... Epichloё内生真菌与禾本科植物很常见。现已有大量关于禾草Epichloё内生真菌系统演化研究的报道,但是尚未发现中华羊茅所带Epichloё内生真菌系统演化方面的研究。本研究经过检测采自青海、甘肃、四川等地中华羊茅8个种群的Epichloё内生真菌带菌率发现8个种群的Epichloё内生真菌均带有Epichloё内生真菌,带菌率为100%。该结果为研究中华羊茅所带Epichloё内生真菌系统演化的研究提供了优良的材料。因此,本研究通过克隆actin(act)序列,并与已报道Epichloё内生真菌act序列构建系统进化树。结果表明,供试菌act序列在进化树上成单支分布,表明该菌属于同一种Epichloё内生真菌,且可能是一个新种。此外,遗传距离分析也证明了供试菌为同一菌种。进化关系同时发现分布在相同或相近地理位置的Epichloё内生真菌聚集在同一个分支,表明它们之间的亲缘关系较近,表明Epichloё内生真菌亲缘关系与宿主采集地密切相关。 展开更多
关键词 内生真菌 中华羊茅 act基因 遗传距离 系统发育
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刺梨RNA的有效提取及Actin基因片段的克隆 被引量:3
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作者 杨玉 安华明 +5 位作者 刘明 黄伟 李德燕 王立新 刘厚宇 李顺雨 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2008年第4期1373-1374,共2页
[目的]为刺梨的分子生物学研究奠定技术基础。[方法]分别采用改进的CTAB-LiCl法和CTAB法提取刺梨果实中的总RNA和基因组DNA。对刺梨总RNA进行反转录,生成cDNA第1链。根据GenBank上的蔷薇科肌动蛋白(Actin)基因保守序列设计1对跨内含子引... [目的]为刺梨的分子生物学研究奠定技术基础。[方法]分别采用改进的CTAB-LiCl法和CTAB法提取刺梨果实中的总RNA和基因组DNA。对刺梨总RNA进行反转录,生成cDNA第1链。根据GenBank上的蔷薇科肌动蛋白(Actin)基因保守序列设计1对跨内含子引物Actin1和Actin2,以cDNA第1链和基因组DNA为模板进行RT-PCR扩增。将含有目的片段的凝胶进行回收纯化,克隆到PMD18-T载体上,转化大肠杆菌TG1感受态细胞,选取带有目的片段的重组质粒进行测序和序列分析。[结果]将目的片段回收后克隆于T载体,可获得298 bpActin基因的cDNA序列。克隆所得核苷酸序列与蔷薇、桃和葡萄的核苷酸序列相似性达83%,与富士苹果、甜菜等的相似性也超过80%。刺梨Actin基因编码的氨基酸序列与梨的相似性最高(达97%),其次是葡萄、花生、大豆、棉花和马铃薯,而与水稻、拟南芥等的相似性也达90%以上。[结论]Actin基因跨内含子,用该Actin基因片段作内标可以减少DNA污染。 展开更多
关键词 剌梨 肌动蛋白 克隆
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鸡β-actin基因实时荧光定量PCR方法的建立 被引量:22
7
作者 马莉 谢秀兰 岳华 《中国畜牧兽医》 CAS 2007年第2期73-75,共3页
根据GenBank上鸡β-actin基因的序列,在保守区域设计并合成一对引物,采用SYBRGreenI染料建立了荧光定量PCR法(real-timePCR)。以常规PCR产物为标准品,建立了标准曲线,并进行了熔解曲线分析。结果表明,标准曲线Ct值检测范围为12... 根据GenBank上鸡β-actin基因的序列,在保守区域设计并合成一对引物,采用SYBRGreenI染料建立了荧光定量PCR法(real-timePCR)。以常规PCR产物为标准品,建立了标准曲线,并进行了熔解曲线分析。结果表明,标准曲线Ct值检测范围为12~31,扩增效率为95.1%;熔解曲线分析结果显示产物特异的单个峰,其Tm为88±0℃,检测周期从RNA提取到荧光定量PCR结束只需4h。本试验建立的鸡β-actin基因实时荧光定量PCR法扩增效率高、检测范围广、检测周期短,为pactin基因作为内参基因进行鸡功能基因与病原基因表达的定量分析奠定了基础。 展开更多
关键词 Β-actin基因 实时荧光定量PCR 内参基因
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淡紫拟青霉γ-actin基因cDNA全长的克隆与序列分析 被引量:2
8
作者 卓侃 罗梅 +1 位作者 廖金铃 林抗美 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期78-81,共4页
