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LAIR-1通过阻断JAK2 V617F突变的人HEL细胞JAK/STAT和PI3K/AKT/mTOR信号通路抑制其增殖并促进其凋亡 被引量:2
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作者 樊翠 张娅薇 +3 位作者 杨蕊 吴肖婕 周嘉迪 薛江楠 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期207-214,共8页
目的研究人白细胞相关免疫球蛋白样受体1(LAIR-1)对Janus激酶2(JAK2)V617F突变的人急性髓系白血病HEL细胞JAK/信号转导子与转录激活子(STAT)和磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/AKT/mTOR)信号通路的调节作用,以... 目的研究人白细胞相关免疫球蛋白样受体1(LAIR-1)对Janus激酶2(JAK2)V617F突变的人急性髓系白血病HEL细胞JAK/信号转导子与转录激活子(STAT)和磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/AKT/mTOR)信号通路的调节作用,以及对细胞增殖和凋亡的影响。方法采用反转录PCR和基因测序鉴定JAK2 V617F突变;应用免疫共沉淀和Western blot法鉴定LAIR-1募集的蛋白酪氨酸磷酸酶(PTP)种类;采用CCK-8法检测HEL细胞的增殖;采用异硫氰酸荧光素标记的膜联素Ⅴ/碘化丙啶(annexinⅤ-FITC/PI)双标记结合流式细胞术检测HEL细胞的凋亡率;采用Western blot法检测JAK/STAT和PI3K/AKT/mTOR通路蛋白酪氨酸磷酸化水平及细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、Bcl2相关X蛋白(BAX)和B细胞淋巴瘤因子2(Bcl2)的蛋白表达。结果在JAK2 V617F突变的HEL细胞中,LAIR-1与其配体胶原蛋白结合后可募集含Src同源域2磷酸酶2(SHP-2);LAIR-1可以下调HEL细胞JAK2、STAT1、STAT3、STAT5、AKT和mTOR的蛋白酪氨酸磷酸化水平,并能够显著抑制cyclin D1和Bcl2的表达,而对BAX的表达水平未见显著影响;LAIR-1能够明显抑制HEL细胞的增殖,促进HEL细胞凋亡。结论在JAK2 V617F突变的人白血病HEL细胞中,LAIR-1可通过募集SHP-2抑制JAK/STAT和PI3K/AKT/mTOR信号通路的活化,进而抑制HEL细胞的增殖,促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 骨髓增殖性肿瘤 白细胞相关免疫球蛋白样受体1(lair-1) JAK2 V617F突变 Janus激酶(JAK) 信号转导子与转录激活子(STAT) 磷脂酰肌醇3激酶(PI3K) 蛋白激酶B(AKT)
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肿瘤患者外周血中抑制性受体LAIR-1表达升高 被引量:8
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作者 薛江楠 王春艳 +2 位作者 张晓姝 曹奇志 宿振国 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期373-374,377,共3页
目的:研究LAIR-1在肿瘤患者中的表达,探讨其在抗肿瘤免疫应答中的作用。方法:应用夹心ELISA检测肿瘤患者血清中可溶型sLAIR-1的水平;应用免疫荧光染色和流式细胞术分析,观察LAIR-1在患者PBMC中NK细胞、CD4+T细胞、CD8+T细胞和B细胞上的... 目的:研究LAIR-1在肿瘤患者中的表达,探讨其在抗肿瘤免疫应答中的作用。方法:应用夹心ELISA检测肿瘤患者血清中可溶型sLAIR-1的水平;应用免疫荧光染色和流式细胞术分析,观察LAIR-1在患者PBMC中NK细胞、CD4+T细胞、CD8+T细胞和B细胞上的表达。结果:肿瘤患者血清sLAIR-1水平为(4.6±3.2)μg/L,明显高于正常人血清sLAIR-1水平(3.9±3.0)μg/L,P<0.05。NK细胞,CD4+T细胞及CD8+T细胞表达LAIR-1水平上调。肺癌患者CD4/CD8比值明显低于正常人,B细胞百分率明显高于正常人。NK细胞、CD4+T细胞CD8+T细胞中LAIR-1的表达阳性率高于对照组。结论:在肿瘤患者LAIR-1分子表达水平高于正常人。肿瘤患者抑制性受体LAIR-1表达水平的上调可能与肿瘤的免疫逃逸有关。 展开更多
