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江苏省南通地区虾源弧菌的分子流行病学分析
1
作者 张鹏 吉星 +3 位作者 孙利厂 朱树娇 何涛 王冉 《江苏农业学报》 北大核心 2025年第9期1791-1802,共12页
为探明南通地区虾源弧菌的分子流行病学特征,本研究对在南通地区规模化虾养殖场中采集的560份病虾样本进行弧菌分离和鉴定,使用微量肉汤稀释法对分离株进行抗菌药物敏感性测试,基于全基因组测序技术分析分离株的耐药基因、毒力基因携带... 为探明南通地区虾源弧菌的分子流行病学特征,本研究对在南通地区规模化虾养殖场中采集的560份病虾样本进行弧菌分离和鉴定,使用微量肉汤稀释法对分离株进行抗菌药物敏感性测试,基于全基因组测序技术分析分离株的耐药基因、毒力基因携带情况,并通过多位点序列分型(MLST)和系统发育树分析南通地区虾源弧菌的流行病学特征。结果表明,560份病虾样本中共分离出119株弧菌,检出率为21.25%,其中,溶藻弧菌为优势亚型,占比达73.95%。弧菌分离株对氨苄西林、头孢氨苄和多西环素的耐药率较高,分别为73.11%、58.82%、45.38%。弧菌分离株中共检测到47种耐药基因,其中tet(34)、tet(35)、bla ampC检出率较高,分别为97.48%、88.24%、61.34%。分离株平均携带33个毒力基因,携带可编码细胞毒性的关键外毒素基因hlyA和rtxA的分离株分别为1株和7株。分离株ST型具有多样性,其中ST388为相对流行的ST型。溶藻弧菌分离株划分为1个进化分支,不同来源菌株之间的遗传进化关系较近;分离株85和分离株4与人类医疗临床来源的溶藻弧菌菌株有着高度同源性。本研究结果可为南通地区水产弧菌的有效防治提供科学依据。 展开更多
关键词 弧菌 虾 耐药基因 毒力基因 进化分型
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虾肝肠胞虫Septin的生物信息学分析及其在增殖中的潜在作用
2
作者 张晟 乔毅 +4 位作者 曹晓慧 张雷霆 成婕 吴海龙 沈辉 《南京师大学报(自然科学版)》 北大核心 2025年第1期66-74,共9页
虾肝肠胞虫(Enterocytozoon hepatopenaei,EHP)是对虾养殖业的重要病原体之一,其裂殖增殖的分子机制尚不明确.本研究通过克隆和分析EHP裂殖期Septin蛋白EhpSeptin的基因序列、表达及定位,初步阐释了该基因在EHP裂殖中的潜在作用.结果表... 虾肝肠胞虫(Enterocytozoon hepatopenaei,EHP)是对虾养殖业的重要病原体之一,其裂殖增殖的分子机制尚不明确.本研究通过克隆和分析EHP裂殖期Septin蛋白EhpSeptin的基因序列、表达及定位,初步阐释了该基因在EHP裂殖中的潜在作用.结果表明,EhpSeptin基因序列编码265个氨基酸的蛋白质,分子量约30.4 kDa,等电点4.75.构建EhpSeptin原核表达载体,获得高纯度表达蛋白.Western blotting验证了表达蛋白与天然蛋白一致.此外,本研究建立了EhpSeptin基因显色原位杂交技术(chromogenic in situ hybridization,CISH),分析感染对虾样本中EhpSeptin的表达模式.结果显示,EhpSeptin的表达水平随EHP感染强度增加而升高,表明其参与了EHP的裂殖过程.本研究首次报道了EHP裂殖相关蛋白EhpSeptin的克隆、表达、定位及其在EHP感染过程中的变化规律,为探究EHP裂殖分子机制和防治该病原体的感染提供了理论基础和技术手段. 展开更多
关键词 虾肝肠胞虫 SEPTIN 原核表达 显色原位杂交
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2022—2023年虾类传染性肌坏死病毒(IMNV)流行情况调查
3
作者 徐瑞东 夏继涛 +5 位作者 李萍 余星潼 姚亮 李文强 贾田畅 张庆利 《渔业科学进展》 北大核心 2025年第1期183-193,共11页