利用同源克隆的策略对淡紫拟青霉(Paecilomyces lilacinus)γ-actin基因进行克隆,获得了淡紫拟青霉γ-ac-tin基因cDNA全长。该基因cDNA的ORF长1128bp,编码375个氨基酸,具有actin基因的保守特征序列。由该基因推导的氨基酸序列与多个子... 利用同源克隆的策略对淡紫拟青霉(Paecilomyces lilacinus)γ-actin基因进行克隆,获得了淡紫拟青霉γ-ac-tin基因cDNA全长。该基因cDNA的ORF长1128bp,编码375个氨基酸,具有actin基因的保守特征序列。由该基因推导的氨基酸序列与多个子囊菌的γ-actin蛋白序列相似性达98%以上。系统进化树显示其系统发育关系与传统的分类关系基本一致。 展开更多
关键词 淡紫拟青霉 γ-actin基因 克隆
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小鼠-βactin mRNA荧光定量PCR方法的建立 被引量:4
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作者 唐佳佳 岳华 +1 位作者 杨发龙 汤承 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2011年第7期127-130,共4页
本研究旨在建立定量检测小鼠-βactin mRNA表达水平的实时荧光定量PCR方法,为小鼠相关基因表达水平的分析提供方法。根据GenBank中登录的小鼠-βactin mRNA序列,针对保守区域设计并合成1对引物,建立了基于SYBR GreenⅠ技术的小鼠-βacti... 本研究旨在建立定量检测小鼠-βactin mRNA表达水平的实时荧光定量PCR方法,为小鼠相关基因表达水平的分析提供方法。根据GenBank中登录的小鼠-βactin mRNA序列,针对保守区域设计并合成1对引物,建立了基于SYBR GreenⅠ技术的小鼠-βactin mRNA荧光定量PCR方法。结果表明,该方法扩增效率高(97.7%),定量线性范围广(9.3×102~9.3×107拷贝/反应),可重复性强,无非特异性扩增和引物二聚体,最小检出量为9.3拷贝/反应。试验结果为-βactin作为内参基因用于小鼠相关基因转录水平分析提供了基础。 展开更多
关键词 小鼠 Β-actin基因 实时荧光定量PCR
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嗜虫书虱β-actin基因克隆及定量PCR方法的建立 被引量:5
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作者 唐培安 王进军 宋伟 《中国粮油学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2011年第11期71-75,共5页
旨在建立嗜虫书虱的实时荧光定量PCR分析方法,为嗜虫书虱基因的定量分析提供技术支持。利用RT-PCR方法,从嗜虫书虱体内克隆获得了β-actin基因cDNA片段(GenBank登录号:FJ041117),该基因片段长度为822 bp,编码273个氨基酸残基(从第3个碱... 旨在建立嗜虫书虱的实时荧光定量PCR分析方法,为嗜虫书虱基因的定量分析提供技术支持。利用RT-PCR方法,从嗜虫书虱体内克隆获得了β-actin基因cDNA片段(GenBank登录号:FJ041117),该基因片段长度为822 bp,编码273个氨基酸残基(从第3个碱基开始编码)。根据此β-actin基因的序列设计引物,建立了基于SYBR Green I染料技术的实时荧光定量PCR方法。建立的嗜虫书虱β-actin实时荧光定量PCR法扩增效率高、检测范围广、检测周期短,为β-actin作为内参基因进行嗜虫书虱功能基因的定量分析奠定了基础。 展开更多
关键词 嗜虫书虱 Β-actin基因 实时荧光定量 PCR内参基因
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不同引物对和退火温度对盐生植物盐穗木内参基因β-actin扩增效率的影响 被引量:3
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作者 白雪芹 杨瑞瑞 曾幼玲 《新疆农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期352-360,共9页
