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福建省急性出血性结膜炎流行特征及其暴发的影响因素分析
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作者 何文祥 李林丰 +2 位作者 朱颖 翁育伟 陈炜 《中国人兽共患病学报》 北大核心 2025年第7期742-748,共7页
目的了解福建地区急性出血性结膜炎(Acute hemorrhagic conjunctivitis,AHC)流行情况及疫情暴发的相关影响因素,为制定有效的疫情防控策略提供参考。方法对福建省AHC流行情况进行描述性统计学分析,对2023年暴发的AHC临床病例标本进行病... 目的了解福建地区急性出血性结膜炎(Acute hemorrhagic conjunctivitis,AHC)流行情况及疫情暴发的相关影响因素,为制定有效的疫情防控策略提供参考。方法对福建省AHC流行情况进行描述性统计学分析,对2023年暴发的AHC临床病例标本进行病原检测、VP1区核苷酸全长序列测定、基因型别鉴定和分析。结果2023年9月份为福建省AHC发病高峰,当月发病人数占全年发病人数的86.39%(5205/6025);发病率处于前3位的地区分别为三明(118.57/10万)、龙岩(53.83/10万)和漳州(16.02/10万);龙岩市AHC发病率在2011—2022年持续12年处于首位。2023年福建省AHC暴发高峰期采集的62例AHC结膜拭子样本经荧光PCR鉴定结果均为CVA24v,测序共获得60条VP1区完整序列,核苷酸同源性为98.7%~100%,氨基酸同源性为98.4%~100%,与广东省中山市2023年毒株的核苷酸同源性最高为99.0%~100%。2023年福建省毒株属于GⅣ基因型,L16I可能为2023年毒株序列特有的氨基酸变异。结论导致AHC流行的病原为CVA24v,其所属的GⅣ基因型是我国现阶段流行的优势型别。今后福建省AHC防控应当聚焦于重点城市,并在每年的9月份之前加强全省AHC监测预警,同时及时跟踪了解相关病原基因变异情况。 展开更多
关键词 急性出血性结膜炎 CVA24v 流行概况 基因型分析
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人A组轮状病毒VP6蛋白的原核表达及其小鼠多克隆抗体的制备 被引量:1
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作者 张卫斌 吕长坤 +2 位作者 杨颖 王向鹏 王明永 《中国人兽共患病学报》 北大核心 2025年第9期910-916,共7页
目的表达和纯化人A组轮状病毒VP6蛋白,制备小鼠抗VP6蛋白多克隆抗体。方法通过RT-PCR方法从人A组轮状病毒感染的粪便标本中扩增VP6基因,构建pET-32a-VP6原核表达质粒并转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞;用异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖... 目的表达和纯化人A组轮状病毒VP6蛋白,制备小鼠抗VP6蛋白多克隆抗体。方法通过RT-PCR方法从人A组轮状病毒感染的粪便标本中扩增VP6基因,构建pET-32a-VP6原核表达质粒并转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞;用异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导VP6表达,采用镍柱(Ni-NTA)亲和层析纯化VP6蛋白,用SDS-PAGE和Western blotting鉴定VP6蛋白;将VP6蛋白免疫BALB/c小鼠制备多克隆抗体,采用间接ELISA检测抗体滴度。结果构建了pET32a-VP6重组表达质粒,VP6蛋白主要以包涵体形式表达。经亲和层析法纯化了VP6蛋白,免疫小鼠后获得了多克隆抗体,抗体效价为1∶32000,抗体可以和VP6蛋白发生特异性反应。结论表达和纯化了人A组轮状病毒的VP6蛋白,制备了小鼠抗VP6蛋白的多克隆抗体,为人A组轮状病毒诊断抗原的制备和血清学检测方法的建立奠定了基础。 展开更多
关键词 人A组轮状病毒 VP6蛋白 原核表达 多克隆抗体
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G4P[23]型猪轮状病毒的基因组序列分析及其对乳鼠和仔猪的致病性研究
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作者 邓慧 陶然 +11 位作者 韩楠 王建新 苏雪繁 王晨 程曦 卞贤宇 宋家鹏 朱雪蛟 张雪寒 肖红波 周金柱 李彬 《中国人兽共患病学报》 北大核心 2025年第9期902-909,共8页
