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人细小病毒B19中国株结构蛋白VP1的克隆及表达
被引量:
1
1
作者
陈彩平
张国成
+5 位作者
许东亮
汪萍
李茹英
黄莹
盛凯
李飚
《医学研究生学报》
CAS
2004年第5期385-387,共3页
目的 :构建人细小病毒B1 9中国株结构蛋白VP1基因片段的重组表达载体 ,探索大量表达VP1蛋白的最佳条件。 方法 :从该科保存的人细小病毒B1 9中国株结构蛋白VP1基因片段的重组克隆载体中获得VP1基因片段 ,将该片段亚克隆入表达载体pQE 3...
目的 :构建人细小病毒B1 9中国株结构蛋白VP1基因片段的重组表达载体 ,探索大量表达VP1蛋白的最佳条件。 方法 :从该科保存的人细小病毒B1 9中国株结构蛋白VP1基因片段的重组克隆载体中获得VP1基因片段 ,将该片段亚克隆入表达载体pQE 30 ,构建VP1 pQE 30原核表达载体 ,并转化至感受态大肠杆菌M1 5中 ,给予不同浓度诱导剂异丙基硫代 β D 半乳糖苷 (IPTG)及在不同温度下进行诱导表达。 结果 :成功构建了融合蛋白VP1 pQE 30的重组表达质粒 ,表达的融合蛋白经 1 5 %SDS PAGE电泳证实其相对分子质量为 2 2 0 0 0。IPTG浓度为 1mmol/L ,诱导表达 5h ,37℃下无表达 ,2 5℃下有表达 ;采用不同的IPTG浓度诱导表达 5h ,0 .0 5mmol/L至 1mmol/L均有表达 ,表达率相近 ,为 (1 6± 1 ) %。 结论 :获得人细小病毒B1 9中国株结构蛋白VP1基因片段的原核表达载体及其产物 。
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关键词
人细小病毒B19
vp1
基因片段
载体构建
诱导表达
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职称材料
题名
人细小病毒B19中国株结构蛋白VP1的克隆及表达
被引量:
1
1
作者
陈彩平
张国成
许东亮
汪萍
李茹英
黄莹
盛凯
李飚
机构
第四军医大学西京医院儿科
出处
《医学研究生学报》
CAS
2004年第5期385-387,共3页
基金
国家自然科学基金资助项目 (批准号 :3 9870 0 2 1)
文摘
目的 :构建人细小病毒B1 9中国株结构蛋白VP1基因片段的重组表达载体 ,探索大量表达VP1蛋白的最佳条件。 方法 :从该科保存的人细小病毒B1 9中国株结构蛋白VP1基因片段的重组克隆载体中获得VP1基因片段 ,将该片段亚克隆入表达载体pQE 30 ,构建VP1 pQE 30原核表达载体 ,并转化至感受态大肠杆菌M1 5中 ,给予不同浓度诱导剂异丙基硫代 β D 半乳糖苷 (IPTG)及在不同温度下进行诱导表达。 结果 :成功构建了融合蛋白VP1 pQE 30的重组表达质粒 ,表达的融合蛋白经 1 5 %SDS PAGE电泳证实其相对分子质量为 2 2 0 0 0。IPTG浓度为 1mmol/L ,诱导表达 5h ,37℃下无表达 ,2 5℃下有表达 ;采用不同的IPTG浓度诱导表达 5h ,0 .0 5mmol/L至 1mmol/L均有表达 ,表达率相近 ,为 (1 6± 1 ) %。 结论 :获得人细小病毒B1 9中国株结构蛋白VP1基因片段的原核表达载体及其产物 。
关键词
人细小病毒B19
vp1
基因片段
载体构建
诱导表达
Keywords
Human parvovirus B19
vp1 gene segment
Vector construction
Induced expression
分类号
Q754 [生物学—分子生物学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
人细小病毒B19中国株结构蛋白VP1的克隆及表达
陈彩平
张国成
许东亮
汪萍
李茹英
黄莹
盛凯
李飚
《医学研究生学报》
CAS
2004
1
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参考文献
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