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浙江省地方品种鸡禽白血病的流行病学调查与净化策略评估
1
作者 倪征 卢磊 +7 位作者 朱寅初 陈柳 李鑫基 叶伟成 云涛 华炯钢 付媛 张存 《浙江农业学报》 北大核心 2025年第4期790-799,共10页
为了解浙江省部分地方品种鸡禽白血病病毒(ALV)的感染情况,并评估禽白血病(AL)净化效果,本研究于2021—2024年采集浙江省6种地方品种鸡的雏鸡胎粪、母鸡蛋清与公鸡血浆样本合计163453份,通过检测ALV p27抗原的阳性率分析ALV的感染情况,... 为了解浙江省部分地方品种鸡禽白血病病毒(ALV)的感染情况,并评估禽白血病(AL)净化效果,本研究于2021—2024年采集浙江省6种地方品种鸡的雏鸡胎粪、母鸡蛋清与公鸡血浆样本合计163453份,通过检测ALV p27抗原的阳性率分析ALV的感染情况,并进行连续3个世代的AL净化,评估净化效果。同时,对阳性样品进行病毒的分离鉴定和组织病理学检查,通过扩增分离株的囊膜糖蛋白gp 85基因,对分离的ALV进行了遗传进化分析。研究结果显示,被调查的6种地方品种鸡均存在ALV感染,p27抗原的群体平均阳性率为10.02%,其中,白耳黄鸡的阳性率最高,为43.87%。经过3个世代的净化,各样本的阳性率均明显下降,但不同品种的下降幅度差异明显,江山乌骨鸡的净化效果最优,3个世代后蛋清和血浆的阳性率均为0。从阳性样本中分离到2株ALV(ZJU2401和ZJU2402),经进化树分析均属于J亚群。研究结果表明,本净化方案切实可行,研究结果可为浙江省地方品种鸡群AL的净化和防控工作提供参考依据和数据支持。 展开更多
关键词 禽白血病 净化效果评估 gp 85基因 遗传进化
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鸭瘟病毒疫苗株UL35缺失株的构建及其免疫保护效果评价
2
作者 陈柳 相生瑞 +5 位作者 云涛 倪征 华炯钢 朱寅初 张存 叶伟成 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第8期3933-3941,共9页
为研究鸭瘟病毒(duck enteritis virus,DEV)UL35基因缺失DEV疫苗株的生物学特性和对强毒株攻击的免疫保护效果,本研究在鸭瘟病毒疫苗株感染性克隆pDEV-EF1基础上,通过“Red E/T两步重组”技术,构建了UL35基因缺失的pDEV-ΔVP26突变体克... 为研究鸭瘟病毒(duck enteritis virus,DEV)UL35基因缺失DEV疫苗株的生物学特性和对强毒株攻击的免疫保护效果,本研究在鸭瘟病毒疫苗株感染性克隆pDEV-EF1基础上,通过“Red E/T两步重组”技术,构建了UL35基因缺失的pDEV-ΔVP26突变体克隆,并转染鸡胚成纤维细胞(CEFs)获得了重组病毒rDEV-ΔVP26,进而对重组病毒细胞生物学特性和免疫保护能力进行了评估。病毒一步生长曲线测定表明,rDEV-ΔVP26的滴度从24~84 h稳步上升,达到峰值10^(5.36)TCID_(50)·0.1 mL^(-1)。在此期间,rDEV-ΔVP26滴度较亲本毒株rDEV-EF1相比有所降低。蚀斑面积测定发现rDEV-ΔVP26蚀斑面积较亲本株rDEV-EF1减少了10.60%,说明UL35基因缺失会轻微影响病毒扩散并降低病毒滴度。动物试验表明,1×10^(6)TCID_(50)的rDEV-ΔVP26对30日龄麻鸭无致病作用,且1×10^(5)TCID_(50)滴度的rDEV-ΔVP26免疫组在强毒株攻击下的保护率与相同剂量的rDEV-EF1对照组一致。该研究表明,UL35为DEV复制非必需基因,且当接种合适剂量的病毒液时,UL35缺失不影响鸭瘟病毒疫苗株的免疫保护效果。该研究为研发用于区分疫苗免疫和野毒感染的DEV鉴别诊断疫苗奠定了基础。 展开更多
关键词 鸭瘟病毒 VP26 非必需基因 鉴别诊断
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非洲猪瘟病毒人工感染猪主要脏器的病理学观察
3
作者 常玲玲 张永强 +6 位作者 王雅诗 张冯禧 张歆悦 赵晓民 戈胜强 李金明 王志亮 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第5期2383-2392,共10页
