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萸蓉壮骨膏调控EZH2/Wnt3a/β-catenin通路促进绝经后骨质疏松大鼠成骨分化 被引量：3
1
作者 邢尚曼 郭超 +6 位作者 宋冰 白敏 汪湛东 汪可欣 徐晓艳 张延英 汪永锋 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期818-823,894,共7页
目的基于EZH2/Wnt3a/β-catenin通路调控成骨分化探讨萸蓉壮骨膏对绝经后骨质疏松大鼠的治疗作用及机制。方法取SD大鼠复制绝经后骨质疏松模型,模型构建成功后随机分为模型组、阿仑膦酸钠片组[6.3 mg/(kg·周)]及萸蓉壮骨膏高[10.8 ... 目的基于EZH2/Wnt3a/β-catenin通路调控成骨分化探讨萸蓉壮骨膏对绝经后骨质疏松大鼠的治疗作用及机制。方法取SD大鼠复制绝经后骨质疏松模型,模型构建成功后随机分为模型组、阿仑膦酸钠片组[6.3 mg/(kg·周)]及萸蓉壮骨膏高[10.8 g/(kg·d)]、中[5.4 g/(kg·d)]、低剂量[2.7 g/(kg·d)]组,另选同龄大鼠作为假手术组。Micro CT检测骨微结构,HE染色观察股骨组织病理形态;IF法检测大鼠股骨组织中成骨相关蛋白(Runx2、OSX、OPG)表达水平。RT-qPCR及Western blot法检测大鼠胫骨组织中EZH2、Wnt3a、β-catenin mRNA和蛋白表达水平。结果与假手术组比较,模型组大鼠骨微结构(BMD、BV/TV、Tb.Th、Tb.N和Tb.Sp)显著破坏(P<0.05),骨小梁排列稀疏松散,结构出现不连续间断,脂滴累积较多,骨组织中成骨蛋白表达显著降低(P<0.05),EZH2 mRNA和蛋白表达水平显著升高,Wnt3a、β-catenin mRNA和蛋白表达水平显著降低(P<0.05);与模型组比较,各给药组大鼠骨微结构显著改善(P<0.05),各给药组不同程度改善模型大鼠骨组织病理结构,各给药组大鼠骨组织中成骨蛋白表达不同程度增加(P<0.05),各给药组大鼠骨组织中EZH2 mRNA和蛋白表达水平显著降低,Wnt3a、β-catenin mRNA和蛋白表达水平显著增加(P<0.05)。结论萸蓉壮骨膏能够显著改善绝经后骨质疏松大鼠骨流失,其作用机制与萸蓉壮骨膏调控EZH2/Wnt3a/β-catenin通路促进成骨分化有关。 展开更多
关键词 萸蓉壮骨膏 绝经后骨质疏松症 EZH2/wnt3a/β-catenin通路 成骨分化
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EBP50通过Wnt3a/β-catenin信号通路抑制乳腺癌细胞的侵袭和转移 被引量：9
2
作者 孙志亮 张胜超 +1 位作者 李洪利 尹崇高 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第9期1027-1032,共6页
EBP50通过抑制LIMK/cofilin信号通路和PI3K/Akt/m TOR/MMP信号通路抑制乳腺癌细胞的侵袭和转移。然而,EBP50是否可以通过其他机制抑制乳腺癌细胞的侵袭和转移尚未可知。本研究发现,EBP50能通过Wnt3a/β-catenin信号通路影响乳腺癌细胞... EBP50通过抑制LIMK/cofilin信号通路和PI3K/Akt/m TOR/MMP信号通路抑制乳腺癌细胞的侵袭和转移。然而,EBP50是否可以通过其他机制抑制乳腺癌细胞的侵袭和转移尚未可知。本研究发现,EBP50能通过Wnt3a/β-catenin信号通路影响乳腺癌细胞的侵袭和转移。Western印迹结果显示,EBP50在低转移细胞株MCF-7和正常乳腺细胞株MCF-10A中高表达,而在高转移细胞株MDA-MB-231低表达。采用RNAi技术将小RNA质粒瞬时转染乳腺癌细胞株MCF-7,同时将质粒pc DNA3.1-EBP50转入乳腺癌细胞株MDA-MB-231。Western印迹结果显示,Si EBP50/MCF-7细胞组的EBP50表达水平明显下调,MDA231/EBP50细胞组的EBP50表达水平明显上调。Transwell侵袭实验和划痕实验结果显示,用Wnt3a刺激后,Si EBP50/MCF-7细胞组体外迁移和侵袭能力明显增强,MDA231/EBP50细胞组体外迁移和侵袭能力明显减弱。Western印迹结果显示,与未用Wnt3a或同时用Wnt3a和抑制剂Dkk1刺激的相比,Si EBP50/MCF-7细胞组上皮-钙粘蛋白(Ecadherin)下调,波形蛋白(vimentin)上调,细胞核中β-联蛋白(β-catenin)的表达水平升高,而MDA231/EBP50细胞组上皮-钙粘蛋白上调,波形蛋白下调,细胞核中β-联蛋白表达下降。上述结果表明,EBP50通过Wnt3a/β-catenin信号通路影响β-联蛋白的转核,抑制EMT的发生,进而抑制乳腺癌细胞的侵袭和转移。 展开更多
关键词 乳腺癌 EBP50 wnt3a/β-catenin 侵袭 转移
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miR-199a通过Wnt3a/β-catenin信号通路调控非小细胞肺癌细胞的生物学活动 被引量：8
3
作者 庄焕伟 白树堂 +7 位作者 符洪犊 曹贤君 梁丽明 陈知群 羊家慧 欧阳华 程弦 张亮 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2020年第18期2515-2521,共7页