【目的】以盐生植物盐穗木为材料,研究不同引物对和不同退火温度对盐穗木内参基因β-actin扩增效率的影响。【方法】设计扩增β-actin基因的两对引物,标记为β-actin1和β-actin2,分别建立这两对引物扩增盐穗木β-actin基因和特异性引... 【目的】以盐生植物盐穗木为材料,研究不同引物对和不同退火温度对盐穗木内参基因β-actin扩增效率的影响。【方法】设计扩增β-actin基因的两对引物,标记为β-actin1和β-actin2,分别建立这两对引物扩增盐穗木β-actin基因和特异性引物扩增该物种的过氧化物酶基因POD(盐响应的代表性基因),在不同退火温度下的标准曲线和扩增曲线。【结果】不论55还是58℃退火温度,引物对β-actin1比引物对β-actin2有更好的扩增效率;在55℃退火温度下,引物对β-actin1有更高的扩增效率。在这两个退火温度下,分别以β-actin1和β-actin2引物对扩增β-actin基因作为内参,盐穗木POD基因的相对表达水平具有一定的差异性。【结论】引物和退火温度会影响荧光定量PCR的扩增效率,进而会影响靶基因的相对表达水平。 展开更多
关键词 盐穗木 不同引物对 退火温度 Β-actin 扩增效率
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浅黄根须腹菌γ-actin基因的克隆及表达分析 被引量:1
12
作者 峥嵘 王琚钢 +2 位作者 邰丽华 白淑兰 牛艳芳 《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2014年第10期80-85,共6页
以油松的优良外生菌根真菌即浅黄根须腹菌为对象,用简并PCR法和RACE技术分离其γ-肌动蛋白基因(Rl-act)的全长cDNA序列。该全长序列为1 339 bp,包含一个1 128 bp的开放阅读框(ORF),编码375个氨基酸,5'端非翻译区(5'UTR)95 bp,3&... 以油松的优良外生菌根真菌即浅黄根须腹菌为对象,用简并PCR法和RACE技术分离其γ-肌动蛋白基因(Rl-act)的全长cDNA序列。该全长序列为1 339 bp,包含一个1 128 bp的开放阅读框(ORF),编码375个氨基酸,5'端非翻译区(5'UTR)95 bp,3'UTR长度116 bp。Port Param软件在线分析结果表明,该cDNA所编码的蛋白质理论等电点为5.01,相对分子质量为94.929 kD,具有真菌γ-actin基因3个保守特征序列。Blast同源性检索结果表明,Rl-act序列与12种担子菌actin序列同源性均在97%以上,与同为外生菌根真菌的双色蜡蘑actin的亲缘关系最近。Rl-act基因在不同碳源及磷水平培养条件下表达量基本一致,验证了该基因作为分子内标的可靠性。 展开更多
关键词 浅黄根须腹菌 肌动蛋白 CDNA 克隆 基因表达
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用DSC测定小鼠看家基因β-actin的PCR反应体系的比热 被引量:3
13
作者 周国燕 陈唯实 +3 位作者 冉姝 林舒律 卜剑鸣 华泽钊 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2007年第10期348-351,共4页
本实验用差示扫描量热技术,测量了不同反应循环数的以PCR内参小鼠看家基因β-actin为目的序列的扩增体系在30~94℃温度范围内的比热容。实验发现,在扩增的初期(3~15个循环),反应体系的比热随着循环数的增加,变化不大;在扩增的指数增长... 本实验用差示扫描量热技术,测量了不同反应循环数的以PCR内参小鼠看家基因β-actin为目的序列的扩增体系在30~94℃温度范围内的比热容。实验发现,在扩增的初期(3~15个循环),反应体系的比热随着循环数的增加,变化不大;在扩增的指数增长期(>20个循环)比热先降低后增加。同一循环,比热随着温度的增加而增加。未经过PCR扩增的反应体系的玻璃化转变温度为-15.29℃。 展开更多
关键词 小鼠看家基因 差示扫描量热分析(DSC) 比热 玻璃化转变温度
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人类α-actin启动子真核表达载体的构建及应用 被引量:3
14
作者 杨玉艾 孙永科 +1 位作者 华进联 窦忠英 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第11期1093-1098,共6页
