离子液体中酵母细胞不对称还原合成(R)-3-羟基丁酸乙酯 被引量：9

1

作者 王普 周丽敏 +2 位作者 何军邀 祖蕾 孙立明 《高校化学工程学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2008年第5期833-838,共6页

采用疏水性离子液体1-丁基-3-甲基咪唑六氟磷酸盐([BMIM]PF6)与缓冲液构成的两相体系,在其中进行了膜醭毕赤酵母(Pichia membranaefaciens Hansen)细胞催化乙酰乙酸乙酯(EOB)不对称还原,制备光学活性的(R)-3-羟基丁酸乙酯(R-EHB)。系统... 采用疏水性离子液体1-丁基-3-甲基咪唑六氟磷酸盐([BMIM]PF6)与缓冲液构成的两相体系,在其中进行了膜醭毕赤酵母(Pichia membranaefaciens Hansen)细胞催化乙酰乙酸乙酯(EOB)不对称还原,制备光学活性的(R)-3-羟基丁酸乙酯(R-EHB)。系统地考察了一些因素,如离子液体浓度、缓冲液pH、辅助底物种类和浓度、反应温度、底物浓度、菌体浓度和转化时间等对该反应的影响。结果表明,上述因素对反应的产率和产物光学纯度影响较大。较佳的生物还原反应条件为:[BMIM]PF6体积分数20%,辅助底物为80g·L-1葡萄糖,pH7.8,反应温度30℃,底物乙酰乙酸乙酯浓度0.5mol·L-1,菌体浓度280g·L-1,转化18h。在此优化条件下,反应产率达72.2%,R-EHB对映体过量值为70.3%。与单一水相体系和正己烷-缓冲液两相体系相比较,在[BMIM]PF6-缓冲液两相体系中进行EOB的生物不对称还原可有效减少底物抑制,提高反应效率。 展开更多

关键词 离子液体 膜醭毕赤酵母 不对称还原 乙酰乙酸乙酯 (r)-3-羟基丁酸乙酯

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水/有机溶剂两相体系微生物催化不对称还原制备(S)-4-氯-3-羟基丁酸乙酯 被引量：7

2

作者 何军邀 孙志浩 +1 位作者 郑璞 韩丽 《高校化学工程学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2007年第2期310-315,共6页

研究了水/有机溶剂两相体系中,出芽短梗霉SW0202细胞催化4-氯乙酰乙酸乙酯(COBE)不对称还原制备(S)-4-氯-3-羟基丁酸乙酯(CHBE)的过程。有机溶剂的选择表明邻苯二甲酸二丁酯为该反应最适有机溶剂,与单一水相体系相比,水/邻苯二甲酸二丁... 研究了水/有机溶剂两相体系中,出芽短梗霉SW0202细胞催化4-氯乙酰乙酸乙酯(COBE)不对称还原制备(S)-4-氯-3-羟基丁酸乙酯(CHBE)的过程。有机溶剂的选择表明邻苯二甲酸二丁酯为该反应最适有机溶剂,与单一水相体系相比,水/邻苯二甲酸二丁酯两相体系能明显改善反应效率。通过系统考察一些因素如相体积比、振摇速度、反应温度和pH等对反应速度、摩尔转化率和产物光学纯度的影响发现,这些因素对还原反应的初速度和摩尔转化率有较明显的影响,而对产物的光学纯度影响不明显。优化后的条件为:水与有机溶剂的相体积比1:1,振摇速度180r·min-1,温度30℃,pH7.0。在该优化反应条件下,水/有机溶剂两相体系中出芽短梗霉SW0202细胞催化COBE生成(S)-CHBE不对称还原反应的最大摩尔转化率和产物的光学纯度分别达到了94.8%和97.9%e.e.,在用Na2CO3溶液控制水相pH7.0条件下,有机相中的产物浓度积累达58.2g·L-1。 展开更多

