阿卡斑病毒抗体双抗原夹心化学发光酶免疫分析法的建立

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作者 陈赫威 杨清 +8 位作者 曹佳媛 韦珊珊 陆晨阳 林俊 覃绍敏 陈凤莲 吴健敏 陈樱 马玲 《中国动物传染病学报》 北大核心 2025年第2期89-96,共8页

阿卡斑病毒(AKAV)是一种主要感染牛羊的虫媒病毒,近年来在我国流行日趋复杂。为了建立一种更加灵敏、可以同时检测多种动物AKAV抗体的方法,本研究以重组AKAV N蛋白和HRP标记的重组AKAV N蛋白分别为捕获抗原和检测抗原,通过优化反应条件... 阿卡斑病毒(AKAV)是一种主要感染牛羊的虫媒病毒,近年来在我国流行日趋复杂。为了建立一种更加灵敏、可以同时检测多种动物AKAV抗体的方法,本研究以重组AKAV N蛋白和HRP标记的重组AKAV N蛋白分别为捕获抗原和检测抗原,通过优化反应条件,首次成功建立检测AKAV抗体的双抗原夹心化学发光酶免疫分析法。该方法与蓝舌病毒、鹿流行性出血热病毒、牛肠道病毒和猪伪狂犬病毒阳性血清均无交叉反应;批内、批间重复性试验变异系数均小于8%,重复性好;与AKAV阻断ELISA试剂盒相比,敏感性高32倍,检测时间缩短42 min,检测结果κ系数为0.826,符合率极高;通过中和试验验证其准确性高。本研究建立的AKAV抗体检测化学发光酶免疫分析法特异性强、敏感性高、重复性好、简便、快速、准确,为AKAV大规模样品监测、血清学调查、疫病防控提供有效的技术手段。 展开更多

关键词 阿卡斑病毒 N蛋白 双抗原夹心CLEIA

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“剂量效应”现象对意外抗体鉴定的影响 被引量：17

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作者 孙晓琳 于洋 +2 位作者 关晓珍 陈麟凤 汪德清 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期222-227,共6页

目的:本研究探讨血型抗原"剂量效应"现象对意外抗体鉴定结果判定的影响以及其出现的条件、范围、规律等。方法:选取利用微柱凝胶法明确鉴定出意外抗体格局的受血者标本共40例,使用AB型新鲜冰冻血浆作为介质,将受血者血浆稀释... 目的:本研究探讨血型抗原"剂量效应"现象对意外抗体鉴定结果判定的影响以及其出现的条件、范围、规律等。方法:选取利用微柱凝胶法明确鉴定出意外抗体格局的受血者标本共40例,使用AB型新鲜冰冻血浆作为介质,将受血者血浆稀释为不同的浓度梯度,选择谱细胞试剂中与受血者血浆意外抗体反应呈阳性的谱细胞,将其分为单剂量抗原谱细胞和双剂量抗原谱细胞,将前者分别与不同浓度梯度的受血者稀释后血浆进行反应(微柱凝胶法),选取出现阴性结果的血清最高稀释度来评价其与双剂量抗原阳性谱细胞反应的凝集强度,以此观察不同剂量的血型抗原与意外抗体反应时表现出的差异。结果:经过稀释的40例受血者血浆标本中,经微柱凝胶法检测后有31例出现了"剂量效应"现象,其中30例意外抗体与双剂量抗原谱细胞凝集强度≤2+,而与单剂量抗原谱细胞反应为阴性;1例意外抗体与双剂量抗原谱细胞凝集强度为3+,与单剂量抗原谱细胞反应为阴性;9例受血者血浆标本经稀释后与谱细胞反应均为阴性(此9例稀释前强度自1+-3+不等)。结论:Rh,MNS,Kidd,Duffy血型系统意外抗体与双剂量抗原谱细胞反应强度≤2+(微柱凝胶法)时,单剂量抗原反应通常会明显减弱甚至阴性,表现出"剂量效应"现象,进而可能干扰意外抗体鉴定。Rh,MNS,Kidd,Duffy血型系统的抗体易出现"剂量效应"现象。 展开更多

关键词 剂量效应 意外抗体鉴定 双剂量抗原 单剂量抗原

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酶的基因剂量效应及其对鱼类远缘杂交的影响 被引量：15

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作者 吴清江 叶玉珍 付洪拓 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 1997年第2期143-151,共9页