非洲猪瘟(African swine fever,ASF)是由非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)引起的猪的一种急性、烈性和高度接触性传染病,2018年8月ASFV首次传入我国,给养猪业带来灾难性打击。为明确我国分离获得的ASFV CN2018株的病理损... 非洲猪瘟(African swine fever,ASF)是由非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)引起的猪的一种急性、烈性和高度接触性传染病,2018年8月ASFV首次传入我国,给养猪业带来灾难性打击。为明确我国分离获得的ASFV CN2018株的病理损伤特征,本文对一例人工感染猪主要脏器进行病理学观察。试验猪在人工感染ASFV CN2018株后第11天死亡,对尸体进行系统剖检和组织病理学检查。大体剖检可见皮肤、全身淋巴结、肾脏、膀胱、盲肠、胆囊、心脏、大脑等脏器表面或浆膜面分布出血斑点,胸腔和腹腔积血,肺脏淤血、水肿,呈全身出血性败血症病变。镜检病变以弥漫性出血和淤血为主,伴微血栓形成,淋巴结和脾脏中淋巴细胞严重缺失。免疫组化染色结果显示,巨噬细胞、肾小管上皮细胞及肝细胞胞质中呈ASFV抗原阳性。综上,ASFV CN2018株人工感染猪表现广泛性出血性病变,损伤的主要靶器官及抗原分布与之前报道类似。推测ASFV感染引起的广泛性出血主要与单核巨噬细胞系统激活损伤导致的炎症因子风暴及血管内皮细胞损伤有关,为深入研究我国ASFV流行毒株的致病机制提供了理论数据。 展开更多
关键词 非洲猪瘟 人工感染 猪 病理学观察
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表达非洲猪瘟pp62与Hsp70蛋白重组腺病毒对小鼠的免疫原性分析
4
作者 陈长春 吴植 +7 位作者 任冠宇 陈文玉 曹世诺 朱睿 张力 成玉婷 朱善元 卢会鹏 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第6期3027-3031,共5页
本研究旨在开发一种针对非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)的重组腺病毒疫苗,为ASFV疫苗的临床应用和研发提供科学依据。利用pAdEasy-1系统构建融合表达ASFV CP530R基因和分支结核杆菌热休克蛋白70(Hsp70)的重组腺病毒(rAd-... 本研究旨在开发一种针对非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)的重组腺病毒疫苗,为ASFV疫苗的临床应用和研发提供科学依据。利用pAdEasy-1系统构建融合表达ASFV CP530R基因和分支结核杆菌热休克蛋白70(Hsp70)的重组腺病毒(rAd-CP530R-Hsp70)。通过间接免疫荧光和Western blot验证目的蛋白的表达。将rAd-CP530R-Hsp70重组腺病毒免疫小鼠,检测小鼠体内产生的抗体和细胞因子水平。结果显示:重组腺病毒成功诱导小鼠产生针对pp62的特异性抗体,免疫后35 d抗体滴度达到1.33。免疫后小鼠脾细胞培养上清中IL-2、IL-4和IFN-γ水平显著升高,显示该疫苗能够有效激活体液和细胞免疫应答。构建的重组腺病毒疫苗可有效诱导小鼠产生免疫应答,为非洲猪瘟疫苗的研发提供数据支持。 展开更多
关键词 非洲猪瘟病毒 CP530R 重组腺病毒 HSP70
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用于非洲猪瘟病毒多靶标核酸检测的DNA假病毒制备及定量
5
作者 邓俊花 李昊轩 +6 位作者 陈冬杰 吕继洲 王晶晶 张舟 袁向芬 魏方 吴绍强 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第7期3555-3560,共6页
本研究旨在研制一种全程质控非洲猪瘟病毒(ASFV)核酸检测、避免质粒交叉污染的DNA假病毒。将ASFV B646L/CD2v/MGF505-1R/MGF360-12L 4种检测关键基因及EGFP基因共构建于杆状病毒的转移载体pFastBac^(TM)Dual中,转化形成重组Bacmid pFast... 本研究旨在研制一种全程质控非洲猪瘟病毒(ASFV)核酸检测、避免质粒交叉污染的DNA假病毒。将ASFV B646L/CD2v/MGF505-1R/MGF360-12L 4种检测关键基因及EGFP基因共构建于杆状病毒的转移载体pFastBac^(TM)Dual中,转化形成重组Bacmid pFastBac-EGFP-ASFV,转染至sf21细胞,包装产生ASFV重组杆状病毒。结果显示:通过荧光倒置显微镜观察,表达的EGFP蛋白绿色荧光信号指示成功获取AcMNPV-EGFP-ASFV病毒;重组杆状病毒基因组溯源分析,ASFV B646L/CD2v/MGF505-1R/MGF360-12L基因序列满足现行检测方法质控需求;ASFV质控品均匀、稳定,-20℃保存至少可稳定24个月。采用ddPCR定量为4.09×10^(3) copies·μL^(-1)。本研究非洲猪瘟病毒DNA假病毒的制备,为非洲猪瘟疫情监测提供了新的技术支撑。 展开更多
关键词 非洲猪瘟病毒 DNA假病毒 定量
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肠道源和口唇源羊口疮病毒ORF128基因的比较分析