目的对分离的猪轮状病毒进行进化分析并研究其对乳鼠、仔猪的致病性。方法从腹泻仔猪粪便样品中分离到一株G4P[23]型猪轮状病毒(Porcine rotavirus,PoRV)JSJR2023株,在非洲绿猴胎肾细胞(MA104)上进行体外增殖特性分析并进行全基因组测... 目的对分离的猪轮状病毒进行进化分析并研究其对乳鼠、仔猪的致病性。方法从腹泻仔猪粪便样品中分离到一株G4P[23]型猪轮状病毒(Porcine rotavirus,PoRV)JSJR2023株,在非洲绿猴胎肾细胞(MA104)上进行体外增殖特性分析并进行全基因组测序及分析,利用MEGA7.0等软件对全基因组序列进行基因分型和遗传进化分析;并利用该病毒在5日龄C57BL/6品系乳鼠和3日龄仔猪上开展致病性实验,从临床症状观察、腹泻指数分析、病毒载量检测及病理剖检等方面研究该毒株的致病特征。结果该病毒在MA104细胞系上能正常增殖,病毒滴度最高达107.5 TCID50/mL,JSJR2023株基因分型为G4-P[23]-I5-R1-C1-M1-A8-N1-T1-E1-H1,遗传进化分析显示该毒株的VP3和NSP4基因序列与人源轮状病毒相应基因序列同源性最高,说明该毒株是猪-人重配毒株;乳鼠动物实验结果显示:与对照组相比,攻毒组乳鼠表现典型的腹泻症状、肠道水肿充血、肠绒毛脱落等,且攻毒剂量越高,症状及病理变化越严重。仔猪致病性实验结果显示,与对照组相比,攻毒组仔猪表现严重腹泻症状、肠道明显变薄、充血,肠内充满黄色水样内容物,肠绒毛变短脱落。结论本研究成功分离到一株人源和猪源重配的G4P[23]型PoRV,该毒株能够引起乳鼠和仔猪发生典型腹泻症状和肠道组织病变等,成功建立G4型毒株感染乳鼠和仔猪的发病模型,为后续开展猪轮状病毒的致病机制研究、疫苗研制、抗病毒药物筛选等提供重要理论依据。 展开更多
关键词 G4型 猪轮状病毒 腹泻 乳鼠 仔猪 致病性
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2023年中国5岁以下儿童肠道腺病毒分子特征分析
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作者 董梦洁 车如意 +8 位作者 熊光萍 王宏 李金松 孙晓曼 李利利 范佳欣 唐晓苹 张无敌 李丹地 《中国人兽共患病学报》 北大核心 2025年第9期887-892,共6页
目的深入探究我国5岁以下急性胃肠炎患儿中肠道人腺病毒(Human Adenovirus,HAdV)的分子特征与遗传进化规律,为疾病防控提供基础数据。方法收集2023年中国5岁以下因急性胃肠炎住院和门诊患儿的8074份粪便样本,采用实时荧光检测技术筛查HA... 目的深入探究我国5岁以下急性胃肠炎患儿中肠道人腺病毒(Human Adenovirus,HAdV)的分子特征与遗传进化规律,为疾病防控提供基础数据。方法收集2023年中国5岁以下因急性胃肠炎住院和门诊患儿的8074份粪便样本,采用实时荧光检测技术筛查HAdV,对阳性样本进行测序,并运用GenBank、BioAider和MEGA11.0等生物信息学软件进行基因分型、同源性及系统发育分析。结果8074份样本中HAdV阳性370例(4.58%),包括2种肠道HAdV基因型,HAdV-F41占比高达98.09%,其次为HAdV-F40(1.90%)。结论我国5岁以下急性胃肠炎患儿中HAdV-F41是最优势基因型,生物信息学分析显示我国HAdV主要流行谱系为谱系1和2,暂未受到欧洲地区的谱系3影响。对HAdV开展系统长期监测,有助于揭示HAdV在中国的多样性及其进化规律,为制定更有效的防控策略提供科学依据。 展开更多
关键词 人肠道腺病毒 基因型 急性胃肠炎 分子特征
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G6P[1]型牛轮状病毒BLL株全基因组遗传特征分析
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作者 张锦华 刘夏飞 +8 位作者 余俊杰 范佳欣 王铭月 熊光萍 王怡鹏 李丹地 孙晓曼 庞立丽 段招军 《中国人兽共患病学报》 北大核心 2025年第1期8-14,共7页
目的了解牛轮状病毒的基因组特征和遗传变异规律。方法对一株分离培养的G6P[1]型牛轮状病毒BLL株进行全基因组测序和分子特征分析。利用MEGA7.0、DNAMAN等软件进行序列同源性和基因分型分析,并构建全基因组进化树分析其遗传进化关系。结... 目的了解牛轮状病毒的基因组特征和遗传变异规律。方法对一株分离培养的G6P[1]型牛轮状病毒BLL株进行全基因组测序和分子特征分析。利用MEGA7.0、DNAMAN等软件进行序列同源性和基因分型分析,并构建全基因组进化树分析其遗传进化关系。结果BLL株的全基因型为G6-P[1]-I2-R2-C2-M2-A3-N2-T6-E2-H3,BLL株的VP7基因与中国RVA/Cow-wt/HB01/China/2021株同源性最高,VP4基因与RVA/Human-tc/ISR/Ro8059/1995株处于同一分支。对不同型别的VP8*氨基酸序列比对分析,结果显示BLL株唾液酸受体结合区与P[1]型毒株相似,与其他型别毒株差异较大,但是189位残基只与Ro8059株相同,与其余株不同。结论BLL株具有潜在感染人的风险,有必要对该毒株进行持续监测和生物学特性的研究,这将为我国深入开展A组轮状病毒跨物种传播的研究提供更多资料和证据。 展开更多
