新疆盐生植物猪毛菜逆向运输蛋白基因SaNHX1 3’-RACE的克隆及序列分析 被引量：3

1

作者 张雨良 罗淑萍 +3 位作者 杨峰山 魏岩 袁辉 郭长奎 《新疆农业科学》 CAS CSCD 2008年第3期511-516,共6页

以新疆盐生植物猪毛菜(Salsola collina Pall.)为材料提取总RNA,根据NHX1家族同源序列保守区设计1对简并引物,进行RT-PCR扩增,得到猪毛菜逆向运输蛋白基因cDNA中间一段619 bp序列。再用快速扩增cDNA 3’末端(3’RACE)方法,得到约1 000 b... 以新疆盐生植物猪毛菜(Salsola collina Pall.)为材料提取总RNA,根据NHX1家族同源序列保守区设计1对简并引物,进行RT-PCR扩增,得到猪毛菜逆向运输蛋白基因cDNA中间一段619 bp序列。再用快速扩增cDNA 3’末端(3’RACE)方法,得到约1 000 bp 3’末端序列。将两段序列进行拼接,得到猪毛菜长为1 585bp(Gen Bank登陆号为EU072932)的逆向运输蛋白基因(SaNHX1)cDNA序列,编码370个氨基酸,其编码序列、氨基酸序列与同科耐盐植物盐角草相应序列同源性为85%和87%,研究为进一步克隆猪毛菜NHX1全基因序列和研究其功能打下基础。 展开更多

关键词 猪毛菜 逆向运输蛋白 SaNHX1基因 3’-race 克隆

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褐飞虱Nilaparvata lugens(S"非汉字符号"l)肌动蛋白基因3′-RACE及基因表达的RT-PCR检测 被引量：3

2

作者 刘美德 洪晓月 +1 位作者 杜建光 程遐年 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期49-51,共3页

通过锚定的 3′ RACE筛选实验 ,确定锚定效率最好的下游引物 ,用于褐飞虱各发育期肌动蛋白基因表达的RT PCR检测。结果表明 :3个锚定引物中 ,0 4 2 2 7( 5′ >TCACACAGGAAACAGCTATGACTTTTTTTTTTTTTTA <3′)的锚定效率最好 ,可以... 通过锚定的 3′ RACE筛选实验 ,确定锚定效率最好的下游引物 ,用于褐飞虱各发育期肌动蛋白基因表达的RT PCR检测。结果表明 :3个锚定引物中 ,0 4 2 2 7( 5′ >TCACACAGGAAACAGCTATGACTTTTTTTTTTTTTTA <3′)的锚定效率最好 ,可以扩增出 5条褐飞虱的肌动蛋白基因 3′末端片段 ,依其大小命名为BPH A、BPH B、BPH C、BPH D、BPH E。RT PCR检测表明 :BPH A从 3龄开始到成虫期都有常量表达 ;BPH B、BPH C、BPH E从 2龄开始到成虫期都有表达 ;BPH D在整个幼虫期都有表达 。 展开更多

关键词 褐飞虱 肌动蛋白基因 3′-race基因 基因表达 RT-PCR检测 翅型分化

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从LongSAGE标签获取cDNA长片段的3'-RACE方法的建立 被引量：1

3

作者 黄德培 何俊琳 +3 位作者 刘学庆 陈雪梅 董艳玲 王应雄 《西南大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期149-152,共4页

长标签基因表达系列分析和末端快速扩增都是目前人类基因组研究中的重要方法.该文介绍了一种我们改良以后的末端快速扩增方法(3'-RACE),用于从LongSAGE标签扩增基因3'端序列.实验证明该方法技术稳定、重复性好,所获得的3'端... 长标签基因表达系列分析和末端快速扩增都是目前人类基因组研究中的重要方法.该文介绍了一种我们改良以后的末端快速扩增方法(3'-RACE),用于从LongSAGE标签扩增基因3'端序列.实验证明该方法技术稳定、重复性好,所获得的3'端cDNA纯度高、完整性好,表明该方法切实可行. 展开更多