亲缘关系较远的杂种二倍体，酶的表达出现父本基因受抑制，双亲基因表达迟缓和母本基因提前表达三种类型的紊乱。由于双亲等位基因不亲和，各等位基因只调控产生1／2的基因产物，从而致使胚胎出现“双单倍体综合症”而在孵化期全部死亡... 亲缘关系较远的杂种二倍体，酶的表达出现父本基因受抑制，双亲基因表达迟缓和母本基因提前表达三种类型的紊乱。由于双亲等位基因不亲和，各等位基因只调控产生1／2的基因产物，从而致使胚胎出现“双单倍体综合症”而在孵化期全部死亡。远缘杂交三倍体由于母本基因剂量加倍，一方面抑制了父本基因的表达，消除了不协调基因活动的干扰，另一方面母本基因产物趋于正常，代谢得以正常进行，杂种后代能成活并正常生长。 展开更多

关键词 鱼纲 远缘杂交 基因剂量 酶

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罗非鱼下脚料双酶法提取呈味物质的研究 被引量：7

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作者 张志翔 杨青 +2 位作者 官庭辉 李丹 万端极 《中国调味品》 CAS 北大核心 2011年第4期18-21,共4页

研究了胰蛋白酶、碱性蛋白酶、复合蛋白酶对罗非鱼下脚料的水解条件;并且研究了复合蛋白酶-风味酶双酶法的水解条件。研究结果表明:复合蛋白酶的最佳水解条件为:加酶量为3%,pH值为7.5,时间为2 h,温度为50℃;在最佳水解条件下,复合蛋白... 研究了胰蛋白酶、碱性蛋白酶、复合蛋白酶对罗非鱼下脚料的水解条件;并且研究了复合蛋白酶-风味酶双酶法的水解条件。研究结果表明:复合蛋白酶的最佳水解条件为:加酶量为3%,pH值为7.5,时间为2 h,温度为50℃;在最佳水解条件下,复合蛋白酶水解罗非鱼下脚料所得的水解液的水解度最高。风味酶的二次酶解的最佳水解条件是:加酶量为1%,pH值为7,时间为1 h,温度为50℃,此条件下的双酶解的水解度可以达到25.9%。 展开更多

关键词 加酶量 PH值 双酶 温度 时间

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与人类关系密切的7种动物对戊型肝炎病毒易感性的初步研究 被引量：20

5

作者 丁福 孟继鸿 +5 位作者 张兰芳 程险峰 张汇东 贺星亮 杨志国 许家璋 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2004年第1期52-55,共4页

目的　用双抗原夹心法ELISA (DS -ELISA)和逆转录巢式PCR法 (RT -nPCR)研究与人类生活关系密切的猪、犬、山羊、鸡、鸭、鸽子和兔等 7种动物对戊型肝炎病毒 (HEV)的易感性。方法　用多基因型HEV重组蛋白建立检测HEV抗体的DS -ELISA ,并... 目的　用双抗原夹心法ELISA (DS -ELISA)和逆转录巢式PCR法 (RT -nPCR)研究与人类生活关系密切的猪、犬、山羊、鸡、鸭、鸽子和兔等 7种动物对戊型肝炎病毒 (HEV)的易感性。方法　用多基因型HEV重组蛋白建立检测HEV抗体的DS -ELISA ,并用于 5 91份猪、警犬、家犬、宠物犬、山羊、鸡、鸭、鸽子和兔等多种动物血清标本的HEV抗体检测 ;用HEV多基因型通用性引物RT -nPCR扩增 14 3份犬血清标本HEVRNA。结果　在猪、家犬和宠物犬血清标本中检测到HEV抗体 ,阳性率分别为 4 3 93%、15 19%和 4 6 5 % ,但在警犬、山羊、鸡、鸭、鸽子和兔血清标本中未检测到HEV抗体 ;14 3份犬血清标本用RT -nPCR未扩增出HEVRNA。结论　用多基因型HEV重组蛋白建立的双抗原夹心法ELISA适用于多种动物血清标本HEV抗体的检测 ;猪和犬对HEV易感 ,在HEV传播中可能起重要作用。 展开更多

关键词 戊型肝炎病毒 易感性 重组蛋自 双抗原夹心法ELISA 逆转录巢式PCR

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大黄素-BSA不同表位构型的免疫原性和特异性研究 被引量：14

