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青海部分地区蜱传斑点热群立克次体遗传进化特征研究
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作者 李志 张海宁 +5 位作者 张学勇 朵红 沈秀英 殷宏 付永 郭志宏 《中国人兽共患病学报》 北大核心 2025年第4期419-426,共8页
目的鉴定青海部分地区蜱种多样性,分析蜱传斑点热群立克次体的遗传分化特征,以期为该地区斑点热群立克次体防控提供理论依据。方法利用16S rRNA基因对采集的446份蜱样本,进行分子生物学鉴定,通过斑点热群立克次体外膜蛋白A基因(ompA基因... 目的鉴定青海部分地区蜱种多样性,分析蜱传斑点热群立克次体的遗传分化特征,以期为该地区斑点热群立克次体防控提供理论依据。方法利用16S rRNA基因对采集的446份蜱样本,进行分子生物学鉴定,通过斑点热群立克次体外膜蛋白A基因(ompA基因)检测蜱样本中斑点热群立克次体感染特征,运用DNASP v6、IQ-tree v2.2.0、BEAST v2.7.4等软件进行斑点热群立克次体单倍型分析、系统发育树构建及分化时间估计。结果采集的446份蜱样本分为3类,其中一类为血蜱,包括青海血蜱(n=192)、丹氏血蜱(n=37);另一类为革蜱,包括西藏革蜱(n=121)、草原革蜱(n=55)和森林革蜱(n=36),以及璃眼蜱属的边缘璃眼蜱(n=5)。在西藏革蜱、森林革蜱、草原革蜱、青海血蜱和丹氏血蜱均检测到劳氏立克次体,其感染率分别为95.9%、80.6%、69.1%、4.1%和2.7%;Rickettsia.sibirica subsp.sibirica BJ-90只在森林革蜱和草原革蜱中发现,感染率分别为5.6%和1.8%;Candidatus R.gannanii F107在丹氏血蜱和青海血蜱中的感染率分别为16.2%和7.8%;Ca.R.hongyuanensis仅在青海血蜱中发现,感染率为16.3%;埃氏立克次体在边缘璃眼蜱和丹氏血蜱中感染率分别为20%和2.7%。经单倍型和核苷酸多态性分析后发现,劳氏立克次体的13个单倍型以H13单倍型为主(42/192),Ca.R.gannanii F107的7个单倍型以H4为主导单倍型(4/18),Ca.R.hongyuanensis的3个单倍型以H1单倍型为优势单倍型(11/13)。系统发育树表明,青海部分地区劳氏立克次体序列和埃氏立克次体与R.rhipicephali聚为一支;Ca.R.hongyuanensis与Ca.R.gannanii F107聚为一支;而R.sibirica subsp.sibirica BJ-90与R.sibirica聚为一支。6种立克次体的平均分化时间大约为2000 Mya(95%CI:1999.08~2001.02 Mya)。结论青海部分地区分布的蜱种具有多样性,且首次在青海发现边缘璃眼蜱;斑点热群立克次体在不同蜱种中的感染率存在显著差异,具有较高遗传多样性。 展开更多
关键词 青海 分子生物学鉴定 斑点热群立克次体 单倍型 遗传进化
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斑点热群立克次体毒力因子研究进展
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作者 窦雯丽 徐可翰 +1 位作者 柳燕 何茂章 《中国人兽共患病学报》 北大核心 2025年第7期755-761,共7页
斑点热群立克次体是一种革兰氏阴性、专性胞内寄生菌,可引起人兽共患的斑点热。斑点热群立克次体可通过表达外膜蛋白和无形体衍生蛋白侵袭宿主细胞,并利用磷脂酶和细胞表面抗原等多种毒力因子逃避或抑制宿主的免疫防御,实现宿主定植及... 斑点热群立克次体是一种革兰氏阴性、专性胞内寄生菌,可引起人兽共患的斑点热。斑点热群立克次体可通过表达外膜蛋白和无形体衍生蛋白侵袭宿主细胞,并利用磷脂酶和细胞表面抗原等多种毒力因子逃避或抑制宿主的免疫防御,实现宿主定植及细胞间传播,发挥其对机体的致病效应。本文对目前已发现的多种斑点热群立克次体毒力因子相关研究进展进行综述,以进一步认识斑点热的致病机理,并为斑点热的防治提供参考。 展开更多
关键词 斑点热群立克次体 毒力因子 致病机制 免疫逃逸
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蜱传斑点热群立克次体研究进展 被引量:22
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作者 叶晓东 郑寿贵 +1 位作者 孙毅 许荣满 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期368-371,共4页
关键词 斑点热群立克次体 蜱传斑点热 FEVER 分子生物学 诊断技术 流行病学 实验诊断 病原学
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实时荧光定量PCR检测斑点热立克次体的方法建立 被引量:5