6
作者 樊月圆 刘泽武 +6 位作者 袁嘉芮 张瑞雪 陈媛媛 周冬雪 段宁 四朗玉珍 富国文 《动物医学进展》 北大核心 2025年第7期1-10,共10页
分析羊口疮病毒(ORFV)肠道源和口唇源锚蛋白ORF128基因和蛋白的差异,为进一步研究该病毒的致病机制奠定基础。对肠道源和口唇源ORFV的ORF128基因PCR扩增后克隆测序,用生物信息学软件对其序列及编码蛋白的二级结构、磷酸化位点和跨膜结... 分析羊口疮病毒(ORFV)肠道源和口唇源锚蛋白ORF128基因和蛋白的差异,为进一步研究该病毒的致病机制奠定基础。对肠道源和口唇源ORFV的ORF128基因PCR扩增后克隆测序,用生物信息学软件对其序列及编码蛋白的二级结构、磷酸化位点和跨膜结构域进行预测和分析。结果表明,肠道源和口唇源ORFV的ORF128基因长度均为1506 bp,编码501个氨基酸;肠道源和口唇源ORF128基因核苷酸序列同源性为98.30%,氨基酸序列同源性为98.40%,存在8个氨基酸突变。氨基酸组成显示,肠道源和口唇源ORF128蛋白丙氨酸含量最高。蛋白质理化性质分析显示,口唇源ORF128蛋白不稳定系数为38.72,提示该蛋白可能为稳定蛋白;肠道源ORF128蛋白不稳定系数为41.33,提示该蛋白可能为不稳定蛋白。蛋白质磷酸化位点分析显示,口唇源ORF128蛋白含有33个潜在的磷酸化位点,肠道源ORF128蛋白含有35个潜在的磷酸化位点。说明ORFV肠道源和口唇源的ORF128基因存在差异,结果可为进一步研究羊口疮病毒致病机制提供参考。 展开更多
关键词 羊口疮病毒 ORF128基因 克隆 生物信息学分析
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马疱疹病毒1型分离毒株对叙利亚金黄地鼠的致病性
7
作者 刘建华 撒瑞雪 +8 位作者 张嗣玉 李银涛 邓智超 贾晗铎 赵敏 付玉 杨一明 冉多良 加尔肯 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第1期327-334,共8页
为了解从伊犁地区分离的EHV-1/China/YL2023的生物学特性及其对叙利亚金黄地鼠的致病性,采用蚀斑试验、病毒培养与增殖、饱和硫酸铵浓缩及蔗糖密度梯度离心等方法,对分离株进行纯化。使用不同剂量的EHV-1/China/YL2023病毒,以鼻内接种... 为了解从伊犁地区分离的EHV-1/China/YL2023的生物学特性及其对叙利亚金黄地鼠的致病性,采用蚀斑试验、病毒培养与增殖、饱和硫酸铵浓缩及蔗糖密度梯度离心等方法,对分离株进行纯化。使用不同剂量的EHV-1/China/YL2023病毒,以鼻内接种的方式感染叙利亚金黄地鼠,探究该分离株的致病效果。结果表明,纯化后的EHV-1/China/YL2023分离株病毒滴度达10^(6.64) TCID_(50)·mL^(-1)。EHV-1/China/YL2023分离株感染4~5周龄叙利亚鼠后,14 d内的出现精神沉郁、食量减退、口部流涎、蜷缩、弓背、皮毛凌乱掉落及不同程度的神经症状。耐过地鼠的平均体重下降25.9%,10^(7)-10^(5) TCID_(50)·0.1 mL^(-1)剂量组的存活率均为50%。病理结果显示,不同剂量组的病毒对叙利亚鼠的肺部脑部造成不同程度的损伤,即肺泡壁增厚,脑部神经元肿胀、大量中性粒细胞、淋巴细胞浸润,出血充血等。不同组织病毒载量测定结果显示,叙利亚鼠的肺、脑及淋巴结中均含有病毒DNA,且在肺和脑中的含量较高。综上所述,EHV-1/China/YL2023分离株对4~5周龄叙利亚金黄地鼠具有较高的致病性。本研究为EHV-1生物学特性研究及其致病机理提供依据,为后期解决EHV-1的流传及疫苗的研发问题提供支持。 展开更多
关键词 马疱疹病毒1型 蚀斑纯化 病毒增殖 致病性
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猪伪狂犬病疫苗研究进展 被引量：5
8
作者 冯伟 付畑畑 +5 位作者 汪忠荣 汤德元 曾智勇 黄涛 叶泥 王彬 《动物医学进展》 北大核心 2025年第2期92-97,共6页
猪伪狂犬病(PR)是由伪狂犬病病毒(PRV)引起的多种家畜和野生动物以发热、奇痒(猪除外)及脑脊髓炎为主要症状的一种急性传染病。该病传播迅速且难以根除,各年龄阶段猪均可发病,对养猪业危害严重。自2011年以来,该病在我国多地Bartha-K61... 猪伪狂犬病(PR)是由伪狂犬病病毒(PRV)引起的多种家畜和野生动物以发热、奇痒(猪除外)及脑脊髓炎为主要症状的一种急性传染病。该病传播迅速且难以根除,各年龄阶段猪均可发病,对养猪业危害严重。自2011年以来,该病在我国多地Bartha-K61疫苗免疫猪场暴发。PRV发生变异是该病暴发的主要原因,且目前野毒流行感染情况仍普遍存在。疫苗免疫接种是防控甚至净化猪伪狂犬病的主要措施之一,研制安全有效且能够应对PRV变异毒株流行的疫苗刻不容缓。论文针对猪伪狂犬病疫苗的最新研究进展进行综述,为该病的有效防控和疫苗研发提供参考。 展开更多