6

作者 李丽华 刘文泰 +4 位作者 戴军 窦玉红 王茹 刘艳臣 彭洋 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期419-422,共4页

目的:研究不同偶联法制备大黄素-BSA的大黄素表位构型及其免疫原性和特异性。方法:用重氮化对氨基苯甲酸偶联法和琥珀酸酐偶联法制备两种不同表位构型的大黄素-BSA1和大黄素-BSA2抗原,免疫小鼠制备抗血清,用醋酸纤维素膜双向免疫扩散法... 目的:研究不同偶联法制备大黄素-BSA的大黄素表位构型及其免疫原性和特异性。方法:用重氮化对氨基苯甲酸偶联法和琥珀酸酐偶联法制备两种不同表位构型的大黄素-BSA1和大黄素-BSA2抗原,免疫小鼠制备抗血清,用醋酸纤维素膜双向免疫扩散法检测免疫原性及其抗体特异性。结果:大黄素-BSA1和大黄素-BSA2抗血清与大黄素反应的抗体效价分别为1∶144 0±357.771和1∶440±219.089,二者有极显著性差异(P=0.006)。分别与大黄素等五种蒽醌类化合物反应,前者对大黄素有较高特异性,抗原结合效价可达1∶1 843.2±457.947。后者对大黄素的特异性较低,结合效价仅为1∶8.8±4.382。结论:两种偶联法制备大黄素-BSA的表位构型不同,其免疫原性和特异性存在着显著差异。重氮化对氨基苯甲酸偶联法制备大黄素-BSA的免疫原性较高、大黄素特异性较强。 展开更多

关键词 抗原抗体反应 双向免疫扩散法 大黄素 半抗原-载体偶联法 表位

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戊型肝炎病毒抗体双抗原夹心法ELISA的建立与初步应用 被引量：8

7

作者 何志强 葛胜祥 +5 位作者 邱艳 彭耿 陈毅歆 何水珍 张军 夏宁邵 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2002年第6期18-21,共4页

目的　建立抗戊型肝炎病毒 (HEV)抗体检测的双抗原夹心ELISA(DS -ELISA) ,并应用于多种动物血清的检测。方法　将大肠杆菌表达的一段HEVORF2区重组抗原分别包被微孔板和进行辣根过氧化物酶 (HRP)标记 ,利用 5份阳性血清和 4 0份阴性血... 目的　建立抗戊型肝炎病毒 (HEV)抗体检测的双抗原夹心ELISA(DS -ELISA) ,并应用于多种动物血清的检测。方法　将大肠杆菌表达的一段HEVORF2区重组抗原分别包被微孔板和进行辣根过氧化物酶 (HRP)标记 ,利用 5份阳性血清和 4 0份阴性血清建立双抗原夹心ELISA ;用 4 0 0份义务献血员血清比较双抗原夹心ELISA与间接法IgG抗体ELISA的符合情况 ;用 3只HEV感染猴系列血清比较双抗原夹心ELISA试剂和Genelabs公司HEVIgG试剂 ;用双抗原夹心ELISA试剂检测新疆地区的部分牛、绵羊、山羊、猪血清和上海地区的部分鸡血清中的HEV抗体。结果　建立了检测HEV抗体的双抗原夹心ELISA方法 ,对 4 0 0份义务献血员血清的检测表明其与间接法IgG抗体ELISA试剂的符合情况良好 ,并且有更高的s/co比值 ;与Genelabs公司HEVIgG试剂的比较表明双抗原夹心ELISA试剂的检出更早 ,尤其是持续时间及强度明显优于Genelabs试剂 ;在所检测的各种动物中均发现了HEV抗体 ,其中猪抗体的阳性率最高 ,表明双抗原夹心ELISA试剂可同时用于不同动物的抗HEV抗体检测。结论　利用大肠杆菌表达的HEV重组抗原建立了双抗原夹心法ELISA ,并可同时用于不同动物的抗HEV抗体检测。 展开更多

关键词 戊型肝炎 抗体检测 双抗原夹心法ELISA 重组抗原 HEV

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广西猪牛羊鸡戊型肝炎血清流行病学调查分析 被引量：10

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作者 刘艳玲 赖莉敏 +9 位作者 廖凤 苏乾莲 李斌 熊敏芬 陈晖月 段群棚 秦毅斌 梁家幸 农扬 赵武 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期103-106,共4页