关键词 lair-1 CD305 抑制性受体 肿瘤
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9.1C3/LAIR-1的真核表达、纯化及单克隆抗体的制备和鉴定 被引量:3
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作者 薛江楠 欧阳为明 +6 位作者 贾卫 张新海 谢鑫 曹云新 宁双飞 李琦 金伯泉 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期614-616,共3页
目的 表达并纯化 9.1C3/LAIR 1胞膜外区与人的IgG1Fc段的融合蛋白 ,制备针对 9.1C3/LAIR 1胞膜外区的单克隆抗体 (mAb)。方法 构建真核表达载体 pIg/ 3C 9.1C3/LAIR 1,表达并纯化 9.1C3/LAIR 1 Fc融合蛋白。以 9.1C3/LAIR 1 Fc融合蛋... 目的 表达并纯化 9.1C3/LAIR 1胞膜外区与人的IgG1Fc段的融合蛋白 ,制备针对 9.1C3/LAIR 1胞膜外区的单克隆抗体 (mAb)。方法 构建真核表达载体 pIg/ 3C 9.1C3/LAIR 1,表达并纯化 9.1C3/LAIR 1 Fc融合蛋白。以 9.1C3/LAIR 1 Fc融合蛋白免疫BALB/c小鼠 ,制备。以间接免疫荧光染色和流式细胞术鉴定mAb的特异性 ,以竞争结合实验鉴定mAb识别LAIR 1的表位。结果表达并纯化了 9.1C3/LAIR 1 hIgFc融合蛋白 ,以其免疫BALB/c小鼠 ,获得 1株针对 9.1C3/LAIR 1胞膜外区的mAb 4H7。4H7对HL 6 0细胞和经 9.1C3/LAIR 1cDNA转染的COS7细胞上的表位识别 ,与已报道的抗 9.1C3mAb体不同。结论 成功地构建了 9.1C3/LAIR 1胞膜外区基因的真核表达载体 ,并表达纯化了 9.1C3/LAIR 1 hIgFc融合蛋白。获得一株针对 9.1C3/LAIR 1胞膜外区的mAb ,为进一步研究9.1C3/LAIR 展开更多
关键词 9.1C3/lair-1 真核表达 纯化 单克隆抗体 鉴定
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LAIR-1/LAIR-2(CD305/CD306)推定配体分布的研究 被引量:3
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作者 许晓光 王春燕 +4 位作者 谢鑫 薛江楠 欧阳为明 菅金龙 金伯泉 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期553-556,560,共5页
目的:研究LAIR-1(CD305)及LAIR-2(CD306)推定配体在多种细胞系上的分布,为鉴定LAIR-1/LAIR-2推定配体提供了实验依据。方法:建立稳定表达LAIR-1-Fc和LAIR-2-Fc融合蛋白的细胞系。以纯化的融合蛋白进行活细胞免疫荧光染色,用流式细胞仪检... 目的:研究LAIR-1(CD305)及LAIR-2(CD306)推定配体在多种细胞系上的分布,为鉴定LAIR-1/LAIR-2推定配体提供了实验依据。方法:建立稳定表达LAIR-1-Fc和LAIR-2-Fc融合蛋白的细胞系。以纯化的融合蛋白进行活细胞免疫荧光染色,用流式细胞仪检测LAIR-1及LAIR-2推定配体在多种细胞系膜表面的表达,并比较LAIR-1和LAIR-2推定配体的分布及可能结合的位点。结果:LAIR-1推定配体及LAIR-2推定配体均在人羊膜来源的上皮细胞系WISH上高表达,在人黑色素瘤细胞系C32、人胚肾上皮细胞系293T及人脐静脉内皮细胞系ECV304上有一定程度的表达。LAIR-1-Fc和LAIR-2-Fc融合蛋白与推定配体的结合,可分别被可同时识别LAIR-2和LAIR-1的单克隆抗体(mAb)FMU-LAIR-2.2和FMU-LAIR-2.1阻断。结论:LAIR-1推定配体及LAIR-2推定配体的分布基本一致,主要表达于WISH、C32、293T和ECV304细胞系。LAIR-1和LAIR-2可能拥有共同的配体。 展开更多
关键词 lair-1 lair-2 推定配体 融合蛋白 单克隆抗体 CD305 CD306
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4个品种猪血清中sLAIR-1表达量的ELISA检测 被引量:2
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作者 潘斌 杨辉 +5 位作者 郭亚芬 范晶 兰干球 蒋钦杨 朱祁明 王爱德 《南方农业学报》 CAS CSCD 2011年第1期102-104,共3页
