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汉滩病毒M、S基因部分片段嵌合基因真核载体的构建与基因免疫 被引量：9
1
作者 张芳琳 徐志凯 +6 位作者 阎岩 罗雯 刘勇 吴兴安 白文涛 赵茜 王海涛 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期419-421,共3页
目的在本室前期工作的基础上,进一步进行汉滩病毒M基因G2片段与S基因0.7Kb片段嵌合基因基因免疫的研究。方法构建汉滩病毒76-118株M基因G2片段与S基因5′端700bp片段的嵌合基因真核表达载体pcDNA3.1-G2S0.7。用该质粒免疫Balb/c小鼠,并... 目的在本室前期工作的基础上,进一步进行汉滩病毒M基因G2片段与S基因0.7Kb片段嵌合基因基因免疫的研究。方法构建汉滩病毒76-118株M基因G2片段与S基因5′端700bp片段的嵌合基因真核表达载体pcDNA3.1-G2S0.7。用该质粒免疫Balb/c小鼠,并用ELISA法及淋巴细胞增殖实验,检测基因免疫后的免疫应答效果。结果限制性内切酶鉴定结果表明真核表达载体的构建正确。用pcDNA3.1-G2S0.7直接免疫小鼠,可诱导产生抗汉滩病毒核蛋白NP及糖蛋白GP特异性的抗体,抗体效价分别为1200及180。淋巴细胞增殖实验表明,嵌合基因免疫小鼠脾细胞对NP及GP的增殖指数,均明显高于对照组。结论汉滩病毒M基因G2片段及S基因0.7kb片段的嵌合基因,既可刺激机体产生特异性的抗汉滩病毒体液免疫应答,也可刺激机体产生特异性的细胞免疫应答,本研究为进一步进行汉滩病毒基因疫苗的研究奠定了实验基础。 展开更多
关键词 汉滩病毒 M基因 S基因 基因疫苗 体液免疫 细胞免疫
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辽宁省鼠类感染肾综合征出血热的病原学及分子生物学检测比较 被引量：9
2
作者 秦彩明 刘芸 +3 位作者 姚文清 孙英伟 韩仰欢 张稷博 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期528-531,共4页
目的了解辽宁省鼠间带毒、鼠密度及鼠种构成与汉坦病毒的分子特征。方法采用夹夜法对鼠密度、鼠种构成及鼠带毒率进行监测,用间接免疫荧光方法检测HFRS抗原,用Vero-E6细胞对病毒进行传代分离,RT-PCR方法对阳性毒株进行基因分型及测序分... 目的了解辽宁省鼠间带毒、鼠密度及鼠种构成与汉坦病毒的分子特征。方法采用夹夜法对鼠密度、鼠种构成及鼠带毒率进行监测,用间接免疫荧光方法检测HFRS抗原,用Vero-E6细胞对病毒进行传代分离,RT-PCR方法对阳性毒株进行基因分型及测序分析。结果鼠密度在春秋季各出现一个高峰,村内鼠密度高于村外鼠密度,褐家鼠为优势鼠种。带毒率无显著性差异,各鼠种间带毒率无显著性差异。5株病毒,有2个遗传分支,4株为HV的SEO型,1株为HTN型,4株SEO型HV基本位于系统发生树的同一进化枝上;1株HTN型HV,与汉滩病毒标准株76-118接近。结论辽宁省每年存在春秋季两个鼠密度高峰,带毒率同季节及鼠种无关。辽宁省是以SEO型HV为主的SEO和HTN混合型疫区,且SEO型汉坦病毒变异较小。 展开更多
关键词 肾综合征出血热 鼠密度 汉坦病毒 RT-PCR 系统发生树
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采用ROC曲线和判别分析对肾综合征出血热的预后研究 被引量：4
3
作者 罗瑞虹 陈幼明 +2 位作者 张宇锋 赵志新 杨绍基 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期481-482,472,共3页
关键词 肾综合征出血热病毒 ROC曲线 预后研究 判别分析 急性病毒性传染病 自然疫源性疾病 syndrome 病毒性出血热 肾脏损害 fever