【目的】全面掌握了解广西各地猪、牛、羊、鸡戊型肝炎(HE)的感染状况及其流行特点。【方法】采用双抗原夹心ELISA检测来自广西各地猪(850份)、牛(392份)、羊(428份)、鸡(352份)共2022份血清中的抗HEV抗体,并比较不同地区、不同动物间抗... 【目的】全面掌握了解广西各地猪、牛、羊、鸡戊型肝炎(HE)的感染状况及其流行特点。【方法】采用双抗原夹心ELISA检测来自广西各地猪(850份)、牛(392份)、羊(428份)、鸡(352份)共2022份血清中的抗HEV抗体,并比较不同地区、不同动物间抗HEV抗体阳性率的差异。【结果】4种主要畜禽的血清总抗HEV抗体阳性率为44.76%(905/2022),其阳性率大小排序为:猪(77.53%)>牛(27.81%)>羊(21.03%)>鸡(13.35%);不同地区的畜禽血清抗HEV抗体阳性率都是以猪群的最高,均在59.00%以上。而从不同地区的4种畜禽血清总抗HEV抗体阳性率来看,以南宁市的最高(61.94%)、河池市的最低(30.93%)。【结论】广西的猪、牛、羊、鸡群中均存在HEV感染,且猪在传播HEV方面起主导作用。 展开更多

关键词 戊型肝炎 流行病学 抗HEV抗体 阳性率 广西

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双抗体夹心ELISA检测伪狂犬病病毒的研究 被引量：19

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作者 娄高明 陈志荣 +5 位作者 郭万柱 王琴 汪铭书 颜其贵 邹啸环 费恩阁 《中国畜禽传染病》 CSCD 1998年第4期236-239,共4页

建立了检测伪狂犬病病毒（ＰＲＶ）抗原的双抗体夹心ＥＬＩＳＡ。试验方法的最佳工作条件为，抗体包被量为５μｇ／孔，酶标抗体的浓度为１２００。对人工感染兔和自然感染猪的组织脏器检测，结果发现扁桃体、脑和肺的检出率最高，其... 建立了检测伪狂犬病病毒（ＰＲＶ）抗原的双抗体夹心ＥＬＩＳＡ。试验方法的最佳工作条件为，抗体包被量为５μｇ／孔，酶标抗体的浓度为１２００。对人工感染兔和自然感染猪的组织脏器检测，结果发现扁桃体、脑和肺的检出率最高，其次为心、肝、脾、肾等组织。 展开更多

关键词 伪狂犬病病毒 双抗体夹心 ELISA 狂犬病 病毒

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一种简易、快速检测弓形虫循环抗原的酶联免疫吸附试验 被引量：4

10

作者 傅翠娥 陈彩华 +1 位作者 杨纪顺 余毅 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1991年第4期371-374,共4页

应用双抗体酶联免疫吸附试验(ELISA)夹心法,检测人工感染弓形虫兔血清循环抗原(CAg)的结果:潜伏期内的阳性检出率为10％;急性期和亚急性期的阳性率为40％～100％;慢性早期为20％。检出弓形虫抗原量为0.63μg/ml。本法与血吸虫、肺吸虫... 应用双抗体酶联免疫吸附试验(ELISA)夹心法,检测人工感染弓形虫兔血清循环抗原(CAg)的结果:潜伏期内的阳性检出率为10％;急性期和亚急性期的阳性率为40％～100％;慢性早期为20％。检出弓形虫抗原量为0.63μg/ml。本法与血吸虫、肺吸虫、丝虫、钩虫、蛔虫及旋毛虫抗原试验,均呈阴性。上述结果表明,本法具有特异、敏感、简易、快速等特点,可作为急性弓形虫病的快速诊断方法。 展开更多

关键词 弓形虫病 循环抗原 ELISA 检测

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检测受染旋毛虫猪血清中循环抗原对诊断和监测本病的研究 被引量：4

11

作者 张月清 温艳 +3 位作者 吴赵永 许威光 王家祥 阎玉河 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 1991年第6期6-7,共2页