目的探讨miR-199a调控非小细胞肺癌A549细胞的增殖、凋亡、转移和侵袭等生物学功能及作用机制。方法RT-PCR检测正常肺上皮细胞BEAS-2B和非小细胞肺癌细胞A549内miR-199a的表达;分别用miR-199a-mimics、miR-199a-NC和miR-199a-inhibitor... 目的探讨miR-199a调控非小细胞肺癌A549细胞的增殖、凋亡、转移和侵袭等生物学功能及作用机制。方法RT-PCR检测正常肺上皮细胞BEAS-2B和非小细胞肺癌细胞A549内miR-199a的表达;分别用miR-199a-mimics、miR-199a-NC和miR-199a-inhibitor转染至A549细胞内,转染48 h后CCK-8法检测细胞各组细胞增殖率,Annexin V-FITC/PI联合流式细胞仪检测细胞凋亡率,划痕实验和Transwell小室实验分别检测细胞迁移、侵袭能力,采用双荧光素酶报告实验验证Wnt3a与miR-199a的靶向关系,Western blot检测Wnt3a、β-catenin、C-myc、Survivin、E-cadherin、Vimentin蛋白表达。结果miR-199a在肺癌细胞中的表达低于正常肺上皮细胞(P<0.05);miR-199a-mimics组细胞增殖、迁移、侵袭活性显著低于其他两组(P<0.05),而凋亡率显著高于其他两组(P<0.05),miR-199a-inhibitor组细胞增殖、迁移、侵袭活性显著高于其他两组(P<0.05),而凋亡率显著低于其他两组(P<0.05);双荧光素酶报告实验证实miR-199a靶向抑制A549细胞中Wnt3a的表达;miR-199a-mimics组细胞Wnt3a、β-catenin、C-myc、Survivin、Vimentin蛋白表达显著低于其他两组(P<0.05),而E-cadherin表达在3组中最强(P<0.05),miR-199a-inhibitor组细胞Wnt3a、β-catenin、C-myc、Survivin、Vimentin蛋白表达显著高于其他两组(P<0.05),而E-cadherin表达在3组中最弱(P<0.05)。结论miR-199a能抑制非小细胞肺癌A549细胞的增殖、迁移和侵袭,同时刺激其凋亡,这种作用是通过靶向抑制Wnt3a/β-catenin信号通路的活性而实现的。 展开更多
关键词 miR-199a 非小细胞肺癌A549 增殖 迁移 侵袭 凋亡 wnt3a/β-catenin信号通路
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强骨合剂通过Wnt3a/β-catenin/VEGF信号通路促进血管生成改善围绝经期大鼠骨质疏松的研究 被引量：9
4
作者 王雨辰 芮立宁 +1 位作者 贾川 俞伟忠 《南京中医药大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第9期819-826,共8页
目的探讨强骨合剂对围绝经期骨质疏松SD大鼠的疗效及其可能的作用机制。方法采用HPLC建立强骨合剂标准指纹图谱。将50只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、雌二醇组、强骨合剂高剂量(12 g·kg^(-1))组、低剂量(6 g·kg^(-1))组,... 目的探讨强骨合剂对围绝经期骨质疏松SD大鼠的疗效及其可能的作用机制。方法采用HPLC建立强骨合剂标准指纹图谱。将50只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、雌二醇组、强骨合剂高剂量(12 g·kg^(-1))组、低剂量(6 g·kg^(-1))组,每组10只。双侧卵巢切除法制备围绝经期大鼠骨质疏松模型,分别灌胃给予生理盐水,雌二醇,高、低剂量强骨合剂,连续给药30 d。记录大鼠体质量和子宫质量,检测大鼠骨力学相关指标,股骨HE染色观察成骨细胞量及骨小梁面积。qPCR检测Wnt3a、β-catenin、VEGF、OPG mRNA表达水平;免疫荧光检测VEGFR-2、CD31,评价血管生成情况;Western blot检测股骨组织Wnt3a、p-GSK3β、VEGF、β-catenin、Lamin蛋白表达情况。结果10批次提取的强骨合剂指纹图谱相似度均大于0.9,表明10批样品质量稳定。与模型组比较,雌二醇组,强骨合剂高、低剂量组可显著改善大鼠子宫指数、骨密度、骨力学性能指标(P<0.05,P<0.01),明显改善骨微结构,提高股骨组织中Wnt3a、β-catenin、VEGF、OPG mRNA水平(P<0.05,P<0.01),以及VEGF、CD31、Wnt3a、p-GSK3β、β-catenin、Lamin蛋白表达水平(P<0.05,P<0.01)。结论强骨合剂可能通过Wnt3a/β-catenin信号通路调节VEGF表达,促进血管生成,从而提高大鼠骨密度,改善骨组织形态,进而发挥抗骨质疏松的作用。 展开更多
关键词 骨质疏松 围绝经期 强骨合剂 wnt3a/β-catenin VEGF
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左归丸通过FNDC5/Wnt3a/β-catenin通路治疗绝经后骨质疏松症的机制研究 被引量：14
5
作者 黄展辉 魏其鹏 +3 位作者 梁炜瑜 周季青 丁富平 张进 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第8期1147-1153,共7页
目的对左归丸治疗绝经后骨质疏松症(postmenopausal osteoporosis,PMOP)的机制进行研究。方法通过体外实验制备左归丸低、中、高剂量对应的含药血清,对培养的MC3T3-E1进行药物干预,分为空白对照组、成骨诱导组(OGI组)、OGI+左归丸低、... 目的对左归丸治疗绝经后骨质疏松症(postmenopausal osteoporosis,PMOP)的机制进行研究。方法通过体外实验制备左归丸低、中、高剂量对应的含药血清,对培养的MC3T3-E1进行药物干预,分为空白对照组、成骨诱导组(OGI组)、OGI+左归丸低、中、高浓度组;对培养的MC3T3-E1细胞进行FNDC5转染后成骨诱导,分为空白对照组、OGI+转染组、OGI+转染+左归丸低、中、高浓度组。对上述细胞培养液进行ALP活力检测及染色。在体内实验中将野生型小鼠随机分为野生型对照组、野生型卵巢切除(OVX)组、野生型治疗组,将FNDC5基因敲除(KO)小鼠随机分为KO对照组、KO-OVX组、KO治疗组,采用OVX方式造模,给予治疗组小鼠灌胃左归丸12周。12周灌胃结束后检测各组股骨骨密度(bone mineral density,BMD),HE染色股骨切片,ELISA检测血清E2、PINP、Irisin含量,实时荧光定量PCR检测FNDC5、Runx2、OPN、OCN、OSX mRNA表达,Western Blot检测FNDC5、Wnt3a、β-catenin蛋白表达。结果左归丸含药血清增加了MC3T3-E1的ALP表达,FNDC5转染后ALP表达下降;左归丸可以显著改善野生型小鼠OVX术后导致的BMD降低及股骨骨小梁损害,缓解E2、PINP、Irisin表达降低,而对于KO小鼠无显著差异;左归丸抑制了OPN的表达,提高了Runx2、OSX、OCN的mRNA表达。对比KO-OVX组,KO治疗组的OPN、Runx2、OSX、OCN等均没有明显差异。左归丸可以上调Wnt3a和β-catenin的表达,当FNDC5被敲除后这种上调效果被显著抑制。结论左归丸可能通过FNDC5/Wnt3a/β-catenin通路治疗PMOP。 展开更多
