为探究原料乳与不同生产工艺液态乳制品中牛乳外泌体典型表征的差异,探究生产工艺和胃肠道消化对于牛乳外泌体表征特性和转运能力的影响,本研究以生牛乳、市售巴氏杀菌乳和超高温瞬时灭菌(ultra-high temperature instantaneous sterili...为探究原料乳与不同生产工艺液态乳制品中牛乳外泌体典型表征的差异,探究生产工艺和胃肠道消化对于牛乳外泌体表征特性和转运能力的影响,本研究以生牛乳、市售巴氏杀菌乳和超高温瞬时灭菌(ultra-high temperature instantaneous sterilization,UHT)乳为研究对象,采用国际INFOGEST体外消化模型模拟胃肠道消化,等电点沉淀结合超速离心法提取牛乳外泌体,通过BCA蛋白含量试剂盒测定外泌体总蛋白浓度、透射电镜观察形态、纳米颗粒跟踪分析仪分析粒径分布,蛋白免疫印迹检测特征蛋白CD9、CD63和TSG101,综合评估外泌体的表征差异,并通过激光共聚焦显微镜观察奶牛乳腺上皮细胞(MAC-T)和大鼠小肠上皮细胞(IEC-6)摄取外泌体的情况。结果表明,等体积生牛乳、巴氏乳和UHT乳中提取到的外泌体总蛋白浓度依次递增且差异显著(P<0.05);生牛乳中外泌体粒径显著高于巴氏乳和UHT乳(P<0.05),但模拟胃肠道消化引起的外泌体粒径变化未见规律性;生产工艺和胃肠道消化会不同程度地降低外泌体表面蛋白完整性,UHT乳外泌体仅检测到TSG101和CD63的弱表达,消化后3种特征蛋白均无法检出;外泌体转运荧光示踪显示,牛乳外泌体进入两种靶标细胞的摄取效果无显著差异,经过生产加工或消化处理的外泌体仍可被IEC-6与MAC-T非特异性摄取。本研究证实生产工艺及胃肠道消化过程均能显著破坏牛乳外泌体表征特性,但并未完全阻断其转运能力,为功能性乳制品开发提供了理论依据。展开更多
牛乳灭菌方式主要为热处理,包括巴氏杀菌法和超高温灭菌法(Ultra high temperature,UHT)等,但使用以上方法得到的乳中均残留有耐热微生物及耐热酶,这些残留物在成品乳贮藏期间会降低其营养价值及安全性。灭菌乳中,尤其是UHT乳中残留耐...牛乳灭菌方式主要为热处理,包括巴氏杀菌法和超高温灭菌法(Ultra high temperature,UHT)等,但使用以上方法得到的乳中均残留有耐热微生物及耐热酶,这些残留物在成品乳贮藏期间会降低其营养价值及安全性。灭菌乳中,尤其是UHT乳中残留耐热微生物及耐热酶含量普遍较低,常规方法难以检出,相关研究主要聚焦于如何将其灭活,但对其残留及耐热机制探究有限。深入研究其残留及耐热机制,寻找相应控制措施,对保障灭菌乳品质十分必要。文章介绍了近年来对乳中耐热微生物、耐热酶的残留及耐热机制的研究,旨在为新型高效灭菌方式的开发提供理论基础,同时为灭菌乳品质控制提供参考。展开更多
文摘为探究原料乳与不同生产工艺液态乳制品中牛乳外泌体典型表征的差异,探究生产工艺和胃肠道消化对于牛乳外泌体表征特性和转运能力的影响,本研究以生牛乳、市售巴氏杀菌乳和超高温瞬时灭菌(ultra-high temperature instantaneous sterilization,UHT)乳为研究对象,采用国际INFOGEST体外消化模型模拟胃肠道消化,等电点沉淀结合超速离心法提取牛乳外泌体,通过BCA蛋白含量试剂盒测定外泌体总蛋白浓度、透射电镜观察形态、纳米颗粒跟踪分析仪分析粒径分布,蛋白免疫印迹检测特征蛋白CD9、CD63和TSG101,综合评估外泌体的表征差异,并通过激光共聚焦显微镜观察奶牛乳腺上皮细胞(MAC-T)和大鼠小肠上皮细胞(IEC-6)摄取外泌体的情况。结果表明,等体积生牛乳、巴氏乳和UHT乳中提取到的外泌体总蛋白浓度依次递增且差异显著(P<0.05);生牛乳中外泌体粒径显著高于巴氏乳和UHT乳(P<0.05),但模拟胃肠道消化引起的外泌体粒径变化未见规律性;生产工艺和胃肠道消化会不同程度地降低外泌体表面蛋白完整性,UHT乳外泌体仅检测到TSG101和CD63的弱表达,消化后3种特征蛋白均无法检出;外泌体转运荧光示踪显示,牛乳外泌体进入两种靶标细胞的摄取效果无显著差异,经过生产加工或消化处理的外泌体仍可被IEC-6与MAC-T非特异性摄取。本研究证实生产工艺及胃肠道消化过程均能显著破坏牛乳外泌体表征特性,但并未完全阻断其转运能力,为功能性乳制品开发提供了理论依据。
文摘牛乳灭菌方式主要为热处理,包括巴氏杀菌法和超高温灭菌法(Ultra high temperature,UHT)等,但使用以上方法得到的乳中均残留有耐热微生物及耐热酶,这些残留物在成品乳贮藏期间会降低其营养价值及安全性。灭菌乳中,尤其是UHT乳中残留耐热微生物及耐热酶含量普遍较低,常规方法难以检出,相关研究主要聚焦于如何将其灭活,但对其残留及耐热机制探究有限。深入研究其残留及耐热机制,寻找相应控制措施,对保障灭菌乳品质十分必要。文章介绍了近年来对乳中耐热微生物、耐热酶的残留及耐热机制的研究,旨在为新型高效灭菌方式的开发提供理论基础,同时为灭菌乳品质控制提供参考。
