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实时荧光定量PCR法检测炭疽杆菌 被引量:16
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作者 陈苏红 张敏丽 +3 位作者 牟航 管伟 李鲁 王升启 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期268-270,共3页
为建立一种简便而特异的炭疽杆菌检测方法用作临床诊断工具 ,以pXO1质粒上的 pag基因及pXO2质粒上的cap基因为靶合成特异引物 ,用DNA嵌入荧光染料SYBRGreenI进行定量PCR扩增 ,在PCR后进行熔解曲线分析以确定得到的产物是否为目的产物。... 为建立一种简便而特异的炭疽杆菌检测方法用作临床诊断工具 ,以pXO1质粒上的 pag基因及pXO2质粒上的cap基因为靶合成特异引物 ,用DNA嵌入荧光染料SYBRGreenI进行定量PCR扩增 ,在PCR后进行熔解曲线分析以确定得到的产物是否为目的产物。定量PCR条件优化结果为 :引物浓度 0 8μmol/L、Mg2 +5 0mmol/L。该法检测炭疽的灵敏度达 10 3拷贝 ,并能区分炭疽杆菌与其他蜡样杆菌。表明实时荧光定量PCR技术能够快速准确。 展开更多
关键词 炭疽杆菌 聚合酶链反应 定量 实时检测
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贵州省2006-2011年炭疽芽胞杆菌检出情况与致病性研究 被引量:5
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作者 马青 李世军 +5 位作者 刘英 游旅 韦小瑜 唐光鹏 王定明 陈峥宏 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期632-635,共4页
目的了解贵州省2006-2011年炭疽芽胞杆菌感染和分布情况,为贵州省炭疽疫情的预防控制和炭疽病的分子流行病学研究提供科学依据。方法对来自贵州省2006-2011年不同地区的830份疑似炭疽标本(外环境标本667份、患者标本151份和牲畜标本12... 目的了解贵州省2006-2011年炭疽芽胞杆菌感染和分布情况,为贵州省炭疽疫情的预防控制和炭疽病的分子流行病学研究提供科学依据。方法对来自贵州省2006-2011年不同地区的830份疑似炭疽标本(外环境标本667份、患者标本151份和牲畜标本12份),采用传统的革兰染色镜检、普通营养琼脂平板和血琼脂平板培养基分离培养炭疽芽胞杆菌,运用青霉素抑制试验和噬菌体裂解试验对可疑炭疽芽胞杆菌菌落进行鉴定。采用Real-time PCR技术检测88株经传统细菌学方法鉴定为炭疽芽胞杆菌菌株pXO1质粒上的PA基因和pXO2质粒上的CAP基因。结果从830份标本中分离出88株炭疽芽胞杆菌,总检出率为10.60%。2007年分离出炭疽杆菌的阳性标本最多,占36.36%;其次为2009年,占29.55%。阳性标本主要分布在黔西南州,其次为毕节地区和黔南州;册亨县、织金县和望谟县为炭疽杆菌检出数较多的监测县。88株炭疽芽胞杆菌CAP基因均为阳性。除2007年2株炭疽菌株PA基因为阴性外,其余86株PA基因均为阳性。结论贵州省炭疽疫源地面积广大,污染严重;检出的88株炭疽芽胞杆菌中97.73%的菌株同时具有两种毒力质粒,具有强致病性;该研究结果对贵州省炭疽疫情的预防控制及分子流行病学研究具有重要意义。 展开更多
关键词 炭疽 炭疽芽胞杆菌 毒力基因 质粒
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2019-2020年宁夏炭疽芽胞杆菌毒力鉴定及基因分型研究 被引量:6
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作者 杨聪 高建炜 +6 位作者 马江涛 海娥 邹悦 陈丽莉 李小璐 韩坤 张术斌 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第5期447-450,457,共5页