关键词 出芽短梗霉SW0202 不对称还原 4-氯乙酰乙酸乙酯 (S)-4-氯-3-羟基丁酸乙酯

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两相体系中固定化黏红酵母CCZU-G5催化合成(R)-2-羟基-4-苯基丁酸乙酯 被引量：3

3

作者 汪云 王利群 +3 位作者 何玉财 朱劼 卿青 王明慧 《化工进展》 EI CAS CSCD 北大核心 2013年第3期661-665,共5页

通过筛选得到一株高立体选择性还原2-氧代-4-苯基丁酸乙酯(OPBE)合成(R)-2-羟基-4-苯基丁酸乙酯[(R)-HPBE]的菌株并鉴定为黏红酵母。研究了在异辛烷/水两相体系中固定化黏红酵母CCZU-G5不对称还原OPBE合成(R)-HPBE的反应条件。结果表明... 通过筛选得到一株高立体选择性还原2-氧代-4-苯基丁酸乙酯(OPBE)合成(R)-2-羟基-4-苯基丁酸乙酯[(R)-HPBE]的菌株并鉴定为黏红酵母。研究了在异辛烷/水两相体系中固定化黏红酵母CCZU-G5不对称还原OPBE合成(R)-HPBE的反应条件。结果表明最适的反应条件为:在异辛烷比例为10%条件下,底物浓度为100mmol/L,催化剂用量为0.45 g/mL,辅底物为40 g/L的葡萄糖。在建立的反应体系中反应16 h,(R)-HPBE产率最高,达83.5%,e.e.值99%以上。固定化酵母经7次重复使用后,产率和e.e.值分别维持在70%和99%以上。 展开更多

关键词 两相体系 固定化 rHODOTOrULA mucilaginosaCCZU-G5 (r)-2-羟基-4-苯基丁酸乙酯 不对称还原

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固定化沙雷氏菌脂肪酶拆分(R,S)-2-羟基-4-苯基丁酸乙酯 被引量：2

4

作者 汪庆 王利群 +3 位作者 何玉财 顾雅平 王明慧 汪云 《精细化工》 EI CAS CSCD 北大核心 2012年第3期250-253,307,共5页

利用海藻酸钙-戊二醛交联法对本实验室筛选到的一株能选择性拆分(R,S)-2-羟基-4-苯基丁酸乙酯〔(R,S)-HPBE〕的沙雷氏菌脂肪酶进行固定化,并对固定化脂肪酶的酶活和拆分条件进行了研究。结果表明,最适反应温度为50℃,pH=7.0,底物浓度40 ... 利用海藻酸钙-戊二醛交联法对本实验室筛选到的一株能选择性拆分(R,S)-2-羟基-4-苯基丁酸乙酯〔(R,S)-HPBE〕的沙雷氏菌脂肪酶进行固定化,并对固定化脂肪酶的酶活和拆分条件进行了研究。结果表明,最适反应温度为50℃,pH=7.0,底物浓度40 mmol/L,ρ(酶液)=200 g/L,在该条件下,反应10 h后,(R)-2-羟基-4-苯基丁酸乙酯〔(R)-HPBE〕产率达93.4%,光学纯度(e.e.)为96.2%。连续反应12批次,固定化脂肪酶仍可使(R)-HPBE产率维持在80%以上。 展开更多

关键词 固定化脂肪酶 沙雷氏菌 (r)-2-羟基4-苯基丁酸乙酯 手性拆分 生物工程

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不对称合成(R)-2-羟基-4-苯基丁酸乙酯的动力学 被引量：4

5

作者 夏涛 任其龙 吴平东 《化工学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2006年第1期46-51,共6页