2020年,由传染性肌坏死病毒(infectious myonecrosis virus,IMNV)引起的虾类传染性肌坏死(infectious myonecrosis,IMN)首次在中国暴发,使对虾养殖产业遭受了严重的经济损失。为掌握近年IMNV在我国的流行情况,2022—2023年间,本研究在... 2020年,由传染性肌坏死病毒(infectious myonecrosis virus,IMNV)引起的虾类传染性肌坏死(infectious myonecrosis,IMN)首次在中国暴发,使对虾养殖产业遭受了严重的经济损失。为掌握近年IMNV在我国的流行情况,2022—2023年间,本研究在全国主要虾类养殖地区开展了IMNV流行病学调查,并利用分子生物学、组织病理学等方法对所采集的样本进行分析。在山东、江苏、浙江、海南、天津、广西、福建、河北等地开展流行病学调查并采集样品829份,所采集的样品包括凡纳对虾(Penaeus vannamei)、日本对虾(P.japonicus)、中国对虾(P.chinensis)与罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii)等主要养殖虾类以及饵料、其他水产经济物种和养殖用水。采用TaqMan探针实时荧光定量PCR(TaqMan RT-qPCR)对所采集的样品进行了IMNV检测。调查中发现,患病对虾腹节或尾节骨骼肌出现IMN感染样的典型斑块状或弥散性白色坏死症状,凡纳对虾、日本对虾、中国对虾等主要养殖虾类中均可检测到IMNV阳性,阳性样品主要来自环渤海地区的山东、河北、天津等省市;除养殖虾类外,采集的虾类鲜活饵料(主要是中华卤虫Artemia sinica)和养殖场抽滤的近海海水中也可检测到IMNV阳性。2022年所采集样品中IMNV阳性检出率为6.27%(23/367),2023年所采集样品中IMNV阳性检出率为15.80%(73/462)。对TaqManRT-qPCR检测呈阳性的样品进行组织病理与原位杂交分析,病虾腹节和尾节发白肌肉组织切片中可见IMNV感染特征性凝固状坏死,且发生病理损伤的肌肉组织中有明显的IMNV探针蓝紫色杂交信号。本研究表明,2022—2023年间我国多省市的养殖对虾、生物饵料及近海海水中存在较高的IMNV阳性检出率,虾类养殖过程中需加强IMNV检测与监测预警,以降低其进一步扩散与流行危害风险。 展开更多
关键词 传染性肌坏死病毒(IMNV) 流行病学 TaqManRT-qPCR 组织病理 组织原位杂交
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虾虹彩病毒病防控技术
4
作者 薛婷 王欢 +3 位作者 孙旋辉 张霖 何义进 张成锋 《科学养鱼》 2025年第10期57-58,共2页
虹彩病毒是一种广泛存在于水生动物体内,危害较大的病毒。目前,虹彩病毒已成为一些鱼类、两栖类和甲壳类动物的新型病原体,对水产养殖业中高经济附加值的特色品种危害尤为严重,因此越发引起人们的关注和重视。虾虹彩病毒感染对象主要有... 虹彩病毒是一种广泛存在于水生动物体内,危害较大的病毒。目前,虹彩病毒已成为一些鱼类、两栖类和甲壳类动物的新型病原体,对水产养殖业中高经济附加值的特色品种危害尤为严重,因此越发引起人们的关注和重视。虾虹彩病毒感染对象主要有南美白对虾、中国对虾、罗氏沼虾、红螯螯虾、克氏原螯虾和青虾等,甚至在梭子蟹、冰冻南极磷虾和沙蚕体内也有检出阳性。近年来,在我国各种虾的主养区如江苏扬泰地区主养的罗氏沼虾,以及华南珠三角、汕尾、饶平、福建等地主养的南美白对虾,均出现了虹彩病毒病,且发病情况严重,发病率高达60%以上,是当前威胁罗氏沼虾和南美白对虾养殖产业的重要病害之一。本文将围绕虾虹彩病毒病的感染症状、发病时间和防治手段几方面进行梳理,以期为相关养殖户提供技术指导和参考。 展开更多
关键词 中国对虾 虹彩病毒 罗氏沼虾 防控技术
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罗氏沼虾养殖防灾减灾防病技术措施(下)
5
作者 李风波 彭菲 +4 位作者 李波 程海华 慎佩晶 张海琪 高强 《科学养鱼》 2025年第8期1-2,共2页