关键词 猪伪狂犬病 疫苗 研究进展
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鸭瘟病毒TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立及应用 被引量：2
9
作者 于江玮 程慧敏 +4 位作者 林健 杨宝琳 黄程 杨志远 胡格 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第2期765-773,共9页
为建立一种鸭瘟病毒(duck plague virus,DPV)TaqMan荧光定量PCR快速检测方法,基于DPV US 6基因保守序列设计特异性引物和探针,构建重组质粒DPV-US6标准品,对方法敏感性、特异性和重复性进行评价,并应用于DPV在鸡胚成纤维细胞(CEF)上增... 为建立一种鸭瘟病毒(duck plague virus,DPV)TaqMan荧光定量PCR快速检测方法,基于DPV US 6基因保守序列设计特异性引物和探针,构建重组质粒DPV-US6标准品,对方法敏感性、特异性和重复性进行评价,并应用于DPV在鸡胚成纤维细胞(CEF)上增殖及人工感染鸭器官组织上分布规律研究。结果显示,成功建立了DPV TaqMan荧光定量PCR检测方法,该方法最低检测限可以达到10 copies·μL^(-1),与番鸭细小病毒、鸭圆环病毒、鸭坦布苏病毒、鸭呼肠孤病毒、H9N2亚型禽流感病毒、鸭甲型肝炎病毒(I型和III型)和鸭衣原体均无交叉反应,批间和批内变异系数均小于2.0%。DPV-AX株感染CEF细胞后,病毒核酸拷贝数检测结果表明,4~8 h病毒增殖缓慢,12~60 h迅速上升,60 h达到最高峰,72~144 h逐渐下降,与TCID 50法测定的病毒滴度相比,两种检测方法具有良好相关性,可实现拷贝数替代TCID 50。DPV人工感染鸭组织脏器的病毒载量分布检测表明,肝脏中的病毒载量最高。本试验建立的检测方法为研究DPV-AX株在CEF上的增殖规律提供工具。 展开更多
关键词 鸭瘟病毒 US 6基因 TAQMAN探针 荧光定量PCR 增殖规律 人工感染
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鸡传染性喉气管炎病毒分离鉴定及遗传进化分析 被引量：1
10
作者 袁辉 刘丹 +8 位作者 刘敏 吴琼 李凌丹 宾晨 李伟 李国攀 陈红心 周启立 熊涛 《动物医学进展》 北大核心 2025年第3期57-63,共7页
荆州某鸡场出现了疑似鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV)感染,为确定该病病因,用PCR初步检测鸡传染性喉气管炎病毒为阳性;将阳性病料经处理后接种于SPF鸡胚绒毛尿囊膜,传至5代,收集出现痘斑和增厚的绒毛尿囊膜及尿囊液,对其进行PCR检测、病毒... 荆州某鸡场出现了疑似鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV)感染,为确定该病病因,用PCR初步检测鸡传染性喉气管炎病毒为阳性;将阳性病料经处理后接种于SPF鸡胚绒毛尿囊膜,传至5代,收集出现痘斑和增厚的绒毛尿囊膜及尿囊液,对其进行PCR检测、病毒滴度测定及动物回归试验。确定分离到1株ILTV毒株,命名为JZCD202302株。参照GenBank公布的鸡传染性喉气管炎病毒WG株设计了gB、gC、gD、gE、gK、TK基因特异性引物,用MEGA6.0软件绘制了遗传进化树。gB-gC-gD-gE-gK-TK串联进化树分析结果显示,该毒株与澳大利亚疫苗相关野外重组流行毒株7b、ACC78、CL9和实验室疫苗重组株ILTV.157/19亲缘关系最近。 展开更多
关键词 鸡传染性喉气管炎病毒 分离鉴定 进化树分析
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牛结节性皮肤病研究进展 被引量：1
11
作者 潘瑶 杨丹娇 +6 位作者 袁媛 方明锦 吴建平 田维 肖海月 王娟 蓝岚 《动物医学进展》 北大核心 2025年第7期95-103,共9页
牛结节性皮肤病(LSD)是一种病毒性牛传染性疫病,主要导致病牛皮肤出现结节或破溃结痂,严重时伴随产奶量下降、生长发育迟缓等多种并发症,是具有重要经济意义的动物疫病之一,目前尚无治疗该病的药物。1929年,LSD在赞比亚首次被报道,此后... 牛结节性皮肤病(LSD)是一种病毒性牛传染性疫病,主要导致病牛皮肤出现结节或破溃结痂,严重时伴随产奶量下降、生长发育迟缓等多种并发症,是具有重要经济意义的动物疫病之一,目前尚无治疗该病的药物。1929年,LSD在赞比亚首次被报道,此后几十年间已逐渐从非洲蔓延到中东地区,并在亚洲和东亚出现。2019年,LSD首次传入我国,并在多个地区发生传播,呈流行态势,对我国牛养殖业构成了严重威胁。目前国内对此病研究比较薄弱,论文综述了LSD的现状,包括其病原学特征、流行病学情况、临床表现、诊断和防控措施,旨在为今后关于LSD方面的研究和防控提供参考。 展开更多