关键词 轮状病毒 G6P[1] 序列分析 VP8*蛋白 遗传进化
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一株轮状病毒疫苗衍生株的全基因组分子特征分析
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作者 唐晓苹 魏宇航 +10 位作者 熊光萍 胡晓 孙晓曼 王宏 李金松 李利利 车如意 董梦洁 张无敌 段招军 李丹地 《中国人兽共患病学报》 北大核心 2025年第9期893-901,共9页
目的探究一株轮状病毒疫苗衍生株G1P[8]基因型A组轮状病毒RVA/Human-wt/CHN/HN1140/2021/G1P[8](简称HN1140)的全基因组分子特征。方法运用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)结合全基因组引物对HN1140株的基因节段进行扩增,获得其全基因组... 目的探究一株轮状病毒疫苗衍生株G1P[8]基因型A组轮状病毒RVA/Human-wt/CHN/HN1140/2021/G1P[8](简称HN1140)的全基因组分子特征。方法运用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)结合全基因组引物对HN1140株的基因节段进行扩增,获得其全基因组序列,借助在线分型工具RotaC 2.0进行基因分型,采用DNAstar5.1和MEGA11.0软件对各基因节段进行相似性及遗传进化分析。结果确定HN1140株的基因型为G1-P[8]-I2-R2-C2-M2-A3-N2-T6-E2-H3,11个节段的系统进化树均显示与疫苗株RotaTeq紧密聚集,核苷酸相似性为99.7%~100%,其中VP1、VP2、VP6和NSP2-NSP5等节段的核苷酸相似性均达到100%。同时,HN1140株与RotaTeq疫苗株之间的VP7、VP4、VP1、VP2、VP3、NSP1基因节段中观察到13个核苷酸差异和8个氨基酸差异。结论HN1140株基因型为G1-P[8]-A3-T6-H3,符合疫苗衍生重配株的典型模式。该毒株与RotaTeq疫苗株表现出高度遗传相似性,核苷酸序列相似性达99.7%~100%,推测其由RotaTeq疫苗株经基因重配演化产生。 展开更多
关键词 A组轮状病毒 基因型 分子特征
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重点海水浴场主要肠道病毒的调查 被引量:3
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作者 明红霞 樊景凤 +1 位作者 关道明 梁玉波 《海洋学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期138-145,共8页
海水浴场作为重要的娱乐场所,其水质卫生状况对保障公众健康极其重要。对全国重点海水浴场中轮状病毒、星状病毒和脊髓灰质炎病毒进行了调查,因为这3种病毒是引发腹泻性胃肠炎的重要病原。2007年8月选定全国10个重点海水浴场,于游泳区设... 海水浴场作为重要的娱乐场所,其水质卫生状况对保障公众健康极其重要。对全国重点海水浴场中轮状病毒、星状病毒和脊髓灰质炎病毒进行了调查,因为这3种病毒是引发腹泻性胃肠炎的重要病原。2007年8月选定全国10个重点海水浴场,于游泳区设定2个站位,无菌采集表层海水,用Millipore的病毒浓缩包进行海水中病毒的浓缩,用RT-PCR进行三种病毒的监测。调查结果显示:轮状病毒阳性检出率达40%(8/20)、星状病毒的为35%(7/20)、脊髓灰质炎病毒的为35%(7/20);在这十大重点海水浴场中,除北海一处无病毒检出外,其余均有不同程度的病毒阳性检出,表明我国的重点海水浴场水质已经遭受肠道病毒不同程度的污染。建议相关部门应该加强海水浴场的卫生管理,避免公众因在海水浴场娱乐导致疾病。 展开更多
关键词 重点海水浴场 肠道病毒 轮状病毒 星状病毒 脊髓灰质炎病毒
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基于GenBank分析1995—2023年间亚洲地区及俄罗斯诺如病毒基因型别分布和变迁
8
作者 姜慧敏 陈燕 +5 位作者 李利利 孙晓曼 薛垂召 李金松 裴银辉 段招军 《中国人兽共患病学报》 北大核心 2025年第5期515-521,共7页
