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玉米赤霉烯酮致彭波半细毛羊睾丸支持细胞增殖凋亡、氧化应激及NAC保护机制
1
作者 朱爱文 王健 +6 位作者 朱戈辉 刘海霞 平措班旦 王军 德庆卓嘎 闫伟 韩大勇 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第6期2752-2764,共13页
旨在研究玉米赤霉烯酮(zearalenone,ZEA)对彭波半细毛羊睾丸支持细胞的生殖毒性及N-乙酰半胱氨酸(NAC)对睾丸支持细胞抗氧化应激的保护机制。本试验选取体质健康3月龄雄性彭波半细毛羊((13.87±0.46)kg)的睾丸组织用以分离支持细胞... 旨在研究玉米赤霉烯酮(zearalenone,ZEA)对彭波半细毛羊睾丸支持细胞的生殖毒性及N-乙酰半胱氨酸(NAC)对睾丸支持细胞抗氧化应激的保护机制。本试验选取体质健康3月龄雄性彭波半细毛羊((13.87±0.46)kg)的睾丸组织用以分离支持细胞进行体外染毒试验,试验组ZEA染毒剂量分别为25、50、100、200μmol·L^(-1),对照组(NC组)仅添加0.1%DMSO,每组3个重复,筛选ZEA试验浓度。采用组合酶消化法、差速贴壁法和免疫荧光染色(IF)法进行彭波半细毛羊睾丸组织支持细胞分离、纯化培养及特异性抗体GATA4和Vimentin鉴定。CCK-8法、EdU法检测睾丸组织支持细胞活率及增殖能力。qRT-PCR和Western blot技术从转录和翻译水平检测细胞增殖(pcna)、凋亡(bax、caspase3、caspase 9)和氧化应激(cat、gsh-px、sod 1)等相关基因和蛋白的表达变化规律以及NAC的保护作用。结果发现,组合酶消化法和差速贴壁法能够获得满足ZEA染毒试验的SCs,随ZEA染毒浓度升高,SCs细胞活性和细胞增殖数量逐渐下降,200μmol·L^(-1)ZEA处理组SCs活性和细胞增殖数量极显著低于NC组(P<0.01);细胞增殖基因pcna的mRNA相对表达量和蛋白表达量均极显著低于NC组(P<0.01);促凋亡相关基因bax、caspase3、caspase 9的mRNA相对表达量极显著高于NC组(P<0.01),CASPASE3蛋白表达量极显著高于NC组(P<0.01),BAX、CASPASE9蛋白表达量显著高于NC组(P<0.05);抗凋亡基因bcl-2的mRNA相对表达量和蛋白表达量显著低于NC组(P<0.05);氧化应激相关基因gsh-px和sod 1的mRNA相对表达量极显著高于NC组(P<0.01),cat的mRNA相对表达量显著高于NC组(P<0.05),CAT、SOD1蛋白表达量极显著于NC组(P<0.01)。N-乙酰半胱氨酸(NAC)预处理后,与NC组对比,试验组cleaved-CASPASE-9、cleaved-CASPASE-3蛋白表达量极显著下降(P<0.01),BAX蛋白表达量显著下降(P<0.05),BCL-2蛋白表达量显著上升(P<0.05)。综上表明,ZEA暴露能够对彭波半细毛羊产生生殖毒性,抑制睾丸SCs增殖,促进SCs凋亡,导致SCs发生氧化损伤,而NAC对ZEA诱导的彭波半细毛羊睾丸SCs氧化损伤具有保护作用。 展开更多
关键词 彭波半细毛羊 玉米赤霉烯酮 睾丸 支持细胞 增殖凋亡 氧化应激 N-乙酰半胱氨酸
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补喂不同剂量的L-瓜氨酸对母羊繁殖性能及相关生殖激素水平的影响 被引量：1
2
作者 妮格尔阿依·安尼瓦尔 李卓 +5 位作者 赵茜 艾克拜尔·艾合麦提 英提扎尔·阿不力孜 王旭光 阿布力孜·吾斯曼 赵国栋 《中国草食动物科学》 北大核心 2025年第1期107-112,共6页
试验旨在研究补喂不同剂量的L-瓜氨酸(L-Citrulline,L-Cit)对湖羊繁殖性能及相关生殖激素水平的影响。挑选120只胎次为2~3胎、体重45.65 kg±5.79 kg的健康湖羊母羊,平均分为4组,分别为对照组、试验I组、试验II组、试验III组,每组3... 试验旨在研究补喂不同剂量的L-瓜氨酸(L-Citrulline,L-Cit)对湖羊繁殖性能及相关生殖激素水平的影响。挑选120只胎次为2~3胎、体重45.65 kg±5.79 kg的健康湖羊母羊,平均分为4组,分别为对照组、试验I组、试验II组、试验III组,每组30只。对照组饲喂基础日粮,试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组在对照组的基础上分别每天每只母羊补喂10、20和30 g的L-瓜氨酸。预饲期7 d,正式饲喂期20 d。在母羊阴道内埋置阴道海绵栓(FGA)的第1天记为试验的第0天,于第12天撤栓,第14天进行人工授精,同时肌肉注射1 mL的促排三号(LRH-A_(3))。埋栓处理后第7天、第14天和第18天,在母羊空腹的情况下使用含有肝素钠抗凝剂的采血管通过颈静脉采集血样,检测试验羊只血清中的LH、GnRH、E_(2)和P_(4)含量。结果表明,试验第0天试验Ⅱ组和Ⅲ组的血清孕酮(P_(4))水平与对照组相比差异显著(P<0.05),试验Ⅱ组与试验Ⅰ组间也差异显著(P<0.05)。第7天试验Ⅲ组的血清促性腺激素释放激素(GnRH)水平显著高于对照组(P<0.05)和试验Ⅰ组(P<0.05);试验Ⅲ组的血清雌二醇(E_(2))水平显著高于试验Ⅰ组(P<0.05)。第14天试验Ⅲ组的血清E_(2)水平显著高于试验Ⅰ组(P<0.05)。第18天试验Ⅲ组的血清GnRH水平显著高于试验Ⅱ组(P<0.05),血清促黄体生成激素(LH)水平显著高于试验Ⅰ组(P<0.05)和试验Ⅱ组(P<0.05);试验Ⅱ组的血清E_(2)水平显著高于对照组(P<0.05)和试验Ⅰ组(P<0.05)。给母羊补喂LCit后,试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组的受胎率、产羔率及双羔率均高于对照组,其中母羊受胎率比对照组分别提高了154.59%(P<0.05)、150.00%(P<0.05)和24.23%(P>0.05)。综上,在本试验条件下,给湖羊母羊补喂L-Cit提高了受胎率,L-Cit的添加量以每天每只10 g或20 g为宜。 展开更多