目的了解宁夏2019-2020年分离的炭疽芽胞杆菌菌株致病力及基因分型特征,为宁夏皮肤炭疽疫情判定与分子溯源提供实验室依据。方法收集2019-2020年宁夏各地区分离的炭疽芽胞杆菌,对其进行毒力鉴定,并运用MLVA-15和canSNP分型技术进行基因... 目的了解宁夏2019-2020年分离的炭疽芽胞杆菌菌株致病力及基因分型特征,为宁夏皮肤炭疽疫情判定与分子溯源提供实验室依据。方法收集2019-2020年宁夏各地区分离的炭疽芽胞杆菌,对其进行毒力鉴定,并运用MLVA-15和canSNP分型技术进行基因分型研究。结果2019-2020年宁夏分离到的炭疽芽胞杆菌均为强毒株,MLVA-15分型为同一种群,canSNP分型为A.Br.001/002组。结论2019-2020年宁夏分离到的炭疽芽胞杆菌致病力较强,且菌株呈现相同的基因分型特征,提示菌株间存在流行病学关联。此研究结果填补了宁夏炭疽芽胞杆菌实验室检测中菌株致病力及基因分型的空白。 展开更多
关键词 炭疽芽胞杆菌 毒力因子 基因分型
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炭疽芽孢杆菌芽孢适配子的结构与亲和性分析 被引量:3
4
作者 甄蓓 宋亚军 +4 位作者 王津 郭兆彪 张敏丽 俞守义 杨瑞馥 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期419-422,共4页
为了对炭疽芽孢杆菌疫苗株A .16R芽孢的适配子进行亲和性分析 ,体外构建了 78个碱基的随机DNA库 ,以炭疽芽孢杆菌疫苗株A .16R芽孢为靶标 ,用SELEX技术进行了 15轮的筛选 ,将筛选到的适配子库进行克隆、测序 ,用Macaw 2 .0 5和DNAsisv2... 为了对炭疽芽孢杆菌疫苗株A .16R芽孢的适配子进行亲和性分析 ,体外构建了 78个碱基的随机DNA库 ,以炭疽芽孢杆菌疫苗株A .16R芽孢为靶标 ,用SELEX技术进行了 15轮的筛选 ,将筛选到的适配子库进行克隆、测序 ,用Macaw 2 .0 5和DNAsisv2 .5软件对每一适配子的保守序列和二级结构进行分析 ,并用生物素 链酶亲和素 辣根酶系统检测 ,根据OD值的高低判定亲和力的大小 ,对每一适配子进行亲和力测定。结果表明 ,适配子的亲和力高低不一 ,OD值最高为 1.2 ,最低为 0 .2 5 ,二级结构分析结果显示 ,茎环和茎等二级结构可能是适配子与芽孢结合的基础 ;其一级结构提示有AGGGG、CCCCG、GGGTT、ACACT等保守序列 。 展开更多
关键词 炭疽芽孢杆菌 适配子 基因 结构 亲和性
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辽宁省炭疽疫源性调查和流行趋势分析 被引量:2
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作者 孙广玖 张眉眉 +1 位作者 姚文清 王英军 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期416-416,共1页
关键词 炭疽芽孢杆菌 流行趋势分析 疫源性 辽宁省 自然状态 传染病 抵抗力
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炭疽毒素受体及其与炭疽毒素的相互作用研究进展 被引量:2
6
作者 屈野 徐俊杰 陈薇 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第8期825-828,共4页
关键词 炭疽毒素受体 相互作用 细菌感染性疾病 炭疽杆菌芽胞 生物恐怖袭击 革兰氏阳性 杆菌感染 炭疽芽胞
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炭疽杆菌毒力因子作用机制研究进展 被引量:1
7
作者 冀德君 高崧 +3 位作者 吴艳涛 彭大新 杨玲 焦新安 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2003年第1期105-107,共3页
关键词 炭疽杆菌 毒力因子 作用机制 研究进展 荚膜
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炭疽毒素及其细胞受体的研究进展 被引量:1
8
作者 李艳玲 刘承宜 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期664-668,共5页