关键词 左归丸 FNDC5通路 绝经后骨质疏松症 wnt3a/β-catenin通路
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sox-9通过Wnt3a/β-catenin通路促进大鼠骨髓间充质干细胞分化 被引量：1
6
作者 樊薰勤 张明勇 +10 位作者 李雯婷 钱雪丰 徐宁路 王勇 曹平 张杰 郭奉斌 赵志强 郑金鹏 刘盾 刘拴 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第8期1169-1173,共5页
目的探讨sox-9对骨髓间充质干细胞(bone marrow-derived mesenchymal stem cells,BMSCs)增殖能力和分化能力的影响。方法分离并鉴定BMSCs,对细胞进行sox-9过表达和敲降处理。将细胞分为对照组、过表达对照组、干扰对照组、sox-9过表达组... 目的探讨sox-9对骨髓间充质干细胞(bone marrow-derived mesenchymal stem cells,BMSCs)增殖能力和分化能力的影响。方法分离并鉴定BMSCs,对细胞进行sox-9过表达和敲降处理。将细胞分为对照组、过表达对照组、干扰对照组、sox-9过表达组、sox-9干扰组。CCK8法检测细胞增殖活性;免疫组化观察细胞的Ⅱ型胶原蛋白(CollageⅡ)和聚蛋白聚糖(Aggrecan)表达水平;Western blot检测细胞sox-9、Wnt3a、β-连环蛋白(β-catenin)表达水平。结果各组细胞增殖能力无显著差异(P>0.05);sox-9过表达组的CollageⅡ和Aggrecan表达显著升高,而Wnt3a和β-catenin的表达显著降低(P<0.05)。结论sox-9可能是调控间质干细胞向软骨细胞分化能力的关键因子,通过抑制Wnt3a/β-catenin信号途径,促进其向软骨细胞分化。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 wnt3a/β-catenin sox-9 软骨分化能力 大鼠
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Wnt3a/β-catenin信号通路诱导人关节软骨间充质祖细胞增殖能力和向软骨分化的能力 被引量：8
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作者 彭旭 陈光兴 +3 位作者 杨柳 戴刚 常红星 刘军 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期477-481,共5页
目的研究Wnt3a/β-catenin信号通路对人关节软骨间充质祖细胞(mesenchymal progenitor cells,MPCs)老化的影响。方法 RT-PCR和Western blot检测正常人(对照组)和原发性骨关节炎(osteoarthritis,OA)患者(OA组)MPCs中Wnt3a/β-catenin的... 目的研究Wnt3a/β-catenin信号通路对人关节软骨间充质祖细胞(mesenchymal progenitor cells,MPCs)老化的影响。方法 RT-PCR和Western blot检测正常人(对照组)和原发性骨关节炎(osteoarthritis,OA)患者(OA组)MPCs中Wnt3a/β-catenin的表达。Western blot检测β-catenin在Wnt3a/β-catenin信号激活与阻断后细胞中的积累,MTT检测细胞的增殖情况,RT-PCR检测细胞向软骨细胞诱导后的分化情况。结果 OA组MPCs中Wnt3a和β-catenin蛋白表达明显高于对照组;在Wnt3a/β-catenin信号通路激活的对照组MPCs中β-catenin积累增加,阻断后β-catenin积累降低;Wnt3a/β-catenin信号通路激活的对照组MPCs增殖能力降低,阻断后增殖能力提高;Wnt3a/β-catenin信号通路激活的对照组MPCs向软骨细胞诱导分化后较对照组MPCs中Ⅱ型胶原、aggrecan、SOX9表达降低(P<0.01);Wnt3a/β-catenin信号通路激活的同时加入阻断剂,Ⅱ型胶原、aggrecan、SOX9表达有明显恢复(P<0.05);Wnt3a/β-catenin信号通路阻断组细胞与对照组MPCs组相比没有差异。结论 Wnt3a/β-catenin信号通路激活促进了MPCs老化,Wnt3a/β-catenin信号通路阻断能够抑制MPCs老化,Wnt3a/β-catenin在OA中可能发挥了重要作用。 展开更多
关键词 骨性关节炎 间充质祖细胞 wnt3a β-catenin
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GCM1通过激活Wnt3a/β-catenin信号通路改善绝经后骨质疏松症 被引量：1
8
作者 谢菲飞 宋立稳 +4 位作者 王小英 胡燕芳 谢蕴云 刘文华 谢宝强 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第6期805-811,共7页
