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新疆高致病性猪蓝耳病病毒分离与鉴定 被引量:5
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作者 简子健 盛卓君 +6 位作者 苏贵成 马素贞 王晓萍 胡峻 王薇 马晓艳 冉多良 《新疆农业科学》 CAS CSCD 2008年第6期1172-1175,共4页
从新疆发病仔猪的肺脏和淋巴结内体内分离到1株PRRSV病毒。该病毒能直接在Marc-145细胞上生长,继代培养72 h后产生细胞病变(CPE)。经特异性荧光抗体和ELISA检测均为阳性,RT-PCR方法能扩增出该病毒的400 bp的特异性片段。从该病的流行病... 从新疆发病仔猪的肺脏和淋巴结内体内分离到1株PRRSV病毒。该病毒能直接在Marc-145细胞上生长,继代培养72 h后产生细胞病变(CPE)。经特异性荧光抗体和ELISA检测均为阳性,RT-PCR方法能扩增出该病毒的400 bp的特异性片段。从该病的流行病学、临床症状、病理学、病原的生物学特征来看,该分离株为猪繁殖与呼吸综合症病毒的变异株。这一结果提示PRRSV毒株变异是引起新疆地区猪场母猪、仔猪大量发病死亡的重要原因,必须引起各级兽医部门和猪场的高度重视。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合症病毒 分离 鉴定 变异株
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猪源冠状病毒ORF3和ORF7的克隆及特性分析 被引量:3
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作者 李建强 柳纪省 +5 位作者 程杰 兰喜 胡永浩 吴润 殷相平 李宝玉 《甘肃农业大学学报》 CAS CSCD 2007年第6期1-7,共7页
参照GenBank中Purdue株全序列对TGEV(猪传染性胃肠炎病毒)TS株的ORF3和ORF7各设计1对特异性引物,经RT-PCR扩增分别获得了1 487 bp和516 bp大小的两个片段,与预期结果大小相符.TS株与CHV株、Puedue株、BW021898B株和KT2株的ORF3a核苷酸... 参照GenBank中Purdue株全序列对TGEV(猪传染性胃肠炎病毒)TS株的ORF3和ORF7各设计1对特异性引物,经RT-PCR扩增分别获得了1 487 bp和516 bp大小的两个片段,与预期结果大小相符.TS株与CHV株、Puedue株、BW021898B株和KT2株的ORF3a核苷酸序列同源性分别为99.1%、93.0%、95.9%、94.4%,相应的氨基酸同源性分别为97.3%、87.8%、93.2%、91.8%,TS株与CHV株、Puedue株、BW021898B株和KT2株的ORF3b核苷酸序列同源性分别为99.5%、98.5%、97.0%、97.8%,相应氨基酸的同源性分别为98.4%、96.3%、94.3%、95.8%,而TS株与PRCVIA1894株的ORF3b核苷酸和氨基酸同源性分别为96.6%和93.9%.TS株ORF7没有发生缺失且和其他毒株有很高的同源性.结果表明:TGEV非结构蛋白高变区在ORF3a第192个碱基至终止密码子之间,TGEV和PRCV在编码ORF3b氨基酸的数量和RNA酶结合位点上有一定的差异. 展开更多
关键词 猪源冠状病毒 传染性胃肠炎病毒 ORF3 ORF7 克隆
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单稀释法间接ELISA和终点法中和试验检测犊牛轮状病毒疫苗抗体效价比较 被引量:1
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作者 简子健 曹竹亭 +4 位作者 马素贞 高文斌 张晓红 王晓萍 袁江玲 《新疆农业科学》 CAS CSCD 2008年第4期733-737,共5页
用NCDV标准毒株接种恒河猴肾细胞(MA-104),制备病毒抗原液,制成油乳佐剂灭活疫苗进行3月龄以内的犊牛田间免疫试验。结果表明,免疫组的OD492nm平均值为0.6,免疫40 d后达到峰值1.5,免疫后609、0 d仍维持较高的抗体效价,OD492nm平均值分别... 用NCDV标准毒株接种恒河猴肾细胞(MA-104),制备病毒抗原液,制成油乳佐剂灭活疫苗进行3月龄以内的犊牛田间免疫试验。结果表明,免疫组的OD492nm平均值为0.6,免疫40 d后达到峰值1.5,免疫后609、0 d仍维持较高的抗体效价,OD492nm平均值分别是1.4和0.9。中和抗体效价在二次免疫时、二次免疫40、60、90 d平均值分别为56.668、413.025、314.9、104.64。实验评价OD492nm值和血清中和抗体效价关系,相关性很大,并证明这种疫苗对预防轮状病毒引起犊牛腹泻是安全有效的。 展开更多
关键词 轮状病毒 间接ELISA OD值 中和抗体效价
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口蹄疫病毒vp3-间接免疫荧光诊断方法的建立 被引量:2
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作者 王冰 周国辉 +2 位作者 涂亚斌 朴范泽 于力 《黑龙江八一农垦大学学报》 2008年第2期55-58,共4页
口蹄疫病毒(FMDV)结构蛋白VP3为保守区,各血清型间差异不大,因此以其为抗原建立一种快速、有效、操作简便的FMDV自然感染动物与疫苗免疫动物鉴别诊断方法。PCR扩增口蹄疫病毒结构蛋白VP3基因,克隆到杆状病毒表达系统转移载体pFastBacHT-... 口蹄疫病毒(FMDV)结构蛋白VP3为保守区,各血清型间差异不大,因此以其为抗原建立一种快速、有效、操作简便的FMDV自然感染动物与疫苗免疫动物鉴别诊断方法。PCR扩增口蹄疫病毒结构蛋白VP3基因,克隆到杆状病毒表达系统转移载体pFastBacHT-A中,转座DH10感受态细胞,获得阳性克隆。提取基因组Bacmid,转染Sf9昆虫细胞,获得含口蹄疫病毒结构蛋白基因VP3基因的重组杆状病毒。以被检测血清为一抗,以FITC标记的兔抗牛IGg为二抗,通过反应条件的优化,建立间接免疫荧光检测方法,并检测血清44份,与ELISA方法符合率为90.9%。 展开更多
关键词 口蹄疫病毒 VP3 鉴别诊断 间接免疫荧光
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