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大白鼠吸入EHFV气溶胶后病毒在各脏器的分布 被引量：10
4
作者 张云 李越希 +4 位作者 陶开华 赵学忠 史江 吴光华 王心如 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 1993年第1期34-36,共3页
本项研究用病毒分离和RT-PCR技术检测大白鼠吸入流行性出血热病毒气溶胶后观察EHFV在各脏器的分布,结果发现大白鼠吸入EHFV气溶胶后30天即在心、肺、肾、脾和肝等脏器组织中用病毒分离和RT-PCR扩增技术检测到EHFV和EHFV-RNA,证实了EHFV... 本项研究用病毒分离和RT-PCR技术检测大白鼠吸入流行性出血热病毒气溶胶后观察EHFV在各脏器的分布,结果发现大白鼠吸入EHFV气溶胶后30天即在心、肺、肾、脾和肝等脏器组织中用病毒分离和RT-PCR扩增技术检测到EHFV和EHFV-RNA,证实了EHFV由吸入感染引起。这对研究气溶胶吸入感染机理和传播方式提供了可靠的科学依据。 展开更多
关键词 流行性血热 病毒 聚合酶链反应
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汉滩病毒囊膜糖蛋白G2与核蛋白氨基端在昆虫细胞中的融合表达 被引量：4
5
作者 刘勇 徐志凯 +4 位作者 张芳琳 罗雯 吴兴安 白文涛 胡刚 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期215-217,共3页
目的 :在Bac to Bac杆状病毒表达系统中 ,融合表达汉滩病毒的囊膜糖蛋白G2与核蛋白氨基端。方法 :构建含有汉滩病毒G2S0 .7嵌合基因的表达载体 pFBDHTa G2S0 .7,并转化DH10Bac感受态菌。利用其含有的细菌Tn7转座系统 ,将嵌合基因重组至... 目的 :在Bac to Bac杆状病毒表达系统中 ,融合表达汉滩病毒的囊膜糖蛋白G2与核蛋白氨基端。方法 :构建含有汉滩病毒G2S0 .7嵌合基因的表达载体 pFBDHTa G2S0 .7,并转化DH10Bac感受态菌。利用其含有的细菌Tn7转座系统 ,将嵌合基因重组至杆状病毒穿梭质粒bacmid中 ,并筛选含有G2S0 .7嵌合基因的重组杆状病毒 ,在昆虫细胞中表达该融合蛋白。对表达产物用间接免疫荧光、ELISA和免疫印迹进行检测。结果 :构建了的含G2S0 .7嵌合基因的重组杆状病毒 ,感染昆虫细胞后 ,可表达相应大小的融合蛋白。该蛋白可被抗汉滩病毒核蛋白及糖蛋白G2的特异性单克隆抗体 (mAb)所识别。结论 :利用杆状病毒表达系统 ,成功地表达同时具有核蛋白及糖蛋白G2生物学活性的融合蛋白G2S0 .7。 展开更多
关键词 汉滩病毒 杆状病毒 昆虫细胞 核蛋白 糖蛋白 融合表达
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运用流式细胞术快速检测汉滩病毒滴度 被引量：4
6
作者 蒋伟 杨栋强 +5 位作者 潘蕾 于海涛 李彧 王伟 王平忠 白雪帆 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期579-581,584,共4页
目的:建立用流式细胞仪快速测定汉滩病毒滴度的方法。方法:汉滩病毒76-118株感染Vero-E6细胞,以汉滩病毒核蛋白单克隆抗体(mAb)3G1为一抗,FITC标记的羊抗小鼠抗体为二抗,用流式细胞术(FCM)检测阳性细胞率,评价感染后不同时间点,以及不... 目的:建立用流式细胞仪快速测定汉滩病毒滴度的方法。方法:汉滩病毒76-118株感染Vero-E6细胞,以汉滩病毒核蛋白单克隆抗体(mAb)3G1为一抗,FITC标记的羊抗小鼠抗体为二抗,用流式细胞术(FCM)检测阳性细胞率,评价感染后不同时间点,以及不同病毒接种量的阳性细胞率,并与间接免疫荧光法对比。结果:感染后36 h阳性细胞百分率为(10.06±0.42)%,最低检测的病毒滴度为100 TCID50/mL。结论:相对于传统的空斑实验及间接免疫荧光滴定法,FCM是一种简单、快速、有效检测汉滩病毒滴度的方法。 展开更多
