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E Protein Prokaryotic Expression of Avian Infectious Bronchitis Virus
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作者 WEI Ping ZHANG Fang +3 位作者 MING Xiaobo ZENG Xiangwei ZHU Yuqing WANG Lin 《Journal of Northeast Agricultural University(English Edition)》 CAS 2008年第3期31-35,共5页
The small envelope protein (E) gene of avian infectious bronchitis virus (IBV) M41 strain was cloned, and then it was subcloned into prokaryotic expressing vector pGEX-6P-1. The recombinant plasmid was transformed... The small envelope protein (E) gene of avian infectious bronchitis virus (IBV) M41 strain was cloned, and then it was subcloned into prokaryotic expressing vector pGEX-6P-1. The recombinant plasmid was transformed into E.coli. BL21 and induced by IPTG. SDS-PAGE result showed that when objective protein fused with GST (about 20 ku), the relative molecular mass of fusion protein was 38 ku. It indicated that objective protein was about 12.4 ku. The result showed that E protein was expressed successfully, it was useful to the subsequent E protein research. 展开更多
关键词 avian infectious bronchitis virus (IBV) CORONAVIRUS small envelope protein (E) protein expression
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Molecular Cloning,Expression,and Characterization of an Adenylyl Cyclase-associated Protein from Gossypium arboreum Fuzzless Mutant
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作者 WANG Sheng,ZHAO Guo-hong,JIA Yin-hua,DU Xiong-ming(Cotton Research Institute,Chinese Academy of Agricultural Sciences Key Laboratory of Cotton Genetic Improvement,Ministry of Agriculture,Anyang,Henan 455000,China) 《棉花学报》 CSCD 北大核心 2008年第S1期69-,共1页
CAP,an adenylyl cyclase-associated protein,is predicted to be involved in cytoskeletal organization and signal transduction.Recently,we found that CAP may play an important role in fuzz-like fiber cell initiation in c... CAP,an adenylyl cyclase-associated protein,is predicted to be involved in cytoskeletal organization and signal transduction.Recently,we found that CAP may play an important role in fuzz-like fiber cell initiation in cotton.For the further research,we isolated two CAP homologues from wild 展开更多
关键词 Molecular Cloning expression and Characterization of an Adenylyl Cyclase-associated protein from Gossypium arboreum Fuzzless Mutant CAP
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应用激光捕获显微切割技术纯化的鼻咽癌蛋白质表达谱的建立 被引量:4
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作者 彭芳 汤参娥 +7 位作者 李茂玉 李萃 程爱兰 李峰 张鹏飞 李美香 肖志强 陈主初 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期481-486,共6页
目的:建立鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)蛋白质表达谱,为NPC蛋白质组学研究奠定基础。方法:应用激光捕获显微切割(laser capture microdissection,LCM)技术从NPC组织纯化NPC细胞,应用二维凝胶电泳(2-DE)分离LCM纯化NPC细胞的蛋... 目的:建立鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)蛋白质表达谱,为NPC蛋白质组学研究奠定基础。方法:应用激光捕获显微切割(laser capture microdissection,LCM)技术从NPC组织纯化NPC细胞,应用二维凝胶电泳(2-DE)分离LCM纯化NPC细胞的蛋白质,基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)鉴定蛋白质,利用生物信息学资源构建NPC的2-DE蛋白质组数据库。结果:建立了NPC蛋白质2-DE参考图谱,2-DE图谱共显示(1312±30)个蛋白质点,共鉴定了427个蛋白质点,包括241个非冗余蛋白质,并构建了NPC的2-DE蛋白质组数据库,这些数据可从本实验室网站(http://www.xyproteomics.org)上进行查询。结论:首次建立了LCM纯化NPC细胞2-DE蛋白质表达谱,为NPC蛋白质组学研究提供了重要的信息和资料。 展开更多
