骨肉瘤中APE1的表达及其与血管生成的关系 被引量：9

1

作者 仲召阳 王东 +3 位作者 李增鹏 向德兵 张沁宏 肖华亮 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第10期1045-1048,共4页

目的　探讨APE1在骨肉瘤中的表达及其与肿瘤发生、发展以及血管生成的关系。方法　采用免疫组化S P法检测10例正常骨、10例良性骨瘤和60例骨肉瘤组织中APE1、CD3 4和FⅧ Rag等蛋白表达,并根据CD3 4和FⅧ Rag染色结果计数微血管密度。结... 目的　探讨APE1在骨肉瘤中的表达及其与肿瘤发生、发展以及血管生成的关系。方法　采用免疫组化S P法检测10例正常骨、10例良性骨瘤和60例骨肉瘤组织中APE1、CD3 4和FⅧ Rag等蛋白表达,并根据CD3 4和FⅧ Rag染色结果计数微血管密度。结果　APE1蛋白表达主要定位于肿瘤细胞的胞核,骨肉瘤中APE1显著高于正常骨(P <0 0 5 ) ,60例骨肉瘤中43例(72 % )呈高表达,17例呈低表达,APE1强表达组中的MVD显著高于弱表达组(P <0 0 1)。结论　APE1在骨肉瘤中过度表达与骨肉瘤分化以及微血管密度密切相关,有可能作为骨肉瘤抗血管生成治疗中一个新的靶向分子。 展开更多

关键词 骨肉瘤 ape1 血管生成 微血管密度 抗血管生成

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APE1在非小细胞肺癌中的表达特点及其与预后的关系 被引量：12

2

作者 张云嵩 范士志 +5 位作者 王东 杨镇洲 向德兵 李增鹏 陈建明 蒋耀光 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第9期776-778,共3页

目的探讨脱嘌呤/嘧啶核酸内切酶(apurinic/apyrimidinic endonuclease,APE1)在非小细胞肺癌中的表达特点及其与患者预后的关系。方法应用免疫组化方法检测103例非小细胞肺癌组织和36例正常肺组织中APE1的表达情况,按染色强度将其分为低... 目的探讨脱嘌呤/嘧啶核酸内切酶(apurinic/apyrimidinic endonuclease,APE1)在非小细胞肺癌中的表达特点及其与患者预后的关系。方法应用免疫组化方法检测103例非小细胞肺癌组织和36例正常肺组织中APE1的表达情况,按染色强度将其分为低表达组和高表达组,并分析APE1在非小细胞肺癌表达情况与临床病理及患者预后的关系。结果正常肺组织及肺癌组织均有APE1表达,但正常肺组织以细胞核表达为主,肺癌组织主要在细胞质表达;APE1的表达与患者的年龄、性别、肿瘤大小、有无淋巴结转移及组织类型无明显关系;生存分析显示APE1的表达强弱与患者的预后明显相关。结论APE1蛋白表达增强与定位的改变与肺癌发生及发展有关,APE1基因表达增强可能是非小细胞肺癌患者预后不良的指标之一。 展开更多

关键词 ape1 非小细胞肺癌 DNA损伤与修复 免疫组化

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血清APE1自身抗体在结直肠癌诊断中的价值 被引量：14

3

作者 何乐 杨宇馨 +6 位作者 张诗珩 罗佳 戴楠 李梦侠 单锦露 王宏毅 王东 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第11期1297-1301,共5页

目的探讨血清中APE1自身抗体(apurinic/apyrimidinic endonuclease 1 autoantibodies,APE1-AAbs)在结直肠癌中的诊断价值。方法利用ELISA检测150例结直肠癌患者和170例健康体检人员(对照组)血清APE1-AAbs水平,采用蛋白芯片法检测相应的... 目的探讨血清中APE1自身抗体(apurinic/apyrimidinic endonuclease 1 autoantibodies,APE1-AAbs)在结直肠癌中的诊断价值。方法利用ELISA检测150例结直肠癌患者和170例健康体检人员(对照组)血清APE1-AAbs水平,采用蛋白芯片法检测相应的CEA、CA199和CA242浓度。运用Logistic回归和ROC曲线分析方法,将APE1-AAbs与CEA、CA199及CA242联合分析。结果 150例结直肠患者血清APE1-AAbs中位水平为2.697,显著高于对照组(P<0.001)。绘制ROC曲线,其AUC为0.797,灵敏度为62.67%,特异性为85.29%。APE1-AAbs分别与CEA、CA199及CA242联合后,AUC、诊断灵敏度和准确性均有所升高。结论血清APE1-AAbs对结直肠癌有辅助诊断价值,与临床上常用的结直肠癌肿瘤标志物联用可提高结直肠癌的诊出率。 展开更多

