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基于鸽鹦鹉热衣原体外膜蛋白的间接ELISA抗体检测方法的建立及应用
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作者 张紫萱 杨志远 +8 位作者 刘月焕 杨宝琳 高洁 冯倩倩 罗伟珏 林健 赵际成 黄程 胡格 《中国畜牧兽医》 北大核心 2025年第10期4920-4929,共10页
【目的】建立一种适用于鸽鹦鹉热衣原体(Chlamydia psittaci,Cps)抗体的间接酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测方法。【方法】试验对Cps的主要外膜蛋白(major outer membrane protein,MOMP)编码基因进行... 【目的】建立一种适用于鸽鹦鹉热衣原体(Chlamydia psittaci,Cps)抗体的间接酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测方法。【方法】试验对Cps的主要外膜蛋白(major outer membrane protein,MOMP)编码基因进行密码子优化,在N-端加入触发因子(trigger factor,TF)后连接至pET-30a(+)载体构建重组质粒pET-30a-M,经IPTG诱导表达和纯化后,利用SDS-PAGE和Western blotting对重组蛋白进行可溶性分析及鉴定。通过棋盘滴定法选择最佳抗原包被浓度和血清稀释度,优化鸽Cps抗体的间接ELISA法。比较本研究建立的间接ELISA法与间接血凝试验(indirect hemagglutination assay,IHA)的敏感性。通过检测鸽其他常见疾病阳性血清评估该方法的特异性,检测Cps阳性和阴性血清各3份以评估其重复性,并利用253份鸽源血清(174份临床血清样品、79份Cps灭活疫苗免疫后血清样品)评估该间接ELISA法与IHA法的符合率。【结果】SDS-PAGE和Western blotting结果显示,在诱导超声破碎后上清中成功表达大小约100 ku的MOMP蛋白,表明该蛋白具有可溶性。间接ELISA法优化后条件为:2μg/mL抗原4℃包被过夜,5%脱脂奶粉37℃封闭2 h,血清稀释度为1∶200、血清孵育时间为1 h,辣根过氧化物酶(HRP)标记兔抗鸽IgY孵育30 min,底物反应时间为10 min。鸽Cps阳性血清稀释度为1∶16时,间接ELISA法检测结果仍为阳性,敏感性高于IHA法。间接ELISA法与其他常见鸽病阳性血清均无交叉反应。批内和批间重复试验结果显示,间接ELISA法变异系数均<10%,表明该方法具有良好的重复性。本研究建立的间接ELISA法和IHA法检测临床样品和免疫后血清样品的符合率分别为80.72%和85.71%,Kappa值分别为0.60和0.69。【结论】本研究建立的间接ELISA法敏感性高、特异性强、重复性好,适用于Cps血清抗体的检测。 展开更多
关键词 鹦鹉热衣原体 间接ELISA 间接血凝试验(IHA) 抗体
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表达牛乳铁蛋白肽的罗伊氏乳杆菌分泌型信号肽的筛选及鉴定
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作者 赵文悦 杨景 +5 位作者 邵怡岚 李佳璇 姜艳平 崔文 王晓娜 唐丽杰 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第3期1431-1440,共10页