关键词 汉滩病毒 流式细胞术 空斑实验 间接免疫荧光 病毒滴度
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汉坦病毒诱导人脐静脉内皮细胞HSP70的表达及意义 被引量：6
7
作者 余璐 马恒 +1 位作者 刘彦仿 杨守京 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期9-12,共4页
　目的: 研究人脐静脉内皮细胞 (HUVEC)感染汉坦病毒(Hantavirus, HTV)后应激反应的规律及意义。方法: 采用免疫细胞化学染色法和核酸分子原位杂交, 检测热休克蛋白 70(HSP70)的表达; 用RT --PCR观察HSP70mRNA水平变化的规律。结果: HT... 　目的: 研究人脐静脉内皮细胞 (HUVEC)感染汉坦病毒(Hantavirus, HTV)后应激反应的规律及意义。方法: 采用免疫细胞化学染色法和核酸分子原位杂交, 检测热休克蛋白 70(HSP70)的表达; 用RT --PCR观察HSP70mRNA水平变化的规律。结果: HTV感染HUVEC后, 免疫细胞化学染色法可检出HSP70呈高表达, 原位杂交发现细胞质内有HSP7mRNA的阳性信号。感染后不同时间点RT- PCR的结果表明与对照组相比较, HSP70mRNA的水平在感染后迅速升高并持续高表达 (P<0. 05 )。结论: HTV可诱导HUVEC高表达HSP70。HSP70可能具有抑制病毒复制和保护内皮细胞的作用。 展开更多
关键词 汉坦病毒 人脐静脉内皮细胞 热休克蛋白70
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肾综合征出血热患者血清中汉坦病毒的检测及其序列分析 被引量：6
8
作者 潘蕾 白雪帆 +3 位作者 黄长形 李光玉 杨为松 傅恩清 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2001年第1期13-17,共5页
目的　为了进一步探讨RT -PCR用于HFRS临床标本中病毒基因检测的可行性及陕西西安地区近年主要流行汉坦病毒 (HV)毒株的分子流行病学特点。方法　本研究设计并合成了两套分别互补于HVM基因片段和S基因片段的引物 ,建立了检测HFRS患者临... 目的　为了进一步探讨RT -PCR用于HFRS临床标本中病毒基因检测的可行性及陕西西安地区近年主要流行汉坦病毒 (HV)毒株的分子流行病学特点。方法　本研究设计并合成了两套分别互补于HVM基因片段和S基因片段的引物 ,建立了检测HFRS患者临床血清标本中HV基因的RT -nestedPCR方法 ,并对扩增的部分HV靶基因进行了测序分析和比较。结果　 119份HFRS病人血清 (经临床和IFA确诊 )经用S基因片段引物的RT -nestedPCR检测 ,阳性率分别为 :6 0 .5 % (<1w) ,34.1% (1～ 2w) ,4% (2～ 3w) ,0 % (>3w) ,31份HFRS急性期病人血清用M基因片段引物的RT -nestedPCR检测 ,仅 12份阳性 ,阳性率 40 %。结论　表明S基因片段引物的扩增效果优于M基因片段引物。 6份S基因片段引物扩增产物的测序结果显示 ,陕西西安地区HFRS感染的主要毒株为汉滩型 ,将PCR扩增的 6个靶基因序列与 76 - 118株S基因片段相应的核苷酸序列进行分析比较 ,同源性为 87.2 %～ 96 .0 % ;其推导的氨基酸序列与 76 - 118株核衣壳蛋白相应的氨基酸序列比较 ,同源性为 89.0 %～ 96 .0 %。 展开更多
关键词 汉坦病毒 肾综合征出血热 聚合酶链式反应 序列分析
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实验性汉坦病毒感染乳鼠诱导脑神经细胞表达热休克蛋白70 被引量：7
9
作者 赵君 杨守京 刘彦仿 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 2000年第3期232-233,共2页