采用10,11-二氢辛可尼定修饰的Pt/Al2O3催化体系,不对称加氢合成(R)-2-羟基-4-苯基丁酸乙酯,研究了各因素影响反应速率和光学收率的一般规律.根据推测的机理,建立了未修饰体系中加氢反应的本征动力学模型,结合实验数据选定了较佳的模型... 采用10,11-二氢辛可尼定修饰的Pt/Al2O3催化体系,不对称加氢合成(R)-2-羟基-4-苯基丁酸乙酯,研究了各因素影响反应速率和光学收率的一般规律.根据推测的机理,建立了未修饰体系中加氢反应的本征动力学模型,结合实验数据选定了较佳的模型.假设不对称加氢反应总速率包括反应物在催化剂表面修饰位上和未修饰位上两部分的加氢速率,建立了不对称加氢的动力学模型,经拟合得到参数并进行了验证和讨论. 展开更多

关键词 不对称加氢 (r)-2-羟基-4-苯基丁酸乙酯 本征动力学

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外消旋体4-氯-3-羟基丁酸乙酯的化学合成 被引量：2

6

作者 唐功 《化学与生物工程》 CAS 2010年第12期18-19,30,共3页

采用化学方法,从4-氯乙酰乙酸乙酯(COBE)出发,合成得到4-氯-3-羟基丁酸乙酯(CHBE),收率为82.5%、纯度达96.779%,并对合成产物的结构进行了表征。

关键词 4-氯-3-羟基丁酸乙酯 化学合成

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固定化假单胞菌脂肪酶催化(R,S)-3-羟基丁酸乙酯转酯化拆分 被引量：4

7

作者 谷耀华 薛屏 +1 位作者 李鹏 夏维涛 《应用化工》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期1621-1626,共6页

设计制备出比表面积290.6 m2/g、平均孔径和孔体积16.5 nm和1.66 cm3的功能化介孔载体G-NH2-MCF,G-NH2-MCF共价结合假单胞菌脂肪酶(Pseudomonas sp Lipase,PSL),获得了固定化酶PSL/G-NH2-MCF。在甲苯溶剂中,乙酸乙烯酯作酰化剂,固定化酶... 设计制备出比表面积290.6 m2/g、平均孔径和孔体积16.5 nm和1.66 cm3的功能化介孔载体G-NH2-MCF,G-NH2-MCF共价结合假单胞菌脂肪酶(Pseudomonas sp Lipase,PSL),获得了固定化酶PSL/G-NH2-MCF。在甲苯溶剂中,乙酸乙烯酯作酰化剂,固定化酶PSL/G-NH2-MCF催化(R,S)-3-羟基丁酸乙酯的转酯化拆分反应,转化率为15.6%,(S)-3-羟基丁酸乙酯的对映体过量值(eeS)为17.8%,(R)-3-乙酸基丁酸乙酯对映体过量值(eeP)为96.2%,对映选择性参数E为61;而在相同条件下,使用游离酶PSL催化拆分反应,转化率、eeS、eeP和E值分别为2.16%,1.95%,88.2%和16,PSL经G-NH2-MCF固定化后催化性能得到明显提高。同时研究了固定化酶PSL/GNH2-MCF催化(R,S)-3-羟基丁酸乙酯转酯拆分的反应条件对转化率和对映选择性的影响规律。 展开更多

关键词 固定化假单胞菌脂肪酶 功能化介孔载体 ( r S)-3-羟基丁酸乙酯 转酯化拆分

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全细胞生物催化合成(R)-2-羟基-4-苯基丁酸乙酯 被引量：1

8

作者 汪庆 侯泽林 +5 位作者 王利群 齐丽英 庞铭鑫 陈瑶 张森 张建达 《精细化工》 EI CAS CSCD 北大核心 2018年第2期207-212,共6页