本研究旨在构建一株高效表达牛乳铁蛋白肽的重组罗伊氏乳杆菌,通过筛选不同信号肽的方式提高牛乳铁蛋白肽的分泌表达水平,提高重组菌株的应用效率。对实验室分离的一株罗伊氏乳杆菌进行全基因组测序,筛选分泌蛋白的信号肽基因,构建表达... 本研究旨在构建一株高效表达牛乳铁蛋白肽的重组罗伊氏乳杆菌,通过筛选不同信号肽的方式提高牛乳铁蛋白肽的分泌表达水平,提高重组菌株的应用效率。对实验室分离的一株罗伊氏乳杆菌进行全基因组测序,筛选分泌蛋白的信号肽基因,构建表达牛乳铁蛋白肽(LFCA)的重组菌株,通过Western blot、ELISA、激光共聚焦等技术分析和比较信号肽分泌LFCA的效果,对重组菌分泌的LFCA对金黄色葡萄球菌增殖抑制作用及其半数最低抑菌浓度进行检测。结果显示,A2、A3、A4和A8信号肽能够表达LFCA,其中A3和A8能够使LFCA分泌到培养上清中,且A3信号肽使LFCA的分泌表达水平提高了近2倍,对宿主菌株的生长性能无显著影响,重组菌株分泌的LFCA对金黄色葡萄球菌的半数最低抑菌浓度为97.50μg·mL^(-1)。本研究成功筛选出能够高效分泌牛乳铁蛋白肽的信号肽,重组菌株的抑菌效率得到显著提高。 展开更多
关键词 牛乳铁蛋白肽 罗伊氏乳杆菌 重组蛋白分泌表达信号肽 抑菌活性
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一株鸵鸟源烈性大肠杆菌噬菌体的分离与生物学特性分析
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作者 谭奕舟 王乐平 +6 位作者 李军 李常挺 白慧丽 马春霞 尹杨燕 彭昊 王晓晔 《广西畜牧兽医》 2025年第4期142-145,共4页
为分离能够有效裂解鸵鸟源大肠杆菌的烈性噬菌体,本试验通过双层平板法,从规模化鸵鸟养殖场采集的污水样品中分离纯化得到一株烈性噬菌体GXHZ-tn3;投射电镜观察显示,GXHZ-tn3的头部大致呈六角形,直径约为50 nm,尾部长约120 nm,属于长尾... 为分离能够有效裂解鸵鸟源大肠杆菌的烈性噬菌体,本试验通过双层平板法,从规模化鸵鸟养殖场采集的污水样品中分离纯化得到一株烈性噬菌体GXHZ-tn3;投射电镜观察显示,GXHZ-tn3的头部大致呈六角形,直径约为50 nm,尾部长约120 nm,属于长尾科噬菌体;在30℃~60℃可以保持效价稳定,在pH 4.0~11.0可以保持噬菌体活性;该噬菌体的最佳感染复数为1;一步生长曲线显示该噬菌体潜伏期为10 min,裂解量为122 PFU/cell;体外抑菌试验结果表明GXHZ-tn3可以在LB肉汤中有效抑制宿主菌9 h,使得后者迟滞期推迟6 h以上,并将其浓度降低1~2个数量级。本试验成功分离得到一株鸵鸟源烈性大肠杆菌噬菌体GXHZ-tn3,其特异性强,在较大的pH和温度范围内可保持活性和稳定性,具有良好的裂解性能,该结果可为未来开发应用耐多药大肠杆菌噬菌体GXHZ-tn3开发新型杀菌剂提供理论依据。 展开更多
关键词 鸵鸟 噬菌体 大肠杆菌 生物学特性 体外抑菌
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屎肠球菌NCIMB11181对大肠杆菌O78感染肉鸡生产性能、肠道微生物和血液抗氧化功能的影响 被引量:11
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作者 黄丽卿 罗丽萍 +2 位作者 张亚茹 王忠 夏兆飞 《中国家禽》 北大核心 2017年第11期17-22,共6页
试验旨在研究饲粮添加屎肠球菌对禽大肠杆菌O78感染肉鸡生产性能、肠道微生物菌群和血液抗氧化功能的影响。选取288只1日龄罗斯308母鸡,随机分成4组。分别在各试验组基础饲粮中添加0、100、200、300 mg/kg屎肠球菌。各试验组在11日龄均... 试验旨在研究饲粮添加屎肠球菌对禽大肠杆菌O78感染肉鸡生产性能、肠道微生物菌群和血液抗氧化功能的影响。选取288只1日龄罗斯308母鸡,随机分成4组。分别在各试验组基础饲粮中添加0、100、200、300 mg/kg屎肠球菌。各试验组在11日龄均气囊接种禽大肠杆菌,0.2 mL/只。