关键词 热休克蛋白 汉坦病毒 免疫组化 流行性出血热
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单克隆抗体对肾综合征出血热病毒感染乳鼠保护作用的研究 被引量：8
10
作者 卫立辛 汪美先 +1 位作者 徐志凯 汪力亚 《单克隆抗体通讯》 CSCD 1989年第2期5-10,共6页
HFRS病毒陈株100LD_(50)腹腔感染新生乳鼠后24小时,腹腔分别接种24株抗HFRS病毒McAb,观察McAb对感染新生乳鼠的保护作用。结果发现,有5株McAb保护率为100％,1株McAb保护率为17％,另有7株McAb可使感染乳鼠的发病死亡时间推迟。取有明显... HFRS病毒陈株100LD_(50)腹腔感染新生乳鼠后24小时,腹腔分别接种24株抗HFRS病毒McAb,观察McAb对感染新生乳鼠的保护作用。结果发现,有5株McAb保护率为100％,1株McAb保护率为17％,另有7株McAb可使感染乳鼠的发病死亡时间推迟。取有明显保护作用的5株McAb分别接种感染后不同时间的乳鼠,结果在48小时内接种保护率均达100％;但随接种时间推后,保护率逐渐下降,感染后10天接种几乎无保护作用。此5株McAb保护作用均优于多克隆的免疫血清。应用不同稀释的McAb 3D8进行保护试验,发现保护效果与接种剂量密切相关。采用固定抗体,稀释病毒方法测得McAb 3D8对HFRS病毒陈株感染乳鼠的保护指数为5.8。 展开更多
关键词 肾综合征出血热病毒 保护作用 感染乳鼠 单克隆抗体 McAb 抗HFRS病毒 新生乳鼠 保护率 腹腔感染 死亡时间 不同时间 接种时间 免疫血清 保护效果 病毒方法 保护指数 感染后 3D8 多克隆 稀释
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不同效价出血热灭活疫苗人体接种后的中和抗体应答及其对两个型汉坦病毒的交叉反应 被引量：5
11
作者 刘文雪 俞永新 +2 位作者 朱智勇 杨立宏 董关木 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2000年第1期73-74,21,共3页
以不同效价的出血热疫苗免疫人体后，４ 批效价合格的疫苗中和抗体阳转率达８７ ％ ～１００％ ，抗体ＧＭＴ达１５ ～１８，而一批未达合格标准的疫苗阳转率只有６０ ％ ，ＧＭＴ７－１ ；免疫血清对同型毒株的抗体阳转率为１００％ ... 以不同效价的出血热疫苗免疫人体后，４ 批效价合格的疫苗中和抗体阳转率达８７ ％ ～１００％ ，抗体ＧＭＴ达１５ ～１８，而一批未达合格标准的疫苗阳转率只有６０ ％ ，ＧＭＴ７－１ ；免疫血清对同型毒株的抗体阳转率为１００％ ，对异型只为２５ ％ 。为保证疫苗在人体应用的有效性，应研究及制备ＨＴＮ和ＳＥＯ两型的双价疫苗。 展开更多
关键词 出血热疫苗 人体接种 中和抗体应答 汉坦病毒
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汉坦病毒诱导非洲绿猴肾上皮细胞热休克蛋白70的表达规律及意义 被引量：6
12
作者 余璐 马恒 +1 位作者 朱军 杨守京 《医学研究生学报》 CAS 2004年第12期1072-1075,F031,共5页
目的 :旨在研究汉坦病毒 (Hantavirus,HTV)感染非洲绿猴肾上皮 (Vero E6 )细胞后应激反应的规律及意义。　方法 :采用免疫细胞化学染色法、免疫荧光激光共聚焦及RT PCR方法观察热体克蛋白 (HSP) 70的表达规律。　结果 :HTV感染Vero E6... 目的 :旨在研究汉坦病毒 (Hantavirus,HTV)感染非洲绿猴肾上皮 (Vero E6 )细胞后应激反应的规律及意义。　方法 :采用免疫细胞化学染色法、免疫荧光激光共聚焦及RT PCR方法观察热体克蛋白 (HSP) 70的表达规律。　结果 :HTV感染Vero E6细胞后 ,免疫细胞化学染色法可检出HSP 70阳性信号。感染后不同时间点 ,免疫荧光激光共聚焦显微镜及RT PCR观察结果表明 ,HSP 70及HSP 70mRNA的水平在感染后迅速升高 ,并持续高表达 (P <0 .0 5 )。　结论 :HTV可诱导Vero E6细胞HSP 70高表达 ;HSP 展开更多