用双抗体夹心-ELISA法检测54头感染旋毛虫的猪血清,33头(61.1±6.7％)呈阳性反应。11头受染猪,于感染后不同时间检测CAg,有10头(90.9％)显示阳性,且绝大多数(8头,72.7％)于感染后3天即出现阳性反应,另于感染后6天和9天各有1头阳性... 用双抗体夹心-ELISA法检测54头感染旋毛虫的猪血清,33头(61.1±6.7％)呈阳性反应。11头受染猪,于感染后不同时间检测CAg,有10头(90.9％)显示阳性,且绝大多数(8头,72.7％)于感染后3天即出现阳性反应,另于感染后6天和9天各有1头阳性。同时对比检测110头正常猪和两种其它寄生虫病猪,仅有两头(1.8％)感染弓形体的猪出现轻度交叉反应。对北京海淀区某屠宰场1987年自外地引进224头猪,进得流行病学调查,有18头(8.0±1.8％)CAg显示阳性反应,其中且有11头猪同时伴有抗体阳性;另检测陕西省商县50头猪,CAg皆为阴性。 展开更多

关键词 旋毛虫 循环抗原 双抗体夹心法

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广西猪戊型肝炎血清流行病学调查 被引量：5

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作者 秦毅斌 赵武 +6 位作者 肖爱欢 梁家幸 梁保忠 何颖 刘芳 李斌 黄伟坚 《广西农业科学》 CAS CSCD 2010年第4期383-385,共3页

为了解广西各地猪群戊型肝炎(HE)的感染状况及其流行特点,采用双抗原夹心ELISA检测来自广西11个市34个猪场及南宁市某屠宰场猪血清中的抗HEV抗体,并比较分析不同地区、不同年龄段猪抗HEV抗体阳性率的差异。结果表明,所检测的34个猪场均... 为了解广西各地猪群戊型肝炎(HE)的感染状况及其流行特点,采用双抗原夹心ELISA检测来自广西11个市34个猪场及南宁市某屠宰场猪血清中的抗HEV抗体,并比较分析不同地区、不同年龄段猪抗HEV抗体阳性率的差异。结果表明,所检测的34个猪场均为抗HEV抗体阳性猪场;537份血清中有448份呈阳性,阳性率为83.4%;其中2月龄以内、3～4月龄和5月龄以上猪的抗体阳性率分别为74.0%、47.0%和95.5%,差异显著(P<0.05);广西各地区猪群抗HEV抗体阳性率均在70.0%以上,差异不显著(P>0.05)。可见,广西猪群普遍存在HEV感染,且母源抗体消失后,猪群抗HEV抗体阳性率随着年龄增长而升高。 展开更多

关键词 猪戊型肝炎 流行病学 双抗原夹心ELISA 广西

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经皮冠状动脉介入治疗术后出现氯吡格雷抵抗患者的治疗方案选择 被引量：4

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作者 张胜 孙建辉 周学中 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2016年第9期1085-1088,1100,共5页

目的 :探讨经皮冠状动脉介入治疗(percutaneous coronary intervention,PCI)术后出现氯吡格雷抵抗患者换用双倍剂量氯吡格雷和替格瑞洛治疗的有效性及安全性。方法:选取PCI术后出现氯吡格雷抵抗(血小板抑制率<30%)患者188例,随机分... 目的 :探讨经皮冠状动脉介入治疗(percutaneous coronary intervention,PCI)术后出现氯吡格雷抵抗患者换用双倍剂量氯吡格雷和替格瑞洛治疗的有效性及安全性。方法:选取PCI术后出现氯吡格雷抵抗(血小板抑制率<30%)患者188例,随机分为氯吡格雷常规剂量组(A组,64例)、氯吡格雷双倍剂量组(B组,61例)、替格瑞洛组(C组,63例),术后7 d分别检测二磷酸腺苷(adenonisine disphosphate,ADP)通道的血小板抑制率、术后1 d及7 d检测超敏C反应蛋白(high sensitivity C reactive protein,hs CRP),观察术后1个月及6个月时主要心脏不良事件(major adverse cardiovascular events,MACE)及轻度出血发生率。结果:术后7 d检测ADP通道的血小板抑制率,B组及C组血小板抑制率明显升高,和A组相比差异有统计学意义(P<0.05);且C组血小板抑制率高于B组(P<0.05)。术后1 d检测hs CRP,3组结果差异无统计学意义,术后7 d检测hs CRP,B组及C组均明显降低,和A组相比差异有统计学意义(P<0.05);相比B组,C组hs CRP降低更明显(P<0.05)。随访至术后1个月,3组之间MACE及轻度出血发生率无明显差异(P>0.05);随访至术后6个月时,B组及C组MACE发生率均显著低于A组,差异有统计学意义(P<0.05),且C组MACE发生率低于B组(P<0.05),但3组之间轻度出血发生率差异仍无统计学意义(P>0.05)。结论:PCI术后出现氯吡格雷抵抗患者,选用替格瑞洛治疗具有更好的有效性,且不增加不良反应。 展开更多

