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5-羟色胺1A受体激动剂高通量筛选模型的建立 被引量:4
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作者 孙颖 蔡海燕 +3 位作者 沈敬山 朱维良 王贺瑶 郭敏亮 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期731-736,共6页
目的为发现5-羟色胺1A(5-HT1A)受体的激动剂,通过报告基因活性检测的方法建立高通量筛选(HTS)细胞模型。方法将带有人源5-HT1A受体的真核表达质粒pcD-NA3.1(pcDNA3.1-h5-HT1AR)与带有报告基因pCRE-luc的pcDNA3.1质粒(pcDNA3.1-pCRE-luc... 目的为发现5-羟色胺1A(5-HT1A)受体的激动剂,通过报告基因活性检测的方法建立高通量筛选(HTS)细胞模型。方法将带有人源5-HT1A受体的真核表达质粒pcD-NA3.1(pcDNA3.1-h5-HT1AR)与带有报告基因pCRE-luc的pcDNA3.1质粒(pcDNA3.1-pCRE-luc)共转染到工具细胞中,通过对工具细胞选择、共转染质粒比例、化合物孵育时间及阳性化合物选择等条件进行探索和优化,建立了稳定表达人源5-HT1A受体并可用于该受体激动剂筛选的细胞模型(HEK293-h5-HT1AR)。结果①根据瞬转实验中信号值的高低,模型采用HEK293细胞作为工具细胞;②根据瞬转实验中的信噪比,发现pcDNA3.1-h5-HT1AR:pcDNA3.1-pCRE-luc的最佳比例为1∶3;③对化合物孵育时间进行优化,选择的最佳孵育时间为6 h;④阳性化合物的选择过程中,实验研究了5-HT.HCl,Flibanserin,8-OH-DPAT以及Lorcaser-in(APD356)4个已报道有5-HT1A受体激动活性的化合物,结果表明APD356在该体系中最适合作为阳性对照化合物。⑤该细胞株连续培养12代,信号稳定。结论通过对一系列实验条件进行选择和优化,建立了一个稳定表达人源5-HT1A受体的细胞模型,该模型可用于高通量5-HT1A激动剂的筛选。 展开更多
关键词 激动剂 高通量筛选 5-羟色胺1a受体 抑郁症 内源型 细胞稳转株
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外源神经递质5-羟色胺(5-HT)和多巴胺(DA)调控三疣梭子蟹争斗行为的初步研究
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作者 吴波 张顺 +3 位作者 张成 母昌考 徐善良 王丹丽 《海洋与湖沼》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期168-175,共8页
影响甲壳类动物争斗行为的因素包括性别差异、体型和生殖状态等,神经递质对甲壳动物的争斗行为也具有调控作用。为探索三疣梭子蟹在养殖和繁殖过程中由于争斗行为受损或死亡的行为机制,采用双抗体夹心法测定争斗前后三疣梭子蟹血淋巴中5... 影响甲壳类动物争斗行为的因素包括性别差异、体型和生殖状态等,神经递质对甲壳动物的争斗行为也具有调控作用。为探索三疣梭子蟹在养殖和繁殖过程中由于争斗行为受损或死亡的行为机制,采用双抗体夹心法测定争斗前后三疣梭子蟹血淋巴中5-HT和DA的含量,并分析了争斗前后肌肉、胸神经节、肝胰腺三种组织中5-HT和DA受体基因表达量变化。同时,通过注射外源5-HT和DA,记录并分析了三疣梭子蟹争斗行为差异以及三种组织中5-HT和DA受体基因表达量变化。结果表明:(1)争斗后三疣梭子蟹血淋巴中5-HT含量显著升高,DA含量显著降低(P<0.05);(2)注射10;mol5-HT能显著减少三疣梭子蟹的争斗行为发生次数以及争斗持续时间(P<0.05),而注射10;molDA却能够显著增加三疣梭子蟹的争斗行为发生次数和争斗持续时间(P<0.05);(3)争斗前后5-HT和DA受体在肌肉和胸神经节中表达量发生显著变化(P<0.05),且不同受体在相同组织中未呈现相同的变化趋势;(4)注射外源DA能够调节5-HT1B、5-HT2B、5-HT7受体的表达水平(P<0.05),外源5-HT也能调节DA1A和DA2受体的表达水平(P<0.05)。综上所述,外源5-HT对三疣梭子蟹争斗行为起抑制作用,而DA对三疣梭子蟹争斗行为起促进作用。同时,外源5-HT和DA也会引起相关受体表达量变化,且它们之间存在相互作用。 展开更多