关键词 ape1自身抗体 结直肠癌 肿瘤标志物

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多发性骨髓瘤患者APE1蛋白表达的临床意义 被引量：8

4

作者 杨镇洲 陈幸华 +3 位作者 王东 向德兵 张曦 张沁宏 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期554-556,共3页

目的　检测多发性骨髓瘤(multiplemyeloma,MM)患者脱嘌呤 脱嘧啶核酸内切酶(apurinic apyrimidinicendonu clease,APE1)基因表达,探讨其临床意义。方法　采用免疫细胞化学、Westernblot分析在MM细胞系KM3、32例MM患者 和10例正常... 目的　检测多发性骨髓瘤(multiplemyeloma,MM)患者脱嘌呤 脱嘧啶核酸内切酶(apurinic apyrimidinicendonu clease,APE1)基因表达,探讨其临床意义。方法　采用免疫细胞化学、Westernblot分析在MM细胞系KM3、32例MM患者 和10例正常自愿者骨髓标本中检测APE1蛋白表达及定位,并且通过图像分析系统计算其积分光密度值。结果　在阳性 对照的MM细胞系KM3中胞核、胞核 胞浆、胞浆均有APE1表达,其中尤以胞核明显。APE1胞浆阳性分度在正常对照组、 初治组、复发或难治组间依次增高(P<0.01,0.05)。结论　APE1蛋白表达强度与MM疗效有关,APE1基因表达增强可能 是MM患者预后不良的指标之一。 展开更多

关键词 多发性骨髓瘤 ape1 DNA损伤修复

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XRCC1、PARP1和APE1多态性与晚期非小细胞肺癌铂类药物化疗敏感性的关系 被引量：5

5

作者 赵万 胡铃敏 +4 位作者 王铖 朱婷婷 魏娟 胡志斌 殷咏梅 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期1021-1026,共6页

目的:探讨碱基切除修复系统(BER)3个重要基因——X线修复互补基因(XRCC1)、多(ADP核糖)聚合酶(PARP1)及脱嘌呤/脱嘧啶核酸内切酶(APE1)的单核苷酸多态性(SNPs)与晚期非小细胞肺癌(NSCLC)患者铂类药物化疗疗效的相关性。方法:对151例接... 目的:探讨碱基切除修复系统(BER)3个重要基因——X线修复互补基因(XRCC1)、多(ADP核糖)聚合酶(PARP1)及脱嘌呤/脱嘧啶核酸内切酶(APE1)的单核苷酸多态性(SNPs)与晚期非小细胞肺癌(NSCLC)患者铂类药物化疗疗效的相关性。方法:对151例接受以铂类药物为基础化疗的晚期NSCLC患者进行临床疗效评价。采用TaqMan探针法对XRCC1G28152A(Arg399Gln)、XRCC1 C26304T(Arg194Trp)、PARP1 T2444C(Val762Ala)及APE1 T1349G(Asp148Glu)多态性位点进行基因型分析。比较不同基因型与铂类药物化疗效果之间的关系。结果:XRCC1 G28152A多态性与铂类化疗敏感性密切相关,GA杂合型患者临床受益率明显高于野生型,其化疗有效率为GG野生型的2.85倍(调整的OR=2.85,95%CI:1.291～6.277,P<0.05);至少携带1个变异等位基因A的患者(GA/AA)临床受益率为GG野生型携带者的2.48倍(调整的OR=2.48,95%CI:1.330～6.075,P<0.05)。XRCC1 26304位点及PARP1 2444位点的突变纯合基因型携带者,其化疗有效率都明显下降,XRCC126304的TT基因型有效率是CT/CC基因型的0.36倍(调整的OR=0.36,95%CI:0.040～3.298),PARP1 2444 CC基因型有效率是CT/TT基因型的0.37倍(调整的OR=0.37,95%CI:0.118～1.170),但均未见有统计学差异。未发现APE1 T1349G多态性与铂类化疗疗效之间存在关联。结论:BER修复通路XRCC1 G28152A多态性与晚期NSCLC患者铂类药物化疗临床受益相关,XRCC1 28152位点基因型检测有可能作为晚期NSCLC铂类化疗敏感性的预测指标。 展开更多

关键词 单核苷酸多态性 XRCC1 PARP1 ape1 非小细胞肺癌 化疗

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pSilence APE1对骨肉瘤诱导血管内皮细胞迁徙抑制作用的实验研究 被引量：5

6

作者 王东 仲召阳 +2 位作者 李增鹏 卿毅 张沁宏 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期93-96,共4页