关键词 LongSAGE标签 3'-末端快速扩增 全长cDNA扩增

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沙棘耐盐基因HrNHX1的克隆及3'UTR序列分析 被引量：3

4

作者 郭长奎 罗淑萍 +1 位作者 沙依拉 于静 《新疆农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期1031-1035,共5页

以沙棘(Hippophae rhamnoides L.)叶片为材料,用改良SDS法提取总RNA,反转录合成第一链cDNA作为模板,根据已公布NHX1家族同源序列保守区设计简并引物,扩增出沙棘中HrNHX1基因的中间序列,然后用快速扩增cDNA末端(rapid amplification of c... 以沙棘(Hippophae rhamnoides L.)叶片为材料,用改良SDS法提取总RNA,反转录合成第一链cDNA作为模板,根据已公布NHX1家族同源序列保守区设计简并引物,扩增出沙棘中HrNHX1基因的中间序列,然后用快速扩增cDNA末端(rapid amplification of cDNA end,RACE)方法,从沙棘中克隆到HrNHX13'cDNA序列。该序列(GenBank登录号:EU718492)长度为1373bp,与已知NHX1序列同源性最大为80%,其编码区1094bp,编码364个氨基酸,3'非翻译区(3'-untranslated region,3'UTR)长度为239 bp。3'UTR序列分析显示沙棘的3'UTR与陆地棉、葡萄柚和小盐芥的同源性分别为43.97%、45.63%和40.64%,明显低于编码区的同源性。结果表明,NHX1基因编码区具有较高的保守性,3'UTR序列的同源性较低,显示了非编码区在环境适应中的重要性,并为进一步研究沙棘对生境的适应分子机制奠定了基础。 展开更多

关键词 沙棘 3'RACE 3'UTR HrNHX1基因 耐盐

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甜菜夜蛾泛素延伸蛋白基因cDNA的3′RACE-PCR扩增及其克隆和表达 被引量：6

5

作者 牛国栋 张海元 张忠信 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期166-170,共5页

根据已知的草地夜蛾Spodopterafrugiperda的泛素延伸基因 5′端核苷酸序列设计引物 ,应用 3′RACE PCR技术 ,从甜菜夜蛾S .exigua脂肪体组织总RNA中反转录扩增泛素基因的cDNA片段。扩增得到的片段全长 5 13bp ,3′末端有 12 3bp的非翻译... 根据已知的草地夜蛾Spodopterafrugiperda的泛素延伸基因 5′端核苷酸序列设计引物 ,应用 3′RACE PCR技术 ,从甜菜夜蛾S .exigua脂肪体组织总RNA中反转录扩增泛素基因的cDNA片段。扩增得到的片段全长 5 13bp ,3′末端有 12 3bp的非翻译区 ,翻译区编码一个长为 12 9个氨基酸残基的蛋白质 ,预测分子量为 14 8kD。同源分析表明 ,此cDNA序列为ubiquitin 5 3aaextensionprotein(ubi 5 3)基因 ,在泛素蛋白后融合了一个核糖体L4 0蛋白 (ribosomalL4 0protein)。用MagAlign和Genedoc软件对cDNA编码的氨基酸序列进行了同源性分析 ,结果表明 :甜菜夜蛾的ubi 5 3基因与真核生物家蚕Bombyxmori、草地夜蛾、果蝇Drosophilamelanogaster和人Homosapienes泛素的同源性分别为 96 9%、98 5 %、95 3%和 93 0 % ,与甜菜夜蛾核型多角体病毒(SeNPV)泛素的同源性为 78 8% ,说明真核生物的泛素基因与核型多角体病毒的泛素基因可能存在不同的分子进化途径。将甜菜夜蛾的ubi 5 3基因克隆到原核表达载体pET 2 8a上 ,转化至BL2 1(DE3)中 ,用IPTG进行诱导表达 ,用异源泛素单克隆抗体进行Westernblot检测 。 展开更多

关键词 甜菜夜蛾 3′RACE—PCR 泛素延伸基因 分子进化 原核表达

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Race法扩增4株鸭肝炎病毒3′末端序列及其克隆分析 被引量：2