目的探究GCM1对小鼠胚胎成骨细胞前体细胞(MC3T3-E1)成骨分化及矿化的影响。方法实验设置control组、BMP2诱导组、BMP2+ov-NC组、MP2+ov-GCM1组、BMP2+sh-NC组、BMP2+sh-GCM1组,BMP2用于诱导细胞成骨分化。通过碱性磷酸酶(ALP)染色及茜... 目的探究GCM1对小鼠胚胎成骨细胞前体细胞(MC3T3-E1)成骨分化及矿化的影响。方法实验设置control组、BMP2诱导组、BMP2+ov-NC组、MP2+ov-GCM1组、BMP2+sh-NC组、BMP2+sh-GCM1组,BMP2用于诱导细胞成骨分化。通过碱性磷酸酶(ALP)染色及茜素红染色检测GCM1对MC3T3-E1成骨分化及矿化的影响;通过Western blot检测成骨分化相关蛋白及Wnt3a/β-catenin蛋白的表达变化。结果GCM1在绝经后骨质疏松症患者血清中低表达。过表达GCM1能够促进BMP2诱导MC3T3-E1的成骨分化和矿化,而抑制GCM1表达则抑制了BMP2诱导MC3T3-E1的成骨分化和矿化。此外,过表达GCM1增加了Wnt3a/β-catenin蛋白表达,激活Wnt3a/β-catenin信号通路,抑制GCM1表达则与上述结果相反。结论GCM1在绝经后骨质疏松症患者血清中低表达,过表达GCM1则可能通过激活Wnt3a/β-catenin信号通路、促进MC3T3-E1成骨分化及矿化,进而改善绝经后骨质疏松症。 展开更多
关键词 绝经后骨质疏松症 GCM1 wnt3a/β-catenin信号通路 成骨分化 矿化
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那可丁通过下调钙黏素17及Wnt3a/β-catenin信号通路抑制结肠癌SW480细胞迁移 被引量：9
9
作者 韩峥 黄晓东 +8 位作者 刘蒙 朱庆曦 谭洁 刘维洁 陈巍 邹艳丽 蔡一珊 黄莎莎 田霞 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第10期1089-1094,共6页
目的:探讨那可丁(Nos)对结肠癌SW480细胞钙黏素17(CDH17)表达的影响及其对细胞迁移的作用机制。方法:选用SW480细胞,分为对照组、空载组(si-EV)、CDH17干扰组(si-CDH17)、Nos处理组和CDH17干扰+Nos处理组(si-CDH17+Nos),其中CDH17干扰... 目的:探讨那可丁(Nos)对结肠癌SW480细胞钙黏素17(CDH17)表达的影响及其对细胞迁移的作用机制。方法:选用SW480细胞,分为对照组、空载组(si-EV)、CDH17干扰组(si-CDH17)、Nos处理组和CDH17干扰+Nos处理组(si-CDH17+Nos),其中CDH17干扰采用小干扰RNA(siRNA)敲低CDH17水平,Nos处理使用半数抑制质量浓度(55.30±2.21)μg/ml。用qPCR检测SW480细胞CDH17 mRNA表达水平,用Hoechst33258染色法和Transwell实验检测细胞的凋亡和迁移能力,用ELISA检测细胞中VEGF、MMP2和MMP9含量,用WB检测细胞CDH17、Wnt3a和β-catenin蛋白表达水平。结果:与对照组相比,Nos组、si-CDH17组和si-CDH17+Nos组的CDH17 mRNA及蛋白表达水平明显降低(均P<0.01),细胞凋亡增加、迁移能力减弱,细胞中VEGF、MPP2和MPP9含量及Wnt3a和β-catenin蛋白表达水平显著降低(均P<0.01),且si-CDH17+Nos组比si-CDH17组效果更显著(P<0.01)。结论:Nos可诱导人结肠癌SW480细胞凋亡、抑制其迁移能力,其机制可能与下调CDH17表达抑制Wnt3a/β-catenin信号通路有关。 展开更多
关键词 那可丁 结肠癌 SW480细胞 钙黏素17 wnt3a/β-catenin信号通路 凋亡 迁移
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特立帕肽通过Wnt3a/β-catenin通路对高糖环境下成骨细胞分化的影响 被引量：3
10
作者 谷营营 侯甜 +4 位作者 秦雅芝 张妍 温国琛 毕文娟 董伟 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2022年第11期1750-1755,共6页
目的研究特立帕肽(TPTD)通过Wnt3a/β-catenin通路对高糖环境下MC3T3-E1细胞向成骨分化的影响。方法实验分为5组:低糖组、低糖+TPTD组、高糖组、高糖+TPTD组、高糖+TPTD+G244-LM组。Calcein-AM染色及CCK-8法检测细胞增殖活性,碱性磷酸酶... 目的研究特立帕肽(TPTD)通过Wnt3a/β-catenin通路对高糖环境下MC3T3-E1细胞向成骨分化的影响。方法实验分为5组:低糖组、低糖+TPTD组、高糖组、高糖+TPTD组、高糖+TPTD+G244-LM组。Calcein-AM染色及CCK-8法检测细胞增殖活性,碱性磷酸酶(ALP)及茜素红s染色观察细胞矿化结节形成情况,免疫荧光检测分析肌动蛋白形成情况,Real-time PCR检测Wnt3a、β-catenin、Tcf1、OPG、COLⅠmRNA表达情况。结果TPTD对高糖条件下MC3T3-E1细胞的增殖活性无显著影响。低糖+TPTD组细胞ALP染色区域、蛋白活性及茜素红s染色面积均高于其他四组(P<0.05),且高糖组低于低糖组(P<0.05),高糖+TPTD组高于高糖组和高糖+TPTD+G244-LM组(P<0.05)。低糖+TPTD组细胞骨架最清晰;高糖组和高糖+TPTD+G244-LM组细胞骨架清晰程度均低于高糖+TPTD组。低糖+TPTD组细胞Wnt3a、β-catenin、Tcf1、OPG、COLⅠmRNA水平最高(P<0.05);低糖组各基因mRNA水平均高于高糖组(P<0.05);高糖+TPTD组细胞各基因mRNA水平均高于高糖组和高糖+TPTD+G244-LM组(P<0.05)。结论高糖抑制成骨细胞分化,TPTD通过调控Wnt3a/β-catenin通路促进高糖环境下成骨细胞分化。 展开更多
关键词 特立帕肽 成骨细胞 高糖 wnt3a/β-catenin
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miR-27a-3p通过Wnt3a/β-catenin信号通路抑制肺成纤维细胞I、III型胶原合成 被引量：14
11
作者 刘理静 钱红 +2 位作者 胡柯 张自珍 贺兼斌 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期229-234,共6页