目的观察APE1siRNA表达载体pSilenceAPE1对骨肉瘤诱导血管内皮细胞迁徙的抑制作用及其与ES的协同作用。方法pSilenceAPE1转染骨肉瘤细胞9901和HOS;骨肉瘤和内皮细胞Transwell双室培养,计数迁移到内室膜背面的内皮细胞数,观察pSilenceAPE... 目的观察APE1siRNA表达载体pSilenceAPE1对骨肉瘤诱导血管内皮细胞迁徙的抑制作用及其与ES的协同作用。方法pSilenceAPE1转染骨肉瘤细胞9901和HOS;骨肉瘤和内皮细胞Transwell双室培养,计数迁移到内室膜背面的内皮细胞数,观察pSilenceAPE1及其联合ES对骨肉瘤细胞诱导内皮细胞迁徙的影响。结果ES低剂量组(350ng/ml)和高剂量组(700ng/ml)与正常对照组有明显差异(P<0·01)。2μgpSilenceAPE1和3μgpSilenceAPE1较单独脂质体组有显著性差异(P<0·01)。2μgpSilenceAPE1和ES低剂量(350ng/ml)联合组抑制内皮细胞迁徙的作用显著高于单独对照组(P<0·01)。结论pSilenceAPE1可显著抑制骨肉瘤细胞诱导的血管内皮细胞迁徙,并且可能与ES具有协同抗血管生成的作用。 展开更多

关键词 骨肿瘤 血管生成 pSilence ape1 内皮细胞 迁徙抑制作用

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电离辐射诱导骨肉瘤细胞DNA损伤修复蛋白APE1线粒体定位研究 被引量：3

7

作者 李梦侠 王东 +3 位作者 向德兵 张云嵩 杨宇馨 龙在云 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第15期1458-1461,共4页

目的探讨电离辐射诱导骨肉瘤细胞脱嘌呤／脱嘧啶核酸内切酶（apurinic／aprimidinic endonuclease 1，APE1）线粒体定位表达情况，为进一步研究线粒体DNA修复在骨肉瘤放射治疗抵抗中的作用提供依据。方法应用激光共聚焦显微术和Western ... 目的探讨电离辐射诱导骨肉瘤细胞脱嘌呤／脱嘧啶核酸内切酶（apurinic／aprimidinic endonuclease 1，APE1）线粒体定位表达情况，为进一步研究线粒体DNA修复在骨肉瘤放射治疗抵抗中的作用提供依据。方法应用激光共聚焦显微术和Western blot观察正常对照组和12Gy X线照射后不同时相点骨肉瘤细胞株HOS细胞中APE1线粒体定位情况。结果对照组、12Gy X射线处理后1、2、3h APE1和线粒体有共定位现象，APE1细细胞质／细胞核荧光强度比值分别为：（0．78±0．04）、（1．04±0．03）、（1．14±0．05）、（1．80±0．38）。Western blot亦证实线粒体内APE1蛋白表达增高。结论放射后早期APE1向细胞质线粒体移位，从1～3h逐渐增高，提示APE1可能在电离辐射后骨肉瘤细胞线粒体DNA损伤修复中发挥重要作用。 展开更多

关键词 骨肿瘤 ape1 线粒体 放射治疗

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RNA干扰抑制KM_3细胞APE1蛋白表达对其增殖与凋亡的影响 被引量：3

8

作者 谢家印 王东 +3 位作者 杨镇洲 王阁 向德兵 李增鹏 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第7期700-703,共4页

目的探讨脱嘌呤/脱嘧啶核酸内切酶(apurinic/apyrimidinic endonuclease,APE1)基因RNA干扰对KM3人多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)细胞APE1蛋白表达及细胞增殖、凋亡的影响,以期为转基因治疗多发性骨髓瘤提供实验依据。方法将构建的A... 目的探讨脱嘌呤/脱嘧啶核酸内切酶(apurinic/apyrimidinic endonuclease,APE1)基因RNA干扰对KM3人多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)细胞APE1蛋白表达及细胞增殖、凋亡的影响,以期为转基因治疗多发性骨髓瘤提供实验依据。方法将构建的APE1siRNA表达载体导入人多发性骨髓瘤细胞株KM3细胞,应用Western blot检测APE1蛋白表达的改变,并通过细胞增殖曲线、MTT法和流式细胞术、DNA片段化百分率检测观察靶细胞的增殖与凋亡。结果Western blot分析表明APE1siRNA表达载体使KM3细胞APE1蛋白表达下降,细胞生长曲线观察、MTT法检测显示,转染的KM3细胞生长受抑,流式细胞术和DNA片段化百分率检测观察到APE1RNA干扰使靶细胞凋亡明显增加。结论APE1RNA干扰通过降低APE1蛋白表达,抑制KM3细胞生长和促进其凋亡。 展开更多

关键词 多发性骨髓瘤 凋亡 ape1基因 RNA干扰 DNA损伤修复

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APE1乙酰化调节电离辐射诱导的HeLa细胞自噬 被引量：3

9

作者 张志敏 杨镇洲 +5 位作者 何昊 蓝保华 李钱 吴艳 王帅 李娟 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期380-384,共5页

