3-MA通过抑制自噬反应提高结肠癌5-FU的化疗效果 被引量：4

1

作者 侯妮 刘娜 +1 位作者 韩佳 李杰 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期49-53,共5页

目的探索新的联合化疗方案以提高5-FU为基础的结肠癌化疗效果。方法研究5-FU(7.5μmol/L)、3-MA(5mmol/L)以及两种药物联合使用对人结肠癌细胞株HCT116的自噬及凋亡影响。MTT、Hoechst+PI染色检测细胞生长及凋亡,MDC染色观察细胞内自噬... 目的探索新的联合化疗方案以提高5-FU为基础的结肠癌化疗效果。方法研究5-FU(7.5μmol/L)、3-MA(5mmol/L)以及两种药物联合使用对人结肠癌细胞株HCT116的自噬及凋亡影响。MTT、Hoechst+PI染色检测细胞生长及凋亡,MDC染色观察细胞内自噬反应,Western blotting观察细胞内的凋亡及自噬相关蛋白改变。将HCT116细胞注射至裸鼠皮下建立在体肿瘤模型并进行治疗,观察肿瘤生长情况。结果MTT检测结果显示HCT116在5-FU作用下细胞生长受到抑制,Hoechst+PI染色显示5-FU联合3-MA组凋亡数量较5-FU组明显增加;Western blotting检测5-FU联合3-MA组的凋亡蛋白Caspase-3、PARP表达较5-FU组明显增高。同时,MDC染色以及自噬特异性蛋白LC3II检测发现在5-FU作用下自噬反应升高,而通过3-MA抑制5-FU引起的细胞自噬反应,细胞生长抑制率从5-FU单独作用的(51.64±4.04)%提高至(79.89±1.35)%,凋亡增加超过100%。皮下注射HCT116细胞的裸鼠肿瘤模型,5-FU联合3-MA组较单独使用5-FU组有效抑制肿瘤生长,肿瘤体积及质量均明显减少。结论 3-MA可抑制5-FU处理引起的细胞自噬反应,促进细胞凋亡,HCT116细胞生长抑制率明显增加;为提高5-FU为基础的结肠癌化疗提供新思路。 展开更多

关键词 结直肠癌 5-FU 3-ma 凋亡 自噬 化疗 Caspase-3 PARP LC3

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自噬抑制剂3-MA在神经系统疾病中的作用的研究进展 被引量：8

2

作者 封秀梅 许明敏 +2 位作者 黄辰 李瑛 张微 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2019年第8期129-134,共6页

3-甲基腺嘌呤(3-methyladenine,3-MA)是经典的自噬抑制剂,主要在自噬小体的形成和发展过程中起到抑制作用。在神经系统中,从中枢神经系统疾病到周围神经系统疾病,从神经创伤到神经退行性疾病,3-MA都发挥着重要作用。但目前3-MA在神经系... 3-甲基腺嘌呤(3-methyladenine,3-MA)是经典的自噬抑制剂,主要在自噬小体的形成和发展过程中起到抑制作用。在神经系统中,从中枢神经系统疾病到周围神经系统疾病,从神经创伤到神经退行性疾病,3-MA都发挥着重要作用。但目前3-MA在神经系统疾病中的确切作用一直颇具争议,且其使用缺乏系统性论述。本文就3-MA在神经系统疾病中的作用及其研究概况进行综述,以期为进一步研究提供新思路。 展开更多

关键词 3-ma 自噬 神经系统疾病 研究进展

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龙蛭汤含药血清联合3-MA、白藜芦醇对氧化应激环境下血管内皮细胞自噬及管腔形成的影响 被引量：3

3

作者 黄显雯 刘启华 +4 位作者 陈永斌 罗捷 李南方 邹玲 罗燕萍 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2020年第10期59-63,I0023-I0025,共8页