关键词 经皮冠状动脉介入治疗 氯吡格雷抵抗 双倍剂量 替格瑞洛

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双抗原夹心ELISA法检测马尔尼菲青霉Mp1p抗体 被引量：10

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作者 王艳芳 曾磊 +6 位作者 陈学东 郝卫 杨梅 蔡建飘 王压娣 袁国勇 车小燕 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期439-443,共5页

目的建立一种检测马尔尼菲青霉特异性抗体的双抗原夹心ELISA方法。方法利用毕赤酵母系统表达重组马尔尼菲青霉特异性甘露糖蛋白Mp1p,并利用改良过碘酸钠法标记Mp1p,经棋盘滴定法建立一种可检测马尔尼菲青霉Mp1p特异性抗体的双抗原夹心EL... 目的建立一种检测马尔尼菲青霉特异性抗体的双抗原夹心ELISA方法。方法利用毕赤酵母系统表达重组马尔尼菲青霉特异性甘露糖蛋白Mp1p,并利用改良过碘酸钠法标记Mp1p,经棋盘滴定法建立一种可检测马尔尼菲青霉Mp1p特异性抗体的双抗原夹心ELISA法,并检测100例健康人群对照血清、21例血培养确诊其他真菌感染病人血清和15例血培养确诊马尔尼菲青霉病人血清,联合本实验室前期建立的马尔尼菲青霉抗原检测方法评价其临床应用价值。结果成功建立一种检测马尔尼菲青霉Mp1p特异性抗体的双抗原夹心ELISA法,经健康人群对照及其他真菌感染病人血清评价特异度为100%(121/121),检测15例马尔尼菲青霉病人血清,Mp1p特异性抗体2例阳性,Mp1p特异性抗原12例阳性,Mp1p抗体与抗原联合检测可明显提高灵敏度,达到93.3%(14/15)。结论双抗原夹心ELISA法检测马尔尼菲青霉Mp1p特异性抗体具有高度的特异性,联合抗原检测可提高马尔尼菲青霉感染诊断率。 展开更多

关键词 马尔尼菲青霉 双抗原夹心ELISA法 真菌 Mp1p 抗体检测

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猪戊型肝炎病毒的流行病学调查 被引量：7

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作者 张亮权 梁焕斌 +4 位作者 王衡 高李泽 王德刚 尤佳 张桂红 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2012年第8期215-219,共5页

利用双抗原夹心ELISA对2009—2011年间采自广东省各地区的若干猪场的484份血清样品,进行血清流行病学调查;对69份病猪胆汁样品进行分子流行病学调查,分离得到猪源戊型肝炎病毒(swine hepatitis E virus,swHEV),并基于ORF2部分基因序列... 利用双抗原夹心ELISA对2009—2011年间采自广东省各地区的若干猪场的484份血清样品,进行血清流行病学调查;对69份病猪胆汁样品进行分子流行病学调查,分离得到猪源戊型肝炎病毒(swine hepatitis E virus,swHEV),并基于ORF2部分基因序列进行核苷酸序列比对、相似性分析和遗传进化树分析,以期初步了解广东各地猪群戊型肝炎(hepatitis E,HE)的感染情况和流行特点。试验结果显示,全部被检查猪的swHEV抗体平均阳性率为71.9%(348/484),分离的猪源HEV毒株均属于基因Ⅳ型,阳性率为71.0%(49/69)。调查结果表明基因Ⅳ型swHEV在广东地区普遍流行。 展开更多

关键词 猪戊型肝炎病毒 双抗原夹心ELISA 流行病学调查

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血清可溶性CD30在电离辐射剂量估算中的价值 被引量：1

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作者 刘琼 何颖 +6 位作者 沈先荣 侯登勇 刘玉明 陈伟 蒋定文 王庆蓉 李珂娴 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期158-161,共4页