目的探讨脱嘌呤/脱嘧啶核酸内切酶∕氧化还原因子(apurinic/aprimidinic endonuclease/redox factor-1,APE1/Ref-1)乙酰化对电离辐射诱导He La细胞自噬的调节作用。方法给予Elekta precise直线加速器处理He La细胞及子系细胞APE1WT和APE... 目的探讨脱嘌呤/脱嘧啶核酸内切酶∕氧化还原因子(apurinic/aprimidinic endonuclease/redox factor-1,APE1/Ref-1)乙酰化对电离辐射诱导He La细胞自噬的调节作用。方法给予Elekta precise直线加速器处理He La细胞及子系细胞APE1WT和APE1K6R/K7R,应用免疫共沉淀(co-immunoprecipitation,Co-IP)的方法检测APE1乙酰化修饰及Beclin1/Bcl2的结合,流式细胞仪检测细胞自噬的水平,免疫荧光激光共聚焦检测LC3的聚集,Western blot检测APE1、LC3和p62的表达。结果 He La细胞APE1乙酰化水平随着照射剂量的增加和照射后时间的延长而逐渐升高(P<0.05)。He La细胞LC3Ⅱ的表达与照射剂量呈正相关,而与p62呈负相关(P<0.05);电离辐射促进细胞的自噬水平和LC3的聚集。电离辐射后,LC3Ⅱ上调;与对照组APE1WT相比,APE1K6R/K7R细胞Beclin1/Bcl2结合增强,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值降低,p62表达上调(P<0.05)。结论 APE1乙酰化通过Beclin1/Bcl2途径调节电离辐射诱导的He La细胞自噬。 展开更多

关键词 电离辐射 ape1乙酰化 自噬 宫颈癌

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pSilence APE1联合中子射线治疗骨肉瘤的体外实验研究 被引量：3

10

作者 卿毅 王东 +2 位作者 仲召阳 李增鹏 张沁宏 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第7期722-725,共4页

目的应用双功能基因脱嘌呤/脱嘧啶核酸内切酶(APE1)小干扰RNA(siRNA)表达载体pSilence APE1“敲低”人骨肉瘤HOS细胞APE1的表达,观察pSilence APE1联合中子放射治疗对HOS细胞生长抑制的协同作用,并探讨其可能机制。方法用脂质体将pSilen... 目的应用双功能基因脱嘌呤/脱嘧啶核酸内切酶(APE1)小干扰RNA(siRNA)表达载体pSilence APE1“敲低”人骨肉瘤HOS细胞APE1的表达,观察pSilence APE1联合中子放射治疗对HOS细胞生长抑制的协同作用,并探讨其可能机制。方法用脂质体将pSilence APE1质粒导入HOS细胞,同时给予不同剂量的锎-252中子射线照射,采用克隆形成分析法测算平均致死剂量(D0)、准域剂量(Dq)值,彗星分析法检测照射后细胞的DNA损伤情况,并用流式细胞仪检测细胞凋亡情况。结果克隆形成分析显示对照组与pSilence APE1转染组HOS细胞经锎-252中子射线照射后的D0值分别为2·80和1·89,Dq值分别为2·66和2·00。分别以2、5、10Gy锎-252中子射线照射对照组与pSilence APE1转染组HOS细胞后,碱性彗星尾力矩分别为6·664±0·648、20·322±1·433、33·909±1·245和7·997±0·542、25·238±1·185、39·191±1·052(P<0·01);细胞凋亡率分别为4·00%、5·91%、9·63%和5·68%、7·55%、13·51%(P<0·05)。结论pSilenceAPE1能显著提高HOS细胞对中子射线的敏感性,促进DNA损伤和细胞凋亡。pSilence APE1基因联合中子放疗可能成为今后骨肉瘤治疗的新方法。 展开更多

关键词 骨肿瘤 ape1 锎-252中子

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血清APE1蛋白在结直肠癌临床诊断中的作用及意义 被引量：5

11

作者 杨宇馨 何乐 +4 位作者 卢先锋 杨骁 仲召阳 王东 戴楠 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期88-93,共6页