目的对GenBank中1995—2023年间的24144条亚洲地区及俄罗斯人诺如病毒序列进行分析,以便了解亚洲地区及俄罗斯诺如病毒基因型别在时间和空间上的变迁特征。方法以FASTA格式从GenBank下载1995—2023年亚洲地区及俄罗斯人诺如病毒序列,使... 目的对GenBank中1995—2023年间的24144条亚洲地区及俄罗斯人诺如病毒序列进行分析,以便了解亚洲地区及俄罗斯诺如病毒基因型别在时间和空间上的变迁特征。方法以FASTA格式从GenBank下载1995—2023年亚洲地区及俄罗斯人诺如病毒序列,使用Excel、R语言、Graphpad Prism分析并作图。结果从2004年开始向GenBank提交的诺如病毒序列数逐年增加,并在2015年达到峰值,其中中国和日本提交序列数占全部诺如病毒序列的62.3%;这些序列共有31种衣壳基因型(C型),GI占9%、GII占90%,49种聚合酶基因型(P型)和68种CP组合的型别;4460条重组序列中41%属于3种重组株:GII.2[P16]、GII.4[P31]和GII.4[P16]。结论通过上述分析有助于了解亚洲地区及俄罗斯诺如病毒型别分布特征和随时间变迁过程,为疫苗设计和评价等提供支撑。 展开更多
关键词 诺如病毒 胃肠炎 基因型
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内蒙古自治区部分地区鼠携带戊型肝炎病毒的调查分析
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作者 王珊珊 司晓艳 +5 位作者 张萌萌 罗曼 闫真 李利利 南晓伟 张忠兵 《中国人兽共患病学报》 北大核心 2025年第9期925-931,共7页
目的调查内蒙古自治区鼠戊型肝炎病毒(Hepatitis E virus,HEV)携带情况。方法2024年在内蒙古自治区呼和浩特市、包头市、呼伦贝尔市、兴安盟、通辽市、赤峰市、锡林郭勒盟、乌兰察布市、鄂尔多斯市、巴彦淖尔市和乌海市共11个盟市采集... 目的调查内蒙古自治区鼠戊型肝炎病毒(Hepatitis E virus,HEV)携带情况。方法2024年在内蒙古自治区呼和浩特市、包头市、呼伦贝尔市、兴安盟、通辽市、赤峰市、锡林郭勒盟、乌兰察布市、鄂尔多斯市、巴彦淖尔市和乌海市共11个盟市采集鼠的肝、脾、肾、肺组织样本,采用巢氏PCR(RT-PCR),检测HEV开放阅读框1(ORF1)基因保守区域,RT-PCR阳性产物测序后,对序列进行系统发育分析和同源性分析。结果此次调查捕获鼠816只,其中褐家鼠319只(39.09%,319/816),小家鼠206只(25.25%,206/816),长爪沙鼠140只(17.16%,140/816)。内蒙古地区鼠HEV感染率为3.68%(30/816),对RT-PCR检测阳性结果测序,分析碱基序列,获得30份鼠HEV的阳性样本,基因进化分析为HEV-C1型。内蒙古地区兴安盟、赤峰市、呼伦贝尔市、锡林郭勒盟、通辽市5个盟市的褐家鼠存在HEV的流行,带毒率分别为:16.67%、10.00%、5.98%、3.30%、2.50%。结论褐家鼠携带多种HEV的亚型均可引起人兽共患病,应加强人居环境周边鼠携带病原体的监测,优化鼠传疾病的防治工作,并应做好相关传染病的科普宣传,降低人群感染风险。 展开更多
关键词 戊肝病毒 巢氏PCR 遗传进化分析 内蒙古自治区
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人A组轮状病毒VP6蛋白间接ELISA抗体检测方法的建立
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作者 张卫斌 吕长坤 +2 位作者 杨颖 王明永 王向鹏 《中国人兽共患病学报》 北大核心 2025年第9期932-938,共7页
目的建立基于人A组轮状病毒(Rotavirus group A,RVA)VP6蛋白的间接ELISA抗体检测方法,为RVA抗体检测提供技术支持。方法以RVA的VP6蛋白为诊断抗原,用棋盘滴定方法优化ELISA反应条件,建立检测RVA抗体的间接ELISA方法。收集健康儿童血清和... 目的建立基于人A组轮状病毒(Rotavirus group A,RVA)VP6蛋白的间接ELISA抗体检测方法,为RVA抗体检测提供技术支持。方法以RVA的VP6蛋白为诊断抗原,用棋盘滴定方法优化ELISA反应条件,建立检测RVA抗体的间接ELISA方法。收集健康儿童血清和RVA患者血清,用建立的方法检测血清标本。结果以2µg/mL的VP6蛋白包被酶标板,血清1∶250倍稀释为最佳条件,阴阳性临界值为0.137。该方法具有良好的特异性、敏感性和重复性,与Western blotting抗体检测方法符合率为95%。检测370份儿童血清标本,抗体阳性率为81.1%。检测15名RVA患者的急性期和恢复期血清,恢复期血清中RVA抗体滴度相比于急性感染期明显增高。结论建立的ELISA抗体检测方法具有良好的特异性、敏感性和重复性,可用于RVA抗体检测和RVA感染的辅助诊断。 展开更多
关键词 人A组轮状病毒 VP6蛋白 间接酶联免疫吸附试验 抗体检测
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USP7抑制MDA5的K48位泛素化正向调控EV71感染炎症反应的机制研究
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作者 潘倩瑜 林小嫚 +2 位作者 孙颖 杨洪 孟君 《中国免疫学杂志》 北大核心 2025年第10期2392-2396,共5页