结果表明:与无添加组相比,(1)饲粮中添加屎肠球菌可线性提高10日龄肉鸡体重(BW)(P<0.05),线性及二次线性提高22和35日龄肉鸡BW(P<0.05),线性提高1~10、10~22和10~35日龄肉鸡平均日增重(P<0.05),降低感染后肉鸡死亡率。(2)饲粮中添加屎肠球菌可线性降低感染后3 d盲肠大肠杆菌和沙门菌数量(P<0.05),线性及二次线性降低双歧杆菌数量(P<0.05);感染后7 d,屎肠球菌添加组大肠杆菌和沙门菌数量线性降低(P<0.05)。(3)感染后3和7 d,屎肠球菌组血清总抗氧化能力分别呈线性(P<0.05)和二次线性降低(P<0.05);血清丙二醛含量均呈线性及二次线性降低(P<0.05);谷胱甘肽过氧化物酶活性均为二次线性降低(P<0.05)。由此可见饲粮添加屎肠球菌可缓解禽大肠杆菌O78感染导致的肉鸡生产性能下降,通过调节肠道菌群结构和机体氧化状态,来减轻大肠杆菌感染造成的生理失衡。提示饲粮添加200 mg/kg屎肠球菌可有效预防肉鸡大肠杆菌O78感染。 展开更多
关键词 肉鸡 屎肠球菌 大肠杆菌O78 生产性能 微生物 抗氧化
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莫家蝇抗菌肽提取及对鸡大肠杆菌病药效试验 被引量:26
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作者 屈军梅 陈平洁 +3 位作者 李文平 屈孝初 唐保国 黄庭汝 《中国畜牧兽医》 CAS 2006年第3期56-58,共3页
体外抑菌试验结果证明抗菌肽对O1型血清大肠杆菌的药敏抑菌圈直径为19.3±0.32mm,以O1型大肠杆菌感染14日龄岭南黄肉用雏鸡,24 h后分别用抗菌肽高、中、低剂量及环丙沙星混饮给药,以比较其疗效。通过临床观察、尸体解剖、细菌检验... 体外抑菌试验结果证明抗菌肽对O1型血清大肠杆菌的药敏抑菌圈直径为19.3±0.32mm,以O1型大肠杆菌感染14日龄岭南黄肉用雏鸡,24 h后分别用抗菌肽高、中、低剂量及环丙沙星混饮给药,以比较其疗效。通过临床观察、尸体解剖、细菌检验结果表明,试验药物组与感染对照组差异极显著(P<0.01),即试验药物对鸡大肠杆菌病有良好疗效;抗菌肽高、中剂量与环丙沙星疗效相当(P>0.05),且不影响鸡只的正常增重(P>0.05)。 展开更多
关键词 抗菌肽 大肠杆菌 疗效观察
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猪感染肺炎支原体后肺组织TLR2、TLR4及促炎症因子TNF-α、IL-1β基因表达的变化 被引量:8
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作者 刘筱 方晓敏 +3 位作者 邹晓龙 赵芳 孟翠 任守文 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2011年第6期1305-1309,共5页
Toll样受体(TLR)作为一种重要的模式识别受体,在动物的天然免疫中发挥重要作用,是机体抵抗感染的第1道屏障。该研究通过建立猪肺炎支原体感染模型,探讨猪感染肺炎支原体后肺组织TLR2、TLR4及促炎症因子TNF-α、IL-1βmRNA的表达及意义... Toll样受体(TLR)作为一种重要的模式识别受体,在动物的天然免疫中发挥重要作用,是机体抵抗感染的第1道屏障。该研究通过建立猪肺炎支原体感染模型,探讨猪感染肺炎支原体后肺组织TLR2、TLR4及促炎症因子TNF-α、IL-1βmRNA的表达及意义。选取80日龄无注射气喘病疫苗苏钟猪14头,随机分为攻毒组和对照组,攻毒组气管内注射猪肺炎支原体组织强毒,对照组气管内注射灭菌生理盐水。感染后观察临床症状,攻毒后18 d时X射线透视猪肺部,记录体重;攻毒后28 d时检测抗体,记录体重,扑杀剖检,采集肺脏。应用Real-time PCR方法检测肺组织TLR2、TLR4及TNF-α、IL-1βmRNA的表达变化。结果显示:猪感染肺炎支原体后,生长缓慢,体重下降;X射线透视,肺部出现典型阴影;攻毒组猪出现典型的病理变化;TLR2、TLR4及TNF-α、IL-1β表达显著升高(P<0.05)。表明:猪肺炎支原体感染后TLR2、TLR4及促炎症因子TNF-α、IL-1β表达量增加,导致肺部炎症;猪肺炎支原体感染与TLR2、TLR4的变化有密切联系,启示肺炎支原体可能通过TLR信号传导通道。 展开更多
