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活性位点邻近的?-loop对胰蛋白酶热稳定性和活性的影响
被引量：
4
1
作者
杜坤
甘一如
黄鹤
《高校化学工程学报》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2017年第3期657-662,共6页
以猪源胰蛋白酶作为研究对象,尝试利用删除猪源胰蛋白酶活性位点邻近?-loop的方法来提高其热稳定性和活性。首先通过Gromacs v4.5.5分子动力学模拟软件,预测出了胰蛋白酶的柔性区Fragment 41~46(即?-loop所在区域)。然后根据删除?-loop...
以猪源胰蛋白酶作为研究对象,尝试利用删除猪源胰蛋白酶活性位点邻近?-loop的方法来提高其热稳定性和活性。首先通过Gromacs v4.5.5分子动力学模拟软件,预测出了胰蛋白酶的柔性区Fragment 41~46(即?-loop所在区域)。然后根据删除?-loop结构中不同的氨基酸数目,确立了三个突变R1Q、K3Q及C5Q;通过重叠延伸PCR技术构建突变菌株,发酵表达后,进行了酶热稳定性和活性分析。结果表明,R1Q、K3Q及C5Q的活性在一定程度上均有提高,在热稳定性上R1Q和K3Q有所提高,C5Q有所下降,其中R1Q突变体酶的最高活性较野生型提高了1.42倍,同时,失活半衰期和最适反应温度较野生型也分别提高了213.3 min和11.8℃。实验结果证明,在删除该?-loop中的异亮氨酸后,得到了突变型R1Q酶,成功实现酶双功能的共同进化。该策略有潜力应用于其他工业酶分子的热稳定性和活性改造,为推动生物酶的工业化应用奠定基础。
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关键词
猪源胰蛋白酶
ω-loop
理性设计
热稳定性
活性
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职称材料
α、ω-二羟基二甲基硅氧烷齐聚物的合成与研究
被引量：
1
2
作者
方少明
王昊
《郑州轻工业学院学报》
1992年第1期69-73,共5页
本文介绍了用自制酸性催化剂、乙酸酐作助催化剂对八甲基环四硅氧烷进行开环聚合制备出低分子量的α,ω-二羟基二甲基硅氧烷齐聚物(PSi)的方法;研究过程中发现,通过改变乙酸酐用量可调节PSi分子量的大小,其收率可达90％以上。
关键词
合成
开环聚合
PSI
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职称材料
量子威尔逊圈首项的引力场激发
3
作者
侯阳来
侯三林
+1 位作者
陈克亮
鄂学壮
《武汉科技大学学报》
CAS
2007年第4期444-448,共5页
在四维R引力场中,采用时空联络展式的线性和扩展表示的平方项,计算出引力场激发的曲率,这是由量子威尔逊圈通过两点联系格林函数给出的。同时以引力三维传播子对〈w〉的最低级校正(k4)和引力场自能计算的结果为基础,在精确的k4级条件下...
在四维R引力场中,采用时空联络展式的线性和扩展表示的平方项,计算出引力场激发的曲率,这是由量子威尔逊圈通过两点联系格林函数给出的。同时以引力三维传播子对〈w〉的最低级校正(k4)和引力场自能计算的结果为基础,在精确的k4级条件下,能得到来自于〈w〉的〈w(2)〉首项激发的完整表达式。
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关键词
引力场激发
威尔逊圈首项
(ω^(2))的k^4级贡献
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职称材料
题名
活性位点邻近的?-loop对胰蛋白酶热稳定性和活性的影响
被引量：
4
1
作者
杜坤
甘一如
黄鹤
机构
天津大学化工学院生物工程系
出处
《高校化学工程学报》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2017年第3期657-662,共6页
基金
国家自然科学基金(31470967)
国家科技重大专项(2011ZX09201-301-05
2014ZX09508006-002-002)
文摘
以猪源胰蛋白酶作为研究对象,尝试利用删除猪源胰蛋白酶活性位点邻近?-loop的方法来提高其热稳定性和活性。首先通过Gromacs v4.5.5分子动力学模拟软件,预测出了胰蛋白酶的柔性区Fragment 41~46(即?-loop所在区域)。然后根据删除?-loop结构中不同的氨基酸数目,确立了三个突变R1Q、K3Q及C5Q;通过重叠延伸PCR技术构建突变菌株,发酵表达后,进行了酶热稳定性和活性分析。结果表明,R1Q、K3Q及C5Q的活性在一定程度上均有提高,在热稳定性上R1Q和K3Q有所提高,C5Q有所下降,其中R1Q突变体酶的最高活性较野生型提高了1.42倍,同时,失活半衰期和最适反应温度较野生型也分别提高了213.3 min和11.8℃。实验结果证明,在删除该?-loop中的异亮氨酸后,得到了突变型R1Q酶,成功实现酶双功能的共同进化。该策略有潜力应用于其他工业酶分子的热稳定性和活性改造,为推动生物酶的工业化应用奠定基础。
关键词
猪源胰蛋白酶
ω-loop
理性设计
热稳定性
活性
Keywords
porcine trypsin
ω-loop
rational design method
thermostability
activity
分类号
Q819 [生物学—生物工程]
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职称材料
题名
α、ω-二羟基二甲基硅氧烷齐聚物的合成与研究
被引量：
1
2
作者
方少明
王昊
机构
郑州轻工业学院化学工程系
安徽大学
出处
《郑州轻工业学院学报》
1992年第1期69-73,共5页
文摘
本文介绍了用自制酸性催化剂、乙酸酐作助催化剂对八甲基环四硅氧烷进行开环聚合制备出低分子量的α,ω-二羟基二甲基硅氧烷齐聚物(PSi)的方法;研究过程中发现,通过改变乙酸酐用量可调节PSi分子量的大小,其收率可达90％以上。
关键词
合成
开环聚合
PSI
Keywords
a,ω-dihydroxy siloxane oligomer, octamethylcyclotetrasiloxane (D4) , synthesis, olen loop polymerization
分类号
TQ264.1 [化学工程—有机化工]
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职称材料
题名
量子威尔逊圈首项的引力场激发
3
作者
侯阳来
侯三林
陈克亮
鄂学壮
机构
武汉科技大学理学院
菏泽学院
出处
《武汉科技大学学报》
CAS
2007年第4期444-448,共5页
基金
湖北省教育厅重点科研资助项目(080043)
文摘
在四维R引力场中,采用时空联络展式的线性和扩展表示的平方项,计算出引力场激发的曲率,这是由量子威尔逊圈通过两点联系格林函数给出的。同时以引力三维传播子对〈w〉的最低级校正(k4)和引力场自能计算的结果为基础,在精确的k4级条件下,能得到来自于〈w〉的〈w(2)〉首项激发的完整表达式。
关键词
引力场激发
威尔逊圈首项
(ω^(2))的k^4级贡献
Keywords
excitation of gravitational field
first term of quantum Wilson loop
contribution from order k^4 in （ω^（2））
分类号
O412.1 [理学—理论物理]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
活性位点邻近的?-loop对胰蛋白酶热稳定性和活性的影响
杜坤
甘一如
黄鹤
《高校化学工程学报》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2017
4
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
α、ω-二羟基二甲基硅氧烷齐聚物的合成与研究
方少明
王昊
《郑州轻工业学院学报》
1992
1
在线阅读
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职称材料
3
量子威尔逊圈首项的引力场激发
侯阳来
侯三林
陈克亮
鄂学壮
《武汉科技大学学报》
CAS
2007
0
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职称材料
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