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‘无籽’瓯柑CsLTP和CsLOX基因的克隆与表达分析
被引量:
2
1
作者
张敏
刘志辉
+4 位作者
宋雪恩
朱咪咪
党婉誉
颜福花
张迟
《浙江农林大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第6期823-830,共8页
采用同源序列法,结合cDNA末端快速扩增(rapid amplification of cDNA ends,RACE)技术,克隆获得‘无籽’瓯柑Citrus suavissima‘Seedless’脂转移酶基因CsLTP和脂氧合酶基因CsLOX的全长cDNA序列;CsLTP cDNA全长667 bp,1个开放阅读框,编...
采用同源序列法,结合cDNA末端快速扩增(rapid amplification of cDNA ends,RACE)技术,克隆获得‘无籽’瓯柑Citrus suavissima‘Seedless’脂转移酶基因CsLTP和脂氧合酶基因CsLOX的全长cDNA序列;CsLTP cDNA全长667 bp,1个开放阅读框,编码215个氨基酸,与脐橙C.sinensis,粗柠檬C.jambhiri的脂转移蛋白的相似性分别为95%和60%;CsLOX cDNA全长2 915 bp,1个开放阅读框,编码895个氨基酸,与粗柠檬、美洲黑杨Populus deltoids的相似性分别为99%和51%。荧光定量聚合酶链式反应(PCR)表明:CsLTP和CsLOX的表达量均在‘无籽’瓯柑花粉粒形成期开始显著下降,并显著低于普通瓯柑Citrus suavissima。‘无籽’瓯柑花粉发育过程中油脂的转运及氧化的异常,可能成为‘无籽’瓯柑花粉败育的原因之一。
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关键词
园艺学
'无籽’瓯柑
花粉败育
CsLTP
CsLOX
荧光定量PCR
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职称材料
‘无籽’瓯柑小孢子母细胞减数分裂特性基因RAD51和MS1的表达差异分析
被引量:
1
2
作者
朱咪咪
张迟
+5 位作者
常爱玲
党婉誉
周彩红
俞狄虎
吴莹莹
张敏
《浙江农林大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第6期921-927,共7页
‘无籽’瓯柑Citrus suavissima‘Seedless’是野生型瓯柑Citrus suavissima的芽变,其花粉完全败育,败育起始于小孢子母细胞减数分裂形成四分体时期。研究‘无籽’瓯柑小孢子母细胞减数分裂异常的分子机制,有利于深入认识果树芽变的发...
‘无籽’瓯柑Citrus suavissima‘Seedless’是野生型瓯柑Citrus suavissima的芽变,其花粉完全败育,败育起始于小孢子母细胞减数分裂形成四分体时期。研究‘无籽’瓯柑小孢子母细胞减数分裂异常的分子机制,有利于深入认识果树芽变的发生机制。随机选择"无籽"瓯柑和瓯柑各3株,根据花蕾直径采集花粉母细胞时期(Ⅰ),四分体时期(Ⅱ),单核花粉粒时期(Ⅲ),双核花粉粒时期(Ⅳ)及花粉粒成熟期(Ⅴ)共5个时期的花蕾并分离花药,利用实时荧光定量聚合酶链式反应(q RT-PCR)分析减数分裂特性基因RAD51和MS1的相对表达量,3次重复。通过SPSS 16.0的最小显著差法(LSD)在0.01水平上进行各样品间的相对表达量差异分析。结果表明:RAD51和MS1基因的表达高峰均集中在第Ⅰ时期和第Ⅱ时期,且此时花药中的相对表达量均极显著(P<0.01)高于花蕾。第Ⅰ时期花药中,‘无籽’瓯柑RAD51的相对表达量为瓯柑的3.7倍,MS1可达300倍;但同时期花蕾中,RAD51的相对表达量仅1.1倍,MS1为140.0倍。‘无籽’瓯柑RAD51基因在第Ⅰ时期和第Ⅱ时期的相对表达量极显著(P<0.01)高于瓯柑,说明‘无籽’瓯柑小孢子母细胞和四分体时期的细胞内均存在DNA受损现象;‘无籽’瓯柑MS1基因在第Ⅰ时期的相对表达量极显著(P<0.01)高于瓯柑,但第Ⅱ时期极显著(P<0.01)低于瓯柑,推测‘无籽’瓯柑败育花粉的形成与MS1基因表达紊乱引起油脂分泌、转运异常密切相关。
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关键词
园艺学
'无籽’瓯柑
减数分裂
花蕾
花药
67851
MS1
实时荧光定量聚合酶链式反应
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职称材料
题名
‘无籽’瓯柑CsLTP和CsLOX基因的克隆与表达分析
被引量:
2
1
作者
张敏
刘志辉
宋雪恩
朱咪咪
党婉誉
颜福花
张迟
机构
浙江农林大学亚热带森林培育国家重点实验室培育基地
浙江省平湖市乍浦镇农技水利服务中心
浙江省丽水市林业科学研究院
浙江农林大学浙江省农产品品质改良技术研究重点实验室
出处
《浙江农林大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第6期823-830,共8页
基金
国家自然科学基金资助项目(31000897)