以2-羰基-4-苯基丁酸乙酯（OPBE）为碳源,从葡萄园土壤中筛选分离得到一株高选择性不对称还原OPBE为（R）-2-羟基-4-苯基丁酸乙酯[（R）-HPBE]的粘质红酵母（Rhodotorula mucilaginosa CCZU-G5）,利用1HNMR、GC-MS、液相色谱（LC）对产... 以2-羰基-4-苯基丁酸乙酯（OPBE）为碳源,从葡萄园土壤中筛选分离得到一株高选择性不对称还原OPBE为（R）-2-羟基-4-苯基丁酸乙酯[（R）-HPBE]的粘质红酵母（Rhodotorula mucilaginosa CCZU-G5）,利用1HNMR、GC-MS、液相色谱（LC）对产物结构进行了表征。构建了Rhodotorula mucilaginosa CCZU-G5全细胞催化还原OPBE合成（R）-HPBE的反应体系并对反应条件进行了优化。结果表明,最适催化反应条件为：在20 mL磷酸盐缓冲液（PBS）反应体系中,反应温度为35℃,pH=7.5,菌体质量浓度200 g/L,葡萄糖质量浓度30.0 g/L,金属离子Ca^（2＋）浓度3 mmol/L,底物OPBE浓度为20 mmol/L,反应时间12h,在此条件下,（R）-HPBE产率达82%,对映体过量值（e.e.）为99.9%。 展开更多

关键词 (r)-2-羟基-4-苯基丁酸乙酯 粘质红酵母 全细胞催化 不对称还原 筛选 生物工程

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面包酵母催化溶剂相不对称还原合成(R)-2-羟基-4-苯基丁酸乙酯 被引量：5

9

作者 石玉刚 方云 +1 位作者 蒋南 夏咏梅 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期66-69,73,共5页

研究有机溶剂中面包酵母催化2-氧代-4-苯基丁酸乙酯(OPBE)不对称还原合成(R)-2-羟基-4-苯基丁酸乙酯((R)-HPBE),分别考察有机溶剂种类、初始水含量、初始底物浓度、缓冲液pH值和添加剂等因素对OPBE转化率(COPBE)、HPBE产率(YHPBE)及(R)-... 研究有机溶剂中面包酵母催化2-氧代-4-苯基丁酸乙酯(OPBE)不对称还原合成(R)-2-羟基-4-苯基丁酸乙酯((R)-HPBE),分别考察有机溶剂种类、初始水含量、初始底物浓度、缓冲液pH值和添加剂等因素对OPBE转化率(COPBE)、HPBE产率(YHPBE)及(R)-HPBE的光学纯度(ee%)的影响。实验结果表明,乙醚为适宜反应介质,适宜pH为中性;反应初始水含量和初始底物浓度分别以w(H2O)=30 g/Lc、(OPBE)=5 mmol/L为佳。添加α-氯代苯乙酮(-αPC)对酵母预处理2 h后,(R)-HPBE的ee从35.52%提高为82.25%,COPBE和YHPBE分别从75.29%和46.02%提高到98.51%和75.82%。 展开更多

关键词 面包酵母 不对称还原 (r)-2-羟基-4-苯基丁酸乙酯 溶剂相

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(2S,3R)-2-羟基-3-氨基-4-苯基丁酸的合成方法进展

10

作者 黄一波 王亮 《化工进展》 EI CAS CSCD 北大核心 2013年第5期1127-1132,共6页

(2S,3R)-2羟基-3-氨基-4-苯基丁酸(AHPBA)是制备Bestatin、Phebestin和Probestin等氨肽酶N(Aminopeptide N)抑制剂的关键中间体。本文从氨基酸法(D-苯丙氨酸、L-天门冬氨酸、苹果酸二酯)、有机金属催化法(双功能铝配合物)、酶催化法(脂... (2S,3R)-2羟基-3-氨基-4-苯基丁酸(AHPBA)是制备Bestatin、Phebestin和Probestin等氨肽酶N(Aminopeptide N)抑制剂的关键中间体。本文从氨基酸法(D-苯丙氨酸、L-天门冬氨酸、苹果酸二酯)、有机金属催化法(双功能铝配合物)、酶催化法(脂肪酶和全细胞酶)以及其它方法对此中间体的合成方法及路线进行综述和分析。经比较,有机催化法、酶法以及苯乙酮法因其具有经济有利、条件温和或路线简单特点,具有潜在的工业化应用前景。同时,未来人们对AHPBA的合成开发将集中在对已有工艺路线的改进与优化。 展开更多