炭疽毒素由 3种蛋白组成 :保护性抗原 (protectiveantigen ,PA)、致死因子 (lethalfactor,LF)和水肿因子 (edemafactor ,EF) .综述炭疽毒素研究的最新进展 .主要介绍炭疽毒素的关键致病因子———LF的结构与功能 ,炭疽毒素膜转运成分PA... 炭疽毒素由 3种蛋白组成 :保护性抗原 (protectiveantigen ,PA)、致死因子 (lethalfactor,LF)和水肿因子 (edemafactor ,EF) .综述炭疽毒素研究的最新进展 .主要介绍炭疽毒素的关键致病因子———LF的结构与功能 ,炭疽毒素膜转运成分PA的结构及其受体 (anthraxtoxinreceptor ,ATR)和其cDNA克隆的结构 ,并讨论了在炭疽的治疗、预防和毒素在肿瘤治疗中的可能应用 . 展开更多
关键词 致死因子 保护性抗原 炭疽毒素 细胞受体 研究进展
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模拟土壤环境中炭疽杆菌生态学的实验研究 被引量:1
9
作者 梁旭东 马凤琴 俞东征 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 1995年第5期28-30,共3页
本实验以模拟的方法,采集不同地区、不同类型的土壤,人为用炭疽杆菌污染,在不同条件下观察该菌形成芽孢数量的变化。结果证实土壤的类型与芽孢的形成数量无明显关系,炭疽杆菌在土壤中保存时,随着时间延长,形成芽孢的比率并无明显... 本实验以模拟的方法,采集不同地区、不同类型的土壤,人为用炭疽杆菌污染,在不同条件下观察该菌形成芽孢数量的变化。结果证实土壤的类型与芽孢的形成数量无明显关系,炭疽杆菌在土壤中保存时,随着时间延长,形成芽孢的比率并无明显增加,但数量有所增长,说明土壤环境在一定程度上支持炭疽杆菌繁殖。特别是在土壤中加入新鲜动物血液时,芽孢数量明显增多,土壤的温度和湿度平衡对芽孢形成影响最大,符合炭疽的流行病学规律,提示在炭疽的监测与控制中,我们应当考虑到炭疽杆菌的这种特征,以便采取更有力的措施。 展开更多
关键词 炭疽杆菌 土壤 芽孢
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广西炭疽疫区外环境病原学调查及其防制对策
10
作者 方锦嵩 刘军 +1 位作者 曾竣 赖初麟 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 1996年第1期56-57,共2页
广西炭疽疫区外环境病原学调查及其防制对策方锦嵩,刘军,曾竣,赖初麟炭疽病是由炭疽杆菌引起的一种人兽共患的急性传染病。我区自1956年将炭疽列入疫情报告以来,每年都有病例发生[1]。近3年来我们在炭疽疫区暴发点采集外环... 广西炭疽疫区外环境病原学调查及其防制对策方锦嵩,刘军,曾竣,赖初麟炭疽病是由炭疽杆菌引起的一种人兽共患的急性传染病。我区自1956年将炭疽列入疫情报告以来,每年都有病例发生[1]。近3年来我们在炭疽疫区暴发点采集外环境水、土标本进行病原体分离,为防制... 展开更多
关键词 炭疽 疫区 外环境 病原学 防制
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医护人员应当注意消除患者疑虑
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作者 魏奉才 《中国医院》 2010年第12期84-84,共1页
案例1(案例见本刊2010年第11期76页)中护士的回答从专业角度上虽然没错,但在向患者或家属解释时,作出的回答却是错误的。
关键词 医护人员 患者 回答 案例
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畜禽常用消毒药的配与用
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作者 张仕权 李亮 《农业科技与信息》 2005年第2期25-25,共1页
漂白粉(含氯石灰) 取漂白粉2.50-10千克,加水47.50-40千克.充分搅匀,即为5%-20%的漂白粉混悬液,能杀灭细菌,病毒及炭疽芽孢。用于圈舍、饲糟及排泄物的消毒,易潮湿分解,诮现用现配,避免用于金属器械的消毒。
关键词 漂白粉 消毒药 畜禽 圈舍 加水 含氯 潮湿 炭疽芽孢 混悬液 细菌
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抗炭疽毒素保护性抗原单克隆抗体的制备及功能分析 被引量:3