关键词 L-瓜氨酸 湖羊 生殖激素 繁殖性能
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高温应激下湖羊卵巢颗粒细胞m^(6)A甲基化修饰差异研究 被引量：1
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作者 李笑微 田微 +1 位作者 刘媛 李惠侠 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第4期1712-1721,共10页
旨在研究高温应激对湖羊卵巢颗粒细胞中m^(6)A甲基化修饰的影响,为揭示高温应激下m^(6)A甲基化修饰对湖羊卵巢颗粒细胞发育和功能的调控机制奠定基础。本研究采集2岁龄左右湖羊母羊新鲜卵巢,收集卵巢表面3~5 mm卵泡中的颗粒细胞,随机分... 旨在研究高温应激对湖羊卵巢颗粒细胞中m^(6)A甲基化修饰的影响,为揭示高温应激下m^(6)A甲基化修饰对湖羊卵巢颗粒细胞发育和功能的调控机制奠定基础。本研究采集2岁龄左右湖羊母羊新鲜卵巢,收集卵巢表面3~5 mm卵泡中的颗粒细胞,随机分为2组,对照组(37℃)和高温应激组(42℃,每天2 h,连续3 d)。通过甲基化RNA免疫共沉淀测序(MeRIP-seq)鉴定m^(6)A峰,获得基因表达数据并进行分析。MeRIP-seq在对照组和高温应激组共有135个具有显著差异的m^(6)A峰,映射到130个差异甲基化基因,主要富集到PI3K-Akt信号通路、谷胱甘肽代谢和Wnt信号通路等。RNA-seq鉴定出359个显著差异表达基因,主要富集在类固醇合成、胆固醇生物合成等信号通路。MeRIP-seq和RNA-seq数据联合分析结果显示,DTX3L、MAGEF1、MAN1C1、CCDC77、RAD51共计5个基因m^(6)A修饰和基因表达水平同时存在显著差异,主要富集在Notch信号通路等。本研究结果表明,高温应激会改变湖羊卵巢颗粒细胞mRNA中m^(6)A修饰水平,最终可能影响细胞增殖、凋亡、雌激素合成等相关通路,为进一步探究m^(6)A修饰在高温应激下的具体作用机制提供了理论基础。 展开更多
关键词 高温应激 卵巢颗粒细胞 湖羊 m^(6)A甲基化修饰 MeRIP-seq
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牛体外胚胎生产技术研发与应用进展 被引量：1
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作者 冷璇 陈思颍 +3 位作者 李伉 安忍 王栋 庞云渭 《中国畜禽种业》 2025年第4期36-47,3,共13页
基于活体采卵、体外受精和胚胎移植的体外胚胎生产技术,通过挖掘良种母畜的卵子资源,借助大量受体母畜快速扩繁,可上百倍提升母牛繁殖效率,是牛良种培育的新赛道。经过几十年的发展,体外胚胎生产技术体系不断优化,并已取得积极进展。然... 基于活体采卵、体外受精和胚胎移植的体外胚胎生产技术,通过挖掘良种母畜的卵子资源,借助大量受体母畜快速扩繁,可上百倍提升母牛繁殖效率,是牛良种培育的新赛道。经过几十年的发展,体外胚胎生产技术体系不断优化,并已取得积极进展。然而,该技术是一个高度集成的技术体系,涉及活体采卵、体外成熟、体外受精、体外培养等多个步骤,目前仍存在采卵效率不稳定、回收卵母细胞质量不均一和体外受精胚胎发育能力差等问题。该文综述了牛体外胚胎生产技术的产生背景、研发历程、应用现状及未来发展方向,旨在为完善牛体外胚胎生产技术体系,加快推动该技术的产业化应用提供参考。 展开更多
关键词 牛 体外胚胎生产 体外受精 体外成熟 活体采卵 体外培养
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绵羊季节性发情性状核心基因和关键lncRNA的筛选与分析
5
作者 杨杨 李良远 +6 位作者 万鹏程 卢守亮 刘长彬 杨华 王立民 代蓉 周平 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第3期1264-1277,共14页
旨在筛选与季节性发情相关的核心基因和长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)。本研究选取2~3岁空怀的中国美利奴羊和湖羊母羊(乏情期、发情期和发情间期各3只),采集卵巢组织样本,采用RNA-seq技术筛选差异表达的基因(differential... 旨在筛选与季节性发情相关的核心基因和长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)。本研究选取2~3岁空怀的中国美利奴羊和湖羊母羊(乏情期、发情期和发情间期各3只),采集卵巢组织样本,采用RNA-seq技术筛选差异表达的基因(differentially expressed genes,DEGs)和lncRNAs,并通过GO、KEGG富集分析、PPI分析及ceRNA网络构建鉴定与繁殖性能相关的核心基因和lncRNAs。