6

作者 邵泽香 韦强 +3 位作者 崔言顺 鲍国连 刘燕 季权安 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2009年第3期225-229,共5页

利用3’RACE方法扩增并克隆了4株鸭肝炎病毒（DHV）（ZYM株、Z05株、Z07株和Z10株）的基因组的3’末端真实序列，包括部分非结构蛋白（3D）基因以及紧接着3D基因下游的3’端非编码区（untranslated region，UTR）和poly（A）尾巴。测序... 利用3’RACE方法扩增并克隆了4株鸭肝炎病毒（DHV）（ZYM株、Z05株、Z07株和Z10株）的基因组的3’末端真实序列，包括部分非结构蛋白（3D）基因以及紧接着3D基因下游的3’端非编码区（untranslated region，UTR）和poly（A）尾巴。测序结果表明，扩增的特异性片段长度为597nt（不包括polyA尾巴）。各毒株3’UTR均为315nt，位于终止密码子TGA之后，比对分析结果表明各毒株间的同源性较高；4株DHV 3’末端核苷酸序列（不包括polyA尾巴）之间的同源性为96．3％～100％，而与参考毒株之间的同源性为93．5％～99．7％。在系统发生进化树上，各毒株亲缘关系较近。 展开更多

关键词 3’RACE 鸭病毒性肝炎病毒 序列比对分析 3’端非编码区 POLY(A)

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富有柿果实ACC合成酶3′末端的cDNA克隆 被引量：2

7

作者 马俊莲 唐霞 +1 位作者 张子德 王国英 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2005年第4期4-7,共4页

利用3′RACE的方法对柿果实ACC合成酶基因的3′末端进行扩增,扩增产物克隆到pMD18-T Vector载体上,转化到大肠杆菌感受态细胞DH5α,蓝白斑筛选重组质粒,并对插入片段进行序列测定。结果表明,3′RACE产物长912 bp,开放阅读框内核苷酸序... 利用3′RACE的方法对柿果实ACC合成酶基因的3′末端进行扩增,扩增产物克隆到pMD18-T Vector载体上,转化到大肠杆菌感受态细胞DH5α,蓝白斑筛选重组质粒,并对插入片段进行序列测定。结果表明,3′RACE产物长912 bp,开放阅读框内核苷酸序列编码251个氨基酸,此氨基酸序列含有ACC合成酶中3个高度保守区,GenBank中登录的DK-ACS1(登录号AB073005)序列只有一个的氨基酸不同。终止子后面的3′非编码区的长度为155 bp,其中只有一个核苷酸与DK-ACS1的3′序列非编码区不同。序列分析结果显示,克隆的片段含有5′端GSP Inner Primer和3′端为RACE Inner Primer的引物。 展开更多

关键词 柿果 富有 ACC合成酶 3’RACE

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日本晚樱同源异型基因PrseAP3的克隆及其在单瓣与重瓣花中的表达分析 被引量：8

8

作者 刘志雄 于先泥 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期578-583,共6页

用同源克隆的方法和3′RACE技术,从日本晚樱(Prunus lannesiana)中分离得到了1个AP3同源基因PrseAP3的cDNA全长,GenBank登录号为JF710371。其cDNA全长977bp,包括1个编码235个氨基酸共708bp的开放阅读框。序列比对和分子系统发生分析表明... 用同源克隆的方法和3′RACE技术,从日本晚樱(Prunus lannesiana)中分离得到了1个AP3同源基因PrseAP3的cDNA全长,GenBank登录号为JF710371。其cDNA全长977bp,包括1个编码235个氨基酸共708bp的开放阅读框。序列比对和分子系统发生分析表明,PrseAP3是拟南芥的AP3同源基因,其蛋白质的C末端具有2个保守基元:PI-derived模体和paleoAP3模体,属B类转录因子中paleoAP3进化系。半定量RT-PCR分析表明,PrseAP3主要在单瓣日本晚樱品种大岛的萼片、花瓣和雄蕊中表达;在重瓣品种一叶的花瓣、雄蕊和叶化心皮中表达。其表达组织特异性在2个品种间表现出明显的差异,并与拟南芥的AP3基因有一定的差别。 展开更多