目的探讨结直肠癌患者血清APE1蛋白的表达及其在临床诊断中的价值。方法利用ELISA法检测本院2010年1月至2015年9月肿瘤中心收治的202例结直肠癌患者和健康体检中心242例健康对照人群血清APE1蛋白的表达水平,通过免疫组化确定相应患者肿... 目的探讨结直肠癌患者血清APE1蛋白的表达及其在临床诊断中的价值。方法利用ELISA法检测本院2010年1月至2015年9月肿瘤中心收治的202例结直肠癌患者和健康体检中心242例健康对照人群血清APE1蛋白的表达水平,通过免疫组化确定相应患者肿瘤组织APE1蛋白的表达特征,同时采用C-12肿瘤蛋白芯片试剂盒检测上述人群CEA的表达水平。分析血清APE1蛋白与肿瘤组织APE1蛋白表达水平及年龄、性别、分期等临床指标的相关性,并绘制受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic curve,ROC)评估血清APE1蛋白及CEA在结直肠癌诊断中的应用价值。结果 202例结直肠癌患者中位血清APE1蛋白浓度为0.331(0.007~4.359)ng/mL,显著高于对照组0.091(0~1.374)ng/mL(P<0.01)。Spearman相关分析显示血清APE1蛋白水平与肿瘤组织中APE1蛋白表达呈正相关(r=0.331,P=0.025),而与年龄、性别、分期等指标不相关。ROC曲线显示血清APE1蛋白的AUC为0.799(95%CI=0.756~0.843),灵敏度为76.20%,特异性为76.40%,血清CEA的AUC为0.736(95%CI=0.687~0.785),其灵敏度为51.00%,特异性为99.60%。血清APE1蛋白与CEA联合后其AUC为0.857(95%CI=0.819~0.896),灵敏度和特异性分别为72.30%和91.30%。结论结直肠癌患者血清APE1蛋白水平与肿瘤组织APE1表达呈正相关且较健康对照人群显著增高。血清APE1蛋白可与CEA联合作为结直肠癌辅助诊断的血清学标志物。 展开更多

关键词 ape1 结直肠癌 肿瘤标志物 诊断

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外周T细胞淋巴瘤APE1和P53蛋白联合表达的临床意义 被引量：1

12

作者 谢家印 王东 +5 位作者 牟江洪 肖华亮 李梦侠 向德兵 仲召阳 王阁 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期510-514,共5页

目的研究外周T细胞淋巴瘤(peripheral T-cell lymphomas,PTCLs)APE1和P53蛋白联合表达与临床特征、化疗效果及预后的关系。方法免疫组化法检测178例PTCLs患者瘤细胞APE1和P53蛋白表达情况,采用单因素和多因素分析比较APE1和P53蛋白表达... 目的研究外周T细胞淋巴瘤(peripheral T-cell lymphomas,PTCLs)APE1和P53蛋白联合表达与临床特征、化疗效果及预后的关系。方法免疫组化法检测178例PTCLs患者瘤细胞APE1和P53蛋白表达情况,采用单因素和多因素分析比较APE1和P53蛋白表达及联合表达与临床特征、预后的关系。结果PTCLs患者APE1和P53蛋白表达阳性率分别为82.6%(147/178)和40.5%(72/178),其中血管免疫母T细胞淋巴瘤(ATL)和外周T细胞淋巴瘤-非特异型(PTCL-U)患者的APE1表达阳性率显著高于结外NK/T细胞淋巴瘤(NK/TL)、皮下脂膜炎样T细胞淋巴瘤(CTCL)和间变大T细胞淋巴瘤(ALCL)患者(P<0.05)。具有APE1+/P53+共表达患者的临床分期以Ⅲ+Ⅳ为主,中、高危患者比例高;APE1+/P53-组与APE1+/P53+组患者化疗疗效显著低于APE1-/P53-组和APE1-/P53+组(P<0.01);APE1+/P53-组和APE1+/P53+组患者总生存率明显低于APE1-/P53-和APE1-/P53+2组(P<0.01),APE1+/P53+组患者无病生存时间(DFS)明显低于其他3组(P<0.01);单因素生存分析显示APE1及P53呈阳性表达、APE1+/P53-和APE1+/P53+联合表达与患者预后不良有关(P<0.05),APE1+/P53-和APE1+/P53+联合表达均与3年生存率有关(P<0.05,P<0.01);多因素生存分析显示APE1+/P53+共表达患者预后最差(P<0.01)。结论APE1、P53表达阳性,以及APE1+/P53-、APE1+/P53+联合表达的患者预后不良;APE1+/P53+共表达为PTCLs患者独立预后因素。 展开更多

关键词 淋巴瘤 外周T细胞 ape1 P53 预后

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DNA修复基因APE1 Asp148Glu多态性与中国西南地区女性宫颈癌风险及预后相关 被引量：3

13

作者 许文婧 张诗珩 王东 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第5期418-424,共7页

目的探讨中国西南地区女性DNA修复基因APE1多态性与宫颈癌风险和预后的相关性。方法调查2007年1月至2014年7月在陆军军医大学大坪医院就诊的290例宫颈癌患者的临床特征,以同期290例体检的健康志愿者为对照;并对患者的总生存期进行随访,... 目的探讨中国西南地区女性DNA修复基因APE1多态性与宫颈癌风险和预后的相关性。方法调查2007年1月至2014年7月在陆军军医大学大坪医院就诊的290例宫颈癌患者的临床特征,以同期290例体检的健康志愿者为对照;并对患者的总生存期进行随访,使用PCR对APE1(Asp148Glu和-141T/G)进行基因分型。利用χ2检验和Hardy-Weinberg平衡分析病例与对照之间基因的多态性;采用多元Logistic回归模型评估基因多态性与宫颈癌风险的相关性,用Kaplan-Meier法评估患者的总生存与不同基因型的关系。结果与APE1 Asp148 Asp/Asp相比,Glu/Glu基因型显示出患宫颈癌的风险更低(OR=0.542,P<0.05),特别是具有以下临床特征的患者:生育次数<2次(OR=0.345,P<0.05),初潮年龄≥14岁(OR=0.522,P<0.05),未绝经患者(OR=0.324,P<0.05),绝经年龄≥45岁(OR=0.495,P<0.05),病理类型为鳞状细胞癌(OR=0.597,P<0.05)。而含有Glu的基因型具有更多的生存获益(P=0.001),但是APE1 pro-141T/G多态性与宫颈癌风险没有显著关联。结论纯合子APE1 Asp148 Glu/Glu基因型有较低的子宫颈癌风险及较好的预后。 展开更多