6.实行分级养殖罗氏沼虾规格整齐度对产量有重要影响。为提高养殖效益,建议具备条件的养殖场采用分级养殖模式。具体操作如下:首先,将淡化仔虾放入标粗池,进行30~60天标粗。标粗期结束前对幼虾进行病原检测,观察其生长情况,淘汰质量差... 6.实行分级养殖罗氏沼虾规格整齐度对产量有重要影响。为提高养殖效益,建议具备条件的养殖场采用分级养殖模式。具体操作如下:首先,将淡化仔虾放入标粗池,进行30~60天标粗。标粗期结束前对幼虾进行病原检测,观察其生长情况,淘汰质量差的个体。然后,从标粗池中选取大小均匀、外观健康、游动活跃的SPF无特定病原体幼虾,转移至暂养池中继续培育约30天。暂养池中降低养殖密度,以促进幼虾生长。暂养期加强病原检测和健康观察,进一步筛选优质SPF幼虾作为成虾养殖苗种。 展开更多
关键词 病原检测 暂养池 罗氏沼虾 分级养殖
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白斑综合征病毒膜囊蛋白VP28原核表达及其多克隆抗体制备
6
作者 卢媛圆 刘亚 房志家 《现代农业科技》 2025年第21期154-156,161,共4页
白斑综合征病毒(WSSV)是影响我国水产养殖业的主要病毒之一,需要针对这一病毒探索快速检测技术。通过克隆对虾白斑综合征病毒膜囊蛋白VP28基因并构建原核表达载体,对大肠杆菌进行表达后,将纯化的重组VP28蛋白作为抗原来免疫兔,以制备特... 白斑综合征病毒(WSSV)是影响我国水产养殖业的主要病毒之一,需要针对这一病毒探索快速检测技术。通过克隆对虾白斑综合征病毒膜囊蛋白VP28基因并构建原核表达载体,对大肠杆菌进行表达后,将纯化的重组VP28蛋白作为抗原来免疫兔,以制备特异性VP28多克隆抗体和单克隆抗体,最终筛选出多抗SBI210026。通过ELISA检测,抗血清的效价远高于1∶64000,表明免疫反应较强,且抗体的特异性较高。 展开更多
关键词 白斑综合征病毒(WSSV) VP28 ELISA 多克隆抗体
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罗氏沼虾育苗期优势细菌调查及耐药性分析
7
作者 郭琦 吕孙建 +2 位作者 沈卫锋 朱东敏 刘莉 《浙江农业科学》 2025年第8期1840-1845,共6页
育苗期的条件致病菌感染是影响罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii)出苗率的重要原因之一。本研究从4个育苗场中定期采集幼体、虾苗及其养殖水,采用琼脂平板分离培养后对样品的细菌数量进行调查,对分离到的优势细菌进行16S rRNA序列分... 育苗期的条件致病菌感染是影响罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii)出苗率的重要原因之一。本研究从4个育苗场中定期采集幼体、虾苗及其养殖水,采用琼脂平板分离培养后对样品的细菌数量进行调查,对分离到的优势细菌进行16S rRNA序列分析,并对优势菌群进行耐药性分析。结果显示,育苗期间虾苗及幼体中的细菌数量处于较高水平,优势细菌的变化与季节存在一定联系,其中产气克雷伯氏菌、弧菌属和气单胞菌属细菌较为普遍。优势菌群的耐药性分析结果显示,不同育苗场虾苗中的优势菌对头孢氨苄和利福平表现出耐药性,对其他测试抗生素的敏感性存在差异。本研究结果为罗氏沼虾育苗期细菌感染的针对性防控提供了参考依据。 展开更多
关键词 罗氏沼虾 育苗期 优势菌 药敏分析 16S rRNA
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安徽蚌埠池塘螃蟹病害发生特点与防治措施 被引量：1
8
作者 刘会成 《农业工程技术》 2025年第9期127-128,共2页
五河螃蟹作为安徽省蚌埠市特产,是中国国家地理标志产品之一,在五河县地区养殖面积较大。近年来,随着社会经济不断发展,五河县的螃蟹养殖面积与产量也在不断提升。随着养殖投入品的增加,池塘中的腐殖质、饲料残饵、螃蟹粪便等有机物增多... 五河螃蟹作为安徽省蚌埠市特产,是中国国家地理标志产品之一,在五河县地区养殖面积较大。近年来,随着社会经济不断发展,五河县的螃蟹养殖面积与产量也在不断提升。随着养殖投入品的增加,池塘中的腐殖质、饲料残饵、螃蟹粪便等有机物增多,对池塘水质造成不良影响,导致五河县螃蟹发病率增加、螃蟹生产性能下降,严重影响螃蟹养殖经济效益。该文以五河县地区为例,介绍了螃蟹病害的发生特点及防治措施,旨在为相关从业人员提供参考。 展开更多