关键词 日本晚樱 花发育 花同源异型基因 APETALA3 同源克隆 3′RACE技术 半定量RT-PCR

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猪嵴病毒441株3D基因的克隆及序列分析 被引量：2

9

作者 王恩丽 兰喜 +3 位作者 刘伟 杨彬 柳纪省 马小军 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第11期148-152,共5页

根据GenBank中登录的猪嵴病毒(porcine kobuvirus,PKV)核苷酸序列设计引物,利用RT-PCR技术及3'RACE法扩增猪嵴病毒441株(swKoV CH441株)3D基因。成功扩增了swKoV CH441株的3D基因,3'非编码区(3'untranslated region,3'U... 根据GenBank中登录的猪嵴病毒(porcine kobuvirus,PKV)核苷酸序列设计引物,利用RT-PCR技术及3'RACE法扩增猪嵴病毒441株(swKoV CH441株)3D基因。成功扩增了swKoV CH441株的3D基因,3'非编码区(3'untranslated region,3'UTR)及Poly(A),扩增的基因片段长度分别为1 064、1 046和592 bp,包括3A、3B、3C、3D基因序列,3'UTR序列和一个至少含有29个Poly(A)的尾巴。序列分析结果表明,swKoV CH441株3D基因全长1 407 bp,编码468个氨基酸,分子质量约为53 369.29 D,理论等电点为6.12;3'UTR位于终止密码子TGA之后,长166 bp;swKoV CH441株与其他猪嵴病毒3D基因核苷酸序列相似性在92.2%-93.4%,氨基酸一致性为97.9%-99.4%。遗传进化分析表明,swKoV CH441株与国内株亲缘关系较近,与匈牙利株亲缘关系较远。 展开更多

关键词 swKoV CH441株 RT-PCR 3’RACE 3D 基因序列分析

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大豆疫霉根腐病菌的分离鉴定及种质资源对3号生理小种的抗性评价 被引量：4

10

作者 徐鹏飞 吴俊江 +5 位作者 范素杰 陈晨 李宁辉 王金生 李文滨 张淑珍 《大豆科学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期272-275,共4页

采用下胚轴伤口接种法,用在黑龙江省建三江农场分离到的大豆疫霉菌3号生理小种对292份栽培大豆材料(其中农家品种153份、其它大豆栽培品种139份)和236份野生大豆材料进行了抗性鉴定。结果表明:栽培大豆资源抗病80份,占27.4%,中间类型93... 采用下胚轴伤口接种法,用在黑龙江省建三江农场分离到的大豆疫霉菌3号生理小种对292份栽培大豆材料(其中农家品种153份、其它大豆栽培品种139份)和236份野生大豆材料进行了抗性鉴定。结果表明:栽培大豆资源抗病80份,占27.4%,中间类型93份,占31.8%,感病119份,占40.8%。153份农家品种中,抗病的有49份,占农家品种的32.0%,表明农家大豆品种资源抗性比例较高。野生大豆资源中抗病的有49份,占20.8%;中间类型55份,占23.3%;感病132份,占55.9%。鉴定的这些高抗资源可为我国大豆抗疫霉根腐病育种奠定基础。 展开更多

关键词 大豆种质资源 大豆疫霉根腐病 3号生理小种 抗性鉴定

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运用3′RACE验证LongSAGE文库构建后白念珠菌不同菌相的差异表达基因 被引量：1

11

作者 张宝军 叶庆佾 +3 位作者 何凤田 王鲁 周村建 郝飞 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第10期1009-1011,共3页

目的　鉴定从LongSAGE文库筛选到的白念珠菌不同菌相表达基因差异表达标签JMD8和JSW10所代表基因。方法　诱导白念珠菌菌丝相的表达后,运用3′RACE技术扩增白念珠菌差异表达基因标签基因片段,纯化回收后,T/A连接,经氯化钙法转化大肠杆菌... 目的　鉴定从LongSAGE文库筛选到的白念珠菌不同菌相表达基因差异表达标签JMD8和JSW10所代表基因。方法　诱导白念珠菌菌丝相的表达后,运用3′RACE技术扩增白念珠菌差异表达基因标签基因片段,纯化回收后,T/A连接,经氯化钙法转化大肠杆菌,X gal/IPTG诱导表达,在阳性菌株中抽提质粒后酶切、测序。结果　两个片段均能在GenBank中找到同源序列,Score值小于40 ,Evalue小于0 5。结论　鉴定了白念珠菌LongSAGE标签JMD8和JSW 10代表的基因分别为EFT2和SHMII。 展开更多