关键词 （2S 3r）-2-羟基-3-氨基-4-苯基丁酸 氨肽酶 抑制剂 合成方法

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负载型PVP-Pt催化剂催化2-氧-4-苯基丁酸乙酯的不对称加氢 被引量：1

11

作者 张学勤 何年志 +1 位作者 肖美添 叶静 《化工进展》 EI CAS CSCD 北大核心 2013年第11期2650-2654,2690,共6页

分别采用乙醇、甲醛、甲酸钠、硼氢化钠为还原剂,聚乙烯吡咯烷酮(PVP)为稳定剂,制备了负载型PVP-Pt/γ-Al2O3催化剂,考察了催化剂对2-氧-4-苯基丁酸乙酯不对称加氢合成(R)-2-羟基-4-苯基丁酸乙酯的性能,其中硼氢化钠作为还原剂时性能最... 分别采用乙醇、甲醛、甲酸钠、硼氢化钠为还原剂,聚乙烯吡咯烷酮(PVP)为稳定剂,制备了负载型PVP-Pt/γ-Al2O3催化剂,考察了催化剂对2-氧-4-苯基丁酸乙酯不对称加氢合成(R)-2-羟基-4-苯基丁酸乙酯的性能,其中硼氢化钠作为还原剂时性能最佳。研究了制备条件如还原温度、还原浓度、还原介质、PVP/Pt物质的量比以及反应溶剂、时间等因素对催化结果的影响。实验结果表明,在PVP/Pt=5∶1、还原温度0℃、NaBH4浓度为0.5 mol/L、乙醇作为还原介质制备的催化剂,对2-氧-4-苯基丁酸乙酯(EOPB)不对称加氢的转化率可达100%,对映选择性为76.8%e.e.。 展开更多

关键词 2-氧-4-苯基丁酸乙酯 辛可尼定 铂 不对称加氢 聚乙烯吡咯烷酮 (r)-2-羟基-4-苯基丁酸乙酯

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DMAP催化的17β-氰基-17α-羟基雄甾-4-烯-3-酮硅醚化反应研究

12

作者 吴庆安 吴红卫 柏挺 《应用化工》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期850-854,共5页

以4-二甲氨基吡啶(DMAP)为催化剂,氯甲基二甲基氯硅烷(CDCS)为硅醚化试剂,Et3N为缚酸剂,5℃反应2 h,对17β-氰基-17α-羟基雄甾-4-烯-3-酮(I)的17α-OH进行硅醚化保护,生成17β-氰基-17α-羟基雄甾-4-烯-3-酮-17-氯甲基二甲基硅醚(II)... 以4-二甲氨基吡啶(DMAP)为催化剂,氯甲基二甲基氯硅烷(CDCS)为硅醚化试剂,Et3N为缚酸剂,5℃反应2 h,对17β-氰基-17α-羟基雄甾-4-烯-3-酮(I)的17α-OH进行硅醚化保护,生成17β-氰基-17α-羟基雄甾-4-烯-3-酮-17-氯甲基二甲基硅醚(II)。研究水分、p H、DMAP用量及投料顺序对化合物(I)硅醚化反应的影响。在最佳反应条件下,化合物收率98.70%,纯度99.07%。 展开更多

关键词 17β-氰基-17α-羟基雄甾-4-烯-3-酮-17-氯甲基二甲基硅醚 17β-氰基-17α-羟基雄甾-4-烯-3-酮 硅醚化 4-二甲氨基吡啶

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(4R,5S)-5-羟基-4-甲基-3-己酮的合成

13

作者 吴江 匡晓帆 颜江 《化学研究与应用》 CAS CSCD 2000年第3期314-317,共4页

The synthesis of (4S,3S) 5 hydroxy 4 methylhexan 3 one has been accomplished by starting from D threonine.