关键词 鼻咽癌 蛋白质表达谱 蛋白质组数据库 激光捕获显微切割 二维凝胶电泳 质谱
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植物质膜水通道蛋白转运及逆境胁迫响应的分子调控机制 被引量:10
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作者 王星 张纪龙 +2 位作者 冯秀秀 李洪杰 张根发 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期293-301,共9页
质膜水通道蛋白即质膜内在蛋白(plasma membrane intrinsic proteins,PIPs),属于通道蛋白,定位在质膜上,是植物体内水分子、CO_2及其他一些小分子溶质跨细胞膜运输的通道。PIPs对运输基质具有高度选择性,在维持植物细胞的水分平衡过程... 质膜水通道蛋白即质膜内在蛋白(plasma membrane intrinsic proteins,PIPs),属于通道蛋白,定位在质膜上,是植物体内水分子、CO_2及其他一些小分子溶质跨细胞膜运输的通道。PIPs对运输基质具有高度选择性,在维持植物细胞的水分平衡过程中发挥重要作用。PIPs的表达、活性与定位不但受转录水平和翻译后水平的调控,而且受外界环境影响。研究表明在非生物胁迫下,PIPs表达模式和定位会发生改变。本文重点阐述了PIPs转运的分子机制、转录水平及翻译后水平的调控机制以及PIPs对非生物胁迫的响应机制,分析了目前关于PIPs的研究动态和值得探究的研究方向,以期帮助相关领域的科研人员对PIPs的研究进展有更深入地了解。 展开更多
关键词 质膜内在蛋白 蛋白转运 表达调控 活性调节 非生物胁迫
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阴道毛滴虫黏附蛋白33基因原核表达载体的构建及表达 被引量:1
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作者 杨树国 王雅静 +2 位作者 朱晓燕 帖超男 廖琳 《四川动物》 CSCD 北大核心 2008年第6期1021-1023,共3页
目的构建阴道毛滴虫黏附蛋白33基因原核表达载体并诱导其体外表达。方法pMD-18T-ap33重组质粒和pUC18空质粒经BamH Ⅰ和XbaⅠ限制性内切酶双酶切,将ap33基因亚克隆入pUC18载体并进行筛选和鉴定。重组质粒经IPTG诱导,SDS-PAGE电泳及Weste... 目的构建阴道毛滴虫黏附蛋白33基因原核表达载体并诱导其体外表达。方法pMD-18T-ap33重组质粒和pUC18空质粒经BamH Ⅰ和XbaⅠ限制性内切酶双酶切,将ap33基因亚克隆入pUC18载体并进行筛选和鉴定。重组质粒经IPTG诱导,SDS-PAGE电泳及Western-blot杂交鉴定重组蛋白。结果经双酶切及PCR鉴定,构建的重组质粒为阳性重组子,诱导出的重组蛋白大小约为Mr36000,与理论值基本相符。结论成功构建重组质粒并获得体外表达。 展开更多
关键词 阴道毛滴虫 黏附蛋白33 原核表达载体 基因表达
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转基因番茄防龋疫苗的基础研究 Ⅰ.变形链球菌pac基因唾液粘附区植物表达质粒的构建 被引量:11
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作者 蒋少云 凌均启 《口腔医学纵横》 CSCD 2000年第2期94-96,共3页
目的 :构建变形链球菌表面蛋白基因 (pac)唾液粘附区的植物表达质粒pROP1和pRPB1。方法 :用PCR扩增的含变形链球菌表面蛋白唾液粘附区P1片段 (184- 1946bp)与植物的高效表达质粒pROKCP结合 ,构建pROP1表达质粒 ;且将此质粒与Bar基因 (... 目的 :构建变形链球菌表面蛋白基因 (pac)唾液粘附区的植物表达质粒pROP1和pRPB1。方法 :用PCR扩增的含变形链球菌表面蛋白唾液粘附区P1片段 (184- 1946bp)与植物的高效表达质粒pROKCP结合 ,构建pROP1表达质粒 ;且将此质粒与Bar基因 (抗除草剂基因 )连接 ,构建表达质粒pRPB1,酶切电泳检测。结果 :从pPC41中扩增的P1片段整合到pROKCP的适当部位 ,构成重组质粒pROP1,从pPBar分离出的Bar基因整合到pROP1,构成重组质粒pRPB1。结论 :本实验成功地构建了携带变形链球菌表面蛋白唾液粘附区的植物表达质粒pROP1和pRPB1。 展开更多
关键词 植物表达质粒 唾液粘附区 龋齿 pac蛋白
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柞蚕免疫相关基因Apdorsal的克隆鉴定与表达分析 被引量:1
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作者 李文利 刘媛 +1 位作者 李凤娟 李亚洁 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期32-37,共6页
ReL/NF—κB蛋白家族是一种重要的转录因子,在机体免疫应答、炎症反应、细胞凋亡与生长发育过程中起着重要调控作用。采用RACE技术克隆了2个柞蚕Rel/NF—κB相关蛋白基因彻dorsalA和Af)dorsalB的全长cDNA序列(GenBank登录号:JF488... ReL/NF—κB蛋白家族是一种重要的转录因子,在机体免疫应答、炎症反应、细胞凋亡与生长发育过程中起着重要调控作用。采用RACE技术克隆了2个柞蚕Rel/NF—κB相关蛋白基因彻dorsalA和Af)dorsalB的全长cDNA序列(GenBank登录号:JF488068,JF488069)。经BLAST比对表明2紊序列编码的蛋白质都含有Rel/NF—κB家族的典型氨基酸序列RHD;系统进化分析显示ApdorsalA蛋白与其它物种的ReL/NF—κB蛋白的序列相似度在32%-78%之间,与家蚕的RelA、烟草天蛾的Dorsal有较近的亲缘关系,说明Apdorsal属于Rel/NF—κB家族的Dorsal类。利用real—timePCR技术检测Apdorsal基因mRNA的组织分布以及经不同微生物诱导处理后的转录变化,结果表明Apdorsal基因mRNA在柞蚕蛹各组织中均有转录;柞蚕蛹脂肪体中的apdorsal基因mRNA经ApNPV诱导处理后的转录水平最高,经毕赤酵母和枯草芽孢杆菌诱导处理后的转录水平次之,经E.coli诱导处理后的转录水平最低,说明柞蚕蛹脂肪体中的Apdorsal可能与对病毒、革兰阳性菌和真菌的免疫有关。 展开更多
关键词 柞蚕 先天免疫 REL NF—κB蛋白家族 基因克隆 表达分析
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