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作者 牛东升 杨晓 +2 位作者 陈梅玲 王锡乐 温博海 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第11期1297-1299,共3页
目的建立检测斑点热立克次体的群特异性实时荧光定量PCR方法。方法根据斑点热立克次体外膜蛋白B(ompB)基因序列设计群特异性引物和探针,以克隆的斑点热立克次体ompB基因片段作为模板,在荧光定量PCR检测仪上建立实时荧光定量检测法。结... 目的建立检测斑点热立克次体的群特异性实时荧光定量PCR方法。方法根据斑点热立克次体外膜蛋白B(ompB)基因序列设计群特异性引物和探针,以克隆的斑点热立克次体ompB基因片段作为模板,在荧光定量PCR检测仪上建立实时荧光定量检测法。结果该方法定量检测标准曲线的循环阈值(Ct)与模板拷贝数呈良好的线性关系,最小检出量小于10个拷贝。用该方法检测斑点热立克次体(立氏立克次体、西伯利亚立克次体、西伯利亚立克次体精河株、康氏立克次体、小蛛立克次体、澳大利亚立克次体、派氏立克次体、扇头蜱立克次体、非洲立克次体、阿斯特罕立克次体、斯洛伐克立克次体、日本立克次体、马赛立克次体、猫立克次体和黑龙江立克次体)DNA样本的结果均为阳性,但检测普氏立克次体、莫氏立克次体、恙虫病东方体、贝氏柯克斯体、查菲埃立克体、汉赛巴通体以及其他9种病原菌DNA样本的结果均为阴性。用荧光定量PCR检测立氏立克次体、黑龙江立克次体、西伯利亚立克次体精河株感染BALB/C小鼠脾脏组织DNA,均检出不同水平的阳性结果,结果与感染进程相关。结论本研究建立的检测斑点热立克次体的实时荧光定量PCR具有较高的敏感性和群特异性,适合样本中各种斑点热立克次体的快速检测,可用于斑点热的实验室快速诊断和自然疫源地的流行病学研究。 展开更多
关键词 立克次体属 斑点热 聚合酶链反应 细菌外膜蛋白质类B
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新发现的蚤传斑点热立克次体病 被引量:6
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作者 范明远 栾明春 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期74-77,共4页
关键词 斑点热群立克次体 立克次体病 血管内皮细胞 FEVER 血管周围炎 局部淋巴结 节肢动物 媒介生物
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黑龙江立克次体054株单克隆抗体对斑点热群立克次体抗原结合位点及特性的分析 被引量:4
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作者 张永国 陈香蕊 +1 位作者 陈万荣 于强 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 1997年第4期12-16,共5页
本文利用三株黑龙江立克欢你054株(HLJ-054)的单克隆抗体对四株斑点热群立克次体西伯利亚种(R.s.)246株、精河株(JH-74),立氏立克次体(R.r.)R株及HLJ-054株进行了血清学反应,对其蛋白组成及单抗结合抗原特性等方面进行... 本文利用三株黑龙江立克欢你054株(HLJ-054)的单克隆抗体对四株斑点热群立克次体西伯利亚种(R.s.)246株、精河株(JH-74),立氏立克次体(R.r.)R株及HLJ-054株进行了血清学反应,对其蛋白组成及单抗结合抗原特性等方面进行了研究。结果表明:JH-74林与246株在上述三个方面完全一致,不同于HLJ-054及R.r.R株;HLJ-054株与R.r.R株与三株单抗血清学反应高度交叉.但二者在蛋白组成及与单抗反应的抗原组成上均存在差异。该结果支持黑龙江立克次体054株为斑点热群立党次作的一个新成员。单抗F7针对的抗原结合表位为蛋白多肽;而单抗2E1、4G2结合的抗原表位可能为精蛋白。 展开更多
关键词 斑点热群 立克次体 单抗 黑龙江 抗原结合位点
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应用单克隆抗体研究康氏立克次体的抗原特性 被引量:2
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作者 赵立成 范明远 +2 位作者 于学杰 毕德增 匡平平 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 1990年第2期7-10,共4页
斑点热群立克次体的抗原成份极为复杂,它们拥有许多相同的抗原决定簇,也具有各自种特异性的抗原决定簇。本试验使用康氏立克次体(Rickettsia conorii)免疫BALB/C小鼠,取小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞系SP2/O-Ag14融合,经克隆筛选,获得2株持续... 斑点热群立克次体的抗原成份极为复杂,它们拥有许多相同的抗原决定簇,也具有各自种特异性的抗原决定簇。本试验使用康氏立克次体(Rickettsia conorii)免疫BALB/C小鼠,取小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞系SP2/O-Ag14融合,经克隆筛选,获得2株持续、稳定分泌抗康氏立克次体的单克隆抗体,经微量免疫荧光试验证实为种特异性。应用这2株单克隆抗体结合免疫印迹试验,对康氏立克次体的抗原成份进行初步分析,结果表明康氏立克次体脂多糖样(LPS-like)抗原具有种特异性的决定簇。 展开更多