关键词 汉坦病毒 热休克蛋白70 应激反应
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应用噬菌体肽文库筛选mAbF3特异性结合肽(英文) 被引量：2
13
作者 王长军 唐家琪 +4 位作者 王登高 陶开华 李先富 潘秀珍 郭恒彬 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期605-607,610,共4页
目的　应用噬菌体展示肽文库筛选可与汉坦病毒囊膜蛋白中和性单抗 (mAb)F3特异性结合的配体肽。方法以F3mAb为筛选配基 ,对噬菌体展示的随机 12肽文库进行 3轮生物亲和淘选 ;用夹心ELISA和竞争ELISA鉴定筛选克隆的结合特性 ,并进一步对... 目的　应用噬菌体展示肽文库筛选可与汉坦病毒囊膜蛋白中和性单抗 (mAb)F3特异性结合的配体肽。方法以F3mAb为筛选配基 ,对噬菌体展示的随机 12肽文库进行 3轮生物亲和淘选 ;用夹心ELISA和竞争ELISA鉴定筛选克隆的结合特性 ,并进一步对阳性克隆进行序列测定和分析。结果　通过 3轮生物淘选 ,能被抗体捕获的噬菌体克隆为 2 1/ 2 2。ELISA测定显示 ,筛选到的噬菌体短肽能与F3mAb特异性结合。序列分析表明 ,7个阳性克隆氨基酸序列相同 ,均为 MHGPTKNQMWHT ;同源性分析显示 ,该序列与HTNV/SEOVM蛋白G2区第 75 0～ 75 9位氨基酸有较高的同源性。结论　本研究为基于表位水平的HFRSV特异性分子多肽疫苗的设计提供了重要的依据分析。结果　通过 3轮生物淘选 ,能被抗体捕获的噬菌体克隆为 2 1/ 2 2。ELISA测定显示 ,筛选到的噬菌体短肽能与F3mAb特异性结合。序列分析表明 ,7个阳性克隆氨基酸序列相同 ,均为 MHGPTKNQMWHT ;同源性分析显示 ,该序列与HTNV/SEOVM蛋白G2区第 75 0～ 75 9位氨基酸有较高的同源性。 展开更多
关键词 MAB F3 特异性结合肽 汉坦病毒 噬菌体展示肽文库 抗原表位 ELISA
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利用噬菌体肽库筛选汉滩病毒受体结合表位的研究 被引量：2
14
作者 吕欣 薛小平 +2 位作者 杨乔欣 马文煜 尹文 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期73-75,共3页
目的 确定汉滩病毒（ＨＴＮＶ）上可与宿主细胞受体结合的一段配基表位。方法 型特异性ｍＡｂ ３Ｇ１，与 ＨＴＮＶ糖蛋白ＧＺ及核蛋白（ＮＰ）具有双结合活性，且中和效价很高。以纯化的 ｍＡｂ ３Ｇ１作为配基，淘筛噬菌体随机 １２... 目的 确定汉滩病毒（ＨＴＮＶ）上可与宿主细胞受体结合的一段配基表位。方法 型特异性ｍＡｂ ３Ｇ１，与 ＨＴＮＶ糖蛋白ＧＺ及核蛋白（ＮＰ）具有双结合活性，且中和效价很高。以纯化的 ｍＡｂ ３Ｇ１作为配基，淘筛噬菌体随机 １２肽库，经ＥＬＩＳＡ法鉴定后，对阳性克隆进行测序并与天然病毒蛋白Ｇ２及ＮＰ的序列进行同源性比较分析。结果 经３轮筛选，噬菌体显示有良好的富集效果。从第３轮筛选产物中，随机挑取２１个克隆进行ＥＬＩＳＡ结合实验。结果显示，９个克隆与 ｍＡｂ３Ｇ１有较强的特异结合活性；ＤＮＡ测序结果表明，具有保守性序列模式ＰＸ＿（１－２）ＨＸ＿（０－２）。该基序分别与Ｇ２～（９６）ＹＰＷＨＴＫＣＨＹ～（１０５）及 ＮＰ～（８１）ＰＹＧＶＥＰＧＤＨＬＫＥＲＳ～（９４）相似。结论 从噬菌体随机肽库中，筛选到能与ｍＡｂ ３Ｇ１特异性结合的一段短肽基序 ＰＸ＿（１－２）ＨＸ（０－２），其与 ＨＴＮＶ Ｇ２部分氨基酸的同源性较高，可能是与宿主细胞受体结合的表位，为进一步证实和研究ＨＴＮＶ的受体奠定了基础。 展开更多