关键词 五河县 螃蟹病害 发生特点 防治措施
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白斑综合症病毒(WSSV)的宿主调查 被引量：53
9
作者 雷质文 黄倢 +2 位作者 史成银 张立敬 俞开康 《海洋与湖沼》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期250-258,共9页
用地高辛 (DIG)标记的WSSVDNA探针斑点杂交与原位杂交技术 ,在中国对虾、斑节对虾、南美白对虾、刀额新对虾、脊尾白虾、天津厚蟹、日本大眼蟹体内检测到了WSSV ,它们是WSSV的天然宿主 ;在经人工感染的哈氏美人虾、短脊鼓虾、克氏原螯... 用地高辛 (DIG)标记的WSSVDNA探针斑点杂交与原位杂交技术 ,在中国对虾、斑节对虾、南美白对虾、刀额新对虾、脊尾白虾、天津厚蟹、日本大眼蟹体内检测到了WSSV ,它们是WSSV的天然宿主 ;在经人工感染的哈氏美人虾、短脊鼓虾、克氏原螯虾、肉球近方蟹、滕壶体内检测到了WSSV ;在球形侧腕水母、病虾池的桡足类等浮游生物、卤虫无节幼体以及人工浸泡感染卤虫成体体内没有检测到WSSV。经原位杂交检测 ,虾类的甲壳下上皮、胃上皮、附肢、造血组织、鳃等组织器官均可被WSSV侵染 ,其中甲壳下上皮和鳃对WSSV敏感 ;蟹类的甲壳下上皮和鳃对WSSV敏感 ;在中国对虾、南美白对虾、脊尾白虾、注射感染的克氏原螯虾的精巢中 ,精荚的结缔组织细胞和血细胞呈阳性 ,在中国对虾、脊尾白虾以及注射感染的短脊鼓虾的卵巢中 ,结缔组织细胞和滤泡细胞被WSSV感染。 展开更多
关键词 白斑综合症病毒 核酸探针 宿主 南美白对虾 中国对虾 斑节对虾
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固定化微藻对改善养殖水质和增强对虾抗病力的研究 被引量：30
10
作者 黄翔鹄 李长玲 +2 位作者 郑莲 刘楚吾 陈永任 《海洋通报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期57-62,共6页
引入固定化波吉卵囊藻(Oocystis borgei)和微绿球藻(Nannochloris oculata)于凡纳对虾(Penaeus vannamei)养殖环境中,检测与凡纳对虾抗病力有关因子的变化和测定主要水质因子,研究固定化微藻改善养殖水质对对虾抗病力的影响。结果表明:... 引入固定化波吉卵囊藻(Oocystis borgei)和微绿球藻(Nannochloris oculata)于凡纳对虾(Penaeus vannamei)养殖环境中,检测与凡纳对虾抗病力有关因子的变化和测定主要水质因子,研究固定化微藻改善养殖水质对对虾抗病力的影响。结果表明:引入固定化波吉卵囊藻和微绿球藻的藻珠能改善水质,凡纳对虾的血细胞数目,血清蛋白的含量以及酚氧化酶、溶菌酶、抗菌酶的活性都较对照组显著提高。固定化波吉卵囊藻对氨氮的吸收能力较强,而固定化微绿球藻对亚硝酸盐氮的吸收能力较强。试验期间固定化波吉卵囊藻和微绿球藻的褐藻胶藻珠中的生物量分别增加了约10倍和17倍,证明它们的生理活性不会因固定化而受干扰。因此,固定化微藻可应用于虾池微藻生态调控防病。 展开更多
关键词 固定化微藻 褐藻胶藻珠 微藻生态调控 抗病力 凡纳对虾
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二温式多重PCR检测鉴别对虾白斑综合征病毒(WSSV)和传染性皮下及造血器官坏死病毒(IHHNV)的研究与应用 被引量：19
11
作者 谢芝勋 庞耀珊 +2 位作者 刘加波 邓显文 唐小飞 《海洋科学》 CAS CSCD 北大核心 2005年第12期9-12,24,共5页