关键词 斑点热 立克次体 单克隆抗体 抗原
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粤东丰溪林场斑点热疫源地 被引量:1
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作者 张健之 毕德增 +5 位作者 贺金荣 陈敏 王士明 郭衍 潘林祥 罗敬平 《中国人兽共患病杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第2期37-39,共3页
本文采用现场调查方法、血清学方法、病原分离方法和分子流行病学方法在广东省大埔县丰溪林场进行了斑点热疫源地调查,共调查了7个自然村,282个健康人,30头牛,2只羊、7个品种共53只野鼠及从野外和动物体表收集3个品种共... 本文采用现场调查方法、血清学方法、病原分离方法和分子流行病学方法在广东省大埔县丰溪林场进行了斑点热疫源地调查,共调查了7个自然村,282个健康人,30头牛,2只羊、7个品种共53只野鼠及从野外和动物体表收集3个品种共494只蜱。结果表明:大埔县林区的优势鼠种为褐家鼠和黄毛鼠;鼠的带蜱率为15.09%(8/53);牛和羊的带蜱率均为100%(30/30,2/2);解剖后观察脏器有病变的鼠占鼠总数的49.05(26/53)。优势蜱种为金泽革蜱、豪猪血蜱和台湾角血蜱。健康人群血清中西伯利亚立克次体抗体阳性率为10.28%(29/282);康氏立克次体抗体阳性率为3.90%(11/282);小蛛立克次体阳性率为5.67%(16/282)。鼠血清中三种立克次体抗体阳性率分别为13.33%(4/30)、3.33%(1/30)和10.00%(3/30)。牛血清中三种立克次体抗体阳性率分别为8.00%(2/26)、4.00%(1/25)和4.00%(1/25)。 展开更多
关键词 斑点热 疫源地 分子流行病学
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日本斑点热立克次体安徽120株ompB基因及其编码蛋白的生物信息学和B细胞抗原表位分析 被引量:1
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作者 刘伯玉 罗婉蓉 +6 位作者 陈振 余冬阳 高越 朱禹 洪颖 杨莉 柳燕 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2020年第6期819-824,共6页
目的对从我国临床患者血液中新发现和分离出的日本斑点热立克次体安徽120株ompB基因及其编码蛋白进行系统的结构与功能预测,为深入了解其在立克次体致病机制中的作用、研发斑点热临床诊断试剂和疫苗提供理论基础。方法基于日本斑点热立... 目的对从我国临床患者血液中新发现和分离出的日本斑点热立克次体安徽120株ompB基因及其编码蛋白进行系统的结构与功能预测,为深入了解其在立克次体致病机制中的作用、研发斑点热临床诊断试剂和疫苗提供理论基础。方法基于日本斑点热立克次体安徽120株ompB基因及其编码的氨基酸序列,应用生物信息学方法预测其信号肽、跨膜区、疏水性等性质和可能的B细胞抗原表位。结果日本斑点热立克次体安徽120株ompB基因在3 297~3 311处存在连续15个碱基的缺失,除此之外,该分离株还有4个碱基突变。该基因编码的氨基酸数目为1 651个,蛋白质分子量为167.69 ku,共由20种氨基酸组成,其中含量较多的氨基酸是Gly;理论等电点pI为5.15,消光系数为58 805或58 680,蛋白不稳定指数为7.15,脂肪指数为88.86,总平均亲水性(GRAVY)为0.06,为疏水性蛋白;Signal peptide (Sec/SPI) Likelihood为0.567 7,有信号肽序列;存在一个Pfam区域和自转运体区,分别与细菌黏附宿主和蛋白质转运有关;蛋白二级结构中以无规卷曲为主,其次为β-折叠和α-螺旋,分别占到53.73%、30.83%和15.45%。同源模建蛋白的三级结构中,第1 308~1 651氨基酸部分在蛋白表面形成桶状结构,可能具有丝氨酸蛋白酶的作用;蛋白分子内抗原表位较丰富,共有159个可能的抗原表位,预测分数最高(0.94)的为1 269~1 284位序列。结论成功分析和预测了日本斑点热立克次体安徽120株ompB基因及其编码蛋白的组成、蛋白质的二级结构、三级结构和B细胞抗原表位,为研究日本斑点热立克次体的致病机制、临床诊断试剂和亚单位疫苗的研发提供了理论支持。 展开更多
关键词 日本斑点热立克次体安徽120株 ompB B细胞抗原表位 生物信息学
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斑点热群立克次体分子生物学研究进展 被引量:1