关键词 噬菌体表面呈现 筛选 汉坦病毒 MAB 表位
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抗汉坦病毒NP抗原细胞内抗体的瞬时表达及活性检测 被引量：2
15
作者 白文涛 徐志凯 +4 位作者 张芳琳 罗雯 刘勇 吴兴安 阎岩 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期705-707,共3页
目的 :在真核细胞中表达抗汉坦病毒NP抗原鼠源性单克隆抗体 (mAb) 1A8的scFv ,并检测表达产物的活性。方法 :将真核表达载体 1A8 scFv Cκ/pCI neo用脂质体转染COS 7细胞 ,用间接免疫荧光和免疫共沉淀法检测瞬时表达产物的免疫学活性。... 目的 :在真核细胞中表达抗汉坦病毒NP抗原鼠源性单克隆抗体 (mAb) 1A8的scFv ,并检测表达产物的活性。方法 :将真核表达载体 1A8 scFv Cκ/pCI neo用脂质体转染COS 7细胞 ,用间接免疫荧光和免疫共沉淀法检测瞬时表达产物的免疫学活性。结果 :间接免疫荧光的结果表明 ,约 1%细胞胞质中出现弥散荧光 ,在免疫共沉淀 /免疫印记中 ,表达的抗体片段可与汉坦病毒的NP抗原特异性结合。结论 :细胞内表达的1A8 scFv Cκ可与NP抗原特异性结合 。 展开更多
关键词 细胞内免疫 单链抗体 单克隆抗体 汉坦病毒
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免疫-PCR检测肾综合征出血热患者血清中抗核衣壳蛋白抗体方法的建立 被引量：3
16
作者 史俊岩 牟玲 +6 位作者 罗恩杰 刘祥宁 王楠 张晓棠 吴云萍 赵新艳 林松 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2004年第5期397-400,共4页
目的　建立高灵敏性和高特异性的免疫 -PCR方法检测肾综合征出血热 (HFRS)患者血清中抗核衣壳蛋白抗体。方法　用汉坦病毒 ( 76 - 118株 )重组核衣壳蛋白为抗原包被聚苯乙烯微滴度板 ,与经ELISA法和临床均已确诊为HFRS患者的血清进行抗... 目的　建立高灵敏性和高特异性的免疫 -PCR方法检测肾综合征出血热 (HFRS)患者血清中抗核衣壳蛋白抗体。方法　用汉坦病毒 ( 76 - 118株 )重组核衣壳蛋白为抗原包被聚苯乙烯微滴度板 ,与经ELISA法和临床均已确诊为HFRS患者的血清进行抗原抗体特异性反应 ,以链霉亲和素为桥梁将生物素标记的抗体与生物素标记的DNA指示分子相连 ,PCR扩增DNA指示分子 ,通过检测指示分子DNA来反映肾综合征出血热患者血清中抗核衣壳蛋白抗体的水平 ,并与传统的ELISA法进行比较。结果　免疫 -PCR检测肾综合征出血热患者血清中抗核衣壳蛋白抗体的敏感性是ELISA法的 2 5 0 0 0倍 ;30例HFRS阳性患者血清免疫 -PCR检测均为阳性 ,2 0例甲型肝炎阳性血清和 2 0例正常人血清免疫 -PCR检测均为阴性。结论　免疫 -PCR方法敏感性高 ,特异性强 。 展开更多
关键词 免疫-PCR 肾综合征出血热 抗核衣壳蛋白抗体
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地高辛素标记探针检测HFRS病毒基因研究 被引量：3
17
作者 朱进 张云 +2 位作者 郭恒彬 唐家琪 吴光华 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2000年第2期13-15,共3页
本实验用聚合酶链反应与随机引物标记法制备地高辛素标记的肾综合征出血热病毒核酸M、S片段cDNA探针。DNA-RNA斑点杂交结果表明，该探针具有肾综合征出血热病毒的特异性，可检出10pgHFRSV-RNA。实验结果表明：抗原阳性鼠体螨10只组、5... 本实验用聚合酶链反应与随机引物标记法制备地高辛素标记的肾综合征出血热病毒核酸M、S片段cDNA探针。DNA-RNA斑点杂交结果表明，该探针具有肾综合征出血热病毒的特异性，可检出10pgHFRSV-RNA。实验结果表明：抗原阳性鼠体螨10只组、5只组，抗原阴性鼠体螨10只组，游离螨50只组、10只组，抗原阳性鼠肺50mg、100mg组，所抽提RNA与探针杂交结果呈阳性，而抗原阴性鼠体螨5只组抽提RNA的探针检测结果呈阴性。 展开更多
