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四个达摩凤蝶新孵幼虫细胞系的建立及其生物学特性被引量：2: 1; 作者丁伟峰冯颖 +3 位作者张欣李娴王成业谢世聪《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第8期826-835,共10页; [目的]建立达摩凤蝶Papilio demoleus Linnaeus新孵幼虫细胞系,并对其生物学特性进行研究。[方法]使用改良配方的Grace培养基并辅以20%胎牛血清,通过原代和传代培养建立达摩凤蝶新孵幼虫细胞系。通过显微观察、细胞活力分析、核型分析... 展开更多; 关键词达摩凤蝶新孵幼虫昆虫细胞系分泌型碱性磷酸酶重组杆状病毒; 在线阅读下载PDF 职称材料

2,3-二氢-7-甲氧基-4H-1-苯并吡喃-4-异烟腙抗骨质疏松作用的体外活性研究被引量：2: 2; 作者王捷频尚福军 +3 位作者熊晓云刘莉侯进梅其炳《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2007年第6期686-689,共4页; 目的:在已有的研究基础上,从我们合成的一系列化合物中筛选出具有抗骨质疏松活性的化合物I(2,3-二氢-7-甲氧基-4H-1-苯并吡喃-4-异烟腙),对其体外活性进行研究。方法:以雌二醇(E2)作为阳性对照,以细胞增殖作用、碱性磷酸酶(ALP)活性和... 展开更多; 关键词 MC3T3-E1细胞 MTT 碱性磷酸酶活性骨钙素分泌; 在线阅读下载PDF 职称材料

HCVIRES调控外分泌性碱性磷酸酶基因在肝细胞中的表达被引量：1: 3; 作者刘水平谭德明 +2 位作者侯周华刘双虎文质《湖南医科大学学报》 CSCD 北大核心 2003年第4期335-337,共3页; 目的 :构建HCVIRES调控外分泌性碱性磷酸酶 (SEAP)基因表达的细胞模型。方法 :用PCR技术扩增HCV 5′NCR片段 ,定向克隆至表达质粒 pSEAP2 Control的SEAP基因上游 ,构建HCV 5′NCR调控SEAP表达的重组质粒 pdNCRSEAP。用脂质体基因转染技... 展开更多; 关键词 HCV IRES 调控外分泌性碱性磷酸酶基因肝细胞表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

GC盒不是人胰岛素基因启动子中关键顺式作用元件: 4; 作者牛新捷王作仁 Jochen Seufert 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期78-80,共3页; 目的鉴定人胰岛素基因启动子中的GC盒(-348￣-338)是否是启动子中的关键顺式作用元件。方法用PCR克隆人胰岛素基因启动子,构建由人胰岛素基因启动子驱动的分泌型碱性磷酸酶(SEAP)报告质粒,并对报告质粒中人胰岛素基因启动子中的GC盒进... 展开更多; 关键词胰岛素基因 GC盒启动子分泌型碱性磷酸酶顺式作用元件; 在线阅读下载PDF 职称材料

人源细胞内物质转运调节分子ARFGAP1对细胞分泌功能的影响被引量：1: 5; 作者刘晓勤张成岗 +2 位作者邢桂春陈清棠贺福初《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期237-243,共7页; ARF GAP是重要的细胞内物质转运调节分子 .最近 ,在人胎肝 c DNA文库中发现一种新基因 ,其编码的氨基酸序列与大鼠的 ARF1 GAP有 32 %同源性 ,故将其命名为“ARFGAP1”.对ARFGAP1进行功能研究 ,利用分子克隆技术构建绿色荧光蛋白 (GFP) ... 展开更多; 关键词细胞内物质转运细胞分泌功能 ARFGAP1 分泌型碱性磷酸酶; 在线阅读下载PDF 职称材料

两种报告基因在达摩凤蝶细胞克隆株RIRI-PaDe-2-C6中的表达: 6; 作者刘志刚丁伟峰 +4 位作者孙娜张欣李娴谢世聪冯颖《林业科学研究》 CSCD 北大核心 2018年第4期31-37,共7页; [目的]前期研究中,项目组从达摩凤蝶细胞系RIRI-Pa De-2中分离培养出单细胞克隆株RIRI-Pa De-2-C6,通过感染野生型苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒(Ac MNPV)发现克隆株RIRI-Pa De-2-C6对病毒敏感性高于原细胞系RIRI-Pa De-2。本研究将对达... 展开更多; 关键词达摩风蝶单细胞克隆昆虫细胞系口一半乳糖苷酶分泌型碱性磷酸酶重组杆状病毒; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名四个达摩凤蝶新孵幼虫细胞系的建立及其生物学特性被引量：2: 1; 作者丁伟峰冯颖张欣李娴王成业谢世聪; 机构中国林业科学研究院资源昆虫研究所国家林业局资源昆虫培育与利用重点实验室; 出处《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第8期826-835,共10页; 基金国家林业局引进国际先进林业科学技术("948")项目(2013-4-53) 中央及公益性科研院所基本科研业务费专项资金(riricaf2012003M); 文摘 [目的]建立达摩凤蝶Papilio demoleus Linnaeus新孵幼虫细胞系,并对其生物学特性进行研究。