目的:探讨USP7对EV71感染免疫和炎症反应的调控作用及机制。方法:以PMA诱导THP-1细胞分化为t-Mφ细胞,利用USP7抑制剂P22077处理细胞,分为DMSO对照组和P22077实验组,以EV71感染细胞,ELISA检测上清中IL-6、CCL3、TNF-α水平;RT-qPCR检测E... 目的:探讨USP7对EV71感染免疫和炎症反应的调控作用及机制。方法:以PMA诱导THP-1细胞分化为t-Mφ细胞,利用USP7抑制剂P22077处理细胞,分为DMSO对照组和P22077实验组,以EV71感染细胞,ELISA检测上清中IL-6、CCL3、TNF-α水平;RT-qPCR检测EV71-VP1 RNA表达,空斑试验检测细胞上清中病毒滴度变化;Western blot检测天然免疫信号通路相关分子的表达及磷酸化水平。构建Myc-USP7和Flag-MDA5的全长质粒并转染于HEK293T细胞中,分别用Myc抗体和Flag抗体进行蛋白质Co-IP,检测外源性USP7与MDA5的相互作用;以EV71感染t-Mφ细胞,分别用USP7抗体和MDA5抗体进行Co-IP,检测两者相互作用。以EV71感染DMSO对照组和P22077实验组t-Mφ细胞,CHX追逐实验检测MDA5和下游相关分子表达。共转染Flag-MDA5、Myc-USP7、HA-Ub或HA-K48质粒,采用Flag抗体进行Co-IP测定Myc-USP7调控Flag-MDA5泛素化及泛素化类型。采用MDA5抗体进行Co-IP测定t-Mφ细胞中USP7调控MDA5泛素化类型。结果:在EV71感染细胞中抑制USP7后,IL-6、CCL3、TNF-α蛋白表达降低(P<0.05);EV71复制增强(P<0.05)、滴度增加;MDA5表达降低、天然免疫信号通路中p-IKKα/β、p-IκBα和p-p65活化减弱。USP7可与MDA5相互作用,通过抑制MDA5的K48位泛素化抑制MDA5降解。结论:USP7通过抑制MDA5的K48位泛素化修饰稳定MDA5表达,从而正向调控EV71感染免疫和炎症反应。 展开更多
关键词 肠道病毒71型 泛素特异性蛋白酶7 黑色素瘤分化相关基因5 天然免疫
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上海市浦东新区柯萨奇病毒A组6型全基因组序列特征分析
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作者 张雪纯 顾玙 +3 位作者 王筱 周雨晴 刘丹 赵冰 《中国人兽共患病学报》 北大核心 2025年第9期917-924,共8页
目的分析2015—2023年上海市浦东新区肠道A组病毒柯萨奇6型(Coxsackievirus A6,CVA6)的全基因组序列特征,为优化流行病控制提供依据。方法收集并选取2015—2023年浦东分离的CVA6毒株45株,进行全基因组测序,采用MEGA 11构建VP1区和3D区... 目的分析2015—2023年上海市浦东新区肠道A组病毒柯萨奇6型(Coxsackievirus A6,CVA6)的全基因组序列特征,为优化流行病控制提供依据。方法收集并选取2015—2023年浦东分离的CVA6毒株45株,进行全基因组测序,采用MEGA 11构建VP1区和3D区的亲缘性进化树,利用DNAstar V7.0分析核苷酸序列的同源性以及氨基酸变异位点,使用Sim⁃plot 3.5.1和RDP 4进行重组分析。结果45株病毒分离株基因型均为D3a亚型,病毒株之间核苷酸和氨基酸序列同源性分别介于88%~99.9%和92.4%~100%之间,与原型株(Gdula)相比,同源性为78.0%~80.5%。VP1区序列出现36个氨基酸突变位点。全基因组序列分析存在与CVA4、EV-A71多区域重组现象,3D区发生RF-A(84.5%)和RF-K(15.5%)重组模式,RF-K重组类型具有相似氨基酸位点变异。结论通过对2015—2023年浦东地区CVA6基因重组及遗传进化分析发现,其与多亚型肠道病毒存在重组现象,为该病毒的进化趋势及遗传特征研究提供了数据支持,为其防控提供理论依据。 展开更多
关键词 手足口病 柯萨奇病毒A组6型 基因重组 氨基酸变异
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隐匿性乙型肝炎病毒感染
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作者 刘永振 廖昊 鲁凤民 《中国生物化学与分子生物学报》 北大核心 2025年第9期1246-1256,共11页