结果,构建了6个不同生理状态下的RNA文库,筛选得到1495个差异表达基因(differentially expressed genes,DEGs)和454个差异表达lncRNAs,其中共性DEGs和lncRNAs分别为313个和435个,特有DEGs和lncRNAs分别为1182个和19个。GO和KEGG富集分析显示,共性DEGs在细胞分裂和细胞周期等方面显著富集,而差异表达的lncRNAs靶基因富集于细胞内信号转导及负调控RNA聚合酶II启动子转录等。特有DEGs在细胞迁移的正向调节中富集,lncRNAs的靶基因集中于细胞间粘附和整合素介导的信号通路等。通过PPI筛选出19个核心基因,主要富集在卵母细胞减数分裂和细胞周期信号通路。聚类分析结果显示,核心基因在乏情期表达量较高。ceRNA网络进一步揭示基因在细胞周期等信号通路的富集。RT-qPCR验证结果与高通量测序一致。筛选出19个核心基因和28个lncRNAs,并发现42个lncRNA-miRNA-mRNA靶向关系,为理解绵羊季节性繁殖的分子机制提供了潜在调控靶点。 展开更多
关键词 绵羊 季节性发情 RNA-SEQ 核心基因 lncRNA
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BMP4/SMAD4通过下调GJA 1基因表达影响绵羊卵巢颗粒间隙连接活性
6
作者 何雨 王翔宇 +2 位作者 狄冉 储明星 梁琛 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第2期679-688,共10页
旨在探索骨形态发生蛋白4(bone morphogenetic protein 4,BMP4)对绵羊卵巢颗粒细胞中间隙连接蛋白基因(gap junction protein alpha 1,GJA 1)表达的影响及其分子调控机制。本研究利用廊坊市屠宰场收集的2~4岁健康绵羊卵巢分离颗粒细胞,... 旨在探索骨形态发生蛋白4(bone morphogenetic protein 4,BMP4)对绵羊卵巢颗粒细胞中间隙连接蛋白基因(gap junction protein alpha 1,GJA 1)表达的影响及其分子调控机制。本研究利用廊坊市屠宰场收集的2~4岁健康绵羊卵巢分离颗粒细胞,采用免疫荧光染色技术定位GJA1在颗粒细胞中的分布。将细胞随机分为4组,分别添加0、10、50和100 ng·mL^(-1)浓度的重组BMP4蛋白,每组3个重复,培养24 h,利用CCK-8法评估细胞活性,RT-qPCR和Western blot研究BMP4对GJA 1的mRNA和蛋白表达水平的影响。为探究BMP4调控GJA 1表达的潜在机制,将细胞随机分为3组,每组3个重复,除对照组外分别添加10μmol·L^(-1)BMP I型受体抑制剂(Dorsomorphin)和干扰小RNA敲除SMAD家族蛋白4(SMAD family member 4,SMAD 4),均添加100 ng·mL^(-1)的BMP4处理细胞24 h,RT-qPCR检测GJA 1和SMAD 4表达量,Western blot分析测定GJA1和SMAD4表达水平以及SMAD1/5/8的磷酸化水平,最后利用划痕染料示踪试验检测绵羊卵巢颗粒细胞之间的间隙连接活性。结果显示,BMP4显著抑制了绵羊卵巢颗粒细胞中GJA 1表达和间隙连接活性(P<0.05),此抑制效应在添加Dorsomorphin和敲除SMAD 4后显著减弱(P<0.05),同时,BMP4处理显著增加了SMAD1/5/8的磷酸化水平(P<0.05)。综上,BMP4通过SMAD1/5/8-SMAD4信号转导调控GJA 1表达进而影响颗粒细胞间隙连接活性,本结果增加了对绵羊BMP/SMAD通路调控颗粒细胞间隙连接活性的了解,为改进体外卵泡成熟方法和高繁母羊的分子育种提供了基础。 展开更多
关键词 绵羊 卵巢颗粒细胞 BMP4 间隙连接 GJA1 SMAD 4
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高硒通过PI3K/AKT/FoxO1信号通路对绵羊睾丸间质细胞自噬的影响
7
作者 董佳宁 胡樱凡 +3 位作者 窦宇飞 李俊 石磊 任有蛇 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第8期3837-3848,共12页
旨在探讨微量元素硒通过PI3K/AKT/FoxO1通路对绵羊睾丸间质细胞自噬的影响及其分子机制。本研究采用3只8月龄健康雄性杜湖杂交绵羊的睾丸进行睾丸间质细胞的分离与培养,根据团队前期研究结果,建立不同浓度亚硒酸钠处理组(0、2、4和8μmo... 旨在探讨微量元素硒通过PI3K/AKT/FoxO1通路对绵羊睾丸间质细胞自噬的影响及其分子机制。本研究采用3只8月龄健康雄性杜湖杂交绵羊的睾丸进行睾丸间质细胞的分离与培养,根据团队前期研究结果,建立不同浓度亚硒酸钠处理组(0、2、4和8μmol·L^(-1))处理细胞18 h,每个处理组6个重复,试验重复3次。使用CCK-8检测细胞增殖活性;采用MDC检测细胞自噬水平、qRT-PCR和Western blot检测细胞内自噬相关基因(ATG5、P62和LC3)表达以及PI3K/AKT/FoxO1信号通路关键因子(PI3K、AKT、p-AKT、FoxO1、p-FoxO1和核内FoxO1)的表达水平;在此基础上,通过添加AKT特异性激活剂SC79或转染siFoxO1,探究PI3K/AKT/FoxO1信号通路在高硒(8μmol·L^(-1))调控绵羊睾丸间质细胞自噬的作用机制。