关键词 (4r 5S)-5-羟基-4-甲基-3-己酮 合成 D-苏氨酸

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具有非对映选择性还原6-氰基-(5R)-羟基-3-羰基己酸叔丁酯活性的微生物菌株筛选与鉴定 被引量：3

14

作者 毛芳芳 王亚军 +2 位作者 罗希 魏积福 郑裕国 《化学与生物工程》 CAS 2012年第7期12-16,共5页

6-氰基-(3R,5R)-二羟基己酸叔丁酯是合成阿托伐他汀钙的关键手性前体。从自然环境中筛选得到一株具有非对映选择性还原6-氰基-(5R)-羟基-3-羰基己酸叔丁酯活性的菌株X25,结合表型特征、生理生化特征和分子遗传学鉴定,确定菌株X25属于季... 6-氰基-(3R,5R)-二羟基己酸叔丁酯是合成阿托伐他汀钙的关键手性前体。从自然环境中筛选得到一株具有非对映选择性还原6-氰基-(5R)-羟基-3-羰基己酸叔丁酯活性的菌株X25,结合表型特征、生理生化特征和分子遗传学鉴定,确定菌株X25属于季也蒙毕赤酵母(Pichia guilliermondii)。研究了P.guilliermondii X25静息细胞非对映选择性还原6-氰基-(5R)-羟基-3-羰基己酸叔丁酯制备6-氰基-(3R,5R)-二羟基己酸叔丁酯过程。结果表明,最佳催化条件为35℃、pH值7.0;在低底物转化率时,能够制备光学纯6-氰基-(3R,5R)-二羟基己酸叔丁酯。 展开更多

关键词 阿托伐他汀钙 6-氰基-(3r 5r)-二羟基己酸叔丁酯 羰基还原酶 季也蒙毕赤酵母

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迭代饱和突变提高卤醇脱卤酶HheA_(AM)催化制备6-氰基-3,5-二羟基己酸叔丁酯的酶活 被引量：2

15

作者 王露 徐刚 +1 位作者 杨立荣 吴坚平 《高校化学工程学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2018年第5期1127-1133,共7页

(3R,5R)-6-氰基-3,5-二羟基己酸叔丁酯(A7)是合成降血脂药物阿托伐他汀钙的关键手性中间体,利用卤醇脱卤酶催化(3R,5S)-6-氯-3,5-二羟基己酸叔丁酯(D3)的脱卤氰化反应制备A7是很有潜力的合成方法。现有研究存在的主要问题是卤醇脱卤酶... (3R,5R)-6-氰基-3,5-二羟基己酸叔丁酯(A7)是合成降血脂药物阿托伐他汀钙的关键手性中间体,利用卤醇脱卤酶催化(3R,5S)-6-氯-3,5-二羟基己酸叔丁酯(D3)的脱卤氰化反应制备A7是很有潜力的合成方法。现有研究存在的主要问题是卤醇脱卤酶种类少,对底物D3的催化活性很低,且鲜见有关脱卤酶分子改造提高其对D3催化活性的报道。本研究利用基因挖掘技术获得了一个对D3表现出较高催化活力的卤醇脱卤酶HheA_(AM) (来源于Agromycesmediolanus sp.),运用定向进化和半理性设计方法确定了4个影响酶活的关键位点(84、88、136、144位),然后使用迭代饱和突变(ISM)策略对这4个位点进行组合突变,突变株M4-HheA_(AM)(84S-88L-136T-144C)的比酶活为0.89U·mg-1,是野生型HheA_(AM)(Wt-HheA_(AM))的13倍,对D3的催化活性得到了显著的提高。 展开更多

关键词 卤醇脱卤酶 脱卤氰化反应 酶活 迭代饱和突变 (3r 5r)-6-氰基-3 5-二羟基己酸叔丁酯

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E.coli BL21(DE3)/pET28a(+)-cr羰基还原酶分离纯化及酶学性质研究 被引量：4

16

作者 王亚军 吴配配 +1 位作者 罗希 郑裕国 《高校化学工程学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2015年第3期607-615,共9页