关键词 三疣梭子蟹 争斗行为 5-ht/DA 5-ht/DA受体
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药物对5-羟色胺引起的犬离体大隐静脉收缩作用的影响
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作者 章新华 邢军 王怀良 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期241-242,250,共3页
目的 :探讨植物药生物碱 94 95 10L对犬离体大隐静脉 5 HT1like受体的作用。方法 :建立 5 羟色胺 ( 5 HT)对犬离体大隐静脉收缩作用的量效曲线 ,观察 94 95 10L对该量效曲线的影响。结果 :94 95 10L表现出对 5 HT1like受体的... 目的 :探讨植物药生物碱 94 95 10L对犬离体大隐静脉 5 HT1like受体的作用。方法 :建立 5 羟色胺 ( 5 HT)对犬离体大隐静脉收缩作用的量效曲线 ,观察 94 95 10L对该量效曲线的影响。结果 :94 95 10L表现出对 5 HT1like受体的微弱的激动作用 (α =2 8.0 % ) ,其 10 -5mol·L-1和 3× 10 -5mol·L-1均使 5 HT量效曲线下移 ,并使最大收缩高度分别下降至 ( 81.0± 3 .2 ) %和 ( 72 .3± 11.7) %。结论 :94 95 10L对犬离体大隐静脉 5 HT1like受体有部分激动作用 ,该作用对防治偏头痛发作可能有重要意义。 展开更多
关键词 5-羟色胺 5-羟色胺1like受体 大隐静脉 偏头痛 防治
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毒蕈胆碱M_1受体激动剂的高通量筛选模型 被引量:11
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作者 高虹 欧阳克清 +3 位作者 郑旭煦 许治良 胡应和 蔡绍皙 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第7期776-779,共4页
目的 建立毒蕈碱样胆碱M1 受体激动剂的高通量筛选模型 ,以此模型进行M1 受体激动剂筛选。方法 将M1 受体基因质粒 (M1 /pCDNA3 1 )与报告基因质粒 (3×CRE/ 3×MRE/SRE LUC)按 1∶5的比例共转染HEK2 93 ,建立了一个稳定的M1... 目的 建立毒蕈碱样胆碱M1 受体激动剂的高通量筛选模型 ,以此模型进行M1 受体激动剂筛选。方法 将M1 受体基因质粒 (M1 /pCDNA3 1 )与报告基因质粒 (3×CRE/ 3×MRE/SRE LUC)按 1∶5的比例共转染HEK2 93 ,建立了一个稳定的M1 受体激动剂报告基因筛选细胞株。配体与细胞表面M1 受体结合后 ,激活相应的信号通路 ,调节报告基因的表达 ,通过测定荧光酶素报告基因表达水平的变化 ,评估配体激活M1 受体的生物活性。结果 通过对筛选条件 ,如细胞数目、荧光素酶表达时间、底物浓度的优化 ,建立了可靠的筛选方法 ,并对多种抗衰老中药水提物进行了筛选 ,找到 3种对M1 受体有活性的中药。结论 该系统能准确、稳定、有效地应用于M1 展开更多
关键词 M1受体 报告基因 激动剂 高通量药物筛选
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二甲双胍联合利拉鲁肽治疗超重多囊卵巢综合征患者后MFAP5水平变化与临床指标改善的相关性研究 被引量:11
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作者 李蔚鑫 李行 +6 位作者 廖明钰 石榴 张玉玲 彭桂亮 洪翩 隆敏 郑宏庭 《陆军军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第3期217-223,共7页