关键词 肺炎支原体 TLR 促炎因子 基因表达 肺部炎症
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基于短乳杆菌S层启动子组成型乳酸杆菌表达系统的构建 被引量:4
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作者 李一经 秦思 +4 位作者 唐丽杰 葛俊伟 乔薪瑗 崔文 姜艳平 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期125-130,共6页
以大肠杆菌和乳酸菌穿梭分泌表达型载体pPG612为基本模型,用短乳杆菌S层启动子SlpA替换载体上gusA启动子,并以TGEV N蛋白基因为目基因构建一种乳酸杆菌组成型表达载体,用以检测SlpA启动子在三种不同乳酸杆菌中表达能力。结果表明,该组... 以大肠杆菌和乳酸菌穿梭分泌表达型载体pPG612为基本模型,用短乳杆菌S层启动子SlpA替换载体上gusA启动子,并以TGEV N蛋白基因为目基因构建一种乳酸杆菌组成型表达载体,用以检测SlpA启动子在三种不同乳酸杆菌中表达能力。结果表明,该组成型启动子具有表达外源功能蛋白功能,且具有严格宿主选择性,为进一步利用该载体及组成型启动子进行其他应用奠定了基础。 展开更多
关键词 乳酸杆菌 组成型启动子 启动子活性
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乳酸杆菌的肠道调节作用及其在动物生产中应用的研究进展 被引量:12
8
作者 曹力 武晓红 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2014年第11期267-274,共8页
作者从乳酸杆菌对肠道表面的作用、免疫激活作用、对肠道微生态的平衡作用及对代谢的调节作用4个方面介绍了乳酸杆菌对机体的调节作用,并介绍了其在动物生产中的应用状况。本综述重点阐述了乳酸杆菌的作用机制与应用效果,以期为其应用... 作者从乳酸杆菌对肠道表面的作用、免疫激活作用、对肠道微生态的平衡作用及对代谢的调节作用4个方面介绍了乳酸杆菌对机体的调节作用,并介绍了其在动物生产中的应用状况。本综述重点阐述了乳酸杆菌的作用机制与应用效果,以期为其应用提供参考。 展开更多
关键词 乳酸杆菌 肠道上皮 免疫 微生态
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兽医临床致病性大肠杆菌超广谱β-内酰胺酶的检测 被引量:3
9
作者 张春辉 张晓根 唐桂芬 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2008年第30期13062-13063,共2页
[目的]指导临床合理用药,控制兽医临床的感染性疾病。[方法]用分子生物学方法对用双纸片协同法检测产生ESBLs的5株猪鸡致病性大肠杆菌进行了ESBLs的检测。[结果]产生ESBLs的猪鸡致病性大肠杆菌中都扩增出了TEM型引物。[结论]双纸片协同... [目的]指导临床合理用药,控制兽医临床的感染性疾病。[方法]用分子生物学方法对用双纸片协同法检测产生ESBLs的5株猪鸡致病性大肠杆菌进行了ESBLs的检测。[结果]产生ESBLs的猪鸡致病性大肠杆菌中都扩增出了TEM型引物。[结论]双纸片协同法检测ESBLs具有较高的可靠性,兽医临床大肠杆菌已经产生ESBLs。 展开更多
关键词 超广谱Β-内酰胺酶 大肠杆菌 耐药性 检测
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体外条件下肉鸡源乳酸菌抑菌作用研究 被引量:4