[方法]使用改良配方的Grace培养基并辅以20%胎牛血清,通过原代和传代培养建立达摩凤蝶新孵幼虫细胞系。通过显微观察、细胞活力分析、核型分析和分子鉴定,获得4个新建细胞系的生物学特性数据。使用Bac-To-Bac杆状病毒表达系统构建重组分泌型碱性磷酸酶杆状病毒（Ac MNPV-SEAP）。使用有限稀释法测定达摩凤蝶细胞系对Ac MNPVSEAP的半数组织培养感染剂量（TCID50）,比较达摩凤蝶细胞系对Ac MNPV-SEAP的敏感性。[结果]建立了4个贴壁生长的达摩凤蝶新孵幼虫细胞系（RIRI-Pa De-1,RIRI-Pa De-2,RIRI-Pa De-3及RIRI-Pa De-4）,且均传至60代以上。形态学方面,细胞系RIRI-Pa De-1和RIRI-Pa De-4较为相近,均由圆形、梭形以及多边形细胞组成,细胞系RIRIPa De-2主要为圆形细胞,而RIRI-Pa De-3主要为类似表皮细胞和纤维状细胞。细胞增殖动力学方面,4个细胞系的群体倍增时间分别为69.77,67.42,81.48及65.43 h。核型分析显示4个细胞系染色体数量均呈正态分布,其中RIRI-Pa De-2,RIRI-Pa De-3以及RIRI-Pa De-4的染色体数目分布区间比较接近,在45～97条之间,RIRI-Pa De-1的染色体条数相比偏少,在36～90条之间。通过比对4个达摩凤蝶细胞系和虫卵的细胞色素c氧化酶亚基I（COI）基因序列,证明4个新建细胞系来源于达摩凤蝶组织。比较4个细胞系对Ac MNPV-SEAP敏感性发现RIRI-Pa De-3对此病毒较为敏感,可作为重组杆状病毒表达的宿主。[结论]虽然4个新建达摩凤蝶细胞系的来源相同,具有相同的遗传背景,但其生物学特征仍有明显差异,具有进一步研究的价值。; 关键词达摩凤蝶新孵幼虫昆虫细胞系分泌型碱性磷酸酶重组杆状病毒; Keywords Papilio demoleus neonate larvae insect cell line secreted alkaline phosphatase recombinant baculovirus; 分类号 Q965.8 [生物学—昆虫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名2,3-二氢-7-甲氧基-4H-1-苯并吡喃-4-异烟腙抗骨质疏松作用的体外活性研究被引量：2: 2; 作者王捷频尚福军熊晓云刘莉侯进梅其炳; 机构第四军医大学药学系药理教研室第四军医大学唐都医院心内科; 出处《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2007年第6期686-689,共4页; 文摘目的:在已有的研究基础上,从我们合成的一系列化合物中筛选出具有抗骨质疏松活性的化合物I(2,3-二氢-7-甲氧基-4H-1-苯并吡喃-4-异烟腙),对其体外活性进行研究。方法:以雌二醇(E2)作为阳性对照,以细胞增殖作用、碱性磷酸酶(ALP)活性和骨钙素(OCN)分泌为指标考察该化合物对成骨细胞系MC3T3-E1细胞的增殖和分化的影响。结果:化合物I在10-6mol/L浓度时对体外培养的细胞有较好的促进作用,显著增加细胞数量(125.73%,与对照组比较P<0.05),提高ALP活性(108.49%,与对照组比较P<0.05),且能够促进骨钙素分泌(109.00%,与对照组比较P<0.05),以上作用均可被雌激素受体(ER)阻断剂tamoxifen阻断。结论:化合物I具有促进成骨细胞增殖分化的作用,其机制可能与ER激动有关。; 关键词 MC3T3-E1细胞 MTT 碱性磷酸酶活性骨钙素分泌; Keywords MC3T3-E1 cells MTT alkaline phosphatase activities osteocalcin secretion; 分类号 R965.2 [医药卫生—药理学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名HCVIRES调控外分泌性碱性磷酸酶基因在肝细胞中的表达被引量：1: 3; 作者刘水平谭德明侯周华刘双虎文质; 机构中南大学湘雅医院传染病研究所中南大学湘雅医学院微生物学教研室; 出处《湖南医科大学学报》 CSCD 北大核心 2003年第4期335-337,共3页; 基金省医药卫生科技项目 (2 0 0 0 0 0 1) 湖南省科技攻关项目 (0 2ssy30 83); 文摘目的 :构建HCVIRES调控外分泌性碱性磷酸酶 (SEAP)基因表达的细胞模型。