目的探讨microRNA-27a-3p(miR-27a-3p)对肺成纤维细胞I型胶原(ColⅠ)和III型胶原(ColⅢ)合成的影响及分子机制。方法培养人胚肺成纤维细胞MRC-5,转染miR-27a-3p模拟物/抑制物,实时荧光定量PCR(qPCR)检测miR-27a-3p水平;qPCR和Western b... 目的探讨microRNA-27a-3p(miR-27a-3p)对肺成纤维细胞I型胶原(ColⅠ)和III型胶原(ColⅢ)合成的影响及分子机制。方法培养人胚肺成纤维细胞MRC-5,转染miR-27a-3p模拟物/抑制物,实时荧光定量PCR(qPCR)检测miR-27a-3p水平;qPCR和Western blot测定ColⅠ、ColⅢ、Wnt3a表达;Western blot分析细胞核内β-catenin水平。生物信息学预测miR-27a-3p与Wnt3a 3′-非翻译区(3′-UTR)靶向结合情况,并用双荧光素酶报告基因检测miR-27a-3p模拟物对Wnt3a 3′-UTR野生型和突变型荧光素酶活性的影响。给予Wnt3a/β-catenin信号通路抑制剂Dkk1预处理MRC-5细胞6 h,再用miR-27a-3p抑制物转染细胞48 h,qPCR和Western blot检测ColⅠ、ColⅢ表达。结果 miR-27a-3p模拟物明显增加miR-27a-3p水平,降低ColⅠ、ColⅢ、Wnt3a和β-catenin表达,其抑制物的作用则相反,与对照组比较,差异均有显著性(P<0.01)。Wnt3a 3′-UTR存在1个miR-27a-3p的结合位点,miR-27a-3p过表达减少野生型Wnt3a 3′-UTR荧光素酶活性(P<0.01),但对其突变型荧光素酶活性无影响(P>0.05)。Dkk1预处理几乎完全逆转miR-27a-3p抑制物对ColⅠ、ColⅢ合成的诱导作用(P<0.05)。结论 miR-27a-3p抑制肺成纤维细胞ColⅠ、ColⅢ生物合成,其机制与拮抗Wnt3a/β-catenin信号通路有关。 展开更多
关键词 miR-27a-3p wnt3a β-catenin Ⅰ型胶原 Ⅲ型胶原 肺纤维化
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miR-27a-3p通过阻断Wnt3a/β-catenin途径抑制大鼠肺纤维化 被引量：11
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作者 刘理静 钱红 +4 位作者 胡柯 王乐 张自珍 尹辉明 贺兼斌 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第11期1015-1020,共6页
目的探讨微小RNA-27a-3p(miR-27a-3p)对博莱霉素A5所致大鼠肺纤维化(PF)的影响及分子机制。方法雄性SD大鼠45只,随机分为对照组、miR-27a-3p激动剂(miR-27a-3p agomir)组和miR-27a-3p拮抗剂(miR-27a-3p antagomir)组,每组15只。经气管... 目的探讨微小RNA-27a-3p(miR-27a-3p)对博莱霉素A5所致大鼠肺纤维化(PF)的影响及分子机制。方法雄性SD大鼠45只,随机分为对照组、miR-27a-3p激动剂(miR-27a-3p agomir)组和miR-27a-3p拮抗剂(miR-27a-3p antagomir)组,每组15只。经气管内注入博莱霉素A5建立PF模型,给药后次日分别予生理盐水、miR-27a-3p agomir、miR-27a-3p antagomir尾静脉注射,每3 d注射1次,共9次。第28天收集血液,ELISA检测血清1型前胶原蛋白羧基端前肽(P1CP)和3型前胶原蛋白氨基端前肽(P3NP)水平;处死大鼠,取肺组织,HE染色和Masson染色评价PF病变程度,实时荧光定量PCR检测miR-27a-3p、1型胶原蛋白(Col1)、Col3的mRNA水平,Western blot法检测Col1、Col3、Wnt3a、β联蛋白(β-catenin)的蛋白水平。结果miR-27a-3p agomir处理明显增加肺组织miR-27a-3p表达,miR-27a-3p antagomir则降低miR-27a-3p表达,提示miR-27a-3pagomir/antagomir转染效率较高。与对照组相比,miR-27a-3p agomir显著减轻大鼠肺泡炎症和PF程度,而miR-27a-3p antagomir则明显加重大鼠肺泡炎症和PF程度。miR-27a-3p agomir组血清P1CP、P3NP水平降低、下调肺组织Col1、Col3、Wnt3a、β-catenin水平,miR-27a-3p antagomir组则作用相反。结论 miR-27a-3p通过抑制Wnt3a/β-catenin信号通路,下调Col1、Col3表达,发挥抗PF作用。 展开更多
关键词 miR-27a-3p 肺纤维化 1型胶原蛋白(Col1) 3型胶原蛋白 wnt3a β联蛋白(β-catenin)
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金复康调控TRIM52-Wnt/β-catenin轴抑制肺癌H358细胞移植瘤
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作者 管懋莹 姚俊强 +2 位作者 周蕾 李和根 慕晓艳 《医药导报》 北大核心 2025年第8期1221-1228,共8页
目的研究金复康对人肺癌H358细胞裸鼠移植瘤生长的影响及对TRIM52介导的Wnt/β-catenin通路的调控作用。方法培养人肺癌H358细胞,建立肺癌裸鼠皮下移植瘤模型,随机分为0.9%氯化钠溶液组、顺铂组(3 mg·kg^(-1),每3天注射1次)、金复... 目的研究金复康对人肺癌H358细胞裸鼠移植瘤生长的影响及对TRIM52介导的Wnt/β-catenin通路的调控作用。方法培养人肺癌H358细胞,建立肺癌裸鼠皮下移植瘤模型,随机分为0.9%氯化钠溶液组、顺铂组(3 mg·kg^(-1),每3天注射1次)、金复康组(0.4 mL,每日灌胃1次)以及金复康+顺铂组(金复康0.4 mL,每日灌胃1次,联合顺铂3 mg·kg^(-1),每3天注射1次),每组6只。连续治疗15 d后,计算瘤体生长抑制率;苏木精-伊红(HE)染色观察瘤体组织病理变化;TUNEL法观察肿瘤细胞凋亡情况并计算凋亡指数;Real-timePCR和蛋白免疫印迹分别检测肿瘤细胞中TRIM52、PCNA、c-Myc、β-catenin和Cyclin D1的mRNA相对表达量和蛋白表达水平。