10
作者 韩秋霞 李春露 崔志芳 《中国畜牧兽医》 CAS 2006年第3期65-67,共3页
从健康肉鸡肠道分离得到乳酸菌,将其菌悬液以不同体积比加入大肠杆菌培养液中,发现大肠杆菌生长受到不同程度的抑制。对于乳酸菌抑菌机理的初步探讨结果表明:乳酸菌菌悬液离心后所得菌体沉淀对大肠杆菌无抑制作用,而上清液中的胞外代谢... 从健康肉鸡肠道分离得到乳酸菌,将其菌悬液以不同体积比加入大肠杆菌培养液中,发现大肠杆菌生长受到不同程度的抑制。对于乳酸菌抑菌机理的初步探讨结果表明:乳酸菌菌悬液离心后所得菌体沉淀对大肠杆菌无抑制作用,而上清液中的胞外代谢产物有明显抑菌作用。上清液中抑菌作用约一半以上是由乳酸产生的,其余的抑菌效果则来源于乳酸菌产生的其它抑菌物质。 展开更多
关键词 乳酸菌 大肠杆菌 抑菌作用
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新疆石河子部分地区猪流行性腹泻病毒遗传变异分析 被引量:1
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作者 黄新 吴桐忠 +3 位作者 韩猛立 张星星 何延华 钟发刚 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2019年第5期17-20,共4页
为分析猪流行性腹泻病毒(PEDV)遗传变异情况,从石河子的3个地区已确诊PED猪场采集病料,分别获得了3株PEDV S基因序列和ORF3基因序列,将其进行序列比对及遗传进化分析。根据3株S基因序列分析表明,XJ-SHZ148、XJSHZ146株与韩国QIAP1401株(... 为分析猪流行性腹泻病毒(PEDV)遗传变异情况,从石河子的3个地区已确诊PED猪场采集病料,分别获得了3株PEDV S基因序列和ORF3基因序列,将其进行序列比对及遗传进化分析。根据3株S基因序列分析表明,XJ-SHZ148、XJSHZ146株与韩国QIAP1401株(KX793713)序列相似性最高,达到97.4%和98.7%;XJ-SW株与广东GD-03 2012株(KP870115)序列相似性最高,达到98.5%。3个分离株与PEDV疫苗株AF353511(CV777)性序列相似性分别为94.5%、94.2%和94.1%。系统进化分析表明,XJ-SHZ148、XJ-SHZ146与韩国的KPV1406(KM108353))、QIAP1401(KX793713))同为一群。XJ-SW株与广东GD/03/2012((KP870115))、GD/2011株(KP870115)同为一群;3株PEDV ORF3基因序列与疫苗株(CV777)序列比对多个位点存在突变,序列相似性较低。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒 遗传进化 S基因 ORF3基因 新疆石河子
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一株驴源干酪乳杆菌分离、鉴定及生物学特性研究 被引量:5
12
作者 刘宇 尹珺伊 +9 位作者 江波涛 史同瑞 徐伟生 杨文忠 李阳 陈楠楠 秦平伟 侯美如 王岩 朱战波 《黑龙江八一农垦大学学报》 2017年第6期16-19,共4页
为了分离出可用于研发驴用微生态制剂的乳酸杆菌,采集健康驴新鲜粪样4份,通过分离培养、形态特征、培养特性筛选出革兰氏阳性,厌氧,无芽孢杆菌1株。通过生理生化鉴定和PCR鉴定,确定该分离菌株为干酪乳杆菌,编号为LV1。生物学特性研究结... 为了分离出可用于研发驴用微生态制剂的乳酸杆菌,采集健康驴新鲜粪样4份,通过分离培养、形态特征、培养特性筛选出革兰氏阳性,厌氧,无芽孢杆菌1株。通过生理生化鉴定和PCR鉴定,确定该分离菌株为干酪乳杆菌,编号为LV1。生物学特性研究结果表明,干酪乳杆菌LV1安全,无致病性,适宜生长温度范围为30~40℃,培养液初始p H3~8条件下均能生长。研究为研发驴用乳酸杆菌微生态制剂奠定了基础。 展开更多