13
作者 吕洪臻 唐小军 +4 位作者 熊四平 徐鑫 郑峰 冯振卿 朱进 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2013年第11期1497-1501,共5页
目的:原核表达炭疽杆菌保护性抗原PA10蛋白,制备单克隆抗体,并进行功能分析。方法:人工合成炭疽杆菌保护性抗原PA10编码基因并克隆入pUC57载体,酶切鉴定后,将PA10编码基因插入原核表达载体pColdⅡ中,测序验证正确后转化至大肠杆菌BL21(D... 目的:原核表达炭疽杆菌保护性抗原PA10蛋白,制备单克隆抗体,并进行功能分析。方法:人工合成炭疽杆菌保护性抗原PA10编码基因并克隆入pUC57载体,酶切鉴定后,将PA10编码基因插入原核表达载体pColdⅡ中,测序验证正确后转化至大肠杆菌BL21(DE3),在IPTG和低温条件下诱导蛋白表达,SDS-PAGE验证产物;用HiTrap IMAC HP柱纯化重组蛋白,Western blot进一步验证。以纯化获得PA10重组蛋白为抗原,常规程序免疫BALB/c小鼠,制备单克隆抗体,并检测所制备抗体的中和活性。结果:获得的PA10重组蛋白免疫小鼠制备单克隆抗体,最终获得了4株特异性的单克隆抗体(分别命名为2G8、5A8、7B3、9C9)。经体外炭疽毒素保护试验证实,其中1株单抗(7B3)具有较强的中和活性,其保护率可高达96%。结论:本文成功构建并表达炭疽杆菌保护性抗原PA10,制备了具有中和活性的抗PA单克隆抗体,为构建人源化的抗PA中和抗体奠定基础,从而有望用于炭疽病的治疗。 展开更多
关键词 炭疽杆菌 保护性抗原 单克隆抗体 中和抗体
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炭疽毒素及其克隆受体的研究进展 被引量:1
14
作者 刘承宜 李艳玲 +3 位作者 段锐 李燕 蔡雄伟 黄平 《华南师范大学学报(自然科学版)》 CAS 2002年第2期114-119,共6页
综述炭疽毒素研究的最新进展 .炭疽毒素由 3种蛋白组成 :致死因子 (Lethalfactor,LF) ,水肿因子 (edemafactor,EF)和保护性抗原 (protectiveantigen ,PA) .本文主要讲述了炭疽毒素的关键致病因子———致死因子 (LF)的结构和功能 ,炭疽... 综述炭疽毒素研究的最新进展 .炭疽毒素由 3种蛋白组成 :致死因子 (Lethalfactor,LF) ,水肿因子 (edemafactor,EF)和保护性抗原 (protectiveantigen ,PA) .本文主要讲述了炭疽毒素的关键致病因子———致死因子 (LF)的结构和功能 ,炭疽毒素受体 (anthraxtoxinreceptor,ATR)的结构及其特征性功能基团 ,介绍了通过基因互补对ATR进行克隆的方法 。 展开更多
关键词 炭疽毒素 克隆受体 致死因子 水肿因子 保护性抗原
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用MALDI_TOF MS观察适配子与炭疽芽孢的结合反应 被引量:1
15
作者 甄蓓 杜宗敏 +4 位作者 宋亚军 郭兆彪 王津 俞守义 杨瑞馥 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期8-11,共4页
用基质辅助激光解吸电离_飞行时间质谱(MALDI_TOFMS)观察炭疽芽孢适配子与炭疽芽孢结合反应 ,将SELEX(systemevolutionofligandsbyexponentialenrichment)技术筛选获得的一个炭疽芽孢适配子F77和第18轮的混合适配子以及兔抗炭疽芽孢抗... 用基质辅助激光解吸电离_飞行时间质谱(MALDI_TOFMS)观察炭疽芽孢适配子与炭疽芽孢结合反应 ,将SELEX(systemevolutionofligandsbyexponentialenrichment)技术筛选获得的一个炭疽芽孢适配子F77和第18轮的混合适配子以及兔抗炭疽芽孢抗体分别与炭疽芽孢结合反应后 ,用MALDI_TOFMS指纹图变化来研究这些分子与芽孢的结合情况 ,结果显示抗体、单个和混合适配子与芽孢结合反应后约在m/z1800处产生的质谱峰强度与芽孢对照相比明显降低;用MALDI_TOFMS质谱图变化可以推测适配子与芽孢的结合反应 ,该试验中观察到的结合情况与作者以前的研究结果一致。 展开更多