关键词 斑点杂交 肾综合征出血热 HFRSV 地高辛素标记
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肾综合征出血热患者合并糖代谢紊乱的临床探讨 被引量：2
18
作者 许芳 刘艳 高鹏 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期306-306,共1页
关键词 肾综合征出血热病毒 糖代谢紊乱 临床 胰腺损伤 汉坦病毒感染 糖尿病并发症 汉坦病毒属 布尼亚病毒
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原位RT-PCR检测革螨体内HFRSV的实验研究 被引量：2
19
作者 朱进 张云 +2 位作者 陶开华 郭恒彬 唐家琪 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2002年第4期61-62,74,共3页
目的　确定肾综合征出血热病毒 (HFRSV)在革螨体内分布和定位 ,进一步证明革螨作为HFRS传播媒介的意义。方法　采用原位RT -PCR分子杂交技术检测鼠肺组织细胞内和革螨体内的HFRSV -RNA。结果　阳性信号呈弥散分布 ,多见于鼠肺吞噬细胞... 目的　确定肾综合征出血热病毒 (HFRSV)在革螨体内分布和定位 ,进一步证明革螨作为HFRS传播媒介的意义。方法　采用原位RT -PCR分子杂交技术检测鼠肺组织细胞内和革螨体内的HFRSV -RNA。结果　阳性信号呈弥散分布 ,多见于鼠肺吞噬细胞、血管内皮细胞等组织细胞内 ;革螨体内的阳性信号主要分布于卵巢细胞、中肠及支囊上皮细胞中 ,前体组织细胞较少。结论　地高辛素标记的核酸探针原位RT 展开更多
关键词 原位RT-PCR 革 HFRSV 实验研究 肾综合征出血热毒 传播媒介 肾综合征出血热
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肾综合征出血热病毒SEO亚型Gou3株S全基因分析的确证 被引量：2
20
作者 姚智慧 董关木 +1 位作者 俞永新 刘文雪 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2001年第6期23-25,共3页
目的　为进一步了解Gou3株的分子基础 ,分析S片段全基因序列 ,以确证该株为SEO亚型毒株。方法　从感染的Vero细胞提取总RNA ,RT -PCR产物纯化后克隆于T载体测序。结果　Gou3株S片段的全基因序列共 173 2个核苷酸 ,最大读码框架从其 4 3... 目的　为进一步了解Gou3株的分子基础 ,分析S片段全基因序列 ,以确证该株为SEO亚型毒株。方法　从感染的Vero细胞提取总RNA ,RT -PCR产物纯化后克隆于T载体测序。结果　Gou3株S片段的全基因序列共 173 2个核苷酸 ,最大读码框架从其 4 3到 13 3 2 ,共编码 4 2 9个氨基酸。序列同源比较分析表明 ,Gou3株与HTN型 76- 118株同源性为67 7% ,与SEO型为 88.1%～ 88.3 % ,与 3株SEO型毒株S片段相差高达 11.7%～ 11.9%。其氨基酸序列与 76- 118同源性为 82 .6% ,与SEO型为 97.4 %～ 98.4 %。并绘出了种系发生树。结论　Gou3株S片段全基因的序列分析 ,确证了Gou3株为新发现的SEO型病毒的亚型毒株。GenBank注册号为AF2 8865 展开更多
关键词 肾综合征出血热病毒 Gou3株 S片段 序列测定 种系发生树 SEO亚型 流行性出血热
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