关键词 牛驴 干酪乳酸杆菌 生物学特性
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大型犬肘头皮下黏液囊炎的诊治体会 被引量:1
13
作者 董海聚 刘芳 +1 位作者 郭燕 邓立新 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2008年第12期4989-4989,5013,共2页
[目的]介绍大型犬肘头皮下黏液囊炎的诊治过程。[方法]对发病金毛犬进行初步诊断,确诊为肘头皮下黏液囊炎后对其进行手术切除。[结果]发病金毛犬的肘头皮下出现一处肿胀,其与周围有明显的分界。B超检查发现肿胀内有大面积液性暗区,外有... [目的]介绍大型犬肘头皮下黏液囊炎的诊治过程。[方法]对发病金毛犬进行初步诊断,确诊为肘头皮下黏液囊炎后对其进行手术切除。[结果]发病金毛犬的肘头皮下出现一处肿胀,其与周围有明显的分界。B超检查发现肿胀内有大面积液性暗区,外有强回声包膜。在波动稍明显的部位进行穿刺,可见有清亮黏液流出。根据初诊结果,确诊为肘头皮下黏液囊炎。手术切除该肘头皮下黏液囊后,金毛犬经精心护理后痊愈。[结论]当病情较轻时,应尽量避免切除肘头皮下粘液囊,建议应破坏黏液囊并减少其黏液的过度分泌。 展开更多
关键词 大型犬 肘头皮下黏液囊炎 诊治
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一株鸽新城疫病毒的分离鉴定 被引量:3
14
作者 赵明秋 胡永明 +1 位作者 许丽娜 易琳 《广东畜牧兽医科技》 2011年第3期36-38,共3页
对广东地区疑似发生鸽新城疫感染的鸽病料进行病毒分离,通过血凝试验(HA)、中和试验、F基因扩增及序列测定。结果分离到1株血凝效价为4㏒2,且能被NDV阳性血清中和的病毒;用针对NDVF基因设计的特异性鉴定引物对该分离株进行PCR扩增,可扩... 对广东地区疑似发生鸽新城疫感染的鸽病料进行病毒分离,通过血凝试验(HA)、中和试验、F基因扩增及序列测定。结果分离到1株血凝效价为4㏒2,且能被NDV阳性血清中和的病毒;用针对NDVF基因设计的特异性鉴定引物对该分离株进行PCR扩增,可扩增出相应的目的片段;测序及Bl ast分析表明其与山东分离株chi cken/Chi na/SD5/2008相似性高达95,%系统进化树分析表明该分离株属于基因Ⅵ型。由此,该分离株为鸽新城疫病毒,并命名为GD2010。 展开更多
关键词 新城疫病毒 分离 鉴定 广东
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猪附红细胞体病研究进展 被引量:2
15
作者 刘静 王长春 +3 位作者 任继武 王志芳 樊瑞泉 员世宇 《山东畜牧兽医》 2012年第6期83-84,共2页
猪附红细胞体病(Eperythrozoonosis)又称"红皮病",是由猪附红细胞体(Eperythrozoon)寄生于红细胞表面、血浆、组织液及脑脊髓液中,引起以发热、贫血、黄疸等为主要特征的传染病。1928年Schillig首次报道了鼠的附红细胞体病[1],尔... 猪附红细胞体病(Eperythrozoonosis)又称"红皮病",是由猪附红细胞体(Eperythrozoon)寄生于红细胞表面、血浆、组织液及脑脊髓液中,引起以发热、贫血、黄疸等为主要特征的传染病。1928年Schillig首次报道了鼠的附红细胞体病[1],尔后报道的有牛、绵羊、猫、猪、犬等动物的附红细胞体病。Splitter于1958年首次发现并命名了猪附红细胞体[2]。猪附红细胞体病多呈隐性感染, 展开更多
关键词 猪附红细胞体病 细胞表面 脑脊髓液 隐性感染 红皮病 组织液 传染病 寄生
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多重荧光PCR检测水产品致病菌方法的建立与应用研究 被引量:2