方法 :用PCR技术扩增HCV 5′NCR片段 ,定向克隆至表达质粒 pSEAP2 Control的SEAP基因上游 ,构建HCV 5′NCR调控SEAP表达的重组质粒 pdNCRSEAP。用脂质体基因转染技术 ,将pdNCRSEAP转染至肝细胞株QSG770 1。用化学发光法检测SEAP的表达 ,并观察不同浓度反义寡聚核苷酸 (ASODN)对SEAP表达的影响。结果 :重组质粒 pdNCRSEAP表达的发光强度为pSEAP2 Control的 76 %,5 μmol和 10 μmolASODN对pdNCRSEAP发光强度的抑制率分别为2 9.2 %和 44 .6 %,而对 pSEAP2 Control的SEAP表达无显著抑制作用 (P >0 .0 5 )结论 :重组质粒 pdNCRSEAP的SEAP表达受HCV 5′NCR调控 ,为以HCV 5′NCR为靶位点的药物评价建立了检测方便的细胞模型。; 关键词 HCV IRES 调控外分泌性碱性磷酸酶基因肝细胞表达; Keywords hepatitis C virus internal ribosome entry site(IRES) secreted alkaline phosphatase (seap) QSG7701 cells; 分类号 R346 [医药卫生—基础医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名GC盒不是人胰岛素基因启动子中关键顺式作用元件: 4; 作者牛新捷王作仁 Jochen Seufert; 机构西安交通大学第一医院肝胆外科德国弗莱堡大学医学院内分泌和糖尿病科; 出处《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期78-80,共3页; 基金德国教育与科研部基金(FKZ01GN0115)~~; 文摘目的鉴定人胰岛素基因启动子中的GC盒(-348￣-338)是否是启动子中的关键顺式作用元件。方法用PCR克隆人胰岛素基因启动子,构建由人胰岛素基因启动子驱动的分泌型碱性磷酸酶(SEAP)报告质粒,并对报告质粒中人胰岛素基因启动子中的GC盒进行删除和突变。将报告质粒转染到!细胞系"TC3中,测定细胞培养液上清中SEAP的活性强度,进而判定GC盒与人胰岛素基因启动子转录活性的关系。结果删除和突变人胰岛素启动子中的GC盒不能显著改变胰岛素基因启动子在#细胞中的转录活性。结论人胰岛素基因启动子中GC盒不是一个关键顺式作用元件。; 关键词胰岛素基因 GC盒启动子分泌型碱性磷酸酶顺式作用元件; Keywords insulin gene GC-box promoter secreted alkaline phosphatase cis-acting element; 分类号 R346 [医药卫生—基础医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名人源细胞内物质转运调节分子ARFGAP1对细胞分泌功能的影响被引量：1: 5; 作者刘晓勤张成岗邢桂春陈清棠贺福初; 机构军事医学科学院放射医学研究所北京大学第一医院神经内科; 出处《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期237-243,共7页; 基金国家自然科学基金!项目 (No.39730 310和 30 0 70 386 )&&; 文摘 ARF GAP是重要的细胞内物质转运调节分子 .最近 ,在人胎肝 c DNA文库中发现一种新基因 ,其编码的氨基酸序列与大鼠的 ARF1 GAP有 32 %同源性 ,故将其命名为“ARFGAP1”.对ARFGAP1进行功能研究 ,利用分子克隆技术构建绿色荧光蛋白 (GFP) - ARFGAP1融合基因表达质粒 (p EGFP- C1 - ARFGAP1 ) ,经脂质体转染将其导入 COS- 7细胞瞬时表达 ,利用绿色荧光确定ARFGAP1的亚细胞定位 .结果显示 ,ARFGAP1位于细胞质部分 ,表达量高时 ,在核周高尔基体区聚集呈团块状或颗粒状 .构建真核表达质粒 pc DNA3.1 /myc- His- ARFGAP1 ,在 COS- 7细胞中表达 ,并用 ARFGAP1和分泌型碱性磷酸酶 (SEAP)真核表达质粒共同转染 COS- 7细胞 ,发现ARFGAP1在细胞中过表达能部分抑制 SEAP的分泌 .