关键词 宫颈癌 ape1 单核苷酸多态性 癌症风险 癌症预后

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携带人脱嘌呤/脱嘧啶核酸内切酶(APE1)基因重组慢病毒载体的构建及体外表达检测 被引量：1

14

作者 张璐 方宇 +2 位作者 曾昭书 连亚军 许予明 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第9期1073-1076,共4页

目的:构建携带人脱嘌呤/脱嘧啶核酸内切酶-1(Apurinic/apyrimidinic endonuclease-1,APE1)基因重组慢病毒载体内英文摘要中,并检测其体外表达目的基因的水平。方法:应用基因克隆技术将人APE1基因克隆入慢病毒载体LV中,经过PCR、酶切和... 目的:构建携带人脱嘌呤/脱嘧啶核酸内切酶-1(Apurinic/apyrimidinic endonuclease-1,APE1)基因重组慢病毒载体内英文摘要中,并检测其体外表达目的基因的水平。方法:应用基因克隆技术将人APE1基因克隆入慢病毒载体LV中,经过PCR、酶切和测序鉴定后,与包装四质粒系统共转染293T细胞,制备并收集携带APE1基因的慢病毒,重组慢病毒感染体外培养大鼠神经元细胞,利用实时定量PCR、蛋白质免疫印迹方法检测APE1的表达情况,观察病毒转染效果。结果:PCR、酶切和测序鉴定,成功克隆了LV-APE1重组质粒。包装慢病毒,浓缩病毒悬液的滴度为1.0×109 TU/ml。慢病毒颗粒稳定转染大鼠神经元细胞,当感染复数为50时,感染效率100%,实时定量PCR、蛋白质免疫印迹方法可以检测到重组慢病毒感染大鼠神经元细胞后能高水平表达APE1。结论:成功构建了携带人APE1基因慢病毒载体,并可在体外高水平表达其所携带的目的基因,为将其进一步应用于神经系统退行性疾病的治疗研究奠定了方法学基础。 展开更多

关键词 人ape1 慢病毒载体 基因治疗

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RNA干扰骨髓基质细胞和/或骨髓瘤细胞APE1表达对共培养骨髓瘤细胞增殖及凋亡的影响

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作者 谢家印 杜佳 +4 位作者 李梦侠 卿毅 关伟 曾林立 王东 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期1008-1011,共4页

目的探讨RNA干扰骨髓基质细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs)及骨髓瘤细胞株U266 APE1表达对共培养的U266细胞增殖、凋亡的影响。方法将构建的APE1 siRNA表达载体分别导入BMSCs及U266细胞中。Westernblot法检测2种细胞中APE1蛋白表... 目的探讨RNA干扰骨髓基质细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs)及骨髓瘤细胞株U266 APE1表达对共培养的U266细胞增殖、凋亡的影响。方法将构建的APE1 siRNA表达载体分别导入BMSCs及U266细胞中。Westernblot法检测2种细胞中APE1蛋白表达;2株细胞经APE1 siRNA处理后采用Transwell插入式培养皿构建BMSCs与骨髓瘤细胞共培养模型,采用MTT法、Annexin V-PE/7-AAD双染法、RT-PCR分别检测U266细胞增殖、凋亡及细胞中IL-6/IL-8 mR-NA表达水平。结果 APE1 siRNA可明显降低BMSCs及U266细胞APE1蛋白表达,与对照组相比差异具有统计学意义(P<0.01);在APE1 siRNA同时处理BMSCs和U266细胞后的共培养体系中,U266细胞增殖抑制及细胞凋亡明显高于单一细胞APE1敲低组及APE1 siRNA未处理组(P<0.01);U266细胞中IL-6及IL-8 mRNA表达水平亦降低(P<0.01)。结论抑制APE1在BMSCs和/或骨髓瘤细胞株U266的表达,可明显抑制共培养体系中U266细胞的增殖活性并促进其凋亡。 展开更多

关键词 多发性骨髓瘤 细胞凋亡 ape1基因 RNA干扰

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骨髓瘤细胞表达APE1促进THP-1细胞破骨样分化

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作者 周立为 杜佳 +3 位作者 张亮 程燚 王东 谢家印 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第16期1663-1666,共4页