16
作者 许如苏 林志雄 +4 位作者 林彩华 陈冠武 蔡颖 陈其生 杨奇志 《广东畜牧兽医科技》 2011年第4期22-27,共6页
根据沙门氏菌invA基因、副溶血性弧菌toxR基因和大肠杆菌O157:H7RFBE基因的保守序列,设计引物和探针,通过优化反应体系,测定其灵敏度和特异性,建立了可同时检测上述三种致病菌的多重实时荧光PCR方法。该方法对纯菌的检测灵敏度均低于10c... 根据沙门氏菌invA基因、副溶血性弧菌toxR基因和大肠杆菌O157:H7RFBE基因的保守序列,设计引物和探针,通过优化反应体系,测定其灵敏度和特异性,建立了可同时检测上述三种致病菌的多重实时荧光PCR方法。该方法对纯菌的检测灵敏度均低于10cfu/PCR反应体系。人工染菌样品经6h增菌,检测的灵敏度可低于10cfu/25g;对48株标准/参考菌株的检测结果,只有目的菌株呈阳性反应;而定量检测批内和批间的变异系数均小于2%。应用本法检测人工染菌样品和进出口水产品样品,结果与SN标准方法检测结果一致。本法可在8h内完成对水产品中上述三种致病菌的定性或定量检测,可适应于进出口水产品的快速检验。 展开更多
关键词 沙门氏菌 副溶血性弧菌 大肠杆菌O157:H7 多重实时荧光PCR
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益生菌防治畜禽细菌性肠炎作用机制的研究进展
17
作者 伊淑帅 王开 +2 位作者 齐宇 潘娜 胡桂学 《中国兽药杂志》 北大核心 2015年第7期58-62,共5页
益生菌是一类对宿主机体有益、安全无害的活微生物,代替抗生素和疫苗广泛用于畜禽细菌性肠炎的防治。益生菌主要通过与病原菌竞争黏附位点、分泌抑菌物质、加固肠道黏膜屏障、调节肠道免疫应答等抑制病原菌增殖,缓解肠道炎症,防治细菌... 益生菌是一类对宿主机体有益、安全无害的活微生物,代替抗生素和疫苗广泛用于畜禽细菌性肠炎的防治。益生菌主要通过与病原菌竞争黏附位点、分泌抑菌物质、加固肠道黏膜屏障、调节肠道免疫应答等抑制病原菌增殖,缓解肠道炎症,防治细菌性肠炎的发生。本文对益生菌的作用机制进行了详细阐述,为益生菌的研究和应用提供参考。 展开更多
关键词 益生菌 黏附 抑菌物质 黏膜屏障 免疫应答
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华东地区家禽低致病性禽流感的病原学检测与带毒情况的分析 被引量:10
18
作者 赵国 赵坤坤 +3 位作者 鹿欣伦 徐全刚 彭大新 刘秀梵 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第9期1133-1137,共5页
从2008年10月到2009年9月采集不同家禽的泄殖腔拭子共2420个,禽流感阳性样品178个,分离到AIVs毒株83株,总分离率7.36%。所分离到的亚型及各亚型分离率从高到低依次为H6、H3、H4、H9、H11、H1、H8。禽流感的分布季节性非常明显,以冬、春... 从2008年10月到2009年9月采集不同家禽的泄殖腔拭子共2420个,禽流感阳性样品178个,分离到AIVs毒株83株,总分离率7.36%。所分离到的亚型及各亚型分离率从高到低依次为H6、H3、H4、H9、H11、H1、H8。禽流感的分布季节性非常明显,以冬、春为高,各亚型又有其不同分布特点。水禽被认为是流感病毒的重要宿主,尤其是家鸭。到目前为止,作者已经从家鸭中分离到8种HA亚型,依次为H1、H3、H4、H6、H8、H9、H10、H11,7种NA亚型,包括N1、N2、N3、N4、N5、N6、N8。两者之间有18种组合,与野鸭的带毒情况十分相似。家鸭还很最容易发生混合感染,并以H6亚型为主,很多亚型都可与其混合感染,尤其是H3、H9亚型,这为基因重组产生新的亚型及毒力的变异提供了好的载体。 展开更多
关键词 低致病性禽流感 流行病学 家禽