【目的】进一步证实利用广西巴马小型猪建立异种器官移植供体模型的可行性。【方法】利用夹心ELISA方法分别检测广西巴马小型猪、长白猪、大约克猪及杜洛克猪血清中可溶型白细胞相关免疫球蛋白样受体1(sLAIR-1)含量,筛选出血清中sLAIR-... 【目的】进一步证实利用广西巴马小型猪建立异种器官移植供体模型的可行性。【方法】利用夹心ELISA方法分别检测广西巴马小型猪、长白猪、大约克猪及杜洛克猪血清中可溶型白细胞相关免疫球蛋白样受体1(sLAIR-1)含量,筛选出血清中sLAIR-1表达量最低的猪品种,为异种移植提供一定参考指标。【结果】所检测的4个不同品种猪血清中sLAIR-1的表达量分别为:广西巴马小型猪(2.39±0.20μmol/L)<大约克猪(3.51±0.28μmol/L)<长白猪(3.59±0.28μmol/L)<杜洛克猪(3.62±0.31μmol/L),且广西巴马小型猪血清中sLAIR-1的表达量显著低于长白猪、大约克猪、杜洛克猪3个品种(P<0.01)。【结论】广西巴马小型猪在异种移植中具有良好的先天优势,可能会成为异种移植的理想动物模型。 展开更多
关键词 slair-1 ELISA检测 异种移植 排斥反应
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广西巴马小型猪LAIR-1基因cDNA克隆及序列分析 被引量:4
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作者 黄云 张名嫒 +3 位作者 黎江 蒋钦杨 兰干球 郭亚芬 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期692-696,共5页
【目的】了解广西巴马小型猪白细胞相关免疫球蛋白样受体1(LAIR-1)基因的序列特征及基本结构,为以广西巴马小型猪作为人类器官模型及器官移植手术后的排斥反应研究奠定基础。【方法】根据GenBank上已登录的人和家鼠LAIR-1基因序列的保... 【目的】了解广西巴马小型猪白细胞相关免疫球蛋白样受体1(LAIR-1)基因的序列特征及基本结构,为以广西巴马小型猪作为人类器官模型及器官移植手术后的排斥反应研究奠定基础。【方法】根据GenBank上已登录的人和家鼠LAIR-1基因序列的保守区域,用Oligo设计合成1对引物,并以广西巴马小型猪总RNA为模板,对LAIR-1基因进行RT-PCR扩增,经PCR和双酶切鉴定后,进行测序及同源性比对分析。【结果】从广西巴马小型猪的外周血淋巴细胞中克隆获得LAIR-1基因cDNA序列,全长867bp;与人、家鼠和挪威鼠的同源性分别为79.3%、50.9%和49.9%。【结论】广西巴马小型猪LAIR-1基因cDNA序列与人类的亲缘关系最近,进一步验证了广西巴马小型猪作为人类器官模型研究的可行性。 展开更多
关键词 广西巴马小型猪 lair-1基因 CDNA 克隆 序列分析
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LAIR-1与TGF-β在口腔扁平苔藓患者外周血中表达的相关性研究 被引量:4
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作者 张立荟 李言君 +3 位作者 于平 付爱丽 薛江楠 刘玉三 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期760-763,共4页
目的:研究LAIR-1和TGF-β在口腔扁平苔藓(OLP)患者外周血中的表达情况,探讨LAIR-1和TGF-β对OLP患者免疫功能的影响。方法:采用流式细胞术检测LAIR-1在OLP患者(n=22)和健康人(n=22)外周血Treg上的表达水平,ELISA检测外周血TGF-β的水平... 目的:研究LAIR-1和TGF-β在口腔扁平苔藓(OLP)患者外周血中的表达情况,探讨LAIR-1和TGF-β对OLP患者免疫功能的影响。方法:采用流式细胞术检测LAIR-1在OLP患者(n=22)和健康人(n=22)外周血Treg上的表达水平,ELISA检测外周血TGF-β的水平。结果:OLP患者外周血CD4+Foxp3+Treg上LAIR-1阳性率高于健康人,TGF-β的水平亦高于健康人,LAIR-1在CD4+Foxp3+Treg上的表达水平和TGF-β的水平呈正相关(r=0.43,P<0.05)。结论:LAIR-1和TGF-β在OLP患者外周血中表达上调,提示LAIR-1和TGF-β可能参与了OLP的发病。 展开更多
关键词 口腔扁平苔藓 调节性T细胞 lair-1 TGF-Β 流式细胞术 ELISA
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