目的研究在非接触式共培养体系下,RNA干扰多发性骨髓瘤细胞株U266 APE1表达对与其共培养的THP-1细胞破骨样分化的影响。方法①将构建的APE1 siRNA表达载体导入U266细胞中。②Western blot法检测U266细胞中APE1及破骨细胞分化因子(RANKL... 目的研究在非接触式共培养体系下,RNA干扰多发性骨髓瘤细胞株U266 APE1表达对与其共培养的THP-1细胞破骨样分化的影响。方法①将构建的APE1 siRNA表达载体导入U266细胞中。②Western blot法检测U266细胞中APE1及破骨细胞分化因子(RANKL)蛋白表达。③建立非接触式共培养体系:THP-1+U266共培养组、THP-1+U266APE1 siRNA共培养组和THP-1细胞单培养组。④抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色鉴定破骨样细胞,RT-PCR法检测THP-1细胞Cathepsin K和V-ATPase mRNA表达水平。⑤光镜下观察骨切片陷窝形成。结果 APE1 siRNA能明显抑制U266细胞中APE1及RANKL蛋白表达(P<0.01)。THP-1细胞与U266细胞共培养后,THP-1细胞可分化为TRAP阳性的破骨样细胞,Cathepsin K和V-ATPase基因表达显著升高(P<0.05);U266细胞经APE1 siRNA处理后,共培养体系中THP-1细胞诱导分化的OCLs数量减少,Cathepsin K和V-ATPase基因水平降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论APE1 siRNA能明显抑制U266细胞诱导的THP-1细胞的破骨样分化,其机制可能与APE1下调U266细胞RANKL有关。 展开更多

关键词 ape1 骨髓瘤骨病 共培养 THP-1 RNA干扰

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APE1和p53蛋白在A549细胞和HeLa细胞中的结合作用 被引量：3

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作者 张翀 李梦侠 +4 位作者 程燚 李增鹏 王阁 王东 杨镇洲 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第21期2314-2319,共6页

目的探讨脱嘌呤/脱嘧啶核酸内切酶(apurinic/apyrimidinic endonuclease,APE1)和p53蛋白内源性和外源性相互结合作用。方法将重组质粒pET42a-hAPE1转染E.coli BL21(DE3),应用IPTG诱导GST-APE1蛋白表达,鉴定后经金属螯合层析技术纯化,通... 目的探讨脱嘌呤/脱嘧啶核酸内切酶(apurinic/apyrimidinic endonuclease,APE1)和p53蛋白内源性和外源性相互结合作用。方法将重组质粒pET42a-hAPE1转染E.coli BL21(DE3),应用IPTG诱导GST-APE1蛋白表达,鉴定后经金属螯合层析技术纯化,通过Western blot鉴定纯化蛋白,得到GST-APE1融合蛋白。免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation,Co-IP)和GST蛋白沉降实验分别检测内源性和外源性APE1和p53蛋白结合作用,免疫荧光标记结合激光共聚焦显微镜技术确定APE1和p53蛋白亚细胞定位。结果转染质粒经IPTG诱导表达,应用SDS-PAGE发现GST-APE1在预期位置64×103处存在阳性条带,"Ni"柱纯化后得到GST-APE1融合蛋白,通过Western blot鉴定。免疫共沉淀和GST蛋白沉降实验证实APE1和p53存在内源性和外源性结合作用。激光共聚焦显微镜观察免疫荧光标记的APE1和p53蛋白均为核浆共表达蛋白,氧化应激处理后,蛋白逐渐由胞浆向胞核移位,二者共定位于核膜处较明显。结论 APE1和p53蛋白在A549和HeLa细胞中存在内源性和外源性结合作用,可能与其转录调控及肿瘤放化疗疗效有关。 展开更多

关键词 ape1蛋白 P53蛋白 相互作用

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pSilence APE1提高骨肉瘤放疗敏感性的动物实验研究 被引量：5

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作者 卿毅 王东 +2 位作者 仲召阳 李增鹏 张沁宏 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期230-233,共4页

目的:观察APE1 siRNA表达载体pSilence APE1基因放射治疗对骨肉瘤裸鼠移植瘤生长的抑制作用。方法:人骨肉瘤细胞9901荷瘤裸鼠30只随机分为3组:对照组、单独放射治疗组和pSilence APE1+放疗联合治疗组。实验治疗第15天处死动物,绘制肿瘤... 目的:观察APE1 siRNA表达载体pSilence APE1基因放射治疗对骨肉瘤裸鼠移植瘤生长的抑制作用。方法:人骨肉瘤细胞9901荷瘤裸鼠30只随机分为3组:对照组、单独放射治疗组和pSilence APE1+放疗联合治疗组。实验治疗第15天处死动物,绘制肿瘤生长曲线,免疫组化SP法检测骨肉瘤细胞APE1蛋白的表达、骨肉瘤细胞的微血管密度和TUNEL法检测肿瘤细胞凋亡的情况。结果:pSilence APE1+放疗联合治疗组和对照组、单独放射治疗组的肿瘤大小存在显著性差异(P<0.05)。pSilence APE1+放疗联合治疗组肿瘤组织APE1表达显著降低;pSilence APE1+放疗联合治疗组肿瘤微血管密度明显低于对照组和单独放射治疗组(P<0.01),而肿瘤细胞凋亡显著增加(P<0.01)。结论:实验结果表明,pSilence APE1基因放射治疗能显著抑制骨肉瘤的生长。 展开更多

