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R262K点突变将紫穗槐二烯合酶变为(3R)-(E)-nerolidol合酶
被引量：
2
1
作者
李振秋
高瑞平
+2 位作者
程隆斌
刘秀华
朱华结
《河北农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第3期12-18,共7页
倍半萜合酶家族催化单一底物法尼基焦磷酸形成近300多种链式、单环、双环和三环倍半萜烯、醇,进一步的加工修饰产生种类更加繁多的倍半萜衍生物。详细了解倍半萜合酶产物特异性性决定机制将会为倍半萜合酶的理性设计,定向生成新型化合...
倍半萜合酶家族催化单一底物法尼基焦磷酸形成近300多种链式、单环、双环和三环倍半萜烯、醇,进一步的加工修饰产生种类更加繁多的倍半萜衍生物。详细了解倍半萜合酶产物特异性性决定机制将会为倍半萜合酶的理性设计,定向生成新型化合物打下基础。本研究利用定点突变技术,对紫穗槐二烯合酶RxR基序及相关的D300位点进行了点突变,发现保守基序中R262K单点突变后其酶促反应主产物为(3R)-(E)-nerolidol,而R262L突变使酶失去活性,R264K突变则对产物比例无影响,显示保守基序中第一个精氨酸在活性中心疏水环境的维持中非常关键。D300突变结果显示此氨基酸对酶的活性维持非常必要,结合R262突变结果,推测R262和D300间的非键相互作用对酶活性的维持起重要作用。由于RxR基序在倍半萜合酶家族中非常保守,因此其作用是否具有普遍性值得进一步验证。
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关键词
倍半萜合酶
紫穗槐二烯合酶
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-nerolidol
合酶
定点突变
产物特异性
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职称材料
角果木内生真菌活性分子对HeLa细胞增殖凋亡的影响
2
作者
孙梦宇
周董董
+1 位作者
邓勤
徐静
《热带生物学报》
2020年第4期399-405,共7页
为了解红树林植物角果木(Ceriops tagal)内生壳囊孢属真菌Cytospora sp.提取物WP-1[(22E,24R)-5,8-epidioxy-5α,8α-ergosta-6,9(11),22E-trien-3β-ol]抑制人宫颈癌HeLa细胞的效果,笔者采用MTT比色法、克隆形成实验、Hoechst 33258染...
为了解红树林植物角果木(Ceriops tagal)内生壳囊孢属真菌Cytospora sp.提取物WP-1[(22E,24R)-5,8-epidioxy-5α,8α-ergosta-6,9(11),22E-trien-3β-ol]抑制人宫颈癌HeLa细胞的效果,笔者采用MTT比色法、克隆形成实验、Hoechst 33258染色和蛋白免疫印迹法来研究WP-1对HeLa细胞增殖和凋亡的影响。结果表明,随着WP-1浓度增加,HeLa细胞的存活率显著降低,而且该提取物能明显抑制HeLa细胞的克隆形成,当其浓度达到10μmol·L−1时,HeLa细胞出现染色质浓缩以及核小体碎裂的凋亡现象。蛋白免疫印迹法结果显示,随着WP-1剂量的增加,与凋亡相关的蛋白Caspase-3及Caspase-9的表达下调,Cleaved Caspase-3,Cleaved Caspase-9的表达明显上调。本实验结果显示,WP-1可以抑制HeLa细胞的增殖,并促进HeLa细胞发生凋亡。
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关键词
角果木
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LA细胞
增殖
凋亡
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职称材料
具有变形碳架双环二萜醇的结构
3
作者
曾志
符雄
曾陇梅
《中山大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
1996年第S2期172-174,共3页
通过波谱分析鉴定了具有变形碳架双环二萜醇１的结构，并进一步通过单晶Ｘ－射线分析得以确证．１的结构为（３Ｚ，５Ｅ，９Ｅ，１Ｒ＊，７Ｒ＊，１２ａＲ＊）－１－异丙基－６，１０，１２ａ－三甲基－１，２，４，７，８，１１，１２...