关键词 白念珠菌 LongSAGE 3’RACE 菌相转换

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褐飞虱肌动蛋白基因3′末端克隆与测序 被引量：1

12

作者 刘美德 洪晓月 +1 位作者 杜建光 程遐年 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期540-544,共5页

应用锚定的 3′ RACE方法 ,对褐飞虱Nilaparvatalugens (St l)肌动蛋白基因 3′末端进行了扩增、克隆和测序 ,并对所得到的 5个cDNA片段的不译端的序列进行了比较。结果显示 :BPH A和BPH D与其他序列不同 ;BPH B、BPH C和PBH E三条片段... 应用锚定的 3′ RACE方法 ,对褐飞虱Nilaparvatalugens (St l)肌动蛋白基因 3′末端进行了扩增、克隆和测序 ,并对所得到的 5个cDNA片段的不译端的序列进行了比较。结果显示 :BPH A和BPH D与其他序列不同 ;BPH B、BPH C和PBH E三条片段的不译端的序列很相似 ,只是长度不同。另外 ,所得序列中所含翻译区的氨基酸序列高度保守 ,根据肌动蛋白基因结构特点可以推断BPH A和BPH D属肌肉特异型肌动蛋白基因 ,BPH B、BPH C和BPH 展开更多

关键词 褐飞虱 肌动蛋白 3′—RACE 基因表达

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五寨黑豆对大豆胞囊线虫3号生理小种的抗性遗传分析 被引量：4

13

作者 李海燕 蔡德利 +3 位作者 段玉玺 陈井生 李肖白 商莹宇 《大豆科学》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期12-16,共5页

大豆胞囊线虫3号生理小种是东北大豆产区分布最广、危害最大的生理小种,五寨黑豆对包括大豆胞囊线虫3号生理小种在内的7个生理小种具有高抗性。以黑龙江省主栽品种合丰35为母本,与五寨黑豆进行杂交,通过鉴定F_2、F_3代对大豆胞囊线虫3... 大豆胞囊线虫3号生理小种是东北大豆产区分布最广、危害最大的生理小种,五寨黑豆对包括大豆胞囊线虫3号生理小种在内的7个生理小种具有高抗性。以黑龙江省主栽品种合丰35为母本,与五寨黑豆进行杂交,通过鉴定F_2、F_3代对大豆胞囊线虫3号生理小种的抗性,研究了五寨黑豆对大豆胞囊线虫抗性遗传。结果表明:在以合丰35为遗传背景下,五寨黑豆对SCN 3号生理小种的抗、感分离比例符合孟德尔遗传规律中1∶3的分离比例,表明五寨黑豆对SCN 3号生理小种的抗性是由1对隐性基因控制。 展开更多

关键词 五寨黑豆 大豆胞囊线虫 3号生理小种 抗性遗传分析

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人HAS3启动子的结构与功能初步分析 被引量：1

14

作者 镇磊 卜友泉 +5 位作者 杜刚 杨正梅 兰欢 崔涛 刘革力 宋方洲 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期534-541,共8页