结果表明:2μmol·L^(-1)组细胞活力最高(P<0.05),而8μmol·L^(-1)组细胞活力最低(P<0.05),2μmol·L^(-1)组ROS含量显著低于其他各组(P<0.05),高硒处理导致ROS的积累。使用MDC检测自噬,随着硒浓度升高,在8μmol·L^(-1)时自噬水平最高(P<0.05),显著增加细胞自噬相关因子(ATG5和LC3-II/I)的丰度(P<0.05),显著降低P62表达(P<0.05)。与对照组相比,8μmol·L^(-1)组显著抑制(P<0.05)PI3K和p-AKT活性,显著增加(P<0.05)FoxO1以及核内FoxO1的表达,显著降低p-FoxO1的丰度(P<0.05)。为了进一步探讨PI3K/AKT/FoxO1信号通路在高硒诱导细胞自噬中的作用,使用SC79(15 mg·L^(-1))预处理1 h,或者转染siFoxO1发现在间质细胞中LC3-II/I比值和ATG5丰度显著降低(P<0.05),P62显著上调减轻高硒诱导的自噬(P<0.05)。同时,SC79显著抑制高硒诱导的FoxO1去磷酸化和大量核转位(P<0.05)。综上所述,高硒通过抑制PI3K/AKT通路调控FoxO1磷酸化及其核易位,诱导绵羊间质细胞氧化应激和自噬。研究结果有助于阐明高硒对绵羊睾丸间质细胞产生负面影响的分子机制。 展开更多
关键词 硒 睾丸间质细胞 PI3K/AKT/FoxO1通路 自噬
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矢车菊素-3-芸香糖苷对奶绵羊精液冷冻保存效果的影响
8
作者 马应天 姜璐瑶 +5 位作者 李增开 秦剑平 赵建华 贺玉芳 宋宇轩 张磊 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第4期1768-1778,共11页
旨在探究稀释液中添加矢车菊素-3-芸香糖苷(cyanidin-3-rutinoside, C3R)对奶绵羊精液冷冻保存效果的影响,并研究其作用机理。本研究采集6只年龄2.5~3岁且体况良好的东佛里生种公羊的新鲜精液,镜检合格后混匀并分为6组,其中1组是用不含... 旨在探究稀释液中添加矢车菊素-3-芸香糖苷(cyanidin-3-rutinoside, C3R)对奶绵羊精液冷冻保存效果的影响,并研究其作用机理。本研究采集6只年龄2.5~3岁且体况良好的东佛里生种公羊的新鲜精液,镜检合格后混匀并分为6组,其中1组是用不含C3R的稀释液仅作稀释处理的冻前组,其余5组分别用不同浓度C3R(0、20、40、60、80μg·mL^(-1))的冷冻稀释液对精液进行稀释及冷冻保存,每组3个重复。通过检测解冻后精子质量、抗氧化能力以及腺苷代谢相关指标,探究C3R对奶绵羊精液冷冻保存效果的影响。结果表明:C3R的添加显著提高了精子质量,其中40μg·mL^(-1)C3R处理组的精子前向运动比例和顶体完整率最高,显著高于对照组(P<0.05);60μg·mL^(-1)C3R处理组的质膜完整率最高,显著高于对照组(P<0.05)。C3R的添加显著提高了精子抗氧化能力,其中40μg·mL^(-1)C3R处理组精子的超氧化物歧化酶活性显著高于其他组(P<0.05),丙二醛含量显著低于其他组(P<0.05);60μg·mL^(-1)C3R处理组的总抗氧化能力和过氧化氢酶活性显著高于其他组(P<0.05);20、40μg·mL^(-1)处理组的活性氧含量显著低于对照组(P<0.05)。综上,在本试验条件下40μg·mL^(-1)C3R对奶绵羊精子的保护效果最佳。在腺苷代谢方面,冻后组精子的腺苷脱氨酶活性显著高于冻前组(P<0.05),而40μg·mL^(-1)C3R的添加显著抑制了腺苷脱氨酶的活性(P<0.05),同时显著降低了腺苷和肌苷的含量(P<0.05)。因此,在冷冻稀释液添加C3R能够提高奶绵羊冷冻精液保存效果。当C3R添加浓度为40μg·mL^(-1)时,能够显著提高精子的抗氧化能力并降低腺苷脱氨酶活性,从而提高了奶绵羊冻后精液的质量。 展开更多
关键词 奶绵羊 精液 冷冻保存 矢车菊素-3-芸香糖苷 抗氧化 腺苷脱氨酶
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FABP4基因在妊娠前后小尾寒羊乳腺中表达差异分析
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作者 蔡文静 慈秋阳 +4 位作者 唐麟 柳杭 孙鑫铭 陈洋 姜怀志 《中国畜牧兽医》 北大核心 2025年第7期3234-3241,共8页
【目的】脂肪酸结合蛋白(fatty acid binding protein,FABP)是一种重要的功能蛋白质,在调节脂质代谢方面发挥关键作用。特别是FABP4被认为是哺乳动物细胞中主要负责脂肪酸转运的载体蛋白,其在机体脂质的合成与分解过程中发挥着至关重要... 【目的】脂肪酸结合蛋白(fatty acid binding protein,FABP)是一种重要的功能蛋白质,在调节脂质代谢方面发挥关键作用。特别是FABP4被认为是哺乳动物细胞中主要负责脂肪酸转运的载体蛋白,其在机体脂质的合成与分解过程中发挥着至关重要的调节作用。探究FABP4基因在绵羊乳腺中的表达规律对于揭示该基因调控乳脂形成具有重要意义,可为后续研究绵羊泌乳提供理论基础。【方法】选取空怀期和妊娠120 d小尾寒羊的乳腺、乳头组织作为研究对象,通过苏木精-伊红染色法(HE)观察妊娠前后乳腺、乳头组织的结构;采用免疫组织化学观察FABP4蛋白在妊娠前后乳腺、乳头组织中的分布;采用实时荧光定量PCR和Western blotting方法分别检测妊娠前后乳腺、乳头组织中FABP4基因和蛋白的表达水平。【结果】FABP4基因在空怀期和妊娠期小尾寒羊乳腺、乳头组织中均呈阳性表达。空怀期小尾寒羊乳腺和乳头中FABP4基因表达量显著或极显著高于妊娠期(P<0.05;P<0.01);空怀期乳头中FABP4基因表达量显著高于乳腺组织(P<0.05)。空怀期小尾寒羊乳腺和乳头中FABP4蛋白表达量极显著高于妊娠期(P<0.01);空怀期和妊娠期乳头中FABP4蛋白表达量显著高于乳腺组织(P<0.05)。【结论】FABP4基因在妊娠期小尾寒羊乳腺、乳头组织中表达量显著降低,提示该基因在乳腺发育中发挥了重要作用,参与了乳腺周期性的发育。 展开更多