目的通过分析血浆微纤丝相关蛋白5(microfibrillar associated protein 5,MFAP5)水平变化与代谢指标改善的相关性,研究MFAP5在二甲双胍联合胰高血糖素样肽-1受体激动剂(glucagon-like peptide-1 receptor agonist,GLP-1RA)利拉鲁肽治疗... 目的通过分析血浆微纤丝相关蛋白5(microfibrillar associated protein 5,MFAP5)水平变化与代谢指标改善的相关性,研究MFAP5在二甲双胍联合胰高血糖素样肽-1受体激动剂(glucagon-like peptide-1 receptor agonist,GLP-1RA)利拉鲁肽治疗超重多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)患者中的潜在作用及机制。方法收集23例经我院二甲双胍联合利拉鲁肽方案治疗12周的超重或肥胖型PCOS患者的病历资料,根据体质指数(BMI)将受试者分为肥胖组(n=12)和超重组(n=11)2个亚组。口服盐酸二甲双胍肠溶片0.5 g,3次/d;皮下注射利拉鲁肽注射液0.6 mg,1次/d,1周后增加至1.2 mg,1次/d,最大剂量增至1.8 mg,1次/d。对比两组治疗前和治疗12周后的体格测量指标、代谢及炎症相关指标、性激素水平以及血浆MFAP5水平。结果经过12周的治疗,2组患者体格测量指标及糖脂代谢指标、炎症指标、性激素水平均有改善(P<0.05);相关性分析提示,所有患者血浆MFAP5水平变化值与体质量(r=0.520,P=0.011)、BMI(r=0.469,P=0.024)、腰围(r=0.634,P=0.001)、臀围(r=0.587,P=0.001)、空腹胰岛素(r=0.602,P=0.002)、甘油三酯(TG,r=0.556,P=0.002)的变化值呈正相关;亚组分析提示,超重组血浆MFAP5水平变化值与糖脂代谢相关指标[胰岛素释放试验60 min胰岛素(r=0.602,P=0.002)、TG(r=0.655,P=0.029)]的变化值呈正相关;肥胖组患者血浆MFAP5水平变化值与腰围(r=0.495,P=0.002)、臀围(r=0.508,P=0.010)、糖脂代谢相关指标[空腹胰岛素(r=0.578,P=0.001)、胰岛素释放试验180 min胰岛素(r=0.656,P=0.021)、HOMA-IR(r=0.497,P=0.012)、TG(r=0.595,P=0.041)]、性激素水平[促黄体生成素(r=0.468,P=0.042)]的变化值呈正相关。结论超重PCOS患者血浆MFAP5水平可能与糖脂代谢的改善有关;MFAP5可能是参与二甲双胍联合利拉鲁肽治疗超重PCOS过程中的相关分子,可能作为超重PCOS治疗效果监测的可靠指标。 展开更多
关键词 二甲双胍 胰高血糖素样肽-1受体激动剂 利拉鲁肽 超重多囊卵巢综合征 糖脂代谢 微纤丝相关蛋白5
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乌拉地尔对吗啡导致的大鼠空间记忆障碍的改善作用 被引量:4
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作者 李新旺 张滨 +1 位作者 于萍 徐爱红 《中国心理卫生杂志》 CSSCI CSCD 北大核心 2006年第3期141-143,共3页
目的研究吗啡对大鼠空间记忆的影响和5-HT1A受体激动剂乌拉地尔对这种影响的改善作用。方法;训练大鼠学习Morris水迷宫任务,检验它们在注射药物情况下回忆空间任务的能力。结果同时注射乌拉地尔(20mg/kg)和吗啡(10mg/kg)的大鼠通过回忆... 目的研究吗啡对大鼠空间记忆的影响和5-HT1A受体激动剂乌拉地尔对这种影响的改善作用。方法;训练大鼠学习Morris水迷宫任务,检验它们在注射药物情况下回忆空间任务的能力。结果同时注射乌拉地尔(20mg/kg)和吗啡(10mg/kg)的大鼠通过回忆寻找Morris水迷宫隐蔽站台的潜伏期(第一次测验,30.43±9.46;第二次测验,41.00±10.30;单位,秒),显著短于单独注射吗啡的动物(第一次测验,87.00±22.53;第二次测验,96.67±20.85;均为P<0.01);而与对照组动物(第一次测验,16.17±3.74;第二次测验,16.33±2.36)没有显著差别。单因素方差分析对照组和给药情况下吗啡组、吗啡-纳洛酮组和吗啡-乌拉地尔组回忆测验结果分别为第一次测验,16.17±3.74、87.00±22.53、34.67±6.75、30.43±9.46,F1(3,21)=5.866,P<0.01;第二次测验,16.33±2.36、96.67±20.85、22.17±6.46、41.00±10.30,F2(3,21)=8.94,P<0.01。结论乌拉地尔能够显著改善吗啡导致的大鼠空间记忆障碍。 展开更多
关键词 空间记忆 MORRIS水迷宫 动物实验 吗啡 5-ht1a受体激动剂 乌拉地尔
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