利用PCR技术克隆了人类α-actin基因的启动子(约450bp),尝试用去掉启动子的pEGFP—N1作为框架结构,成功构建了真核表达载体pEGFP-N1-α-actin—P。应用Lipofectamine 2000将所构建的pEGFP-N1-α-actin-P转染入小鼠ES细胞。通过比较... 利用PCR技术克隆了人类α-actin基因的启动子(约450bp),尝试用去掉启动子的pEGFP—N1作为框架结构,成功构建了真核表达载体pEGFP-N1-α-actin—P。应用Lipofectamine 2000将所构建的pEGFP-N1-α-actin-P转染入小鼠ES细胞。通过比较,发现在本实验室条件下,质粒DNA浓度以3.0~5.0μg/mL,转染时间约在2~3h最佳。200μg/mL的G418较适宜于靶细胞的转染与筛选。得到表达心肌a—actin和GFP的小鼠ES细胞,基本维持小鼠ES细胞的形态。PCNA染色结果表明,转染后的小鼠ES细胞具有增殖能力。α—actin抗体免疫组化染色结果表明,转染后细胞表达α-actin和GFP,揭示构建的真核表达载体pEGFP-N1-α-actin-P转染小鼠ES细胞,可能促进其向心肌细胞分化并对其筛选。 展开更多
关键词 人类ractin启动子 真核表达载体 小鼠ES细胞 心肌细胞
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尼罗罗非鱼β-actin基因启动子的分离及其在真核细胞中的活性验证 被引量:1
15
作者 邹芝英 王茂元 +1 位作者 李大宇 杨弘 《淡水渔业》 CSCD 北大核心 2011年第1期78-82,共5页
采用高保真PCR方法从尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)基因组DNA中分离出β-actin基因启动子序列,将β-actin基因启动子插入pN1-EGFP构建成真核细胞表达载体pEGFP-β-actin,并通过脂质体转染法将重组载体导入人胚肾上皮细胞HEK 293T,... 采用高保真PCR方法从尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)基因组DNA中分离出β-actin基因启动子序列,将β-actin基因启动子插入pN1-EGFP构建成真核细胞表达载体pEGFP-β-actin,并通过脂质体转染法将重组载体导入人胚肾上皮细胞HEK 293T,荧光显微镜下观察外源基因EGFP在细胞中的表达情况。结果显示:β-actin基因启动子调控区具有典型的启动子特征,含有TATA Box、CArG和CCAAT Box 3个重要的顺式作用元件。荧光显微镜下观察到50%~60%的HEK 293T细胞中发出绿色荧光,显示尼罗罗非鱼β-actin基因启动子能够驱动EGFP的转录和表达,具有较好的活性,为构建"全鱼"转基因罗非鱼的研究奠定基础。 展开更多
关键词 尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus) Β-肌动蛋白 启动子 绿色荧光蛋白 转染
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猪瘟病毒C蛋白与宿主β-actin相互作用的鉴定 被引量:1
16
作者 董泓 李丹 +7 位作者 陈佳宁 李素 何文瑞 冯烁 贺番 廖亚金 孙元 胡永浩 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第12期1995-1999,共5页
为了研究猪瘟病毒(CSFV)和宿主间的相互作用,采用Co-IP方法,利用CSFV C蛋白从PK-15细胞中钓取与其相互作用的宿主蛋白质,经SDS-PAGE电泳,银染,选取差异条带,进行质谱分析,选取β-actin蛋白作为研究的对象。经内源性Co-IP试验和GST pulld... 为了研究猪瘟病毒(CSFV)和宿主间的相互作用,采用Co-IP方法,利用CSFV C蛋白从PK-15细胞中钓取与其相互作用的宿主蛋白质,经SDS-PAGE电泳,银染,选取差异条带,进行质谱分析,选取β-actin蛋白作为研究的对象。经内源性Co-IP试验和GST pulldown试验进一步证实CSFV C蛋白和β-actin可以特异性结合,激光共聚焦试验表明两者共定位于细胞质。本研究表明CSFV C蛋白与宿主细胞β-actin蛋白存在相互作用,为深入研究CSFV蛋白质与宿主蛋白质间相互作用提供了实验依据。 展开更多
关键词 猪瘟病毒 C蛋白 Β-actin 病毒-宿主相互作用
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阿魏酸对兔主动脉血管平滑肌细胞骨架F-actin的作用 被引量:1
17
作者 张娴 曾星 +2 位作者 孙景波 欧润妹 黄羽 《中国医药导报》 CAS 2009年第19期37-38,共2页