关键词 牛结节性皮肤病 诊断 防控
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禽4型腺病毒单克隆抗体的制备、鉴定与初步应用
12
作者 张宇 程凡玉 +7 位作者 俞赵荣 邵颖 魏宁波 陈芳芳 王振宇 宋祥军 涂健 祁克宗 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第5期2364-2371,共8页
本研究旨在制备禽4型腺病毒(fowl adenovirus type 4,FAdV-4)的单克隆抗体,鉴定其特异性结合位点,并评估其在免疫组化(immunohistochemistry,IHC)和免疫沉淀反应中的应用价值。使用纯化的FAdV-4-AH-F41株全病毒免疫小鼠,通过间接酶联免... 本研究旨在制备禽4型腺病毒(fowl adenovirus type 4,FAdV-4)的单克隆抗体,鉴定其特异性结合位点,并评估其在免疫组化(immunohistochemistry,IHC)和免疫沉淀反应中的应用价值。使用纯化的FAdV-4-AH-F41株全病毒免疫小鼠,通过间接酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)方法筛选出一株阳性杂交瘤细胞并进行亚克隆,并对所制备的单克隆抗体进行效价检测。利用间接免疫荧光(indirect immunofluorescence assay,IFA)与蛋白免疫印迹(Western blot)方法鉴定单克隆抗体生物学特性,构建了pCold TF-Hexon、pET-32a(+)-Fiber1、pCold TF-Penton、pCold TF-Fiber2的原核表达载体,并通过Western blot初步鉴定所得单克隆抗体的特异性结合位点,在检测出抗体的亚型后,将其初步应用于IHC和免疫沉淀试验。结果表明本试验获得1株稳定分泌抗Fiber1蛋白的单克隆抗体,并将其命名为5C7。该抗体效价为1∶102400,亚型为IgG-2b,表现出良好的生物学特性。在IHC中,能够观察到明显的病变特征;在免疫沉淀试验中,5C7可作为捕获抗体,与病毒感染细胞中的Fiber1蛋白特异性结合。结果提示,本试验通过全病毒粒子免疫小鼠所制备的单克隆抗体能够特异性识别Fiber1蛋白,并在IHC和免疫沉淀反应中显示出良好的应用前景,为FAdV-4实验室病理诊断方法的建立和Fiber1蛋白的功能研究奠定了基础。 展开更多
关键词 血清4型禽腺病毒 单克隆抗体 抗体鉴定 Fiber1蛋白 IHC 免疫共沉淀
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表达猪圆环病毒3型Cap蛋白重组伪狂犬病病毒的构建及其对小鼠免疫效果评价
13
作者 宋若琪 谭姗姗 +9 位作者 马瑞一 陈新新 宜越 马梦瑶 王颖 牛胜 闫芳 赵宇军 田文霞 任建乐 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第11期5778-5788,共11页
为构建表达猪圆环病毒3型(PCV3)Cap蛋白的重组病毒载体疫苗,以猪伪狂犬病病毒(PRV)SX1910毒株为亲本毒株,利用CRISPR/Cas9和同源重组技术构建了缺失gE和gI基因并携带LoxP位点和GFP荧光标记的重组病毒SX1910-ΔgE/gI-GFP。然后利用Cre酶... 为构建表达猪圆环病毒3型(PCV3)Cap蛋白的重组病毒载体疫苗,以猪伪狂犬病病毒(PRV)SX1910毒株为亲本毒株,利用CRISPR/Cas9和同源重组技术构建了缺失gE和gI基因并携带LoxP位点和GFP荧光标记的重组病毒SX1910-ΔgE/gI-GFP。然后利用Cre酶将SX1910-ΔgE/gI-GFP的GFP表达盒置换为双拷贝的Cap基因表达盒,获得重组病毒rSX1910-ΔgE/gI-2Cap_(PCV3),并对其进行体外生物学特性和免疫效果分析。结果表明,rSX1910-ΔgE/gI-2Cap_(PCV3)体外增殖能力和噬斑大小显著小于亲本毒株SX1910。将rSX1910-ΔgE/gI-2Cap_(PCV3)免疫接种至6周龄雌性BALB/c小鼠进行免疫效果初步评价,结果显示,rSX1910-ΔgE/gI-2Cap_(PCV3)可有效刺激小鼠产生Cap蛋白的抗体,有效减轻_(PCV3)感染对肺部组织的损伤,显著降低组织病毒载量。以上数据表明,rSX1910-ΔgE/gI-2Cap_(PCV3)可对小鼠产生良好的免疫效果,并为PCV3新型疫苗的研究奠定了科学基础。 展开更多
关键词 猪圆环病毒3型 CAP蛋白 猪伪狂犬病病毒 CRISPR Cas9 免疫保护
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甘肃某规模化鸡场禽腺病毒4型感染的诊断与分析