目的观察龙蛭汤含药血清联合3-甲基腺嘌呤(3-Methyladenine,3-MA)、白藜芦醇(Resveratrol,Res)对过氧化氢(H2O2)诱导的氧化应激环境下血管内皮细胞(HUVECs)自噬及管腔形成的影响。方法SPF级SD大鼠分别予生理盐水、龙蛭汤水煎液灌胃7 d,... 目的观察龙蛭汤含药血清联合3-甲基腺嘌呤(3-Methyladenine,3-MA)、白藜芦醇(Resveratrol,Res)对过氧化氢(H2O2)诱导的氧化应激环境下血管内皮细胞(HUVECs)自噬及管腔形成的影响。方法SPF级SD大鼠分别予生理盐水、龙蛭汤水煎液灌胃7 d,取腹主动脉血制备含药血清,分装备用。通过建立H2O2诱导的HUVECs氧化应激自噬模型,分别加入正常对照组(Control组)、生理盐水含药血清组(空白血清组)、3-MA(3-MA组)、3-MA+10%龙蛭汤含药血清(3-MA+LZD组)、Res(Res组)、Res+10%龙蛭汤含药血清(Res+LZD组);CCK8、划痕实验、基质胶管型形成实验分别检测HUVECs增殖、迁移及管型形成能力,细胞免疫荧光检测自噬表达强度,Western Blot比较各组细胞Beclin-1、LC3Ⅱ/Ⅰ、VEGF的蛋白表达水平。结果与空白血清组相比,Res组与Res+LZD组的细胞增殖数、迁移距离及管型形成数均明显增多,LC3荧光表达增强,Beclin-1、LC3Ⅱ/Ⅰ、VEGF蛋白水平升高,3-MA组的自噬、VEGF蛋白水平均降低;与3-MA组、Res组相比,加入龙蛭汤含药血清后的细胞增殖、迁移、管型形成数增多,3-MA+LZD组自噬荧光表达增强,Beclin-1、LC3Ⅱ/Ⅰ、VEGF蛋白水平升高;Res+LZD组下调Beclin-1、LC3Ⅱ/Ⅰ蛋白水平,与自噬荧光表达趋势一致,同时VEGF蛋白表达水平上调。结论龙蛭汤含药血清通过调节Beclin-1、LC3Ⅱ/Ⅰ自噬蛋白水平调控自噬通路,提高血管内皮细胞活力,促进内皮细胞迁移及管型形成,可能是血管内皮细胞氧化应激损伤后的血管新生的重要作用机制。 展开更多

关键词 龙蛭汤含药血清 3-ma RESVERATROL 自噬 血管管型形成

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添加Al_2O_3-MA复合微粉对铝镁质浇注料性能的影响

4

作者 周渝豪 张丹洋 +2 位作者 江念 陈帆 员文杰 《耐火材料》 CAS 北大核心 2018年第1期14-18,共5页

为了探究Al_2O_3-MA复合微粉的加入对铝镁质浇注料性能的影响,对比加入不同量的(加入质量分数分别为2.5%和5%)Al_2O_3-MA复合微粉(Al_2O_3与MA的质量比为3 2,d50=2.49μm)的试样与不加复合微粉的参比试样在不同温度(1 150~1 450℃)热处... 为了探究Al_2O_3-MA复合微粉的加入对铝镁质浇注料性能的影响,对比加入不同量的(加入质量分数分别为2.5%和5%)Al_2O_3-MA复合微粉(Al_2O_3与MA的质量比为3 2,d50=2.49μm)的试样与不加复合微粉的参比试样在不同温度(1 150~1 450℃)热处理后的性能,并分析试样的物相组成和显微结构。结果表明:加入Al_2O_3-MA复合微粉有利于CA6的形成,降低了CA6的初始形成温度。从显微结构看,随着Al_2O_3-MA复合微粉加入量的增大,片状CA6的生长受到了限制。镁铝尖晶石(220)、(400)与(440)晶面衍射峰强度比值随试样处理温度的变化表明,Al_2O_3-MA复合微粉的加入能够促进尖晶石的反转。另外,Al_2O_3-MA复合微粉会导致试样加热永久线变化率和显气孔率增大,但烧后试样的强度呈现非单调变化。 展开更多