建立了一种同时检测对虾白斑综合征病毒(WSSV)、传染性皮下和造血器官坏死病毒(IHHNV)的二温式多重PCR技术。根据基因库中WSSV(AF369029)和IHHNV(NC002190)基因序列,设计了两对分别与WSSV和IHHNV某段保守基因序列互补的引物,用这两对引... 建立了一种同时检测对虾白斑综合征病毒(WSSV)、传染性皮下和造血器官坏死病毒(IHHNV)的二温式多重PCR技术。根据基因库中WSSV(AF369029)和IHHNV(NC002190)基因序列,设计了两对分别与WSSV和IHHNV某段保守基因序列互补的引物,用这两对引物对同一样品中的WSSV和IHHNV DNA模板进行多重PCR扩增,结果均同时得到了两条大小与实验设计相符的593 bp(WSSV)和356 bp(IHHNV)特异性多重PCR扩增条带,而对其他对虾疾病病原的PCR扩增结果均为阴性;敏感性测定结果表明,该多重PCR技术最低能检测到WSSV和IHHNV DNA各100 pg。用该多重PCR对400份临床病料进行检测,结果230份检出WSSV,阳性率57.5%;96份检出IHHNV,阳性率24%;56份同时检出WSSV和IHHNV,阳性率14%。18份为阴性,阴性率为4.5%。结果提示了WSSV和IHHNV广泛存在于中国南方的养殖对虾中,作者建立的二温式多重PCR可以用于这两种病毒的临床快速检测和鉴别诊断。 展开更多
关键词 多重聚合酶链式反应 检测 对虾 白斑综合征病毒(WSSV) 传染性皮下和造血器官坏死病毒(IHHNV)
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罗氏沼虾诺达病毒TAS-ELISA检测法的建立及应用研究 被引量：18
12
作者 钱冬 刘问 +2 位作者 潘晓艺 曹铮 于涟 《浙江大学学报（农业与生命科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期377-382,共6页
罗氏沼虾肌肉白浊病(Whitish muscle diseases ofMacrobrachium rosenbergii)是近年来流行于罗氏沼虾苗种阶段的严重疾病,该病病原已确定为罗氏沼虾诺达病毒(Macrobrachium rosenbergiiNodavirus,MrNV).作者在病毒超离提纯的基础上,制... 罗氏沼虾肌肉白浊病(Whitish muscle diseases ofMacrobrachium rosenbergii)是近年来流行于罗氏沼虾苗种阶段的严重疾病,该病病原已确定为罗氏沼虾诺达病毒(Macrobrachium rosenbergiiNodavirus,MrNV).作者在病毒超离提纯的基础上,制备了罗氏沼虾诺达病毒兔抗血清,并应用抗罗氏沼虾诺达病毒单克隆抗体2B5,建立了三抗体夹心酶联免疫检测方法(TAS-ELISA).TAS-ELISA最适反应条件为:兔抗体以1μg/mL包板,小鼠单抗2B5的工作浓度为1∶50000,该法检测MrNV的灵敏度达0.98 ng,对WSSV、TSV及其他细菌感染死亡的罗氏沼虾苗没有非特异性反应.通过对2000—2002年病虾及疑似病虾的病毒检测,表明TAS-ELISA法比间接ELISA法和核酸电泳法有更高的阳性检出率和符合率;此外还摸索了降低孵育温度和缩短孵育时间对病毒检测的影响,表明各步孵育温度和时间分别为25℃和20 min对于白浊症状的病苗检测无明显影响,使得本法更加适合于生产实践. 展开更多
关键词 罗氏沼虾肌肉白浊痛 罗氏沼虾诺达病毒 TAS-ELISA 应用
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二温式PCR检测对虾白斑综合征病毒 被引量：25
13
作者 庞耀珊 谢芝勋 +6 位作者 谢志勤 廖敏 邓显文 刘加波 唐小飞 何竞铭 梁海明 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2003年第4期43-45,共3页
本研究设计了一对能扩增大小为 30 6 bp对虾白斑综合征病毒 (WSSV)某段基因的特异性引物 ,优化建立了能快速检测 WSSV的二温式 PCR。在对包括 10 5份临床样品、10份 SPF南美白对虾组织样品和其他对虾病害病原在内的样品检测结果中 ,有 ... 本研究设计了一对能扩增大小为 30 6 bp对虾白斑综合征病毒 (WSSV)某段基因的特异性引物 ,优化建立了能快速检测 WSSV的二温式 PCR。在对包括 10 5份临床样品、10份 SPF南美白对虾组织样品和其他对虾病害病原在内的样品检测结果中 ,有 6 5份临床样品呈现 WSSV阳性 ,而 10份 SPF南美白对虾组织样品和其他对虾病害病原的 PCR结果为阴性。该二温式 PCR最低能检测到 1pg的 WSSV感染对虾组织样品总 DNA。这些结果表明 ,该 PCR具有高度的特异性和敏染性。 展开更多