关键词 骨肿瘤 APEI RNA干扰 放射治疗

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兔抗人APE1多克隆抗体的制备及鉴定 被引量：5

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作者 曹晓静 戴楠 +4 位作者 易维京 李增鹏 杨宇馨 王东 胡川闽 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期325-327,331,共4页

目的:制备兔抗人脱嘌呤/脱嘧啶核酸内切酶多克隆抗体并进行鉴定。方法:以纯化的全长APE1蛋白为抗原,采用改良的快速免疫法制备兔抗人APE1多克隆抗体并进行特异性亲和纯化,ELISA、Western blot和免疫组化检测制备抗体的效价和特异性。结... 目的:制备兔抗人脱嘌呤/脱嘧啶核酸内切酶多克隆抗体并进行鉴定。方法:以纯化的全长APE1蛋白为抗原,采用改良的快速免疫法制备兔抗人APE1多克隆抗体并进行特异性亲和纯化,ELISA、Western blot和免疫组化检测制备抗体的效价和特异性。结果:ELISA检测显示该抗体的效价达到1∶128000,相对亲和力常数为8.96×10-6mol/L。Western blot显示该抗体能与APE1蛋白特异性结合,免疫组化检测显示阳性反应产物主要定位于细胞核。此外,该抗体还可用于小鼠和大鼠组织APE1蛋白的检测。结论:制备的多克隆抗体特异性和效价良好,不仅为今后深入研究人APE1蛋白的性质与功能提供了有用的实验工具,还可用于检测小鼠和大鼠组织中APE1蛋白的表达。 展开更多

关键词 脱嘌呤/脱嘧啶核酸内切酶 多克隆抗体

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APE1 siRNA重组腺病毒增强贝伐单抗对移植骨肉瘤的治疗作用 被引量：3

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作者 仲召阳 张沁宏 +3 位作者 卿毅 李梦侠 李增鹏 王东 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期331-335,共5页

目的:探讨以DNA损伤修复基因脱嘌呤/脱嘧啶核酸内切酶基因(apurinic/aprimidinic endonuclease-1,APE1)为靶点的siRNA在骨肉瘤治疗中的作用及其与贝伐单抗(bevacizumab,Avastin)的协同效应。方法:建立人骨肉瘤9901细胞荷瘤裸鼠模型,16... 目的:探讨以DNA损伤修复基因脱嘌呤/脱嘧啶核酸内切酶基因(apurinic/aprimidinic endonuclease-1,APE1)为靶点的siRNA在骨肉瘤治疗中的作用及其与贝伐单抗(bevacizumab,Avastin)的协同效应。方法:建立人骨肉瘤9901细胞荷瘤裸鼠模型,16只荷瘤鼠随机分为4组:EGFP对照组,APE1siRNA治疗组,Avastin治疗组和联合治疗组(Avastin+APE1siR-NA)。观察移植瘤生长情况并计算抑瘤率,免疫组织化学法检测肿瘤组织微血管密度和Ki67表达,TUNEL法检测肿瘤细胞凋亡,激光共聚焦检测肿瘤组织的缺氧状态,Western blotting检测肿瘤组织内VEGF蛋白的表达。结果:与APE1siRNA治疗组和Avastin治疗组相比,Avastin+APE1siRNA治疗组的抑瘤率显著增加(P<0.01)。各治疗组的微血管密度及Ki67表达明显低于对照组,且Avastin+APE1siRNA治疗组微血管密度和Ki67表达显著低于单独治疗组(P<0.01)。各治疗组的凋亡指数明显高于对照组,且Avastin+APE1siRNA治疗组明显高于单独治疗组(P<0.01)。APE1siRNA或Avastin治疗均可引起肿瘤组织缺氧,抑制肿瘤组织中VEGF的表达,Avastin+APE1siRNA治疗效果更加明显。结论:以APE1为靶点的siRNA能显著抑制裸鼠移植骨肉瘤的血管生成和瘤体生长,并诱导肿瘤细胞凋亡,且与Avastin具有协同作用。 展开更多

关键词 骨肉瘤 SIRNA 脱嘌呤/脱嘧啶核酸内切酶 贝伐单抗 抗血管生成 凋亡

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