关键词 FABP4基因 脂肪酸 小尾寒羊 妊娠 乳腺
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竹叶黄酮和木犀草素对小尾寒羊精液冷冻保存的影响
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作者 初和 刘东宇 尹国安 《中国草食动物科学》 北大核心 2025年第5期49-55,共7页
小尾寒羊是我国重要的肉用绵羊品种,精液冷冻保存对其种质资源保护和繁殖效率提升具有重要意义。然而,冷冻过程中产生的氧化应激会导致精子活力下降和DNA损伤。本研究探讨了竹叶黄酮(BLF)和木犀草素(LUT)对小尾寒羊精液冷冻保存质量和... 小尾寒羊是我国重要的肉用绵羊品种,精液冷冻保存对其种质资源保护和繁殖效率提升具有重要意义。然而,冷冻过程中产生的氧化应激会导致精子活力下降和DNA损伤。本研究探讨了竹叶黄酮(BLF)和木犀草素(LUT)对小尾寒羊精液冷冻保存质量和抗氧化能力的影响,旨在为提升精液冷冻保存效果提供科学依据。试验采用单因素设计,将精液分为对照组(仅添加常规冷冻保存液)、竹叶黄酮组(添加1、2、3、4 mg/mL BLF)、木犀草素组(添加0.01、0.02、0.03、0.04 mg/mL LUT)及联合使用组(组合1:3 mg/mL BLF+0.03 mg/mL LUT;组合2:3 mg/mL BLF+0.02 mg/mL LUT;组合3:2 mg/mL BLF+0.03 mg/mL LUT;组合4:2 mg/mL BLF+0.02 mg/mL LUT)。结果表明,添加3 mg/mL BLF和0.03 mg/mL LUT显著提高了冷冻后精子的活率、活力、运动速度、顶体完整性和质膜完整性(P<0.05),并显著增强了精液的总抗氧化能力(T-AOC)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSHPX)活性(P<0.05),同时降低了丙二醛(MDA)含量(P<0.05)。联合使用竹叶黄酮和木犀草素(2 mg/mL BLF+0.03 mg/mL LUT)效果更佳。因此,竹叶黄酮和木犀草素作为天然抗氧化剂,可有效提高小尾寒羊精液的冷冻保存质量,具有广泛的应用前景。 展开更多
关键词 小尾寒羊 冷冻精液 抗氧化 竹叶黄酮 木犀草素
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绵羊子宫内膜容受前期与容受期的阴道微生物比较研究
11
作者 楚翼健 崔久增 +4 位作者 李增开 张磊 褚婷婷 黄艳平 宋宇轩 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第2期689-699,共11页
旨在基于16S rRNA测序技术,解析绵羊子宫容受前期与容受期阴道微生物群落的差异变化,筛选绵羊子宫内膜容受期的标志菌群。本研究选取12只两岁龄、体重相近且健康的经产雌性湖羊为研究对象。试验分为两组,每组6只湖羊,利用同期发情技术,... 旨在基于16S rRNA测序技术,解析绵羊子宫容受前期与容受期阴道微生物群落的差异变化,筛选绵羊子宫内膜容受期的标志菌群。本研究选取12只两岁龄、体重相近且健康的经产雌性湖羊为研究对象。试验分为两组,每组6只湖羊,利用同期发情技术,在绵羊配种后第5天(容受前期,pre-receptive endometrium组,PE组)与第15天(容受期,peceptive endometrium组,RE组)采集阴道分泌物及子宫内膜组织。利用RT-qPCR检测子宫内膜组织相关容受基因表达情况,并选择16S rRNA V3V4可变区对阴道分泌物进行测序分析,比较两组之间微生物组成差异。RT-qPCR结果显示,相比于配种后第5天,配种后第15天的子宫内膜组织中HOXA10、LIF和VEGFA容受基因显著升高(P<0.01或P<0.05),表明配种后第15天的子宫内膜组织进入容受状态。Alpha多样性比较分析,容受前期组与容受期组的阴道微生物无显著差异(P>0.05)。Beta多样性比较分析,容受前期组与容受期组存在组间差异。物种相对丰度结果显示,在门分类水平上,Proteobacteria、Firmicutes等为优势菌门,占据70%以上。与容受前期组相比,容受期组Proteobacteria和Fusobacteriota菌门丰度下降;Firmicutes菌门丰度上升;在属分类水平上,unidentified_Enterobacteriaceae、PorpHyromonas等为优势菌属。与容受前期组相比,容受期组unidentified_Enterobacteriaceae、Streptobacillus等菌属丰度下降;PorpHyromonas、Ureaplasma等菌属丰度增加。差异菌群比较结果显示,在门水平上,Fusobacteriota、Acidobacteriota等丰度存在显著差异(P<0.05)。在属水平上,Occallatibacter、EdapHobacter、Roseiarcus丰度存在显著差异(P<0.05)。功能预测分析表明,相比于容受前期组,容受期组孕酮介导的卵母细胞成熟、雌激素信号通路、抗原的处理和呈递等通路显著升高(P<0.05)。绵羊子宫内膜容受前期与容受期组微生物Alpha多样性并无显著差异,Beta多样性表明两组间存在着组间差异。同时在多个分类水平上均有显著差异菌群,Facklamia、Turicibacter菌属、Firmicutes菌门可作为绵羊子宫内膜容受期的标志菌群。 展开更多