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作者 张健之 范明远 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 1993年第5期50-52,共3页
斑点热群(Spotted Fever Group,SFG)立克次体是引起斑点热的病原体。该群立克次体是立克次体目中最复杂的一群。目前已定论并记载在《Bergey’s细菌学鉴定手册》第九版上的有8种,即:引起落矶山斑点热的立氏立克次体(Rickettsia ricketts... 斑点热群(Spotted Fever Group,SFG)立克次体是引起斑点热的病原体。该群立克次体是立克次体目中最复杂的一群。目前已定论并记载在《Bergey’s细菌学鉴定手册》第九版上的有8种,即:引起落矶山斑点热的立氏立克次体(Rickettsia rickettsii),引起北亚热的西伯利亚立克次体(R.sibiria),引起钮扣热的康氏立克次体(R.conorii)。 展开更多
关键词 斑点热群 立克次氏体 分子生物学
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实时荧光定量PCR检测斑点热立克次体方法的建立 被引量:2
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作者 罗婉蓉 刘伯玉 +6 位作者 陈振 任翠平 高越 杨莉 朱禹 余东阳 柳燕 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2020年第7期1008-1013,共6页
目的建立斑点热群立克次体(SFGR)TaqMan实时荧光定量PCR(qPCR)快速检测方法。方法根据日本斑点热立克次体外膜蛋白A(ompA)基因序列设计特异性引物和探针,建立基于TaqMan探针的实时荧光定量PCR检测方法,对其特异性、灵敏性、重复性进行检... 目的建立斑点热群立克次体(SFGR)TaqMan实时荧光定量PCR(qPCR)快速检测方法。方法根据日本斑点热立克次体外膜蛋白A(ompA)基因序列设计特异性引物和探针,建立基于TaqMan探针的实时荧光定量PCR检测方法,对其特异性、灵敏性、重复性进行检测,用建立的此检测方法和常规的巢式PCR方法同时对临床收集的80份患者血标本进行检测并比较两者结果。结果成功建立了检测SFGR的实时荧光定量PCR方法,标准曲线的循环阈值与模板拷贝数均呈良好的线性关系(r>0.99),且在检测SFGR核酸样本时具有良好的灵敏度、特异性和重复性。结论该研究建立了基于TaqMan探针检测SFGR的实时荧光定量PCR检测方法,为临床实验室快速确诊SFGR疾病提供了快速、有效的技术手段。 展开更多
关键词 斑点热立克次体 OMPA TAQMAN探针 实时荧光定量PCR
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黑龙江立克次体感染对小鼠脾脏免疫相关基因转录的影响
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作者 于永慧 段长松 +5 位作者 焦俊 赵月峨 周冬生 温博海 欧阳譞 熊小路 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第4期326-333,共8页
目的分析黑龙江立克次体感染小鼠脾脏免疫相关基因的转录变化,筛选影响黑龙江立克次体感染致病进程的关键靶标。方法取20只雌性C3H/HeN小鼠,随机分为未感染组(0 hpi)、感染3 h组(3 hpi)、感染3 d组(3 dpi)及感染6 d组(6 dpi),每组5只,... 目的分析黑龙江立克次体感染小鼠脾脏免疫相关基因的转录变化,筛选影响黑龙江立克次体感染致病进程的关键靶标。方法取20只雌性C3H/HeN小鼠,随机分为未感染组(0 hpi)、感染3 h组(3 hpi)、感染3 d组(3 dpi)及感染6 d组(6 dpi),每组5只,采用尾静脉注射法感染黑龙江立克次体,在4个时相点解剖小鼠取脾,提取总RNA进行测序,筛选出特异性转录基因并进行GO注释、R语言富集及KEGG可视化功能分析。结果小鼠感染黑龙江立克次体后,脾脏有219930个mRNA发生了特异性转录,通过GO注释及富集筛选出显著性变化的3类基因:(1)35个天然免疫相关基因,其中参与γ干扰素(IFN-γ)信号通路的irg1、gbp10基因转录上调最明显(P<0.05);(2)31个获得性免疫相关基因,其中参与细胞凋亡通路的gzmb基因转录上调最明显(P<0.05);(3)41个炎症反应相关基因,其中参与细胞因子与细胞因子受体信号通路的ccl4基因转录上调最明显(P<0.05)。结论宿主IFN-γ信号通路中的irg1、gbp10基因,细胞凋亡通路中的gzmb基因,细胞因子及细胞因子受体信号通路中的ccl4基因影响黑龙江立克次体感染的致病进程。 展开更多
关键词 立克次体感染 转录 遗传 黑龙江立克次体 天然免疫 获得性免疫 炎症反应
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