关键词 浇注料 Al2O3-ma复合微粉 尖晶石 六铝酸钙

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SiO_2对Al_2O_3-MA浇注料热剥落影响的研究

5

作者 杨洋 李心慰 +3 位作者 郭玉香 李瑞一 孙诺达 车明姝 《硅酸盐通报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第9期2766-2769,共4页

为研究SiO_2对Al_2O_3-MA浇注料热剥落性的影响,固定浇注料中SiO_2质量分数为0.5wt%,分别以硅微粉、硅石、熔融石英为添加剂制备了Al_2O_3-MA浇注料试样,检测1550℃保温3 h后试样的高温抗折强度、加热永久线变化率、热循环后高温抗折强... 为研究SiO_2对Al_2O_3-MA浇注料热剥落性的影响,固定浇注料中SiO_2质量分数为0.5wt%,分别以硅微粉、硅石、熔融石英为添加剂制备了Al_2O_3-MA浇注料试样,检测1550℃保温3 h后试样的高温抗折强度、加热永久线变化率、热循环后高温抗折强度保持率等性能指标,利用SEM分析试样的微观形貌。结果表明:与引入硅微粉和熔融石英相比,在Al_2O_3-MA浇注料试样中引入硅石,试样中液相生成速度慢,降低了CA6晶粒的成核及生长速度,提高了试样的体积稳定性和致密度,经5次热循环后,CA6晶体生长慢,产生微膨胀,应力集中效应小,使其具有适宜的烧结性能和力学性能同时提高试样的热剥落性。 展开更多

关键词 SIO2 Al2O3-ma 热剥落性 硅石

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MgCO_(3)微粉加入量对氧化铝空心球浇注料结构和性能的影响 被引量：3

6

作者 胡书禾 陈留刚 +3 位作者 李飞 田学坤 张阳 叶国田 《耐火材料》 CAS 北大核心 2021年第5期456-460,共5页

为了开发出低密度、高强度、易成型、保温效果好的氧化铝空心球浇注料,将MgCO_(3)微粉引入到氧化铝空心球浇注料基质中。采用粒度分别为5~3、3~1和1~0.2 mm的氧化铝空心球,板状刚玉细粉、氧化铝微粉和MgCO_(3)微粉制备了氧化铝空心球浇... 为了开发出低密度、高强度、易成型、保温效果好的氧化铝空心球浇注料,将MgCO_(3)微粉引入到氧化铝空心球浇注料基质中。采用粒度分别为5~3、3~1和1~0.2 mm的氧化铝空心球,板状刚玉细粉、氧化铝微粉和MgCO_(3)微粉制备了氧化铝空心球浇注料试样,研究了MgCO_(3)微粉加入量(w,0、1%、2%、3%、4%)对试样显微结构和性能的影响。结果表明:1)经1500℃保温3 h热处理后,改变了基质中六铝酸钙(CA_(6))板片状的晶体形态,生成了粒度更加细小的镁铝尖晶石(MA)和CA_(6)微晶共存的微晶结构,形成的MA-CA_(6)微晶复合体均匀分布在基质空隙内部。2)110℃保温24 h处理后,浇注料体积密度从1.83 g·cm^(-3)降低到1.58 g·cm^(-3),常温抗折强度大于5 MPa;1500℃保温3 h处理后,加热永久线变化率保持在0~0.5%微膨胀,体积稳定性优异;400℃时的热导率下降近30%。 展开更多

关键词 氧化铝空心球浇注料 MgCO_(3)微粉 CA_(6)-ma微晶

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比较热休克蛋白A5和3-甲基腺嘌呤和介导小鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用 被引量：1