结果与0.9%氯化钠溶液组比较,金复康组、顺铂组、金复康+顺铂组均可抑制瘤体生长(P<0.05);其中金复康+顺铂组抑瘤作用较好,略优于顺铂组,但差异无统计学意义(P>0.05)。各组裸鼠肿瘤组织的病理形态学和凋亡指数比较结果显示,金复康+顺铂组肿瘤组织坏死程度大于其他各组,且凋亡指数显著升高(P<0.05),提示该组治疗对肿瘤细胞的坏死和凋亡具有更强的促进作用。金复康+顺铂组可显著下调Cyclin D1、PCNA、TRIM52、β-catenin和c-Myc的mRNA表达(P<0.05)和蛋白表达(P<0.05)。结论金复康能够有效抑制人肺癌H358细胞裸鼠移植瘤的生长,并破坏肿瘤细胞的结构,促进肿瘤细胞凋亡。联合顺铂治疗时,其抗肿瘤效果更为显著,其机制可能与下调TRIM52表达,进而抑制Wnt/β-catenin信号通路的活性,从而增强抗肿瘤作用有关。 展开更多
关键词 金复康 肺癌 H358细胞移植瘤 三结构域蛋白52 wnt/β-catenin通路
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miR-148a通过Wnt3a/β-catenin影响巨噬细胞M2型极化抑制肝癌细胞增殖的作用机制研究
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作者 韩光宇 张鼐鹏 +2 位作者 兰秀芬 孙丽莉 张慧欣 《细胞与分子免疫学杂志》 2025年第9期790-797,共8页
目的探讨miR-148a通过Wnt3a/β联蛋白(β-catenin)影响巨噬细胞M2型极化抑制肝癌细胞增殖的作用机制。方法实时定量PCR检测84名肝癌患者肿瘤组织和相应的邻近非肿瘤肝组织中miR-148a、CD206、白细胞介素10(IL-10)mRNA表达水平;将THP-1... 目的探讨miR-148a通过Wnt3a/β联蛋白(β-catenin)影响巨噬细胞M2型极化抑制肝癌细胞增殖的作用机制。方法实时定量PCR检测84名肝癌患者肿瘤组织和相应的邻近非肿瘤肝组织中miR-148a、CD206、白细胞介素10(IL-10)mRNA表达水平;将THP-1细胞分为空白组(常规培养)、M2组(200 nmol/L佛波酯、20 ng/mL IL-4、20 ng/mL IL-13)、M2联合阴性对照(miR-NC)组(在M2组基础上转染miR-NC)、M2联合miR-148a模拟物(miR-148a mimics)组(在M2组基础上转染miR-148a mimics)、M2和miR-148a mimics联合Wnt3a组(在M2联合miR-148a mimics组基础上,加入100μg/L Wnt3a处理);CCK-8、EdU法检测HuH7细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡及M2型巨噬细胞标志物CD206;化学发光法检测细胞上清液中IL-10水平;实时定量PCR检测细胞中miR-148a、CD206、IL-10 mRNA表达水平;Western blot法检测Wnt3a、β-catenin表达。结果肿瘤组织CD206、IL-10 mRNA、Wnt3a、β-catenin表达高于非肿瘤肝组织,miR-148a降低;M2型巨噬细胞标志物CD206、IL-10 mRNA表达明显增加;与空白组相比,M2组A_(450)值、EdU阳性率、CD206、IL-10 mRNA表达、上清液中IL-10水平、Wnt3a、β-catenin表达增加,凋亡率、miR-148a降低;与M2组、M2联合miR-NC组相比,M2联合miR-148a mimics组A_(450)值、EdU阳性率、CD206、IL-10 mRNA表达、上清液中IL-10水平、Wnt3a、β-catenin表达降低,凋亡率、miR-148a增加;Wnt3a逆转了过表达miR-148a对肝癌细胞增殖的抑制作用。结论过表达miR-148a抑制巨噬细胞M2型极化进而阻止肝癌细胞增殖,可能与抑制Wnt3a/β-catenin通路有关。 展开更多
关键词 巨噬细胞 miR-148a M2型极化 肝癌细胞 增殖 wnt3a/β-catenin通路
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基于Wnt/β-catenin信号通路的针灸效应研究进展
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作者 罗芳丽 孙路强 +3 位作者 王司琦 侯雨君 李瑛 周思远 《辽宁中医杂志》 北大核心 2025年第8期197-202,I0006,共7页
Wnt/β-catenin信号通路对细胞增殖、分化凋亡、组织稳态和干细胞维持至关重要,该通路的异常调控与许多疾病的发生发展密切相关。越来越多的研究证据表明针灸可以通过调控Wnt/β-catenin信号通路中基因或蛋白的表达量,从而影响疾病的进... Wnt/β-catenin信号通路对细胞增殖、分化凋亡、组织稳态和干细胞维持至关重要,该通路的异常调控与许多疾病的发生发展密切相关。越来越多的研究证据表明针灸可以通过调控Wnt/β-catenin信号通路中基因或蛋白的表达量,从而影响疾病的进展,但其具体机制尚未阐述清楚。作者通过检索近10年来针灸调控Wnt/β-catenin信号通路的文献资料,综述了Wnt/β-catenin信号通路在针灸治病过程中的调节机制,分析针灸防治疾病的机制机理,为今后针灸临床治疗和试验研究提供参考和新的研究方向。 展开更多
关键词 针灸 wnt/β-catenin信号通路 针灸效应 研究进展
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基于Wnt/β-catenin信号通路探讨益肾通癃汤对人前列腺癌细胞DU 145的影响
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作者 朱文雄 袁轶峰 +3 位作者 刘慧 龙柳芽 张熙 陈其华 《中成药》 北大核心 2025年第1期250-254,共5页
