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日本脑炎病毒WHe株全长cDNA的长链RT-PCR法的扩增 被引量:2
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作者 唐青海 乔宪凤 +6 位作者 马秋明 何维明 郑新民 刘西梅 安立国 颜艳 魏庆信 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2007年第8期19-23,共5页
为深入探索日本脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)WHe株的致病机理,并为新型疫苗研发提供技术支持,采用长链RT-PCR技术对其基因组全长cDNA进行了扩增鉴定,并对含复杂二级结构的3′末端和5′末端非编码区扩增片段进行了测序分... 为深入探索日本脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)WHe株的致病机理,并为新型疫苗研发提供技术支持,采用长链RT-PCR技术对其基因组全长cDNA进行了扩增鉴定,并对含复杂二级结构的3′末端和5′末端非编码区扩增片段进行了测序分析。扩增结果表明,扩增出的JEV WHe株基因组全长cDNA分子近11 kb大小;非编码区测序分析表明,扩增产物为WHe株所特有。提示长链RT-PCR法可用于JEV WHe株基因组全长cD-NA的扩增。 展开更多
关键词 日本脑炎病毒WHe株 全长CDNA 长链rt-pcr
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用连续长片段RT-PCR扩增HCV结构基因 被引量:1
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作者 高健 邓小昭 +3 位作者 王永山 刁振宇 周宗安 何亮 《医学研究生学报》 CAS 2001年第z1期51-53,共3页
目的与方法 :使用连续长片段 RT- PCR,扩增 HCV的结构基因。 结果 :利用连续长片段 RT- PCR技术 ,结合热启动和两段 PCR一次扩增出长 2 .3kb的 HCV结构基因和部分调控序列 ,并用测量分子质量和限制性酶切的方法进行了鉴定。 结论 :利... 目的与方法 :使用连续长片段 RT- PCR,扩增 HCV的结构基因。 结果 :利用连续长片段 RT- PCR技术 ,结合热启动和两段 PCR一次扩增出长 2 .3kb的 HCV结构基因和部分调控序列 ,并用测量分子质量和限制性酶切的方法进行了鉴定。 结论 :利用长片段 RT- PCR可一次扩增出 C、E1、E2基因和部分 5 - N TR。 展开更多
关键词 丙肝病毒 结构基因 rt-pcr 限制性内切酶
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定量RT-PCR检测肝细胞P450酶基因与苦参的关系 被引量:4
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作者 陈曙霞 谢龙山 +4 位作者 钱富荣 钱培丽 张君玮 邓中平 陈美芳 《上海第二医科大学学报》 CSCD 2004年第2期91-93,共3页
目的 明确肝脏微粒体中细胞色素P450酶活性与苦参中对抗CVB病毒的有效成分抗柯注射液药物剂量及用药时间的关系。方法 用定量RT-PCR法,在Begale犬长毒试验的不同时期(45、90、135 d),用不同剂量抗柯注射液(7.5、15、30 mg/kg)检测肝脏... 目的 明确肝脏微粒体中细胞色素P450酶活性与苦参中对抗CVB病毒的有效成分抗柯注射液药物剂量及用药时间的关系。方法 用定量RT-PCR法,在Begale犬长毒试验的不同时期(45、90、135 d),用不同剂量抗柯注射液(7.5、15、30 mg/kg)检测肝脏微粒体中细胞色素P450酶基因(β-actin/P450)的特异mRNA。结果 P450酶基因(β-actin/P450)特异信使核糖核酸mRNA随所用抗柯注射液剂量及用药时间而增加(P<0.01)。结论 P450的比值随药物剂量及时间延长而上升,可视为机体抵抗中毒而作出的一种适应性反应,可用于有关药物的毒理研究。 展开更多
关键词 定量rt-pcr 检测 肝细胞 P450酶基因 苦参
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奶牛Leptin长型受体(OB-Rb)竞争RT-PCR内标物的构建
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作者 张才 夏成 +2 位作者 牛淑玲 王哲 徐闯 《吉林畜牧兽医》 2005年第4期9-10,21,共3页
为了构建奶牛瘦素长型受体(OB-Rb)的定量PCR内标物。应用RT-PCR方法,克隆、测序287bp的OB-Rb片段,应用限制性内切酶BglⅡ插入470bp外源片段,构建了一个重组的竞争模板,为建立竞争性RT-PCR法检测奶牛瘦素长型受体mRNA奠定了基础。
关键词 rt-pcr Leptin长型受体(OB-Rb) 内标物