隐匿性乙型肝炎病毒感染(occult hepatitis B virus infection,OBI)是潜在的HBV传染源,可通过输血等方式传播。同时,OBI还可使乙肝相关疾病慢性进展,并维持乙肝慢性感染的状态,在免疫机能下降或接受免疫抑制治疗情况下可能导致HBV感染... 隐匿性乙型肝炎病毒感染(occult hepatitis B virus infection,OBI)是潜在的HBV传染源,可通过输血等方式传播。同时,OBI还可使乙肝相关疾病慢性进展,并维持乙肝慢性感染的状态,在免疫机能下降或接受免疫抑制治疗情况下可能导致HBV感染再激活,引发急性肝炎或肝衰竭等严重肝病。因而,OBI是一个重要的公共卫生问题,严重影响该人群生命健康和我国HBV感染防控。OBI的核心特征是用灵敏的试剂检测血清乙肝表面抗原(hepatitis B surface antigen,HBsAg)阴性,但肝内存在复制全能性(replication competent)HBV基因组,以致循环血中的HBV DNA可呈间歇低值阳性(通常<200 IU/mL),HBV存在再激活风险。随着慢性乙型肝炎功能性治愈的不断扩大,国内外各大指南对功能性治愈的定义也在不断完善,其中均提到血清乙肝表面抗原持续消失的功能性治愈者肝组织内仍可能有HBV共价闭合环状DNA(covalently closed circular DNA,cccDNA)的存在,提示这部分功能性治愈者的病毒学指征类似于隐匿性感染状态。本文围绕OBI定义、分类、对公共卫生影响、发生机制和临床再激活预防等方面进行阐述,梳理OBI相关研究进展,更新对OBI的认知,以期提高临床和公共卫生从业者对新形势下OBI人群的关注。 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒 隐匿性乙型肝炎病毒感染 功能性治愈 乙型肝炎病毒表面抗原
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丙型肝炎病毒非结构蛋白NS5A反式激活基因的克隆化研究 被引量:43
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作者 刘妍 陆荫英 +3 位作者 成军 王建军 李莉 张玲霞 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期40-43,共4页
应用抑制性消减杂交技术构建丙型肝炎病毒非结构蛋白 5A(HCVNS5A)反式激活基因差异表达的cDNA消减文库 ,克隆HCVNS5A蛋白反式激活相关基因。以HCVNS5A表达质粒pcDNA3 1(- ) NS5A转染HepG2细胞 ,以空载体pcDNA3 1(- )为对照 ,制备转染... 应用抑制性消减杂交技术构建丙型肝炎病毒非结构蛋白 5A(HCVNS5A)反式激活基因差异表达的cDNA消减文库 ,克隆HCVNS5A蛋白反式激活相关基因。以HCVNS5A表达质粒pcDNA3 1(- ) NS5A转染HepG2细胞 ,以空载体pcDNA3 1(- )为对照 ,制备转染后的细胞裂解液 ,提取mRNA并逆转录为cDNA ,经RsaI酶切后 ,将实验组cDNA分成两组 ,分别与两种不同的接头衔接 ,再与对照组cDNA进行两次消减杂交及两次抑制性PCR ,将产物与T/A载体连接 ,构建cDNA消减文库 ,并转染大肠杆菌进行文库扩增 ,随机挑选克隆PCR扩增后进行测序及同源性分析。文库扩增后得到 12 1个阳性克隆 ,经菌落PCR分析 ,得到 115个 2 0 0~10 0 0bp的插入片段 ,对其中的 90个片段测序 ,并进行同源性分析 ,显示 31种已知基因编码蛋白和 15种未知功能基因序列 ,包括一些与细胞周期、细胞凋亡、信号传导及肿瘤发生等细胞生长调节密切相关的蛋白编码基因 ,可能是NS5A反式激活靶基因。结果提示 ,成功构建了HCVNS5A反式激活基因差异表达的cDNA消减文库 ,该文库的建立为进一步阐明HCVNS5A反式调节的靶基因及致肝细胞癌发生的分子生物学机制提供了理论依据。 展开更多
关键词 丙型肝炎病毒 非结构蛋白NS5A 反式激活 基因 克隆化
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戊型病毒性肝炎研究进展 被引量:34
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作者 夏宁邵 张军 +5 位作者 李少伟 葛胜祥 吴婷 郑子峥 吴文翰 史维国 《厦门大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期431-436,共6页
戊型病毒性肝炎是全球最主要的病毒性肝炎之一,近半个世纪多次发生大规模暴发,孕妇感染戊型肝炎后病死率高达20%.近年随着基于构象型表位多肽E2的戊型肝炎诊断试剂的出现,戊型肝炎的病原学诊断及流行病学调查均获得了较大的发展,越来越... 戊型病毒性肝炎是全球最主要的病毒性肝炎之一,近半个世纪多次发生大规模暴发,孕妇感染戊型肝炎后病死率高达20%.近年随着基于构象型表位多肽E2的戊型肝炎诊断试剂的出现,戊型肝炎的病原学诊断及流行病学调查均获得了较大的发展,越来越引起人们的重视.由我国自主创新研制的重组戊型肝炎疫苗现已在中国完成世界上首个Ⅲ期临床试验,其预防戊型肝炎的保护率达到100%(95%CI,72.1%~100.0%). 展开更多
关键词 戊型病毒性肝炎 戊型肝炎病毒 E2 诊断试剂 重组戊型肝炎疫苗