关键词 适配子 炭疽芽孢 基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱 结合反应
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全保护的半乳吡喃糖基(α1→4)-(半乳吡喃糖基)(β1→3)-2-脱氧-2-乙酰氨基-葡萄吡喃糖对甲氧基苯酚苷的合成
16
作者 黄蕾 李翔 +2 位作者 胡宏岗 俞世冲 吴秋业 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期145-152,共8页
目的合成全保护的半乳吡喃糖基(α1→4)-(半乳吡喃糖基)(β1→3)-2-脱氧-2-乙酰氨基-葡萄吡喃糖对甲氧基苯酚苷。方法以D-半乳糖和D-氨基葡萄糖盐酸盐为起始原料,采用硫苷和Schmidt苷糖基化高立体选择性、高效地合成2,3,4,6-四-O-苄基-... 目的合成全保护的半乳吡喃糖基(α1→4)-(半乳吡喃糖基)(β1→3)-2-脱氧-2-乙酰氨基-葡萄吡喃糖对甲氧基苯酚苷。方法以D-半乳糖和D-氨基葡萄糖盐酸盐为起始原料,采用硫苷和Schmidt苷糖基化高立体选择性、高效地合成2,3,4,6-四-O-苄基-β-D-半乳糖基(α1→4)-(2,3,4,6-四-O-乙酰基-β-D-半乳吡喃糖基)(β1→3)-2-脱氧-2-乙酰氨基-β-D-葡萄糖对甲氧基苯酚苷(1)。结果简便高效地获得了目标化合物,主要反应中间产物以及目标化合物均由1 HMNR、13 CMNR和质谱确证。结论选用的保护基合成简单,易脱去,通用性强;糖基化反应立体选择性好,产率高,适用于各种寡糖化合物的合成。 展开更多
关键词 糖基化 三糖类 炭疽芽孢杆菌 化学合成
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炭疽杆菌水肿因子的纯化及其性质
17
作者 南丽 钟小平 庄汉澜 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 1991年第1期16-20,共5页
将炭疽杆菌Sterne株芽孢液注入小鼠腹部皮下引起水肿,收集水肿渗出液,经硫酸铵分段盐析、离子交换纤维素层析、葡聚糖凝胶-G6200层析,可将水肿因子纯化131~178倍;经硫酸铵分段盐析、离子交换纤维素层析、高效液相层析,可纯化269倍。其... 将炭疽杆菌Sterne株芽孢液注入小鼠腹部皮下引起水肿,收集水肿渗出液,经硫酸铵分段盐析、离子交换纤维素层析、葡聚糖凝胶-G6200层析,可将水肿因子纯化131~178倍;经硫酸铵分段盐析、离子交换纤维素层析、高效液相层析,可纯化269倍。其中纯化178倍及269倍的EF在聚丙烯酰胺凝胶电泳时只见1条蛋白带。EF在pH7.0,-30℃或4℃保存较稳定,在37℃及偏酸、偏碱条件下均易失活;EF的生物学活性对炭疽保护性抗原有依赖性。 展开更多
关键词 炭疽杆菌 水肿因子 保护性抗原
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一种分离炭疽杆菌指示性选择培养基的改进 被引量:1
18
作者 窦大庆 海力且木 +2 位作者 格热提 王明军 邓秀芳 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 1997年第1期70-70,共1页
关键词 炭疽杆菌 培养基 指示性 细菌分离 卫生检验
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中和炭疽毒素的化合物
19
作者 李潇 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期226-226,共1页
关键词 保护作用 中和 炭疽毒素 化合物
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三种炭疽杆菌选择性培养基的比较实验
20
作者 王明军 王兴福 +2 位作者 格热提 邓秀芳 尔肯 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 1998年第5期88-88,82,共2页
关键词 炭疽杆菌 培养基 比较 实验
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