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抗炎免疫调节活性益生菌的体外筛选及其相关组分的初步鉴定 被引量:7
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作者 米洁兰 王志浩 +9 位作者 王婷婷 刘长军 祁小乐 张艳萍 李凯 高立 潘青 王笑梅 高玉龙 崔红玉 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第12期1283-1289,共7页
为筛选出具有抗炎、抗感染免疫调节活性的益生菌并探究益生菌免疫调节活性的主要成分,本研究分别以10株益生菌Lac.1~Lac.10作为候选菌株,将益生菌的活菌体、灭活菌体、菌体裂解物分别作用于由脂多糖+尼日利亚菌素(LPS+Nigericin)诱导的... 为筛选出具有抗炎、抗感染免疫调节活性的益生菌并探究益生菌免疫调节活性的主要成分,本研究分别以10株益生菌Lac.1~Lac.10作为候选菌株,将益生菌的活菌体、灭活菌体、菌体裂解物分别作用于由脂多糖+尼日利亚菌素(LPS+Nigericin)诱导的急性炎症巨噬细胞模型及NF-κB和IRF信号通路报告细胞系J774-DualTM巨噬细胞,经荧光定量PCR检测细胞因子Il-1β和Il-10 mRNA的转录水平,通过检测报告基因SEAP和Lucia荧光素酶的活性分析NF-κB和干扰素调节因子(IRF)信号通路的激活情况。结果显示,在排除发酵液中MRS培养基干扰的情况下,益生菌株Lac.5活菌体能够极显著下调巨噬细胞炎症模型下Il-1β mRNA的转录水平(P<0.0001)、极显著上调Il-10 m RNA的转录水平(P<0.0001),并且能够极显著激活巨噬细胞的NF-κB和IRF信号通路(P<0.0001),进一步将益生菌Lac.5活菌体热灭活和超声破碎后显示,益生菌Lac.5灭活菌体和菌体裂解物的免疫调节活性均显著降低,仅益生菌Lac.5活菌体组分起到抗炎、抗感染的免疫调节活性。综上所述,本研究筛选出一株具有抗炎、抗感染的免疫调节活性的益生菌株Lac.5,并确认了其活菌体为免疫调节组分,对功能益生菌的筛选和新型益生菌治疗制剂的开发具有重要意义。 展开更多
关键词 益生菌 抗炎 免疫调节 NF-ΚB信号通路 IRF信号通路
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口蹄疫病毒结构蛋白基因vp1的表达与应用研究 被引量:11
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作者 邢继兰 潘洁 +4 位作者 陈波 饶忠 尤永进 徐泉兴 刘惠莉 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期299-302,共4页
体外克隆口蹄疫病毒vp1基因,构建重组表达载体pET28a-vp1。将此重组质粒转化到受体菌BL21(DE3)中,进行诱导表达,SDS-PAGE和蛋白质印迹分析表明,诱导5h后表达量达到最高,表达产物大小约为33Ku~40Ku,表达蛋白能与口蹄疫病毒阳性血清产生... 体外克隆口蹄疫病毒vp1基因,构建重组表达载体pET28a-vp1。将此重组质粒转化到受体菌BL21(DE3)中,进行诱导表达,SDS-PAGE和蛋白质印迹分析表明,诱导5h后表达量达到最高,表达产物大小约为33Ku~40Ku,表达蛋白能与口蹄疫病毒阳性血清产生特异性免疫反应。经HPLC纯化后,以重组蛋白为抗原,建立检测VP1蛋白抗体的ELISA方法,检测猪牛血清样品,免疫抗体检测结果与口蹄疫液相阻断ELISA检测结果呈正相关,能反映出免疫抗体动态变化,对临床样品口蹄疫病毒血清抗体检测,两种方法有一定相关性,但不显著。所以以重组VP1蛋白为检测抗原的ELISA方法有望用于口蹄疫免疫抗体监测。 展开更多
关键词 口蹄疫病毒 结构蛋白 vp1基因表达
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