关键词 绵羊 容受前期 容受期 16S rRNA
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一种低密度猪精液稀释粉使用效果分析
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作者 刘琳 赵光蒲 +8 位作者 潘红双 张雅雯 王尔雅 靳晓静 卞佳怡 李明 赵姝灿 李新建 杨峰 《黑龙江动物繁殖》 2025年第2期44-47,共4页
为了解决猪精液高倍稀释后难以保存的问题,试验探索了在低密度猪精液稀释粉(HNAU)中添加牛血清白蛋白(BSA)对猪精液低密度(1亿/60 mL、3亿/60 mL、4亿/60 mL、5亿/60 mL)保存效果的影响。HNAU不添加BSA为试验1组,HNAU添加BSA为试验2组,... 为了解决猪精液高倍稀释后难以保存的问题,试验探索了在低密度猪精液稀释粉(HNAU)中添加牛血清白蛋白(BSA)对猪精液低密度(1亿/60 mL、3亿/60 mL、4亿/60 mL、5亿/60 mL)保存效果的影响。HNAU不添加BSA为试验1组,HNAU添加BSA为试验2组,商业稀释粉V为对照组。结果表明:与对照组和试验1组相比,试验2组在精子密度为1亿/60 mL时精子保存时间显著提升(P<0.05);在精子密度为3亿/60 mL、4亿/60 mL时保存72 h后,试验2组精子活力显著高于对照组(P<0.05),且96 h后仍维持>70%的活力;对照组和试验2组猪精液稀释至3亿/60 mL配种后配妊率均大于95%,两组间无显著差异(P>0.05)。说明HNAU添加BSA可显著提高低密度猪精液保存效果。 展开更多
关键词 猪精液 高倍稀释 低密度精液 精液保存 低剂量输精
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基于全转录组测序的2个不同品种绵羊卵巢ceRNA网络构建及关键miRNA的筛选
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作者 谷博 王安琪 +4 位作者 于鑫淼 郭俊彤 杨一 邓祎婕 姜怀志 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第6期2765-2777,共13页
旨在解析非编码RNA(non-coding RNA,ncRNA)对绵羊卵巢发育过程的分子调控机制,筛选提高绵羊繁殖力的关键基因。本研究以多胎型(小尾寒羊)和单胎型(乌珠穆沁羊)绵羊为材料,选取健康成年母羊各3只,构建卵巢组织ncRNA及mRNA表达谱,筛选差... 旨在解析非编码RNA(non-coding RNA,ncRNA)对绵羊卵巢发育过程的分子调控机制,筛选提高绵羊繁殖力的关键基因。本研究以多胎型(小尾寒羊)和单胎型(乌珠穆沁羊)绵羊为材料,选取健康成年母羊各3只,构建卵巢组织ncRNA及mRNA表达谱,筛选差异表达(differentially expressed,DE)lncRNAs、circRNAs、miRNAs及mRNAs,并对其进行靶基因预测以及功能和信号通路的富集分析,筛选出繁殖相关通路进一步构建ceRNA(lncRNA-miRNA-mRNA和circRNA-miRNA-mRNA)调控网络,最后总结调控网络中的关键miRNA。结果显示,乌珠穆沁羊和小尾寒羊卵巢组织共筛选出差异表达lncRNAs共1579个,circRNA共561个,miRNAs共175个及mRNAs共3095个。GO和KEGG富集分析结果显示,差异表达的靶基因显著富集于胚胎的形态发生、减数分裂的激活等生物过程及粘蛋白型O-聚糖生物合成、鞘糖脂生物合成、精氨酸鸟氨酸代谢等信号通路。筛选繁殖相关通路上富集到的差异表达基因,构建1个ceRNA网络(包含87个lncRNA,27个circiRNA,3个miRNA和3个mRNA),获得3个关键miRNAs(miR-140、miR-338及miR-423-5p)及对应的靶向调控ceRNA网络。采用qRT-PCR方法对随机选取的9个差异表达lncRNAs、circRNAs、miRNAs、mRNAs进行验证,结果证实了RNA-seq测序的准确性。本研究对DE ncRNAs与对应靶基因的协调调控机制进行分析,为阐明调控绵羊卵巢发育的关键基因及分子机制提供有效理论依据,进而充分了解绵羊的繁殖生物学特性,对于提高繁殖效率具有重要指导意义。 展开更多
关键词 乌珠穆沁羊 小尾寒羊 卵巢 lncRNA circRNA MIRNA ceRNA网络
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不同浓度果糖与葡萄糖对湖羊精液低温保存效果的影响
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作者 孙宇轩 王旭洋 +2 位作者 江才雨 张柳明 李拥军 《中国草食动物科学》 北大核心 2025年第3期16-22,共7页