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筛选与克隆丙型肝炎病毒NS5A蛋白结合蛋白的基因 被引量:23
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作者 王琳 李克 +7 位作者 成军 陆荫英 张键 刘妍 王刚 洪源 王贺 芮莉莉 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期50-52,共3页
细胞内蛋白 蛋白的结合是丙型肝炎病毒 (HCV)与宿主肝细胞相互作用的分子生物学基础。HCV的非结构蛋白 5A(NS5A)被认为是一种HCV基因组编码的重要调节蛋白因子 ,参与HCV的复制、转录和信号传导等过程 ,但是它在HCV的致病及耐药等方面的... 细胞内蛋白 蛋白的结合是丙型肝炎病毒 (HCV)与宿主肝细胞相互作用的分子生物学基础。HCV的非结构蛋白 5A(NS5A)被认为是一种HCV基因组编码的重要调节蛋白因子 ,参与HCV的复制、转录和信号传导等过程 ,但是它在HCV的致病及耐药等方面的作用还存有争议。为了进一步阐明这个多功能蛋白质与宿主蛋白的关系 ,作者采用酵母双杂交系统 3,在酵母细胞融合蛋白表达型人肝cDNA文库中进行筛选 ,得到 35个与NS5A特异性结合的阳性克隆 ,包括载脂蛋白、线粒体单体型基因、磷脂酸酸性磷酸酶等 11种已知功能蛋白质基因和 3个未知功能基因。 展开更多
关键词 筛选 克隆 丙型肝炎病毒 NS5A蛋白 结合蛋白 基因 酵母双杂交
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2009-2017年江苏省手足口病病原谱及柯萨奇A16型的分子流行病学研究 被引量:38
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作者 嵇红 鲍倡俊 +3 位作者 祁贤 霍翔 胡建利 樊欢 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期113-119,共7页
目的描述2009-2017年江苏省手足口病(HFMD)病原谱及柯萨奇A16型(CVA16)的流行病学、基因变异及遗传进化特征。方法对2009-2017年江苏省手足口病发病资料和病原学检测情况进行统计分析,选取120株CVA16病毒分离株进行VP1区全长基因序列测... 目的描述2009-2017年江苏省手足口病(HFMD)病原谱及柯萨奇A16型(CVA16)的流行病学、基因变异及遗传进化特征。方法对2009-2017年江苏省手足口病发病资料和病原学检测情况进行统计分析,选取120株CVA16病毒分离株进行VP1区全长基因序列测定,并对核苷酸及氨基酸序列进行同源性比较及系统进化分析。结果 2009-2017年江苏省共报告手足口病1 013 771例。其中,手足口病肠道病毒阳性病例37 389例,主要病原构成为EV71(39.85%)和CVA16(30.13%);重症病例中,以EV71为主要病原,CVA16及其他肠道病毒引起的重症病例较少。CVA16在每年的3~7月和9~11月出现流行高峰,主要感染1~4岁年龄段儿童,男性比例高于女性。江苏省地区流行的CVA16毒株属于B1a亚型和B1b亚型,其中B1b亚型为优势流行基因亚型。120株CVA16病毒分离株VP1区核苷酸及编码氨基酸序列同源性分别为87.5%~100%、97%~100%。结论 2009-2017年,江苏省地区流行的CVA16具有明显的时间、人群分布特征;120株CVA16分离株属于B1a亚型和B1b亚型。CVA16分离株核苷酸序列变异较大,但氨基酸同源性较高,推断存在一定的同义突变。 展开更多
关键词 手足口病 柯萨奇病毒A组16型 流行病学 遗传特征
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2009年西安地区手足口病病原血清型分析及肠道病毒71型基因特征 被引量:29
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作者 马超锋 郑海潮 +6 位作者 邓惠玲 杜全丽 李一为 杨扬 龚建人 李江博 陈志军 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期603-607,共5页
目的了解西安地区2009年手足口病的肠道病毒血清型;评价IgM抗体检测在肠道病毒71(EV71)感染早期诊断中的意义;分析西安地区EV71 VP1基因特征。方法分别在西安市城区医院和郊县医院采集的标本共185份,RT-PCR法检测标本中的病毒核酸;采集E... 目的了解西安地区2009年手足口病的肠道病毒血清型;评价IgM抗体检测在肠道病毒71(EV71)感染早期诊断中的意义;分析西安地区EV71 VP1基因特征。方法分别在西安市城区医院和郊县医院采集的标本共185份,RT-PCR法检测标本中的病毒核酸;采集EV71核酸阳性的急性期病例血液标本,ELISA法检测血清中IgM抗体;细胞培养分离EV71,扩增其VP1区,测序并与EV71各血清型代表株序列比对,进行进化分析。结果在185份标本中,156份检出肠道病毒核酸(84.32%),其中72.4%为EV71,17.3%为柯萨奇A16(CA16);63份EV71核酸阳性的急性期病例血清标本中,45份EV71 IgM抗体阳性(71.43%);分离到的12株EV71均为C4亚型。结论 2009年西安地区手足口病病原以EV71为主,且主要是C4亚型;ELISA方法可用于EV71感染的早期诊断。 展开更多