结果证明 ,ARFGAP1对细胞的物质转运和分泌功能有调节作用 .; 关键词细胞内物质转运细胞分泌功能 ARFGAP1 分泌型碱性磷酸酶; Keywords ADP\|ribosylation factor(ARF), GTPase activating protein(GAP),subcellular localization,secreted alkaline phosphatase; 分类号 Q25 [生物学—细胞生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名两种报告基因在达摩凤蝶细胞克隆株RIRI-PaDe-2-C6中的表达: 6; 作者刘志刚丁伟峰孙娜张欣李娴谢世聪冯颖; 机构中国林业科学研究院资源昆虫研究所; 出处《林业科学研究》 CSCD 北大核心 2018年第4期31-37,共7页; 基金中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资助项目(CAFYBB2016ZD005) 中国林业科学研究院资源昆虫研究所中央及公益性科研院所基本科研业务费专项资金(riricaf2012003M)资助; 文摘 [目的]前期研究中,项目组从达摩凤蝶细胞系RIRI-Pa De-2中分离培养出单细胞克隆株RIRI-Pa De-2-C6,通过感染野生型苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒(Ac MNPV)发现克隆株RIRI-Pa De-2-C6对病毒敏感性高于原细胞系RIRI-Pa De-2。本研究将对达摩凤蝶单细胞克隆株RIRI-Pa De-2-C6的生物学特性和外源蛋白表达特性进行研究,并与原细胞系RIRI-Pa De-2进行比较,评价其用于外源蛋白表达的可行性。[方法]使用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统构建重组β-半乳糖苷酶杆状病毒(Ac MNPV-Gal)和重组分泌型碱性磷酸酶杆状病毒(Ac MNPV-SEAP),分别侵染RIRI-Pa De-2和RIRI-Pa De-2-C6。在感染后的24、48、72、96、120、144、168 h检测2种重组蛋白的表达量,并对2个细胞系的形态学、生长曲线、倍增时间及核型进行分析和比较。[结果]表明:RIRI-Pa De-2和RIRI-Pa De-2-C6均可表达β-半乳糖苷酶(β-Gal)和分泌型碱性磷酸酶(SEAP),单细胞克隆株RIRI-Pa De-2-C6对重组β-Gal的表达水平显著高于原细胞系RIRI-Pa De-2(P<0.05),在接种Ac MNPV-Gal后96 h表达量达到最高。RIRI-Pa De-2-C6对重组SEAP的表达水平与RIRI-Pa De-2无显著差异(P>0.05)。显微观察发现,RIRI-Pa De-2-C6的细胞类型全部为梭形,比原细胞系RIRI-Pa De-2的细胞组成更加单一。RIRI-Pa De-2-C6的群体倍增时间为94.94 h,比原细胞系RIRI-Pa De-2的倍增时间(67.42 h)长。核型分析显示,RIRI-Pa De-2-C6的染色体数量呈正态分布,数目为21 82条,与RIRIPa De-2的染色体数目分布范围(48 97条)存在显著差异(P<0.05)。[结论]通过单细胞克隆方法获得的克隆株RIRI-Pa De-2-C6无论在外源蛋白表达以及基础生物学特性方面均有别于原细胞系RIRI-Pa De-2。; 关键词达摩风蝶单细胞克隆昆虫细胞系口一半乳糖苷酶分泌型碱性磷酸酶重组杆状病毒; Keywords Papilio demoleus single cell cloning insect cell line β-galactosidase secreted alkaline phosphatase re-combinant baculovirus; 分类号 Q965.8 [生物学—昆虫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	四个达摩凤蝶新孵幼虫细胞系的建立及其生物学特性	丁伟峰冯颖张欣李娴王成业谢世聪	《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心	2015	2	在线阅读下载PDF 职称材料
2	2,3-二氢-7-甲氧基-4H-1-苯并吡喃-4-异烟腙抗骨质疏松作用的体外活性研究	王捷频尚福军熊晓云刘莉侯进梅其炳	《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD	2007	2	在线阅读下载PDF 职称材料
3	HCVIRES调控外分泌性碱性磷酸酶基因在肝细胞中的表达	刘水平谭德明侯周华刘双虎文质	《湖南医科大学学报》 CSCD 北大核心	2003	1	在线阅读下载PDF 职称材料
4	GC盒不是人胰岛素基因启动子中关键顺式作用元件	牛新捷王作仁 Jochen Seufert	《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2007	0	在线阅读下载PDF 职称材料
5	人源细胞内物质转运调节分子ARFGAP1对细胞分泌功能的影响	刘晓勤张成岗邢桂春陈清棠贺福初	《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心	2001	1	在线阅读下载PDF 职称材料
6	两种报告基因在达摩凤蝶细胞克隆株RIRI-PaDe-2-C6中的表达	刘志刚丁伟峰孙娜张欣李娴谢世聪冯颖	《林业科学研究》 CSCD 北大核心	2018	0	在线阅读下载PDF 职称材料