透明质酸合酶3(hyaluronan synthase3,HAS3),是一个参与透明质酸合成的酶分子,在上皮形成和肿瘤转移等过程中起重要作用.为了进一步研究HAS3基因的转录调控机制,本研究克隆鉴定了HAS3基因的启动子.首先应用5′RACE(rapid amplification ... 透明质酸合酶3(hyaluronan synthase3,HAS3),是一个参与透明质酸合成的酶分子,在上皮形成和肿瘤转移等过程中起重要作用.为了进一步研究HAS3基因的转录调控机制,本研究克隆鉴定了HAS3基因的启动子.首先应用5′RACE(rapid amplification of cDNA ends,cDNA末端快速扩增)技术鉴定了HAS3基因的转录起始位点,发现了丰度和转录起始位点不同的两种新的HAS3基因剪接变异体.通过PCR定向克隆策略,构建了覆盖HAS3基因5′端侧翼区起始密码子ATG上游约4.3kb区域的一系列HAS3基因启动子荧光素酶报告基因重组体.启动子活性分析表明,HAS3基因启动子定位于转录起始位点附近约450bp的区域内.转录因子结合位点分析表明,HAS3基因启动子缺乏典型的TATA盒,但含有典型的GC盒以及C/EBP等其它潜在的转录因子结合位点.结果提示,Sp1和C/EBP等转录因子可能参与HAS3基因的转录调控. 展开更多

关键词 透明质酸合酶3 CDNA末端快速扩增 启动子 转录调控

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牛IRS1基因3’UTR的克隆、鉴定及生物信息学分析 被引量：1

15

作者 李文清 李中举 +2 位作者 孟志鹏 牛梦宇 李万利 《河南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期48-52,共5页

以奶牛乳腺组织为材料,采用3’RACE技术克隆到奶牛IRS1基因3’UTR的全长,进一步对测得的序列进行了验证,同时利用Target Scan 7.0和Pic Tar软件预测可能结合的microRNA,并对多个软件预测结合的microRNA,进行最小结合自由能分析。结果表... 以奶牛乳腺组织为材料,采用3’RACE技术克隆到奶牛IRS1基因3’UTR的全长,进一步对测得的序列进行了验证,同时利用Target Scan 7.0和Pic Tar软件预测可能结合的microRNA,并对多个软件预测结合的microRNA,进行最小结合自由能分析。结果表明,成功克隆了1 327 bp的牛IRS1 3’UTR全长,与NCBI上的预测序列一致率达到99%;miR-128、miR-96、miR-27a为2个软件共同预测到的结合microRNA;3个结合位点的最小自由能分别为-89.58、-87.91、-100.88 k J·mol-1,表明牛IRS1基因表达可能受到这3个microRNA的调控。 展开更多

关键词 牛 胰岛素受体基质1 3’非翻译区 3’RACE 最小自由能

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女子3000m障碍跑技术难点与训练对策分析 被引量：7

16

作者 吴正耀 苏肖晴 《武汉体育学院学报》 CSSCI 北大核心 2004年第1期95-96,共2页

分析了女子3000m障碍跑的技术难点,认为要攻克这些技术难点应加强栏间节奏跑技术环节、跨越障碍水池的弹跳力、跨越水池落地单腿支撑与快速跑相衔接等方面的训练及运动员意志品质的训练。

关键词 女子 3000M障碍跑 技术难点 训练对策

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西瓜枯萎病尖孢镰孢菌生理小种3初报 被引量：2

17

作者 王冠 李小妮 +4 位作者 杨万邦 薛丽芳 张兴平 李建设 邓云 《中国瓜菜》 CAS 北大核心 2022年第7期13-18,共6页

为明确宁夏回族自治区西瓜枯萎病致病菌,2021年在银川市贺兰县的商品西瓜种植基地采集到典型枯萎病病株,对病原菌分离纯化,测定其致病性;利用形态学特征和EF-1α基因序列分析法鉴定该病原菌种类,并利用西瓜鉴别寄主确定生理小种。结果表... 为明确宁夏回族自治区西瓜枯萎病致病菌,2021年在银川市贺兰县的商品西瓜种植基地采集到典型枯萎病病株,对病原菌分离纯化,测定其致病性;利用形态学特征和EF-1α基因序列分析法鉴定该病原菌种类,并利用西瓜鉴别寄主确定生理小种。结果表明,菌株NXWFW008能够使Black Diamond、Crimson Sweet和Calhoun Gray 100%枯萎死亡,且在PI 296341-FR上引起93.75%的发病率,因此鉴定该病原菌为尖孢镰孢菌西瓜专化型3号小种(Fusarium oxysporum f.sp.niveum,race 3),生理小种3侵染导致的西瓜枯萎病为国内首次报道。 展开更多