14
作者 豆玲 吉艳红 +5 位作者 李鹏飞 刘萍 杜国玉 刘志杰 何继军 尚佑军 《动物医学进展》 北大核心 2025年第7期57-63,共7页
针对近期甘肃某规模化蛋鸡场发生禽腺病毒4型(FAdV-4)感染的疑似疫情,系统开展实验室确诊及病原分子流行病学分析。通过对死亡鸡临床剖检、多组织病理切片分析、根据FAdV-4型Fiber-2基因设计引物进行PCR扩增、测序与核苷酸序列比对、同... 针对近期甘肃某规模化蛋鸡场发生禽腺病毒4型(FAdV-4)感染的疑似疫情,系统开展实验室确诊及病原分子流行病学分析。通过对死亡鸡临床剖检、多组织病理切片分析、根据FAdV-4型Fiber-2基因设计引物进行PCR扩增、测序与核苷酸序列比对、同源性分析;对患病鸡、同群未表现症状的假定健康鸡和健康鸡采集血液进行禽腺病毒抗体ELISA检测;对剖检后实质脏器进行细菌培养,进行16S rRNA的PCR扩增,测序后序列同源性比对。结果显示,病鸡表现进行性消瘦、贫血、产蛋停止、腹泻乃至死亡等症状,剖检显示心包积液,肝、肾肿大,弥漫性出血,肝脏质脆;多个组织病理切片检查可见心肌纤维坏死伴炎性细胞浸润,肺脏组织被膜增厚、肺小叶坏死,肾小管溶解坏死,肝细胞灶状坏死,小肠及腺胃组织黏膜层可见溶解坏死等系列病理变化;PCR检测FAdV-4型病毒的Fiber-2基因片段(358 bp)呈阳性,其测序结果与GenBank上公布的Fiber 2基因同源性为99.7%;ELISA检测FAdV-4型病毒血清抗体亦为阳性;病料细菌检测16S rRNA序列比对结果与致病性大肠埃希氏菌的同源性达99.93%。表明该蛋鸡场发病主要是禽腺病毒4型感染所致,同时也存在致病性大肠埃希氏菌混合感染的情况。 展开更多
关键词 禽腺病毒4型 心包水-肝炎综合征 蛋鸡
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表达非洲猪瘟病毒基因B602L-B646L的重组病毒免疫原性的初步分析
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作者 卢会鹏 曹世诺 +6 位作者 吴植 陈长春 陈文玉 成玉婷 周晓慧 孙怀昌 朱善元 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第6期2816-2825,共10页
本研究旨在分析表达非洲猪瘟病毒基因B602L-B646L的重组腺病毒和杆状病毒的免疫原性。联合CpG佐剂注射3 d后或单独免疫rAd-F-Hsp7021 d后用rBac-F加强免疫,或以rBac-F为初免21 d后用rAd-F-Hsp70进行加强免疫,免疫剂量1×10^(8)·... 本研究旨在分析表达非洲猪瘟病毒基因B602L-B646L的重组腺病毒和杆状病毒的免疫原性。联合CpG佐剂注射3 d后或单独免疫rAd-F-Hsp7021 d后用rBac-F加强免疫,或以rBac-F为初免21 d后用rAd-F-Hsp70进行加强免疫,免疫剂量1×10^(8)·只^(-1)。在初免21和42 d后采集血清检测针对ASFV pB602L和p72蛋白的抗体水平。检测初免42 d后的由抗原刺激后外周血单核细胞(PBMCs)上清中干扰素-γ(IFN-γ)和白细胞介素-4(IL-4)的含量。结果显示:自免疫后第21天起,所有免疫猪的血清中均能检测到特异性IgG抗体,且在加强免疫后,抗体水平显著上升。CpG联合rAd-F-Hsp70/rBac-F免疫组血清中,pB602L和p72抗体水平均显著高于rAd-F-Hsp70/rBac-F(P<0.01)和rBac-F/rAd-F-Hsp70(P<0.01),其中rAd-F-Hsp70/rBac-F免疫组特异性抗体水平也显著高于rBac-F/rAd-F-Hsp70(P<0.01)。用ASFV pB602L和p72重组抗原刺激PBMCs后,CpG佐剂联合rAd-F-Hsp70/rBac-F免疫组细胞上清中IFN-γ和IL-4含量显著高于其他免疫组(P<0.01),表明以rAd-F-Hsp70作为首免载体优于rBac-F以及CpG佐剂显著提高体液免疫和细胞免疫效果。综上,以rAd-F-Hsp70作为初免疫苗和以rBac-F作为加强疫苗,同时联合使用CpG佐剂显著增强了针对pB602L和p72特异性抗体和细胞因子水平,为进一步优化非洲猪瘟病毒相关疫苗策略提供了数据支持和参考依据。 展开更多
关键词 非洲猪瘟病毒 重组腺病毒 重组杆状病毒 CpG分子
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牛结节性皮肤病病毒ORF002蛋白原核表达及间接ELISA抗体检测方法的建立
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作者 张亚岭 景伟 +7 位作者 赵妍 何小兵 房永祥 苏洋 李小明 张慧 景志忠 陈国华 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第11期5817-5825,共9页