目的探讨血清可溶性CD 3 0(s CD 3 0)作为电离辐射剂量估算的生物指标的可行性。方法健康雄性C57BL/6小鼠300只,随机分为对照组及1、3、5、7Gy辐照组(n=60)。辐照组小鼠接受60Coγ射线一次性全身辐照,剂量率为0.78Gy/min。各组分别于辐... 目的探讨血清可溶性CD 3 0(s CD 3 0)作为电离辐射剂量估算的生物指标的可行性。方法健康雄性C57BL/6小鼠300只,随机分为对照组及1、3、5、7Gy辐照组(n=60)。辐照组小鼠接受60Coγ射线一次性全身辐照,剂量率为0.78Gy/min。各组分别于辐照后24、48、72h留取血清样本(每组每时间点20只小鼠),采用定量抗体芯片检测s CD30浓度,并通过回归分析法分析血清s CD30浓度与辐照剂量的相关性。结果未辐照小鼠s CD30正常值范围为121.2±25.6pg/ml;辐照后24、48、72h,血清s CD30浓度随辐射剂量增大而降低。回归分析显示,血清s CD30浓度与辐照剂量具有明显的剂量-效应关系(R^2=0.9913),其回归方程为y=1.1489x^2-21.139x+121.44。结论小鼠血清s CD30表达基线稳定,其浓度变化与急性辐照剂量相关,可作为γ电离辐射剂量估算的生物指标。 展开更多

关键词 辐射 电离 辐射剂量 抗原 CD30 生物学标记

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机体炎症因子和氧化应激标志物介导姜黄素抑制骨性关节炎的作用机制 被引量：6

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作者 刘军 何晓乐 +2 位作者 甄平 周胜虎 李旭升 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期461-468,共8页

目的：探讨骨性关节炎（OA）关节软骨基质金属蛋白酶-2（MMP-2）、单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）、CD47、L-选择素及高级氧化蛋白产物（AOPP）表达的变化以及姜黄素（Cur）的干预作用。方珐：建立C57BIM6小鼠OA模型，20只小鼠随机分为手... 目的：探讨骨性关节炎（OA）关节软骨基质金属蛋白酶-2（MMP-2）、单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）、CD47、L-选择素及高级氧化蛋白产物（AOPP）表达的变化以及姜黄素（Cur）的干预作用。方珐：建立C57BIM6小鼠OA模型，20只小鼠随机分为手术对照组、模型对照组、Cur25组和Cur50组（术后分别每日接受25μmol／L和50μmol／L浓度姜黄素腹腔注射）。4周后取材，采用免疫组织化学法观察各组大体标本形态学变化，电子显微镜下观察软骨组织超微结构；培养各组软骨细胞，运用蛋白质印迹法检测各组MMP-2、MCP-1和CD47表达，ELISA和分光光度法检测L-选择素水平及AOPP浓度变化。结果：软骨组织标本形态学变化模型对照组最明显，Cur25组次之；与手术对照组比较，模型对照组、Cur25组、cur50组软骨细胞MMP-2、MCP-1表达均增多（均P〈0．05），CD47表达均下降（均P〈0．05），L．选择素水平及AOPP浓度均增加（均P〈0．05）；与模型对照组比较，Cur25组和Cur50组软骨细胞MMP-2、MCP-1、L-选择素及AOPP的表达下降（均P〈0．05），CIM7的表达上升（均P〈0．05），且与Cur25组比较，Cur50组的上述变化更为显著（均P〈0．05）。结论：MMP-2、MCP—1、CD47、L-选择素及AOPP的异常表达与OA软骨退变的病理过程相关。姜黄素可缓解关节软骨的退变，减轻软骨炎症，提高软骨细胞的代谢活性，且此作用与姜黄素的浓度有关。 展开更多

关键词 骨关节炎/病理学 姜黄素/药理学 姜黄素/投药和剂量 基质金属蛋 白酶2 趋化因子CCL2 抗原 CD47 L选择素 蛋白水解产物 疾病模型 动物

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SARS患者康复期血清特异性抗体效价检测 被引量：2

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作者 匡铁吉 梁艳 +5 位作者 董梅 雷红 何菊芳 孟祥红 佟爱华 肖漓 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第11期794-795,共2页

目的 :SARS患者康复期血清特异性抗体的效价。方法 :采用间接酶联免疫法和双抗原夹心法。结果 :SARS患者康复期血清特异性抗体IgG水平在住院第 5周达最高值 ,IgM水平在住院第 3周达到最高值。SARS患者康复期血清IgG水平是IgM的 1～ 7倍... 目的 :SARS患者康复期血清特异性抗体的效价。方法 :采用间接酶联免疫法和双抗原夹心法。结果 :SARS患者康复期血清特异性抗体IgG水平在住院第 5周达最高值 ,IgM水平在住院第 3周达到最高值。SARS患者康复期血清IgG水平是IgM的 1～ 7倍。住院 5～ 7周的SARS康复期患者 ,其血清特异性抗体检测阳性率达 10 0 %。结论 :SARS患者康复期血清特异性抗体水平在住院第 5周达到最高值 ,其阳性检出率达 10 0 %。 展开更多