利用强酸型阳离子交换层析和疏水作用层析技术,从实验室构建的羰基还原酶工程菌E.coli BL21(DE3)/p ET28a(+)-cr细胞中分离得到电泳纯NADP(H)依赖型的羰基还原酶,LC-MS-QTOF分析揭示其相对分子质量为35.4 k Da。该酶能不对称还原6-氰基-... 利用强酸型阳离子交换层析和疏水作用层析技术,从实验室构建的羰基还原酶工程菌E.coli BL21(DE3)/p ET28a(+)-cr细胞中分离得到电泳纯NADP(H)依赖型的羰基还原酶,LC-MS-QTOF分析揭示其相对分子质量为35.4 k Da。该酶能不对称还原6-氰基-(5R)-羟基-3-羰基己酸叔丁酯(CHOHB)、4-氯乙酰乙酸乙酯(COBE)合成阿托伐他汀关键手性合成子6-氰基-(3R,5R)-二羟基己酸叔丁酯、(S)-4-氯-3-羟基丁酸乙酯,对丙酮酸乙酯、丁二酮也表现出较高的还原能力。该羰基还原酶的最适作用条件为:30℃,p H7.5;且活性不依赖于金属离子。它催化CHOHB还原反应的最大反应速度vmax 54.3μmol·mg-1·min-1,KmCHOHB值4.4 mmol·L-1;作用于COBE时,最大反应速度vmax 36.5μmol·mg-1·min-1,KmCOBE值1.2×10-1 mmol·L-1。E.coli BL21(DE3)/p ET28a(+)-cr羰基还原酶在他汀手性侧链制造上具有广阔的应用前景。 展开更多

关键词 r-羰基还原酶 分离纯化 6-氰基-(3r 5r)-二羟基己酸叔丁酯 (S)-4-氯-3-羟基丁酸乙酯

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葡萄汁酵母SW-58不对称还原4，4，4-三氟乙酰乙酸乙酯的研究 被引量：1

17

作者 茆旭东 何军邀 +1 位作者 孙志浩 郑璞 《化学研究与应用》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期518-522,共5页

对实验室保藏菌种进行筛选,得到一株葡萄汁酵母Saccharoinyces uvarum SW-58,能够催化还原4,4,4-三氟乙酰乙酸乙酯生成(R)-4,4,4-三氟-3-羟基丁酸乙酯。在优化条件下,摩尔转化率达到77.0%,产物的对映体纯度88.9%e.e.,产物浓度达到15.7 g... 对实验室保藏菌种进行筛选,得到一株葡萄汁酵母Saccharoinyces uvarum SW-58,能够催化还原4,4,4-三氟乙酰乙酸乙酯生成(R)-4,4,4-三氟-3-羟基丁酸乙酯。在优化条件下,摩尔转化率达到77.0%,产物的对映体纯度88.9%e.e.,产物浓度达到15.7 g/L,产物浓度得到了显著的提高,达到优化前的3.3倍。 展开更多

关键词 (r)-4 4 4-三氟-3-羟基丁酸乙酯 4 4 4-三氟乙酰乙酸乙酯 葡萄汁酵母 羰基还原酶

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1,4-二氢吡喃类化合物与牛血清白蛋白相互作用的研究 被引量：1

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作者 范丽岩 廉淑芹 +1 位作者 宛瑜 吴翚 《分析科学学报》 CAS CSCD 2007年第6期669-672,共4页

用荧光光谱法研究了人体生理pH条件下,3-甲基-6-氨基-5-氰基-4-(2-邻羟基苯基)-1-苯基-1,4-二氢吡喃并[2,3-c]吡唑(I)与牛血清白蛋白(BSA)间的结合反应。获得了不同温度下I与BSA作用的结合常数K和结合位点数n,计算给体-受体间距离r为5.7... 用荧光光谱法研究了人体生理pH条件下,3-甲基-6-氨基-5-氰基-4-(2-邻羟基苯基)-1-苯基-1,4-二氢吡喃并[2,3-c]吡唑(I)与牛血清白蛋白(BSA)间的结合反应。获得了不同温度下I与BSA作用的结合常数K和结合位点数n,计算给体-受体间距离r为5.75 nm及能量转移效率E为0.74。证实了I与BSA的相互结合作用为单一的静态猝灭过程,结合力以疏水作用力为主。 展开更多