为了研究不同浓度果糖与葡萄糖对低温保存湖羊精液的影响,在湖羊精液基础稀释液中添加不同浓度(0 g/mL、0.01 g/mL、0.02 g/mL、0.03 g/mL、0.04 g/mL)的果糖和葡萄糖进行低温保存。在不同保存时间(0~5 d)对精子活力进行测定,确定湖羊... 为了研究不同浓度果糖与葡萄糖对低温保存湖羊精液的影响,在湖羊精液基础稀释液中添加不同浓度(0 g/mL、0.01 g/mL、0.02 g/mL、0.03 g/mL、0.04 g/mL)的果糖和葡萄糖进行低温保存。在不同保存时间(0~5 d)对精子活力进行测定,确定湖羊精液低温保存稀释液中果糖和葡萄糖的最佳添加浓度。以此浓度为基础,单独以及联合添加两种糖,配制0.02 g/mL果糖、0.02 g/mL葡萄糖、0.01 g/mL果糖+0.01 g/mL葡萄糖、0.02 g/mL果糖+0.02 g/mL葡萄糖、0.005 g/mL果糖+0.015 g/mL葡萄糖和0.015 g/mL果糖+0.005 g/mL葡萄糖6种不同浓度处理组,用于湖羊精液低温保存。结果表明,保存1~5 d时,0.02 g/mL果糖处理组湖羊的精子活率、活力、直线运动速率(VSL)、曲线运动速率(VCL)、平均路径速率(VAP)最高。保存2~5 d时,0.02 g/mL果糖处理组湖羊的精子质膜完整率、顶体完整率显著高于其他5组(P<0.05);保存5 d时,0.02 g/mL果糖处理组的湖羊精子线粒体膜电位(MMP)显著高于其他各组(P<0.05)。因此,在低温保存条件下,0.02 g/mL果糖处理组效果最好,可以有效延长湖羊精子的存活时间,提高精子质量。 展开更多
关键词 湖羊 精液 果糖 葡萄糖 低温保存
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谷氨酰胺通过激活HSF1/HSP70通路改善绵羊冻融精液质量
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作者 张健 海尔汗 +2 位作者 张建军 李博渊 张家新 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第5期2219-2229,共11页
旨在探讨谷氨酰胺在绵羊精子冷冻保护过程中的作用机制。本研究使用6头2~4岁健康的成年湖羊精液,检测冷冻解冻后的精子活力、质膜和顶体完整性、线粒体膜电位、ATP含量、α-酮戊二酸脱氢酶活性和异柠檬酸脱氢酶活性及精子HSP70、HSF1及p... 旨在探讨谷氨酰胺在绵羊精子冷冻保护过程中的作用机制。本研究使用6头2~4岁健康的成年湖羊精液,检测冷冻解冻后的精子活力、质膜和顶体完整性、线粒体膜电位、ATP含量、α-酮戊二酸脱氢酶活性和异柠檬酸脱氢酶活性及精子HSP70、HSF1及pHSF1蛋白表达。结果表明,在冷冻稀释液中添加谷氨酰胺能够显著提高绵羊精子总活力(P<0.05)。5 mmol·L^(-1)谷氨酰胺组解冻后精子活力、质膜和顶体完整性、线粒体膜电位、ATP含量、α-酮戊二酸脱氢酶和异柠檬酸脱氢酶活性均显著高于对照组(P<0.05)。谷氨酰胺显著提高了解冻后精子HSP70和pHSF1的表达(P<0.05),HSF1的抑制剂DTHIB抑制了这一过程,并显著降低了解冻后精子的总活力(P<0.05),通过外源补充HSP70蛋白可以抵消DTHIB的抑制作用,并显著降低DTHIB处理导致的精子总活力降低(P<0.05)。本研究通过检测绵羊解冻后精液的各质量参数,发现谷氨酰胺可通过上调冷冻-解冻精子中HSF1蛋白的磷酸化水平、提高HSP70蛋白的表达、保护线粒体功能,进而改善绵羊精子的冷冻保存效果。 展开更多
关键词 精子冷冻 谷氨酰胺 热休克蛋白70 热休克因子1
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母羊下丘脑-垂体-性腺轴调控其子宫复旧机制研究进展
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作者 马青玲 王志有 +1 位作者 侯生珍 杨超 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第6期2525-2536,共12页
子宫复旧是动物繁殖过程中的重要环节,其复旧程度决定母畜能否成功受孕。母畜分娩后子宫复旧的完成通常受到营养、产后护理和分娩季节等因素影响。反刍动物子宫复旧主要通过下丘脑-垂体-性腺轴(hypothalamic-pituitary-gonadal axis,HP... 子宫复旧是动物繁殖过程中的重要环节,其复旧程度决定母畜能否成功受孕。母畜分娩后子宫复旧的完成通常受到营养、产后护理和分娩季节等因素影响。反刍动物子宫复旧主要通过下丘脑-垂体-性腺轴(hypothalamic-pituitary-gonadal axis,HPGA)来调控。然而,目前对母羊子宫复旧机制方面的研究尚不系统,HPGA调控母羊子宫复旧的机制尚不明析。基于此,本文将从母羊子宫复旧机制、子宫复旧影响因素以及子宫复旧过程中HPGA的作用机制方面进行综述,以期为深入理解HPGA对母羊子宫复旧的重要性提供参考,为HPGA调控母羊子宫复旧机制的深入研究提供理论依据。 展开更多
关键词 母羊 子宫复旧 下丘脑-垂体-性腺轴 调控机制
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滩羊超数排卵处理后血浆类固醇激素对超排效果的影响
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作者 邢洲 宋承磊 +3 位作者 曹凤凤 李卓颖 李庆云 陶金忠 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第9期4422-4431,共10页