7

作者 韩世强 闵恒 +2 位作者 任海军 张新宇 付学锋 《神经解剖学杂志》 CSCD 北大核心 2017年第3期305-310,共6页

目的:比较研究热休克蛋白A5(HSPA5)和3-甲基腺嘌呤(3-MA)介导小鼠脑缺血再灌注(I/R)损伤性自噬的保护作用。方法:成年雄性BALB/c小鼠30只,分为6组:sham组、缺血再灌注组(I/R组)、vehicle+I/R组、3-甲基腺嘌呤(3-MA)+I/R组、scramble siR... 目的:比较研究热休克蛋白A5(HSPA5)和3-甲基腺嘌呤(3-MA)介导小鼠脑缺血再灌注(I/R)损伤性自噬的保护作用。方法:成年雄性BALB/c小鼠30只,分为6组:sham组、缺血再灌注组(I/R组)、vehicle+I/R组、3-甲基腺嘌呤(3-MA)+I/R组、scramble siRNA+I/R组和HSPA5 siRNA+I/R组,每组5只。采用大脑中动脉阻塞(MCAO)60 min后再灌注24 h制作小鼠I/R模型。Vehicle+I/R组和3-MA+I/R将5μl 0.9%Na Cl或3-MA(30 mg/ml)在MCAO前30 min侧脑室注射;scramble siRNA+I/R group组和HSPA5 siRNA+I/R组将5μl scramble siRNA或HSPA5 siRNA(2μg/μl)在MCAO前24 h侧脑室注射。通过小鼠I/R后神经功能评分确定运动功能障碍程度。小鼠神经细胞内自噬体形成用透射电子显微镜测定,再灌注24 h缺血大脑皮层(LC3)-II/LC3-I表达用Western Blot方法检测。小鼠I/R后缺血大脑神经细胞损伤用Nissl染色进行观察。结果:HSPA5和3-MA可以影响I/R小鼠行为学改变并使脑缺血性损伤和神经症状加重(P<0.05)。透射电子显微镜检测可见,sham组小鼠大脑皮层神经细胞形态正常,I/R组小鼠缺血大脑皮层神经元胞质中细胞器减少,形成自噬体。与sham组小鼠比较,I/R组小鼠缺血大脑皮层LC3-II蛋白表达水平显著增高(P<0.05);3-MA+I/R或HSPA5 siRNA+I/R小鼠缺血大脑皮层LC3-II蛋白表达水平明显低于I/R小鼠(P<0.05)。结论:HSPA5和3-MA在介导小鼠脑缺血再灌注损伤导致的自噬可发挥相同的保护作用,并且促进神经细胞凋亡。 展开更多

关键词 热休克蛋白A5(HSPA5) 3-甲基腺嘌呤(3-ma) 自噬 缺血再灌注损伤 小鼠

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Al(OH)_3加入量对Al_2O_3-CaO-MgO浇注料性能的影响

8

作者 王伟伟 周宁生 毕玉保 《耐火材料》 CAS 北大核心 2014年第2期123-126,130,共5页

为了避免常见Al2O3-CaO-MgO轻质浇注料使用重基质造成的与轻质骨料性能差异较大的问题，以微孔轻质CA6-MA骨料（8-5、5-3、3-1mm）、w（Al2O3）=99．5％的速烧刚玉（≤0．045、≤0．074mm）、α-Al2O3微粉、Al（OH）3（≤0．045mm）等... 为了避免常见Al2O3-CaO-MgO轻质浇注料使用重基质造成的与轻质骨料性能差异较大的问题，以微孔轻质CA6-MA骨料（8-5、5-3、3-1mm）、w（Al2O3）=99．5％的速烧刚玉（≤0．045、≤0．074mm）、α-Al2O3微粉、Al（OH）3（≤0．045mm）等为原料，研究了在Al2O3-CaO-MgO轻质浇注料的基质中引入不同量的Al（OH）3（其质量分数分别为0、1％、3％和5％）对其烧后性能的影响。结果表明：随Al（OH）3加入量增加，Al2O3-CaO-MgO轻质浇注料的加水量增加，体积密度略有降低，常温耐压强度呈下降趋势，对试样的常温抗折强度和高温抗折强度（1400℃1h）影响不大，热导率减小；经1600℃3h热处理后，加入质量分数3％Al（OH）3的浇注料基质中由大量交叉排列的六方片状六铝酸钙转变为多层叠加状。综合考虑Al2O3-CaO-MgO轻质浇注料的各项性能，Al（OH）3的合适加入质量分数为3％。 展开更多