目的:观察阿魏酸对兔血管平滑肌细胞骨架F-actin的作用。方法:兔血管平滑肌细胞用含20%灭活胎牛血清的高糖DMEM培养,在阿魏酸作用24h后,用鬼笔环肽标记细胞骨架蛋白F-actin后,用流式细胞仪检测荧光强度,用激光共聚焦显微镜观察细胞骨架... 目的:观察阿魏酸对兔血管平滑肌细胞骨架F-actin的作用。方法:兔血管平滑肌细胞用含20%灭活胎牛血清的高糖DMEM培养,在阿魏酸作用24h后,用鬼笔环肽标记细胞骨架蛋白F-actin后,用流式细胞仪检测荧光强度,用激光共聚焦显微镜观察细胞骨架蛋白的变化。结果:阿魏酸作用24h后,流式细胞检测结果显示,细胞骨架蛋白F-actin荧光强度明显减弱,与对照组比较,有显著性差异。激光共聚焦显微镜观察可见细胞形态明显变长,荧光减弱,与对照组比较,荧光密度减弱。结论:阿魏酸对兔血管平滑肌骨架蛋白F-actin的形成有抑制作用。 展开更多
关键词 阿魏酸:血管平滑肌细胞 F-actin
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优化大鼠肺动脉平滑肌细胞骨架F-actin图像的激光共聚焦显微技术 被引量:1
18
作者 郑易 施孟如 林全 《电子显微学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期61-64,共4页
目的:优化大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)骨架蛋白F-actin图像的激光共聚焦显微技术。方法:采用不同浓度梯度的荧光染料及不同孵育条件,应用激光共聚焦显微扫描技术对PASMCs细胞骨架F-actin进行形态学观察。结果:终浓度10 mg/mL FITC-鬼... 目的:优化大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)骨架蛋白F-actin图像的激光共聚焦显微技术。方法:采用不同浓度梯度的荧光染料及不同孵育条件,应用激光共聚焦显微扫描技术对PASMCs细胞骨架F-actin进行形态学观察。结果:终浓度10 mg/mL FITC-鬼笔环肽及10 mg/mL PI,分别染色30 min,并经RNA酶37℃处理为最适实验条件,可见F-actin呈明亮细丝状绿色荧光,PI标记的胞核呈红色荧光,胞浆无明显PI染色。结论:通过对染色条件的最终优化,表现出激光共聚焦技术在平面及三维同时观察细胞骨架F-actin的优越性,为进一步实验提供良好的技术平台。 展开更多
关键词 肺动脉平滑肌细胞 F-actin 激光共聚焦显微镜 FITC-鬼笔环肽
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宿主细胞F-actin聚集在顶复门原虫入侵过程中的作用研究
19
作者 吴彩艳 王祯 +5 位作者 李娟 林栩慧 廖申权 戚南山 吕敏娜 孙铭飞 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期423-428,共6页
病原入侵宿主细胞,由宿主细胞肌动蛋白(F-actin)聚集引起的细胞骨架重排起着极其重要的作用,本文主要就宿主细胞整合素介导的宿主细胞F-actin聚集重排在顶复门原虫入侵过程中的作用进行系统的阐述,对解析顶复门原虫的入侵机制及以此研... 病原入侵宿主细胞,由宿主细胞肌动蛋白(F-actin)聚集引起的细胞骨架重排起着极其重要的作用,本文主要就宿主细胞整合素介导的宿主细胞F-actin聚集重排在顶复门原虫入侵过程中的作用进行系统的阐述,对解析顶复门原虫的入侵机制及以此研制新型寄生虫病药物和疫苗具有非常重要的意义。 展开更多
关键词 顶复门原虫 宿主细胞 F-actin聚集 入侵
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光皮桦总RNA的提取及Actin基因的克隆 被引量:8
20
作者 王钰 童再康 +1 位作者 黄华宏 林二培 《浙江林业科技》 北大核心 2010年第4期32-36,共5页
以光皮桦(Betula luminifera)的嫩叶为材料,针对光皮桦组织中富含多糖多酚等特点,改进了CTAB法,采用β-巯基乙醇和PVP去除酚类,无水乙醇去除多糖,LiCl沉淀过夜。运用该方法提取得到的RNA,条带整齐、清晰,证明得到的RNA纯度、完整性和产... 以光皮桦(Betula luminifera)的嫩叶为材料,针对光皮桦组织中富含多糖多酚等特点,改进了CTAB法,采用β-巯基乙醇和PVP去除酚类,无水乙醇去除多糖,LiCl沉淀过夜。运用该方法提取得到的RNA,条带整齐、清晰,证明得到的RNA纯度、完整性和产率均较高,蛋白、多糖及酚类等去除较彻底。在此基础上,通过逆转录、PCR和RACE实验从光皮桦中克隆得到Actin基因。 展开更多
关键词 光皮桦 总RNA CTAB法 actin基因
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