关键词 严重急性呼吸综合症 康复期 血清 特异性抗体 SARS 间接酶联免疫法 双抗原夹心法 效价检测

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夹心ELISA定量检测猪圆环病毒2b型抗原方法的建立 被引量：2

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作者 杨利 张浩明 +3 位作者 陈瑾 乔绪稳 侯继波 郑其升 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第12期987-992,共6页

为建立快速定量检测猪圆环病毒2b型(PCV2b)抗原含量的方法,本研究采用重组抗PCV2b纳米抗体作为捕获抗体,鼠抗PCV2b单克隆抗体为检测抗体,建立了定量检测PCV2b的夹心ELISA方法。该方法不仅能够用于猪圆环疫苗中PCV2b抗原的检测,还可用于... 为建立快速定量检测猪圆环病毒2b型(PCV2b)抗原含量的方法,本研究采用重组抗PCV2b纳米抗体作为捕获抗体,鼠抗PCV2b单克隆抗体为检测抗体,建立了定量检测PCV2b的夹心ELISA方法。该方法不仅能够用于猪圆环疫苗中PCV2b抗原的检测,还可用于大肠杆菌或杆状病毒表达的PCV2b衣壳蛋白(Cap)亚单位疫苗的检测,且与其它猪病毒无交叉反应。该方法检测细胞培养PCV2b的线性范围是104.3TCID50/mL^105.5TCID50/mL,样品回收率为89.3%~105.6%,该方法批内、批间变异系数小于5%,重复性好。该方法与间接免疫荧光方法(IFA)检测相同样品时误差值小于10%,并且ELISA检测结果离散度更小。分别用两种方法定量PCV2b抗原,取相同抗原量免疫猪,其诱导产生的PCV2b抗体效价无显著差异。本研究构建的夹心ELISA方法在定量猪圆环疫苗中PCV2b抗原方面,与传统的IFA方法比较其显示了良好的符合性,并具有更好的重复性和更短的检测周期,是替代IFA方法用于PCV2b定量检测的更优选择。 展开更多

关键词 猪圆环2型病毒 抗原定量 夹心ELISA 纳米抗体

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SIVp27抗原双抗体夹心ELISA检测方法的研究 被引量：3

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作者 孙敏 魏强 +4 位作者 梁成珠 佟巍 丛喆 蒋虹 涂新明 《中国动物检疫》 CAS 北大核心 2007年第4期32-35,共4页

目的建立检测SIVp27抗原的双抗体夹心ELISA方法并进行初步应用。方法使用ProteinA亲和层析柱纯化腹水中的SIVp27单抗,用过碘酸钠法对单抗进行辣根过氧化物酶标记。经抗体配对实验确定包被抗体和检测抗体,再用棋盘滴定法确定抗体工作浓度... 目的建立检测SIVp27抗原的双抗体夹心ELISA方法并进行初步应用。方法使用ProteinA亲和层析柱纯化腹水中的SIVp27单抗,用过碘酸钠法对单抗进行辣根过氧化物酶标记。经抗体配对实验确定包被抗体和检测抗体,再用棋盘滴定法确定抗体工作浓度后,探索构建检测SIVp27抗原的双抗体夹心ELISA法。应用建立的双抗体夹心ELISA法,对SIV模型猴血浆标本和SHIV模型猴病毒分离培养上清标本进行了检测,并将其结果与Coulter公司试剂盒检测结果进行比较。结果以稀释至20ug/mL的2E12为包被抗体、1:400稀释的酶标3G3为检测抗体为ELISA最优体系。模型猴血浆标本和病毒分离培养上清标本的检测结果表明自建体系可以用于SIVp27抗原的检测,特异性良好,灵敏度略低于Coulter公司试剂盒。结论检测SIVp27抗原的双抗体夹心ELISA方法初步建成,为研制有独立知识产权的检测试剂奠定了一定的基础。 展开更多

关键词 SIV P27抗原 单克隆抗体 双抗体夹心ELISA

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