关键词 CA6-ma骨料 Al2O3-CaO-MgO轻质浇注料 轻质骨料 AL(OH)3

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姜黄素对白血病K562细胞增殖抑制作用的研究 被引量：10

9

作者 潘红宁 梁中琴 +1 位作者 贾艳丽 李君 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期202-205,共4页

目的:探讨姜黄素(curcumin)对白血病K562细胞增殖抑制的作用机制。方法:采用MTT法测定curcumin对K562细胞增殖的抑制作用;分别应用AO/EB和MDC荧光染色观察给药后凋亡和自噬的发生;检测LDH漏出率以观察用自噬特异性抑制剂3-MA后curcumin... 目的:探讨姜黄素(curcumin)对白血病K562细胞增殖抑制的作用机制。方法:采用MTT法测定curcumin对K562细胞增殖的抑制作用;分别应用AO/EB和MDC荧光染色观察给药后凋亡和自噬的发生;检测LDH漏出率以观察用自噬特异性抑制剂3-MA后curcumin抑瘤作用的变化。结果:Curcumin可显著抑制K562细胞生长,诱导其发生自噬和凋亡;给药后阻断自噬其细胞毒性作用减弱。结论:curcumin能诱导白血病K562细胞的自噬和凋亡从而提高了抗癌的敏感性。 展开更多

关键词 姜黄素 自噬 K562 3-ma

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过氧化氢诱导猪卵巢颗粒细胞自噬及其对凋亡的影响 被引量：9

10

作者 李烈川 申明 +4 位作者 宁彩波 管志强 蒋毅 吴望军 刘红林 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期814-818,共5页

[目的]本试验旨在研究抑制氧化应激诱导的自噬对猪卵巢颗粒细胞凋亡的作用。[方法]采用流式细胞术和细胞计数试剂盒(cell counting kit-8,CCK8)检测不同浓度(0、50、100和150μmol·L^(-1))过氧化氢处理12 h对猪颗粒细胞的凋亡诱导... [目的]本试验旨在研究抑制氧化应激诱导的自噬对猪卵巢颗粒细胞凋亡的作用。[方法]采用流式细胞术和细胞计数试剂盒(cell counting kit-8,CCK8)检测不同浓度(0、50、100和150μmol·L^(-1))过氧化氢处理12 h对猪颗粒细胞的凋亡诱导作用和细胞活力的影响;Western-blot检测微管相关蛋白1轻链3(LC3,包括LC3-Ⅰ和LC3-Ⅱ)和自噬相关蛋白P62/SQSTM1的表达量变化,转染GFP-LC3质粒检测自噬体的数量;利用3-甲基腺嘌呤(3-MA)提前4 h抑制自噬后再氧化应激12 h,用流式细胞术检测细胞的凋亡率,CCK8检测细胞活力。[结果]氧化应激12 h后,细胞活力随过氧化氢浓度提高显著降低,凋亡率显著上升。在氧化应激前6 h LC3-Ⅱ相对表达量先增加后减少,P62的相对表达量先减少再增加;转染GFP-LC3质粒后,自噬体数量极显著上调,6 h后显著下降,上述结果表明在氧化应激早期自噬增加,持续氧化应激自噬受到抑制。若提前4 h用3-MA抑制自噬,再用过氧化氢处理12 h,抑制自噬后细胞凋亡率较单独氧化应激组显著下降,细胞活力也显著上升。[结论]氧化应激能诱导猪卵巢颗粒细胞的凋亡和早期自噬,若抑制早期自噬,凋亡率会下降。 展开更多

关键词 氧化应激 自噬 凋亡 猪卵巢颗粒细胞 3-ma

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自噬调节药物对多发性骨髓瘤细胞增殖、凋亡和自噬的影响 被引量：7

11

作者 王纪珍 陈君敏 +1 位作者 曾志勇 邱东飚 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期817-823,共7页