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大鼠耳蜗α_(1D)L-型电压门控钙通道组织特异性异构体的剪切方式及其意义 被引量:1
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作者 申卫东 曹菊阳 +2 位作者 胡吟燕 杨伟炎 韩东一 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期530-533,共4页
目的 研究α1DL 型电压门控钙通道基因在大鼠耳蜗的剪切 (splicing )方式及其意义。 方法 以显微解剖取材的大鼠耳蜗基底膜为起始材料 ,利用外显子特异性 (exon specific)引物的RT PCR扩增和序列测定确定耳蜗表达的α1DL 型电压门控... 目的 研究α1DL 型电压门控钙通道基因在大鼠耳蜗的剪切 (splicing )方式及其意义。 方法 以显微解剖取材的大鼠耳蜗基底膜为起始材料 ,利用外显子特异性 (exon specific)引物的RT PCR扩增和序列测定确定耳蜗表达的α1DL 型电压门控钙通道的剪切方式。结果 耳蜗表达的α1D钙通道cDNA剪切部位发生在功能域Ⅰ、Ⅱ之间的细胞内连接区和羧基末端。结论 大鼠耳蜗存在α1D钙通道组织特异性的剪切异构体 。 展开更多
关键词 耳蜗α1DL-型电压门控钙通道 选择性剪切 rtpcr 长距离rtpcr
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CCl_4肝纤维化大鼠功能性瘦素受体表达的动态变化 被引量:6
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作者 张鹏 马红 +1 位作者 王丽婷 贾继东 《首都医科大学学报》 CAS 2006年第4期464-468,共5页
目的明确瘦素受体(OB-R)在正常和CCl4肝纤维化大鼠肝组织的表达,观察功能性瘦素受体(OB-Rb)表达在肝纤维化进程中的动态变化,以探讨瘦素在肝纤维化形成中的作用机制。方法建立大鼠CCl4肝纤维化模型,采用免疫组织化学方法观察瘦素受体在... 目的明确瘦素受体(OB-R)在正常和CCl4肝纤维化大鼠肝组织的表达,观察功能性瘦素受体(OB-Rb)表达在肝纤维化进程中的动态变化,以探讨瘦素在肝纤维化形成中的作用机制。方法建立大鼠CCl4肝纤维化模型,采用免疫组织化学方法观察瘦素受体在大鼠肝组织的表达及变化;采用RT-PCR方法观察大鼠肝组织OB-Rb mRNA表达的动态变化。结果正常肝组织可见OB-R在汇管区和血管周围间质细胞的胞质和胞膜有少量表达;OB-R在模型大鼠汇管区、小叶内窦周及纤维间隔的表达明显增加。正常肝组织表达OB-Rb mRNA,不同时间点其表达量差异无统计学意义;模型组造模4 d后,OB-Rb mRNA表达水平即开始增加,随着肝纤维化的形成,OB-Rb mRNA表达逐渐增强,其表达水平与肝纤维化分期呈正相关性(rs=0.804,P=0.000)。结论在大鼠CCl4肝纤维化形成过程中,功能性瘦素受体的表达在肝损伤早期即明显增加,并随纤维化程度加重而逐步升高,从而促进肝脏纤维化的发生。 展开更多
关键词 肝纤维化 功能性瘦素受体 rtpcr 免疫组化
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长链非编码RNA GHET1在胃癌中的表达及其临床意义 被引量:8
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作者 夏英 严芝强 +2 位作者 毕瑩 赵娟娟 黄海 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2016年第9期1418-1421,共4页
目的:探讨长链非编码RNA GHET1(lnc RNA gastric carcinoma high expressed transcript 1,lnc RNA GHET1)在胃癌组织和不同分化程度人胃癌细胞中的表达情况,探索其在胃癌发生、发展过程中的作用。方法:收集35例胃癌组织及癌旁组织,培养... 目的:探讨长链非编码RNA GHET1(lnc RNA gastric carcinoma high expressed transcript 1,lnc RNA GHET1)在胃癌组织和不同分化程度人胃癌细胞中的表达情况,探索其在胃癌发生、发展过程中的作用。方法:收集35例胃癌组织及癌旁组织,培养5株分化程度不同胃癌细胞系和正常胃黏膜细胞GES-1,通过实时荧光定量PCR(quantitative real-time polymerase chain reaction,q RT-PCR)检测组织和细胞中GHET1的表达量,结合临床资料分析GHET1与胃癌临床病理特征的关系。结果 :GHET1在胃癌组织中表达增高,且与胃癌的侵袭和TNM分期相关(P<0.01);在分化程度不同的胃癌细胞中GHET1均有不同程度的表达上调(P<0.05),但GHET1表达水平与胃癌细胞的分化程度不相关(P>0.05)。结论:GHET1的在胃癌中表达上调,且与侵袭和TNM分期有关,可能成为辅助胃癌诊断和预后的潜在分子标志。 展开更多
关键词 胃肿瘤 长链非编码RNA GHET1 Q rt-pcr
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