目的探究益肾通癃汤对人前列腺癌脑转移细胞DU 145的影响。方法SD大鼠灌胃给予相应药物制备空白血清和益肾通癃汤含药血清,将DU 145细胞分为空白血清组,阳性药物组(25μmol/L ICG-001),益肾通癃汤低、中、高剂量组(5%、10%、15%含药血... 目的探究益肾通癃汤对人前列腺癌脑转移细胞DU 145的影响。方法SD大鼠灌胃给予相应药物制备空白血清和益肾通癃汤含药血清,将DU 145细胞分为空白血清组,阳性药物组(25μmol/L ICG-001),益肾通癃汤低、中、高剂量组(5%、10%、15%含药血清),联合用药组(25μmol/L ICG-001+15%含药血清)。CCK-8比色法检测细胞增殖情况,Transwell小室法检测细胞侵袭和迁移能力,RT-qPCR法检测细胞Wnt1、Wnt3a、β-catenin、GSK-3β、APC mRNA表达,Western blot法检测细胞Wnt1、Wnt3a、β-catenin、GSK-3β、p-GSK-3β、APC蛋白表达。结果益肾通癃汤可有效抑制DU 145细胞的增殖、侵袭及迁移,降低Wnt1、Wnt3a、β-catenin、APC mRNA和蛋白表达(P<0.01),升高GSK-3βmRNA及蛋白表达(P<0.01),降低p-GSK-3β蛋白表达(P<0.01),并呈剂量依赖性,且与ICG联用时效果最佳。结论益肾通癃汤可能是通过调控Wnt/β-catenin信号通路来发挥对前列腺癌的改善作用。 展开更多
关键词 益肾通癃汤 前列腺癌 wnt/β-catenin信号通路 DU 145细胞 增殖 侵袭 迁移
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中药靶向调控Wnt/β-catenin信号通路治疗糖尿病足溃疡的研究进展
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作者 李金鹏 郭婕 +1 位作者 何波 陈杰 《天然产物研究与开发》 北大核心 2025年第5期974-982,956,共10页
糖尿病溃疡(diabetic foot ulcer,DFU)是糖尿病常见并发症,表现为足部溃疡合并感染,治疗周期长,具有较高的致残率和病死率。目前,现代医学对DFU的治疗效果并不令人满意,随着中医药的不断发展,中医药的多靶点、多通路、多层次和多系统的... 糖尿病溃疡(diabetic foot ulcer,DFU)是糖尿病常见并发症,表现为足部溃疡合并感染,治疗周期长,具有较高的致残率和病死率。目前,现代医学对DFU的治疗效果并不令人满意,随着中医药的不断发展,中医药的多靶点、多通路、多层次和多系统的治疗优势使其在DFU的治疗中表现出来的效果越来越显著。现代研究表明,DFU的发生发展与多条信号通路相关,其中Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路与DFU的关系最为密切,通过调控相关信号蛋白与基因的表达而参与DFU的发生和发展。近年来研究发现,中药单体、提取物和复方可通过调控Wnt/β-catenin通路下游蛋白与基因的表达而发挥治疗DFU的作用,但缺乏系统的整理与归纳。基于此,文章梳理国内外相关文献,分析阐释中医药干预Wnt/β-catenin信号通路治疗DFU的作用机制,总结和归纳出靶向调控该信号通路的中药单体、提取物和复方等,以期为DFU临床治疗与药物研制提供参考。 展开更多
关键词 糖尿病足溃疡 wnt/β-catenin信号通路 中医药 研究进展
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基于Wnt/β-catenin通路探讨葛根芩连汤对结直肠肿瘤生长的影响和机制
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作者 蔡蓉 王上 +3 位作者 肖柳 周燕萍 胡作为 李云海 《科学技术与工程》 北大核心 2025年第8期3142-3151,共10页
基于Wnt/β-catenin通路探究葛根芩连汤(Gegen Qinlian Decoction,GQD)对结直肠癌的抗肿瘤作用及对胞质分裂的蛋白质调节因子1(protein regulator of cytokinesis 1,PRC1)核易位的影响。采用BALB/c裸鼠皮下接种CT26结直肠癌细胞株制备... 基于Wnt/β-catenin通路探究葛根芩连汤(Gegen Qinlian Decoction,GQD)对结直肠癌的抗肿瘤作用及对胞质分裂的蛋白质调节因子1(protein regulator of cytokinesis 1,PRC1)核易位的影响。采用BALB/c裸鼠皮下接种CT26结直肠癌细胞株制备结直肠肿瘤体内模型,分别按低(L-GQD)、中(M-GQD)及高(H-GQD)剂量连续灌药干预25 d,模型组(Control)作为空白对照,并记录裸鼠皮下肿瘤生长变化,于末次给药后取出肿瘤后观察。苏木精-伊红染色(hematoxylin-eosin staining,HE)、免疫组化(immunohistochemistry,IHC)和原位末端转移酶标记技术(terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated dUTP nick end labeling,TUNEL)检测肿瘤的增殖和凋亡情况,并通过qRT-PCR和蛋白质免疫印迹分析(western blot,WB)检测Wnt/β-catenin信号及其下游因子的表达变化;此外,WB检测GQD对PRC1的磷酸化水平其亚细胞定位的影响。结果表明:相较于Control组,GQD以剂量依赖方式抑制体内结直肠肿瘤的生长并提高其凋亡水平;IHC结果显示GQD下调了增殖相关蛋白细胞周期蛋白D1(Cyclind1)、增殖标志物Ki-67(Ki67)和血小板-内皮细胞黏附分子(CD31)的表达(P<0.05),同时促进了凋亡相关蛋白胱天蛋白酶3(Caspase 3)和胱天蛋白酶9(Caspase 9)的表达(P<0.05);进一步发现GQD可抑制Wnt/β-catenin信号的激活,推测可能与降低PRC1磷酸化水平并增加其核保留比例有关。GQD可显著抑制结直肠肿瘤的增殖并促进其凋亡,GQD还可抑制Wnt/β-catenin信号通路的激活,且可能与介导PRC1的核易位有关。 展开更多
关键词 葛根芩连汤(GQD) 结直肠癌(CRC) wnt/β-catenin信号 蛋白质调节因子1(PRC1)