目的:探讨自噬调节药物包括自噬激活剂(雷帕霉素)、自噬抑制剂(羟氯喹和3-甲基腺嘌呤)对人多发性骨髓瘤细胞株RPMI8226增殖、凋亡和自噬的影响。方法:采用不同浓度雷帕霉素(RAPA)、羟氯喹(HCQ)、3-甲基腺嘌呤(3-MA)处理RPMI 8226细胞,用... 目的:探讨自噬调节药物包括自噬激活剂(雷帕霉素)、自噬抑制剂(羟氯喹和3-甲基腺嘌呤)对人多发性骨髓瘤细胞株RPMI8226增殖、凋亡和自噬的影响。方法:采用不同浓度雷帕霉素(RAPA)、羟氯喹(HCQ)、3-甲基腺嘌呤(3-MA)处理RPMI 8226细胞,用CCK-8法检测药物对细胞增殖的作用,流式细胞术检测药物作用24 h后细胞凋亡率,应用单丹磺酰戊二胺(MDC)染色观察自噬小体数量,Western blot检测各组细胞自噬相关蛋白LC-3b和凋亡相关蛋白(caspase-3、PARP和BCL-2)的表达情况。结果:RAPA和HCQ可呈时间及剂量依赖性抑制RPMI8226细胞的增殖,并增加细胞的凋亡,而3-MA无明显抑制细胞增殖作用,也无诱导凋亡作用。MDC染色结果显示,细胞内自噬泡数量随着RAPA浓度的提高逐渐增多,而随着HCQ和3-MA浓度升高自噬泡数量却逐渐减少。Western blot结果显示,RAPA可诱导自噬相关蛋白LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ和凋亡蛋白caspase-3及PARP表达上调,但抑制抗凋亡蛋白BCL-2表达;HCQ抑制LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ和BCL-2表达,但可上调caspase-3和PARP表达;3-MA可下调LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ表达,但对caspase-3、PARP及BCL-2表达均未显示明显影响。结论:RAPA能抑制RPMI8226细胞增殖,诱导RPMI8226细胞凋亡和自噬,HCQ则在抑制自噬和增殖的同时也可诱导凋亡,3-MA可抑制细胞自噬但对细胞增殖和凋亡影响不大。 展开更多

关键词 自噬 雷帕霉素 羟氯喹 3-ma 骨髓瘤细胞

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抑制自噬对乳腺癌阿霉素耐药的逆转作用 被引量：6

12

作者 陈平 吴正升 +2 位作者 吴强 闫红 汪树静 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期528-532,共5页

目的探讨自噬在乳腺癌阿霉素耐药过程中发挥的作用。方法采用大剂量阿霉素间歇诱导MCF-7细胞;应用MTT法检测阿霉素耐药细胞株MCF-7/ADM的耐药指数;通过qRT-PCR、Western blot及细胞免疫荧光法检测自噬表达;选用自噬抑制剂3-Methyladenin... 目的探讨自噬在乳腺癌阿霉素耐药过程中发挥的作用。方法采用大剂量阿霉素间歇诱导MCF-7细胞;应用MTT法检测阿霉素耐药细胞株MCF-7/ADM的耐药指数;通过qRT-PCR、Western blot及细胞免疫荧光法检测自噬表达;选用自噬抑制剂3-Methyladenine(3-MA)抑制细胞自噬,并检测MCF-7/ADM细胞株耐药性的逆转情况。结果乳腺癌耐药细胞株MCF-7/ADM成功建立,MCF-7/ADM细胞对ADM有明显的耐药性,阿霉素抑制MCF-7和MCF-7/ADM细胞存活的IC50值分别为1.0 971μg/ml和175.8 921μg/ml,耐药倍数为160(P<0.01),且MCF-7/ADM细胞自噬表达升高,加入3-MA的实验组细胞耐药逆转倍数为1.16,差异有统计学意义(P<0.05)。结论抑制自噬可部分逆转MCF-7/ADM细胞耐药。 展开更多

关键词 乳腺肿瘤 阿霉素耐药 MCF-7/ADM 自噬 3-methyladenine

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自噬在孤独症模型大鼠行为学及海马PSD-95蛋白表达变化中的作用 被引量：3