本研究旨在建立一种基于牛结节性皮肤病病毒(LSDV)ORF002蛋白的间接ELISA抗体检测方法。通过构建重组质粒pET-30a(+)-ORF002并诱导表达,获得相对分子质量约为13 ku的蛋白,以SDS-PAGE和Western blot验证后的ORF002蛋白为包被抗原,建立LSD... 本研究旨在建立一种基于牛结节性皮肤病病毒(LSDV)ORF002蛋白的间接ELISA抗体检测方法。通过构建重组质粒pET-30a(+)-ORF002并诱导表达,获得相对分子质量约为13 ku的蛋白,以SDS-PAGE和Western blot验证后的ORF002蛋白为包被抗原,建立LSDV间接ELISA抗体检测方法并进行条件优化。优化后的间接ELISA条件为:抗原包被浓度2.5μg·mL^(-1),血清稀释度1∶100,二抗稀释度1∶120000。结果判定标准为待检样品OD_(450 nm)值≥标准阳性值×20.34%为阳性,反之为阴性。重复性试验变异系数<10%,与多种病毒阳性血清无交叉反应。该方法具有良好的敏感性、特异性及重复性,适用于LSD感染临床血清样品检测和疫苗免疫效果评价。 展开更多
关键词 牛结节性皮肤病 ORF002 原核表达 间接ELISA
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十足目虹彩病毒病诊断方法的研究进展
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作者 邢静怡 郭晓萌 +5 位作者 王蒙 管鑫 邱亮 李安琪 张庆利 黄倢 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第4期1549-1560,共12页
十足目虹彩病毒病是一种新发的甲壳动物疫病,由十足目虹彩病毒1(Decapod iridescent virus 1,DIV1)感染引起。该病毒包含两个原始分离株,即虾血细胞虹彩病毒(shrimp hemocyte iridescent virus, SHIV 20141215)和红螯螯虾虹彩病毒(Chera... 十足目虹彩病毒病是一种新发的甲壳动物疫病,由十足目虹彩病毒1(Decapod iridescent virus 1,DIV1)感染引起。该病毒包含两个原始分离株,即虾血细胞虹彩病毒(shrimp hemocyte iridescent virus, SHIV 20141215)和红螯螯虾虹彩病毒(Cherax quadricarinatus iridovirus, CQIV CN01)。DIV1传播速度快、宿主范围广、致死率高,在近年来广泛流行于虾蟹养殖业中,给产业造成巨大的经济损失。目前,针对此疫病已开发了多种诊断技术,本文对此进行了总结,以期为十足目虹彩病毒病的准确诊断和防控提供参考。 展开更多
关键词 十足目虹彩病毒1(DIV1) 虾血细胞虹彩病毒(SHIV) 红螯螯虾虹彩病毒(CQIV) 疫病诊断 甲壳动物
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猪伪狂犬病病毒gE基因遗传变异及密码子使用偏好性分析
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作者 陈志安 章蓓雯 +9 位作者 何敏嘉 陈美椿 翁成桢 黄欣欣 李鸿喜 曾仲文 陈宝良 邱龙新 陈洪博 李晓冰 《中国畜牧兽医》 北大核心 2025年第7期3264-3275,共12页
【目的】了解国内猪伪狂犬病病毒(Porcine pseudorabies virus,PRV)的流行现状、流行毒株的遗传情况以及PRV gE基因的密码子使用偏好性和影响因素。【方法】本研究针对2019—2023年中国分离到的106条PRV gE基因序列,利用Mega 7.0软件构... 【目的】了解国内猪伪狂犬病病毒(Porcine pseudorabies virus,PRV)的流行现状、流行毒株的遗传情况以及PRV gE基因的密码子使用偏好性和影响因素。【方法】本研究针对2019—2023年中国分离到的106条PRV gE基因序列,利用Mega 7.0软件构建系统发育树,通过Launch DnaSP 6.0软件进行基因选择压力和基因流分析,采用CodonW 1.4.2和SPSS 27.0.1软件进行密码子分析。【结果】遗传进化分析结果表明,国内流行的PRV毒株为基因Ⅱ型,可进一步分为基因型2.1和基因型2.2。基因流分析显示,基因Ⅱ型中基因型2.1和2.2核苷酸多样性(Pi)分别为0.006和0.002;种群间遗传分化系数(Fst)为0.381,同义替换率(Ks)和基因流量化指标(Z)分别为1.353和6.637。基因选择压力分析显示,基因Ⅱ型中基因型2.1和2.2的非同义突变与同义突变比值(dN/dS)分别为1.808和1.362。密码子碱基分析结果表明,基因Ⅱ型的2个亚型中,GC3含量均>50%,基因型2.1和2.2的不同基因编码区有效密码子数(ENC)值分别为30.04和30.06。