浙江省自然科学基金资助项目(Y3090494)
浙江农林大学科研发展基金资助项目(2007FR106)
文摘
采用同源序列法,结合cDNA末端快速扩增(rapid amplification of cDNA ends,RACE)技术,克隆获得‘无籽’瓯柑Citrus suavissima‘Seedless’脂转移酶基因CsLTP和脂氧合酶基因CsLOX的全长cDNA序列;CsLTP cDNA全长667 bp,1个开放阅读框,编码215个氨基酸,与脐橙C.sinensis,粗柠檬C.jambhiri的脂转移蛋白的相似性分别为95%和60%;CsLOX cDNA全长2 915 bp,1个开放阅读框,编码895个氨基酸,与粗柠檬、美洲黑杨Populus deltoids的相似性分别为99%和51%。荧光定量聚合酶链式反应(PCR)表明:CsLTP和CsLOX的表达量均在‘无籽’瓯柑花粉粒形成期开始显著下降,并显著低于普通瓯柑Citrus suavissima。‘无籽’瓯柑花粉发育过程中油脂的转运及氧化的异常,可能成为‘无籽’瓯柑花粉败育的原因之一。
关键词
园艺学
'无籽’瓯柑
花粉败育
CsLTP
CsLOX
荧光定量PCR
Keywords
horticulture
seedless Ougan (Citrus suavissima ‘Seedless’)
pollen abortion
CsLTP
CsLOX
real-time PCR
分类号
S603 [农业科学—园艺学]
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职称材料
题名
‘无籽’瓯柑小孢子母细胞减数分裂特性基因RAD51和MS1的表达差异分析
被引量:
1
2
作者
朱咪咪
张迟
常爱玲
党婉誉
周彩红
俞狄虎
吴莹莹
张敏
机构
浙江农林大学亚热带森林培育国家重点实验室培育基地
浙江农林大学浙江省农产品品质改良技术研究重点实验室
出处
《浙江农林大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第6期921-927,共7页
基金
国家自然科学基金资助项目(31000897)
浙江省自然科学基金资助项目(Y3090494)
+1 种基金
浙江省团队科技特派员服务计划项目(浙科发农〔2013〕215-122)
浙江省大学生科技创新活动计划项目(2016R412003)
文摘
‘无籽’瓯柑Citrus suavissima‘Seedless’是野生型瓯柑Citrus suavissima的芽变,其花粉完全败育,败育起始于小孢子母细胞减数分裂形成四分体时期。研究‘无籽’瓯柑小孢子母细胞减数分裂异常的分子机制,有利于深入认识果树芽变的发生机制。随机选择"无籽"瓯柑和瓯柑各3株,根据花蕾直径采集花粉母细胞时期(Ⅰ),四分体时期(Ⅱ),单核花粉粒时期(Ⅲ),双核花粉粒时期(Ⅳ)及花粉粒成熟期(Ⅴ)共5个时期的花蕾并分离花药,利用实时荧光定量聚合酶链式反应(q RT-PCR)分析减数分裂特性基因RAD51和MS1的相对表达量,3次重复。通过SPSS 16.0的最小显著差法(LSD)在0.01水平上进行各样品间的相对表达量差异分析。结果表明:RAD51和MS1基因的表达高峰均集中在第Ⅰ时期和第Ⅱ时期,且此时花药中的相对表达量均极显著(P<0.01)高于花蕾。第Ⅰ时期花药中,‘无籽’瓯柑RAD51的相对表达量为瓯柑的3.7倍,MS1可达300倍;但同时期花蕾中,RAD51的相对表达量仅1.1倍,MS1为140.0倍。‘无籽’瓯柑RAD51基因在第Ⅰ时期和第Ⅱ时期的相对表达量极显著(P<0.01)高于瓯柑,说明‘无籽’瓯柑小孢子母细胞和四分体时期的细胞内均存在DNA受损现象;‘无籽’瓯柑MS1基因在第Ⅰ时期的相对表达量极显著(P<0.01)高于瓯柑,但第Ⅱ时期极显著(P<0.01)低于瓯柑,推测‘无籽’瓯柑败育花粉的形成与MS1基因表达紊乱引起油脂分泌、转运异常密切相关。
关键词
园艺学
'无籽’瓯柑
减数分裂
花蕾
花药
67851
MS1
实时荧光定量聚合酶链式反应
Keywords
horticulture
Citrus suavissima ‘Seedless'
meiosis
flower buds
anther
RAD51
MS1
qRT-RCR
分类号
S666.1 [农业科学—果树学]
S759.3 [农业科学—森林经理学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
‘无籽’瓯柑CsLTP和CsLOX基因的克隆与表达分析
张敏
刘志辉
宋雪恩
朱咪咪
党婉誉
颜福花
张迟
《浙江农林大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2014
2
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
‘无籽’瓯柑小孢子母细胞减数分裂特性基因RAD51和MS1的表达差异分析
朱咪咪
张迟
常爱玲
党婉誉
周彩红
俞狄虎
吴莹莹
张敏
《浙江农林大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2016
1
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