13

作者 刘芬 周波 +4 位作者 文敏 罗瑜平 陈运华 艾戎 童雪涛 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2018年第11期1746-1750,共5页

目的观察孤独症大鼠自噬干预前后突触相关蛋白的表达变化,探讨自噬在孤独症大鼠突触发育中的作用。方法采用母孕期化学干预法于Wistar鼠孕12. 5 d(E12. 5)给于腹腔注射丙戊酸钠(VPA),其子代为孤独症模型组,同样方法在孕鼠E12. 5腹腔注... 目的观察孤独症大鼠自噬干预前后突触相关蛋白的表达变化,探讨自噬在孤独症大鼠突触发育中的作用。方法采用母孕期化学干预法于Wistar鼠孕12. 5 d(E12. 5)给于腹腔注射丙戊酸钠(VPA),其子代为孤独症模型组,同样方法在孕鼠E12. 5腹腔注射同等剂量生理盐水,其子代为正常组,通过自梳理实验、三箱实验验证模型是否成功。在出生后35~42 d(P35~P42)从孤独症模型中随机取30只分为三组:自噬增强组(Rap组),腹腔注射雷帕霉素(5 mg/kg);自噬抑制组(3-MA组),腹腔注射3-methyladenine (5mg/kg);模型组,腹腔注射同等剂量的溶剂。运用三箱实验及自梳理实验对比自噬干预前后大鼠的社会行为变化,Western blot方法对比自噬干预前后孤独症大鼠P42自噬与突触相关蛋白的表达变化。结果 (1)成功建立孤独症模型,自梳理实验显示,模型组理毛时间较正常组明显延长(P<0. 01),与模型组(治疗后)比较,Rap组理毛时间减少(P<0. 01),3-MA组理毛时间延长(P <0. 01);三箱实验显示,与正常组比较,模型组缺乏社会交往能力及对新鲜事物偏好能力,Rap组可改善该社会能力,而3-MA组则进一步加重;(2)与正常组比较,模型组大鼠P42海马LC3-Ⅱ、Beclin 1表达减少(P <0. 05)、PSD-95表达增加(P <0. 05);与模型组(治疗后)比较,Rap组大鼠P42海马LC3-Ⅱ、Beclin 1表达增加(P <0. 05),PSD-95表达减少(P <0. 05),而3-MA组则相反。结论孤独症大鼠通增强自噬可调节突触发育,增强自噬可能是一个潜在的治疗方法。 展开更多

关键词 孤独症 自噬 突触 雷帕霉素 3-ma

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自噬对过氧化氢诱导的2BS早衰细胞具有保护作用 被引量：2

14

作者 何维清 谢步善 +1 位作者 贺东奇 毛泽斌 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第10期943-948,共6页

过氧化氢诱导的2BS应激性早衰细胞后,自噬被发现增多.自噬特异抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)阻断年轻和早衰的2BS细胞的自噬作用36 h,用共聚焦显微镜,分析转染了自噬特异标志GFP-LC3融合质粒的年轻和早衰细胞,发现细胞自噬颗粒均明显减少,且... 过氧化氢诱导的2BS应激性早衰细胞后,自噬被发现增多.自噬特异抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)阻断年轻和早衰的2BS细胞的自噬作用36 h,用共聚焦显微镜,分析转染了自噬特异标志GFP-LC3融合质粒的年轻和早衰细胞,发现细胞自噬颗粒均明显减少,且GFP-LC3染色阳性/细胞数目也大大减少,说明3-MA有效地阻断了细胞的自噬过程.分别用流式细胞术和荧光显微镜分析年轻和早衰细胞的凋亡情况,发现年轻的2BS细胞自噬阻断后凋亡未见显著变化,而早衰的细胞凋亡明显增加,且有细胞坏死.由此推断,3-AM可使过氧化氢诱导的2BS早衰细胞自噬明显减少,而凋亡被诱导增多,提示自噬对过氧化氢诱导的早衰细胞具有避免凋亡和维持存活的保护作用. 展开更多

关键词 应激性早衰 过氧化氢 3-甲基腺嘌呤(3-ma) 自噬

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