通过波谱分析鉴定了具有变形碳架双环二萜醇１的结构，并进一步通过单晶Ｘ－射线分析得以确证．１的结构为（３Ｚ，５Ｅ，９Ｅ，１Ｒ＊，７Ｒ＊，１２ａＲ＊）－１－异丙基－６，１０，１２ａ－三甲基－１，２，４，７，８，１１，１２，１２ａ－八氢环戊－环ｒ一碳烯－７－醇．它是从采自我国南海的软珊瑚ＣｌａｖｕｌａｒｉａｉｎｆｌａｔａＳｃｈｅｕｋｖａｒ．
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关键词
软珊瑚
二萜
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职称材料
题名
R262K点突变将紫穗槐二烯合酶变为(3R)-(E)-nerolidol合酶
被引量：
2
1
作者
李振秋
高瑞平
程隆斌
刘秀华
朱华结
机构
河北大学生命科学学院
河北大学药学院
出处
《河北农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第3期12-18,共7页
基金
国家自然科学基金青年基金项目(30900111
31300056)
河北大学博士后资助项目
文摘
倍半萜合酶家族催化单一底物法尼基焦磷酸形成近300多种链式、单环、双环和三环倍半萜烯、醇,进一步的加工修饰产生种类更加繁多的倍半萜衍生物。详细了解倍半萜合酶产物特异性性决定机制将会为倍半萜合酶的理性设计,定向生成新型化合物打下基础。本研究利用定点突变技术,对紫穗槐二烯合酶RxR基序及相关的D300位点进行了点突变,发现保守基序中R262K单点突变后其酶促反应主产物为(3R)-(E)-nerolidol,而R262L突变使酶失去活性,R264K突变则对产物比例无影响,显示保守基序中第一个精氨酸在活性中心疏水环境的维持中非常关键。D300突变结果显示此氨基酸对酶的活性维持非常必要,结合R262突变结果,推测R262和D300间的非键相互作用对酶活性的维持起重要作用。由于RxR基序在倍半萜合酶家族中非常保守,因此其作用是否具有普遍性值得进一步验证。
关键词
倍半萜合酶
紫穗槐二烯合酶
(
3
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合酶
定点突变
产物特异性
Keywords
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分类号
Q785 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
角果木内生真菌活性分子对HeLa细胞增殖凋亡的影响
2
作者
孙梦宇
周董董
邓勤
徐静
机构
海南大学化学工程与技术学院
海南大学园艺学院
出处
《热带生物学报》
2020年第4期399-405,共7页
基金
海南省高层次人才项目(2019RC006)
国家自然科学基金项目(81973229/81660584)
+1 种基金
海南省教育厅重点项目(Hnky2019ZD-6)
海南省研究生创新科研课题(Hys2018-64)。
文摘
为了解红树林植物角果木(Ceriops tagal)内生壳囊孢属真菌Cytospora sp.提取物WP-1[(22E,24R)-5,8-epidioxy-5α,8α-ergosta-6,9(11),22E-trien-3β-ol]抑制人宫颈癌HeLa细胞的效果,笔者采用MTT比色法、克隆形成实验、Hoechst 33258染色和蛋白免疫印迹法来研究WP-1对HeLa细胞增殖和凋亡的影响。结果表明,随着WP-1浓度增加,HeLa细胞的存活率显著降低,而且该提取物能明显抑制HeLa细胞的克隆形成,当其浓度达到10μmol·L−1时,HeLa细胞出现染色质浓缩以及核小体碎裂的凋亡现象。蛋白免疫印迹法结果显示,随着WP-1剂量的增加,与凋亡相关的蛋白Caspase-3及Caspase-9的表达下调,Cleaved Caspase-3,Cleaved Caspase-9的表达明显上调。本实验结果显示,WP-1可以抑制HeLa细胞的增殖,并促进HeLa细胞发生凋亡。
关键词
角果木
Cytospo
r
a
sp.
(22
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5
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LA细胞
增殖
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Keywords
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apoptosis
分类号
Q949.761.7 [生物学—植物学]
R737.33 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
具有变形碳架双环二萜醇的结构
3
作者
曾志
符雄
曾陇梅
机构
中山大学化学系
出处
《中山大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
1996年第S2期172-174,共3页
基金
国家自然科学基金
国家教委博士点基金
中国科学院上海有机化学研究所生命有机化学国家重点实验室资助
文摘
通过波谱分析鉴定了具有变形碳架双环二萜醇１的结构，并进一步通过单晶Ｘ－射线分析得以确证．１的结构为（３Ｚ，５Ｅ，９Ｅ，１Ｒ＊，７Ｒ＊，１２ａＲ＊）－１－异丙基－６，１０，１２ａ－三甲基－１，２，４，７，８，１１，１２，１２ａ－八氢环戊－环ｒ一碳烯－７－醇．它是从采自我国南海的软珊瑚ＣｌａｖｕｌａｒｉａｉｎｆｌａｔａＳｃｈｅｕｋｖａｒ．
关键词
软珊瑚
二萜
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分类号
O624.33 [理学—有机化学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
R262K点突变将紫穗槐二烯合酶变为(3R)-(E)-nerolidol合酶
李振秋
高瑞平
程隆斌
刘秀华
朱华结
《河北农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2015
2
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职称材料
2
角果木内生真菌活性分子对HeLa细胞增殖凋亡的影响
孙梦宇
周董董
邓勤
徐静
《热带生物学报》
2020
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
具有变形碳架双环二萜醇的结构
曾志
符雄
曾陇梅
《中山大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
1996
0
在线阅读
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职称材料
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