旨在探究超数排卵处理后滩羊血浆类固醇激素变化与超排效果之间的关系。本研究对33只经产年龄在4.5±0.1岁的健康滩羊采用CIDR+FSH+PG法超数排卵,采集试验滩羊在人工授精(AI)当天(第0天)和采胚日(第6天)的血液样品并分离血浆,依据... 旨在探究超数排卵处理后滩羊血浆类固醇激素变化与超排效果之间的关系。本研究对33只经产年龄在4.5±0.1岁的健康滩羊采用CIDR+FSH+PG法超数排卵,采集试验滩羊在人工授精(AI)当天(第0天)和采胚日(第6天)的血液样品并分离血浆,依据采胚日观察到卵巢黄体数量结合样品采集时间将血浆样品为4组,AI当天高反应组(HCA)、AI当天低反应组(LCA)、采卵日高反应组(HC6)、采卵日低反应组(LC6),每组各8个样品。采用液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)方法,靶向检测血浆中类固醇激素的变化。结果显示,采卵日滩羊血浆中孕酮(P4)、孕烷二醇(PdG)、去氧皮质酮(DOC)和2-甲氧基雌酮(2-ME)极显著高于AI当天,而AI当天(LCA和HCA组)血浆中4-甲氧基雌酮(4-ME)极显著的高于采卵日;对于AI当天,HCA组17α-羟孕酮浓度(FC=1.50)显著高于LCA组(P<0.05);采卵日两组中,HC6组孕酮(FC=0.52)和去氧皮质酮(FC=0.50)浓度显著高于LC6组(P<0.05),且孕酮和去氧皮质酮浓度与黄体数和总胚胎数之间呈显著强的正相关。结果表明,超数排卵处理后,滩羊血浆类固醇激素发生了变化,采卵日孕酮与去氧皮质酮浓度影响超数排卵效果。 展开更多
关键词 滩羊 超数排卵 黄体数 类固醇激素
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海绵栓与硅胶栓对小尾寒羊同期发情效果及血液激素水平的影响
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作者 王泉宝 高见红 +7 位作者 郭庸 刘畅 丁宇婷 王晴 武洪凯 翟登荣 董笑言 柳海星 《中南农业科技》 2025年第4期41-44,共4页
为比较海绵栓和硅胶栓(CIDR)对小尾寒羊同期发情效果及血液激素水平的影响,并评估其对母羊受胎率的影响,试验选取60 kg以上的健康、空怀期小尾寒羊,分别使用海绵栓和硅胶栓进行处理,并结合孕马血清促性腺激素(PMSG)进行同期发情处理。... 为比较海绵栓和硅胶栓(CIDR)对小尾寒羊同期发情效果及血液激素水平的影响,并评估其对母羊受胎率的影响,试验选取60 kg以上的健康、空怀期小尾寒羊,分别使用海绵栓和硅胶栓进行处理,并结合孕马血清促性腺激素(PMSG)进行同期发情处理。结果表明,海绵栓处理组的同期发情率(94.2%)显著高于硅胶栓组(85.5%),且在人工授精条件下,海绵栓处理组的受胎率(89.2%)也显著高于自然发情组(71.3%)。血清激素水平分析显示,撤栓后48 h内雌激素(E2)和促黄体素(LH)浓度显著上升,孕酮(P)浓度显著下降。研究表明,海绵栓在同期发情和繁殖率方面效果优于硅胶栓,适合规模化养殖应用。 展开更多
关键词 小尾寒羊 同期发情 海绵栓 硅胶栓(CIDR) 孕马血清促性腺激素(PMSG) 血清激素水平 受胎率
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羊人工授精技术关键要点 被引量：1
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作者 卢人嘉 覃祥 《畜牧兽医科技信息》 2025年第1期135-137,共3页
羊属于现代化畜牧业养殖工作当中的主要牲畜种类,本身具备较高的经济价值。如果想要提升羊养殖效益,则要对羊繁育技术进行调节与优化。而羊人工受精技术属于其中的关键环节,因此应规避自然交配当中存在的效率不达标问题,并优化羊的繁殖... 羊属于现代化畜牧业养殖工作当中的主要牲畜种类,本身具备较高的经济价值。如果想要提升羊养殖效益,则要对羊繁育技术进行调节与优化。而羊人工受精技术属于其中的关键环节,因此应规避自然交配当中存在的效率不达标问题,并优化羊的繁殖能力,加快品种改良速度。由此,要对羊人工授精的技术要点展开研究,为羊养殖行业提供一定的助力。 展开更多
关键词 羊养殖 人工授精技术 技术应用 技术要点
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单细胞测序技术在绵羊卵巢生长发育过程中的研究进展
20
作者 魏康康 马贵 +4 位作者 李文迪 田雨 张令锴 朱继红 胡亚美 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第7期3080-3087,共8页
高通量单细胞测序技术已成为解析不同细胞组成信息的重要工具,能够通过该技术高精准剖析样本细胞的基因特征,揭示复杂样本中的细胞基因结构和基因表达状态,进而反映细胞间的异质性。本文总结了单细胞测序技术在羊卵巢生长发育过程中对... 高通量单细胞测序技术已成为解析不同细胞组成信息的重要工具,能够通过该技术高精准剖析样本细胞的基因特征,揭示复杂样本中的细胞基因结构和基因表达状态,进而反映细胞间的异质性。本文总结了单细胞测序技术在羊卵巢生长发育过程中对不同类型卵巢细胞发育机制的研究结果。运用单细胞测序技术,能够更全面地理解羊卵巢中不同细胞类型的分子特征、功能差异以及细胞间的相互作用,为羊卵巢生理功能的深入研究和相关疾病的诊断治疗提供新的思路和方法。 展开更多
关键词 单细胞测序 绵羊卵巢 细胞异质性
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