密码子使用偏好性分析显示,基因型2.1和2.2的相关系数分别为0.115和0.173。相对同义密码子使用度(RSCU)分析显示,基因型2.1和2.2中高表达的密码子第3位均为G/C碱基,低表达的密码子第3位主要为A/U碱基;共25个密码子的RSCU>1,为优先使用密码子,其中13个具有高GC含量,16个以碱基C结尾。【结论】国内PRV流行株以基因Ⅱ型为主,其具有独特的碱基组成,GC含量较高、AU含量相对较低,表现出较低的偏好性,密码子使用受突变压力与自然选择的双重作用,其中自然选择起主导性作用。研究结果为国内猪伪狂犬病的流行趋势研判及防控策略制定提供了科学依据与技术支撑。 展开更多
关键词 猪伪狂犬病病毒(PRV) GE基因 遗传多样性 密码子 偏好性
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羊痘病毒抗体胶体金免疫层析试纸条的研制与初步应用
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作者 何印娣 石正旺 +10 位作者 石鑫泰 陈婕 廖焕程 张帆 罗俊聪 朱昱茜 席韬 李帅鹏 王川 田宏 郑海学 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第7期3368-3377,共10页
旨在建立一种快速、简便、特异、灵敏的羊痘病毒抗体的通用型胶体金检测方法。通过原核表达、纯化获得羊痘病毒122重组蛋白,并制备122蛋白多克隆抗体。将122蛋白与胶体金偶联,作为金标抗原,再将122蛋白及兔多克隆抗体包被在硝酸纤维素膜... 旨在建立一种快速、简便、特异、灵敏的羊痘病毒抗体的通用型胶体金检测方法。通过原核表达、纯化获得羊痘病毒122重组蛋白,并制备122蛋白多克隆抗体。将122蛋白与胶体金偶联,作为金标抗原,再将122蛋白及兔多克隆抗体包被在硝酸纤维素膜(NC)上,分别作为检测线(T线)和质控线(C线),经条件优化,研制成检测羊痘病毒抗体的胶体金免疫层析试纸条。结果表明,成功获得122重组蛋白,大小约为32 ku,胶体金试纸条可在12 min特异性检测到羊痘病毒抗体;与其他常见家畜疫病病原阳性血清无交叉反应;检测绵羊痘病毒、牛结节性皮肤病病毒和山羊痘病毒阳性血清的灵敏度分别为1∶64、1∶128和1∶128,与市售羊痘抗体间接ELISA诊断试剂盒(效价1∶128、1∶256和1∶256)的敏感性相当;对130份临床血清样品的检测与商品化试剂盒检测结果进行比较,两者的kappa值为0.93,为高度一致。本研究成功研制了羊痘病毒抗体通用型胶体金免疫层析试纸条,具有较高的敏感性和特异性,且具有成本低、检测快速、操作简便、结果容易判断等特点,对羊痘现场检测具有实际应用价值。 展开更多
关键词 羊痘病毒 122蛋白 多克隆抗体 胶体金试纸条
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大鲵源虹彩病毒的分离鉴定
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作者 王丞 李霜 +5 位作者 蒋万胜 周强 邓智勇 解宜兴 周勇 魏营 《动物医学进展》 北大核心 2025年第7期35-40,共6页
2023年7月,张家界金鞭溪暴发了高致死率的大鲵疾病。为明确病原、病害特征与致病性,通过标记重捕法评估了野生大鲵死亡率,并利用电镜观察、PCR检测、人工感染试验等技术对该病原进行分离鉴定。结果表明,调查区约有野生大鲵种群数量242尾... 2023年7月,张家界金鞭溪暴发了高致死率的大鲵疾病。为明确病原、病害特征与致病性,通过标记重捕法评估了野生大鲵死亡率,并利用电镜观察、PCR检测、人工感染试验等技术对该病原进行分离鉴定。结果表明,调查区约有野生大鲵种群数量242尾,剔除患病死亡个体后,约有134尾,病毒导致超55%的野生大鲵死亡。患病大鲵症状包括皮肤出血、四肢肿大坏死,肝脏、脾脏、肾脏肿大和出血。将病鲵肾脏组织匀浆滤液接种到鲤鱼上皮瘤细胞(EPC)出现典型细胞病变效应(CPE),病毒滴度为10~(7.76) TCID_(50)/mL。利用透射电镜观察,发现六边形病毒颗粒,直径约120~140 nm,疑似虹彩病毒。经基因组PCR鉴定和序列同源性分析,确认该病毒为大鲵虹彩病毒(GSIV),命名为GSIV-HN。人工感染大鲵出现身体肿大、四肢腐烂、皮肤溃疡,体腔腹水、内脏肿大出血等症状,于第9天开始出现死亡,14 d后死亡率达70%,PCR鉴定与GSIV同源。研究评估了GSIV对野生大鲵种群的致死危害,发现GSIV-HN对野生和养殖大鲵均具有高致病性和致死率,有助于理解GSIV特性和传播机制,对野生大鲵种群安全和大鲵健康养殖具重要实践意义。 展开更多
关键词 大鲵 虹彩病毒 种群估计 MCP基因 致病性
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