关键词 二温式 PCR检测 白斑综合征病毒 南美白对虾 病原 样品检测 WSSV阳性 WSSV感染
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两种沼虾溶菌酶基因ORF的克隆和罗氏沼虾溶菌酶基因的组织表达(英文) 被引量：15
14
作者 高风英 叶星 +2 位作者 白俊杰 劳海华 吴锐全 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期615-620,共6页
分别提取罗氏沼虾和日本沼虾血细胞总RNA,RT-PCR扩增获得特异性cDNA片段,纯化后克隆到T载体上。序列测定表明所克隆的两种沼虾溶菌酶基因的开放阅读框(ORF)为477bp,共编码158个氨基酸,包括溶菌酶成熟肽140个氨基酸残基和信号肽18个氨基... 分别提取罗氏沼虾和日本沼虾血细胞总RNA,RT-PCR扩增获得特异性cDNA片段,纯化后克隆到T载体上。序列测定表明所克隆的两种沼虾溶菌酶基因的开放阅读框(ORF)为477bp,共编码158个氨基酸,包括溶菌酶成熟肽140个氨基酸残基和信号肽18个氨基酸残基。同源性分析表明,罗氏沼虾和日本沼虾溶菌酶基因的碱基序列及推测氨基酸序列高度同源,分别为99.4%和98.1%。两种沼虾溶菌酶基因的碱基序列和推测氨基酸序列与Gen-Bank上其他对虾溶菌酶的同源性达83.0%和80.0%以上。两种沼虾溶菌酶都具有c-型溶菌酶典型的两个酶活性位点(Glu51)和(Asp68),以及8个保守结构氨基酸残基Cys,且在101、106和107位上缺少Asp,因而推测本实验所克隆的两种沼虾溶菌酶基因属c-型溶菌酶基因的非钙结合亚型。以PCR法制备罗氏沼虾溶菌酶基因的生物素标记探针,斑点杂交检测感染弧菌后溶菌酶基因mRNA在各组织中的转录水平,结果表明受感染6h后在眼、肌肉、鳃、肝胰腺、肠管中的表达量均有升高,其中在肝胰腺中的表达量最高,约为对照组的560%。在不同感染时间里,肝胰腺中该基因表达量有较大的变化:感染后3h表达量最低,24h后表达量升至最高,大约为对照组的430%,48h时的表达量又有所下降,但仍明显高于对照组(约为330%)。受弧菌感染后罗氏沼虾溶菌酶基因转录的上调证明溶菌酶基因在非特异性免疫中的直接作用,同时表明肝胰腺可能在沼虾的免疫防御过程起重要作用。 展开更多
关键词 罗氏沼虾 日本沼虾 溶菌酶 基因克隆 基因表达
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大泷六线鱼精巢发育的周年变化研究 被引量：23
15
作者 温海深 王连顺 +3 位作者 牟幸江 陈彩芳 姚珺 陈松林 《中国海洋大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期581-585,共5页
为完善六线鱼的人工繁殖理论，采用石蜡切片，HE组织染色方法研究了性成熟野生大泷六线鱼的精巢结构和精巢发育的周年变化过程。结果表明，大泷六线鱼精巢为典型的小叶型结构，精小叶间有间质细胞（Leydigs cell），小叶内有支持细胞（S... 为完善六线鱼的人工繁殖理论，采用石蜡切片，HE组织染色方法研究了性成熟野生大泷六线鱼的精巢结构和精巢发育的周年变化过程。结果表明，大泷六线鱼精巢为典型的小叶型结构，精小叶间有间质细胞（Leydigs cell），小叶内有支持细胞（Sertolis cell）及精小囊结构，其精巢的周年发育历程可分为：重复发育Ⅲ期，精子形成Ⅳ期，精子成熟Ⅴ期和退化吸收Ⅵ期。8月下旬开始生精活动的启动，生殖季节为11月至翌年1月份，2～4月份为退化吸收期，5～7月份为重复发育Ⅲ期。 展开更多
关键词 大泷六线鱼 精巢 周年变化
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白斑综合症病毒实时荧光LAMP检测方法的建立及应用 被引量：15
16