关键词 西瓜 枯萎病 生理小种3

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我国登革3型病毒广西株基因组非编码区结构特征的研究 被引量：1

18

作者 苑锡同 李晓萸 +4 位作者 耿丽卿 于曼 陈水平 范宝昌 秦鄂德 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期39-42,共4页

应用cDNA末端快速扩增法 (RACE) ,获得我国登革 3型病毒株基因组的包括 5′和 3′端非编码区的扩增片段 ,经琼脂糖凝胶电泳观察其长度分别为 710bp和 470bp。序列分析表明 ,与登革 3型病毒菲律宾株 (H87株 )核苷酸序列同源性 >99%。... 应用cDNA末端快速扩增法 (RACE) ,获得我国登革 3型病毒株基因组的包括 5′和 3′端非编码区的扩增片段 ,经琼脂糖凝胶电泳观察其长度分别为 710bp和 470bp。序列分析表明 ,与登革 3型病毒菲律宾株 (H87株 )核苷酸序列同源性 >99%。进化树分析提示 ,该株病毒属于登革 3型病毒Ⅰ亚型。基因组的 5′和 3′端可能含有较强的二级结构域。 展开更多

关键词 RACE 登革3型病毒 中国毒株 CDNA 非编码区

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我国优秀女子3000米障碍跑相关运动学参数分析 被引量：1

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作者 季跃龙 李建英 《成都体育学院学报》 CSSCI 北大核心 2009年第8期56-58,62,共4页

以我国参加奥运会的三名女子3000米障碍跑运动员为研究对象,运用运动解析的方法对其在2007年在全国田径大奖赛上的运动技术进行解析。找出制约我国女子3000米障碍跑运动员运动成绩的主要因素,使今后的运动训练更加具有针对性和目的性,... 以我国参加奥运会的三名女子3000米障碍跑运动员为研究对象,运用运动解析的方法对其在2007年在全国田径大奖赛上的运动技术进行解析。找出制约我国女子3000米障碍跑运动员运动成绩的主要因素,使今后的运动训练更加具有针对性和目的性,尽快提高我国女子3000米障碍跑的运动成绩。 展开更多

关键词 女子 3 000米障碍 运动学参数

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猪CD3∈分子的cDNA克隆与序列分析

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作者 王建华 杨汉春 +2 位作者 郭鑫 陈艳红 查振林 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2005年第6期7-10,共4页

应用RT-PCR和3′RACE技术,本研究从猪外周血淋巴细胞总RNA中扩增克隆了猪CD3ε基因并进行了序列分析。序列分析结果表明,猪CD3εcDNA序列长1241nt,其中5′非翻译区80nt,3′非翻译区570nt,开放阅读框591nt,该开放阅读框编码196个氨基酸... 应用RT-PCR和3′RACE技术,本研究从猪外周血淋巴细胞总RNA中扩增克隆了猪CD3ε基因并进行了序列分析。序列分析结果表明,猪CD3εcDNA序列长1241nt,其中5′非翻译区80nt,3′非翻译区570nt,开放阅读框591nt,该开放阅读框编码196个氨基酸残基的CD3ε前体蛋白(无糖基化位点);在猪CD3ε蛋白的胞外区,Cys49、Cys91、Cys108和Cys111为保守性氨基酸残基,它们与CD3ε免疫球蛋白样结构的形成有关。在猪CD3ε蛋白胞浆区,存在免疫受体酪氨酸活化基序(ITAM)、内质网潴留基序和1个SH3结合基序,其中ITAM基序含有2个SH2结合基序和2个潜在酪氨酸磷酸化位点Tyr177和Tyr188,这些基序是猪CD3分子参与T细胞活化信号转导和TCR-CD3复合体装配的结构基础。推导氨基酸序列分析结果表明,猪与人、鼠、狗、牛和绵羊CD3ε蛋白的氨基酸同源性分别为61.2%、58.7%、58.7%、65.1%和65.6%。 展开更多

关键词 猪 CD3ε分子 基因克隆 序列分析 T淋巴细胞分化抗原 RT-PCR 3′RACE技术

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