关键词 3-甲基-6-氨基-5-氰基-4-(2-邻羟基苯基)-1-苯基-1 4-二氢吡喃并[2 3-c]吡唑 牛血清白蛋白 荧光光谱

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乙醛还原酶工程菌的构建以及与葡萄糖脱氢酶工程菌偶联还原制备R-CHBE 被引量：2

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作者 金永琴 徐娴 +1 位作者 毛政 何冰芳 《化工进展》 EI CAS CSCD 北大核心 2010年第6期1120-1124,共5页

R-4-氯-3-羟基丁酸乙酯(R-CHBE)是多种药物的手性中间体,可由4-氯乙酰乙酸乙酯(COBE)立体选择性还原制备,而辅酶高效再生是绝大多数氧化还原酶实际应用的瓶颈。本研究从赭色掷抱酵母细胞ZJU010中克隆出NADPH依赖型乙醛还原酶ARI基因(al... R-4-氯-3-羟基丁酸乙酯(R-CHBE)是多种药物的手性中间体,可由4-氯乙酰乙酸乙酯(COBE)立体选择性还原制备,而辅酶高效再生是绝大多数氧化还原酶实际应用的瓶颈。本研究从赭色掷抱酵母细胞ZJU010中克隆出NADPH依赖型乙醛还原酶ARI基因(alr),构建重组大肠杆菌E.coliBL21/pET-alr,并与葡萄糖脱氢酶的基因工程菌(BL21/pET-gdh)进行偶联转化COBE。合理调整双菌双酶比例,当BL21/pET-alr和BL21/pET-gdh的湿菌重比为6∶1时,CHBE的产量达到最高,无需添加辅酶,转化22h摩尔转化率达到95.88%,产物R-CHBE的对映体过量值ee为96%,较好地实现了双酶偶联制备R-CHBE。 展开更多

关键词 NADPH再生 葡萄糖脱氢酶 乙醛还原酶 r-4-氯-3-羟基丁酸乙酯

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羰基还原酶工程菌构建及其应用于还原制备S-CHBE 被引量：3

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作者 张志斌 吴小芳 +4 位作者 杨慧林 颜日明 曾庆桂 汪涯 朱笃 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2013年第12期24-29,共6页

S-4-氯-3-羟基丁酸乙酯(S-CHBE)是多种药物的手性中间体,可由4-氯乙酰乙酸乙酯(COBE)不对称还原合成。该研究对来自Candida magnoliae AKU4643的S1羰基还原酶基因进行E.coli密码子优化,获得的S1'基因序列并进行人工合成,利用该序列... S-4-氯-3-羟基丁酸乙酯(S-CHBE)是多种药物的手性中间体,可由4-氯乙酰乙酸乙酯(COBE)不对称还原合成。该研究对来自Candida magnoliae AKU4643的S1羰基还原酶基因进行E.coli密码子优化,获得的S1'基因序列并进行人工合成,利用该序列构建了基因工程菌BL21(DE3)/pET28a-S1',提高了羰基还原酶表达效率,经诱导条件优化后羰基还原酶活力达11.49 U/mg蛋白;将BL21(DE3)/pET28a-S1'与E.coli BL21(DE3)/pET28a-gdh进行偶联,在单一水相中未添加辅酶条件下转化10 h,产物的摩尔转化率和对映体过量值(e.e.)分别达92.1%和100%。 展开更多

关键词 生物催化 羰基还原酶 密码子优化 诱导表达 S-4-氯-3-羟基丁酸乙酯

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