作者 李红梅 江晓 +5 位作者 刘助红 赵哲 任春华 胡超群 石磊 王广军 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期142-148,共7页
研究利用ESE-Quant tube scanner检测平台,建立了一套基于环介导等温扩增技术(Loop-Mediated Isothermal Amplification,LAMP)的实时荧光检测方法,用于白斑综合征病毒(White Spot Syndrome Virus,WSSV)的检测;并在此基础上,与巢式PCR、R... 研究利用ESE-Quant tube scanner检测平台,建立了一套基于环介导等温扩增技术(Loop-Mediated Isothermal Amplification,LAMP)的实时荧光检测方法,用于白斑综合征病毒(White Spot Syndrome Virus,WSSV)的检测;并在此基础上,与巢式PCR、Real-time PCR和其他已发表的4种LAMP方法在检测灵敏度、实际应用方面进行比较。结果显示,研究建立的实时荧光LAMP检测方法在63℃恒温反应30min可检测到最低为105倍稀释的基因组DNA模板,与Real-time PCR检测方法的灵敏度相当,高于巢式PCR和其他已发表的4种LAMP方法的检测灵敏度;而且特异性较好,与传染性皮下及造血组织坏死病毒等5种常见对虾病原DNA均无交叉反应。通过构建质粒进一步进行灵敏度测试显示,本研究建立的实时荧光LAMP检测方法最低检测限度为24个拷贝质粒DNA,检出时间亦为30min。通过对66份待检样品的检测结果显示,实时荧光LAMP检测方法的检出阳性率为7.57%,准确率为100%,高于其他WSSV的检测方法。因此,研究建立的WSSV实时荧光LAMP检测方法,操作简单,反应速度快,特异性好,灵敏度高,成本低廉,可以直观、实时地观察反应的进行情况,适合对虾养殖现场及诊断实验室的WSSV快速检测。 展开更多
关键词 白斑综合症病毒 实时荧光LAMP ESE-Quant TUBE SCANNER
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凡纳滨对虾免疫指标变化与其养殖环境理化因子的关系 被引量：13
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作者 张华军 李卓佳 +4 位作者 张家松 郭志勋 文国樑 曹煜成 吴垠 《大连海洋大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期356-361,共6页
选择两口凡纳滨对虾Litopenaeus vannamei养殖土池(305#、301#池),每隔14 d定期采集一次养殖对虾和水样,检测对虾血清、肝胰脏和肌肉组织中酚氧化酶(PO)、超氧化物歧化酶(SOD)、碱性磷酸酶(AKP)、酸性磷酸酶(ACP)的活力和抗菌活力(Ua)... 选择两口凡纳滨对虾Litopenaeus vannamei养殖土池(305#、301#池),每隔14 d定期采集一次养殖对虾和水样,检测对虾血清、肝胰脏和肌肉组织中酚氧化酶(PO)、超氧化物歧化酶(SOD)、碱性磷酸酶(AKP)、酸性磷酸酶(ACP)的活力和抗菌活力(Ua)等免疫指标,以及水温、溶解氧(DO)等环境因子,探讨了养殖对虾免疫指标与环境因子的相关关系。结果表明:凡纳滨对虾各组织中免疫指标随亚硝酸盐氮、总氨氮等浓度的转变有很明显变化,301#池塘水体中总氨氮和亚硝酸盐氮由高于305#池转变为低于305#池,其养殖对虾体内各组织的免疫指标由低于305#池转变为高于305#池。表明在检测的养殖池塘理化因子中,总氨氮和亚硝酸盐氮是影响养殖对虾免疫指标最主要的因子,因此,养殖过程中应加以严格控制,以提高对虾的免疫力和抗病力。 展开更多
关键词 凡纳滨对虾 免疫指标 土池 理化因子
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克氏原螯虾源致病性豚鼠气单胞菌的分离及其生物学特性 被引量：19