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敲低趋化因子受体3通过减弱Wnt/β-catenin信号通路抑制肝母细胞瘤细胞增殖与迁移
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作者 丁道奎 袁宇航 +4 位作者 李延安 崔西春 杨合英 杜佳 苏阳光 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第12期2347-2354,共8页
目的 探讨CXC趋化因子受体3 (CXC chemokine receptor 3,CXCR3)在肝母细胞瘤(hepatoblastoma,HB)中的作用及机制。方法 收集16例HB组织及其癌旁组织,用免疫组化与Western blot法检测CXCR3蛋白的表达。HB细胞(Huh-6及HepT1)分别转染Con-s... 目的 探讨CXC趋化因子受体3 (CXC chemokine receptor 3,CXCR3)在肝母细胞瘤(hepatoblastoma,HB)中的作用及机制。方法 收集16例HB组织及其癌旁组织,用免疫组化与Western blot法检测CXCR3蛋白的表达。HB细胞(Huh-6及HepT1)分别转染Con-shRNA、CXCR3-shRNA1和CXCR3-shRNA2后,将其分为Con-shRNA组、CXCR3-shRNA1组和CXCR3-shRNA2组。CCK-8法和EdU染色法检测细胞增殖,划痕法和Transwell法检测细胞迁移与侵袭,Western blot法检测β-连环蛋白(β-catenin)、c-Myc、细胞周期蛋白D1 (cyclin D1)、基质金属蛋白酶(metallomatrix proteinase,MMP)7及MMP-9的表达。裸鼠异位移植;肿瘤实验检测各组细胞体内成瘤情况及瘤体体积,并用免疫组化检测瘤体组织中MMP-9和Ki67表达。结果 CXCR3在HB组织中表达上调(P<0.01)。与Con-shRNA比较,CXCR3-shRNA1组和CXCR3-shRNA2组Huh-6及HepT1细胞活力、增殖、迁移及侵袭能力均降低(P<0.01),Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白表达减弱(P<0.01),细胞移植瘤的瘤体生长缓慢且体积明显缩小(P<0.01),瘤体组织中MMP-9和Ki67表达降低(P<0.01)。结论 下调CXCR3可抑制HB细胞的增殖与迁移,其机制可能与减弱Wnt/β-catenin信号有关。 展开更多
关键词 肝母细胞瘤 趋化因子受体3 wnt/β-catenin信号通路 增殖 迁移 侵袭
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鸦胆子苦素A抑制Wnt/β-catenin抗结肠癌细胞增殖及转移的作用研究 被引量：1
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作者 盛钰翔 蒋捷 +5 位作者 苑家福 包小江 郑正 秦富豪 唐一石 江滨 《南京中医药大学学报》 北大核心 2025年第2期223-232,共10页
目的探究鸦胆子苦素A(BA)对结肠癌的抑制作用及机制。方法采用不同浓度BA(0、1、2、5、10、20、40、80μmol·L^(-1))作用于人结肠癌HT-29和HCT116细胞,利用细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞活力。通过流式细胞术、细胞划痕实验和Tran... 目的探究鸦胆子苦素A(BA)对结肠癌的抑制作用及机制。方法采用不同浓度BA(0、1、2、5、10、20、40、80μmol·L^(-1))作用于人结肠癌HT-29和HCT116细胞,利用细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞活力。通过流式细胞术、细胞划痕实验和Transwell实验,评估BA对细胞凋亡、细胞周期、侵袭和迁移能力的影响。采用分子对接模拟BA与GSK-3β蛋白的结合,并通过Western blot检测细胞周期、上皮间质转化(EMT)相关蛋白和Wnt/β-catenin信号通路蛋白表达。建立HT-29细胞皮下移植瘤小鼠模型,成瘤后,将小鼠随机分为3组,即空白组,BA低、高剂量组(0.1、0.2 mg·kg^(-1)),每组6只,给药19 d后,处死小鼠,分离肿瘤组织。观察各组肿瘤体积随时间变化;采用Ki67免疫组化法观察各组肿瘤组织细胞增殖情况;Western blot检测Wnt/β-catenin信号通路蛋白表达。结果与空白组相比,BA可显著抑制HT-29和HCT116细胞增殖,IC 50值为10.80μmol·L^(-1)和17.96μmol·L^(-1)。流式细胞术结果显示,BA显著诱导HT-29细胞凋亡(P<0.01,P<0.001),并阻滞细胞周期于S期,伴随周期相关蛋白CDK2和Cyclin A表达减少(P<0.05,P<0.01,P<0.001)。BA抑制细胞迁移和侵袭能力(P<0.05,P<0.01,P<0.001),降低EMT相关蛋白Snail、Vimentin、N-Cadherin的表达(P<0.01,P<0.001),并上调E-Cadherin蛋白表达。此外,BA抑制β-catenin和p-GSK3β蛋白的表达。Wnt激动剂LiCl可显著拮抗BA的抗结肠癌作用;Wnt抑制剂XAV939可增强BA的抗结肠癌作用。而体内实验中,与空白组相比,BA低、高剂量组肿瘤体积显著缩小(P<0.05,P<0.001)。免疫组化结果显示,与空白组相比,BA低、高剂量组肿瘤组织中Ki67表达显著降低(P<0.001)。Western blot结果进一步证明BA在体内抑制Wnt/β-catenin信号通路。结论BA抑制结肠癌HT-29细胞活力、细胞侵袭和迁移,诱导细胞凋亡并引发细胞周期停滞,并且在体内能显著抑制HT-29细胞皮下移植瘤的生长,其作用与抑制Wnt/β-catenin信号通路正相关。 展开更多
关键词 鸦胆子苦素A 结肠癌 增殖 转移 wnt/β-catenin
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