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作者 曹海鹏 温乐夫 +2 位作者 杨移斌 石婷婷 何珊 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期1047-1053,共7页
从患病的克氏原螯虾体内分离到一株致病菌L2M-A,经生理生化鉴定和16S rDNA序列分析,证实菌株L2M-A为豚鼠气单胞菌(Aeromonas caviae)(GenBank登录号:KF446251),其16S rDNA序列与基因库中气单胞菌属菌株的16S rDNA序列有99%—100%的同源... 从患病的克氏原螯虾体内分离到一株致病菌L2M-A,经生理生化鉴定和16S rDNA序列分析,证实菌株L2M-A为豚鼠气单胞菌(Aeromonas caviae)(GenBank登录号:KF446251),其16S rDNA序列与基因库中气单胞菌属菌株的16S rDNA序列有99%—100%的同源性,而且与豚鼠气单胞菌JXZ-3株(GenBank登录号:JF496552)的亲缘关系最近。此外,菌株L2M-A在pH5—9内均能够生长良好,最适生长温度为30℃,最适生长转速为200 r/min,但浓度≥6.25μg/mL的双氟沙星对其生长具有显著的抑制作用,可作为防治用药的依据。 展开更多
关键词 豚鼠气单胞菌 鉴定 生物学特性 克氏原螯虾
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L-精氨酸对凡纳滨对虾体液免疫因子的影响 被引量：7
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作者 朱春华 李广丽 +2 位作者 吴天力 师尚丽 吴灶和 《海洋科学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期55-59,共5页
用添加不同剂量L-精氨酸(L-arg)的饲料投喂凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei),测定其血淋巴液中一氧化氮(NO)含量以及一氧化氮合成酶(NOS)、酸性磷酸酶(ACP)、碱性磷酸酶(AKP)和超氧化物歧化酶(SOD)活力,并检测其对病原体的抗病力。结... 用添加不同剂量L-精氨酸(L-arg)的饲料投喂凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei),测定其血淋巴液中一氧化氮(NO)含量以及一氧化氮合成酶(NOS)、酸性磷酸酶(ACP)、碱性磷酸酶(AKP)和超氧化物歧化酶(SOD)活力,并检测其对病原体的抗病力。结果显示:L-arg显著提高血淋巴液中NO含量,且变化趋势与NOS、AKP活性升高趋势相一致;中等剂量(质量分数为1%)L-arg显著提高血淋巴液中SOD和ACP活性,但高剂量(质量分数为1.5%)、低剂量(质量分数为0.5%)L-arg对血淋巴液中SOD(高剂量除外)和ACP活性影响不显著。副溶血弧菌人工感染后,中剂量L-arg组(1%)对虾死亡率最低,高剂量(1.5%)、低剂量组(0.5%)次之,对照组死亡率最高,各剂量L-arg组死亡率与对照组相比差异显著。表明饲料中添加适量L-精氨酸可使对虾体液免疫因子总体活力达到较高水平,L-精氨酸含量过高对对虾非特异免疫力的作用效果反而不佳。 展开更多
关键词 凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei) L-精氨酸 一氧化氮合成酶 酸性磷酸酶 碱性磷酸酶 超氧化物歧化酶
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大黄与黄连对二种淡水虾血细胞吞噬活性的影响 被引量：56
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作者 陈孝煊 吴志新 张厚梅 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期201-204,共4页
关键词 大黄 黄连 克氏原螯虾 红螯螯虾 血细胞 吞噬活性 中草药 免疫促进作用
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