关键词 手足口病 血清型 肠道病毒71型(EV71) 柯萨奇A16(CA16) 进化分析
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丙型肝炎病毒非结构蛋白NS3与乙型肝炎病毒X蛋白协同反式激活作用的研究 被引量:15
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作者 刘妍 成军 +5 位作者 牟劲松 陆荫英 王建军 杨倩 王琳 张玲霞 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期47-49,共3页
构建丙型肝炎病毒(HCV)非结构蛋白 3(NS3)的重组表达质粒pcDNA3 1(- ) NS3和表达乙型肝炎病毒 (HBV)X蛋白的重组质粒pcDNA3 1(- ) X ,分别瞬时转染肝母细胞瘤细胞系HepG2细胞 ,用免疫印记 (Westernblotting)方法鉴定病毒基因的表达。... 构建丙型肝炎病毒(HCV)非结构蛋白 3(NS3)的重组表达质粒pcDNA3 1(- ) NS3和表达乙型肝炎病毒 (HBV)X蛋白的重组质粒pcDNA3 1(- ) X ,分别瞬时转染肝母细胞瘤细胞系HepG2细胞 ,用免疫印记 (Westernblotting)方法鉴定病毒基因的表达。两个表达质粒分别及同时与报告质粒pCAT3 promoter共转染HepG2细胞 ,检测报告基因氯霉素乙酰转移酶 (CAT)的表达水平 ,酶的活性反映了表达的肝炎病毒蛋白对SV4 0病毒早期启动子功能的影响。结果显示 ,两个重组表达载体pcDNA3 1(- ) NS3及pcDNA3 1(- ) X在HepG2细胞均能瞬时表达相应的肝炎病毒蛋白 ;单独共转染实验中 pcDNA3 1(- ) NS3、pcDNA3 1(- ) X组的CAT的表达分别是对照的 3 5倍和 4 4倍 ,两种质粒共同转染时酶的表达是对照的 8 5倍 ;表达质粒对CAT酶表达的激活作用呈剂量依赖性。研究表明 ,HepG2细胞中表达的HCVNS3蛋白和HBVX蛋白均具有反式激活SV4 0早期启动子的功能 ,并且两种蛋白的反式激活功能具有协同特性。本实验有助于解释HCV、HBV感染 ,尤其是共同感染的致病 (癌 ) 展开更多
关键词 丙型肝炎病毒 非结构蛋白 NS3 乙型肝炎病毒 X蛋白 协同反式激活 研究
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福建省2011年病毒性脑炎暴发病原Echo30分子流行病学分析 被引量:22
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作者 杨秀惠 严延生 +6 位作者 翁育伟 何爱华 张红榕 陈炜 许江阳 林其财 周勇 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期265-269,共5页
目的了解福建省2011年病毒性脑炎暴发的病原特点及福建省近10年Echo30分子流行病学特征。方法应用细胞培养法获得病毒株,微量血清中和试验或RT-PCR序列分析鉴定Echo30血清型,提取病毒RNA核酸,逆转录为cD-NA,分段扩增VP1基因序列全长,测... 目的了解福建省2011年病毒性脑炎暴发的病原特点及福建省近10年Echo30分子流行病学特征。方法应用细胞培养法获得病毒株,微量血清中和试验或RT-PCR序列分析鉴定Echo30血清型,提取病毒RNA核酸,逆转录为cD-NA,分段扩增VP1基因序列全长,测定并分析扩增产物的序列。结果 2011年4月1日-6月2日,从福建省4个县(市)区病毒性脑炎病例标本中分离的病毒经鉴定均为Echo30;VP1基因序列分析显示,泉州市安溪和德化两地流行株高度同源(核苷酸与氨基酸序列同源性分别为99.0%和99.6%),同福安和厦门流行株(核苷酸与氨基酸序列同源性分别为98.5%和100%)核苷酸差异约9%,3个位点氨基酸出现了变异。近10年福建省Echo30分子流行病学分析显示,2011年泉州流行株并非由2005年当地流行株进化而来,而与2008年河南省分离株(HQ625646-Henan/04/2008)同源性最高;近10年福建省Echo30存在多基因型、多谱系的同时传播,并在2006年发现了两株第III新基因型病毒。结论造成2011年福建省病毒性脑炎暴发的病原为Echo30,且至少存在两条不同传播链病毒同时流行。Echo30福建株呈多基因型、多谱系分布流行特点。 展开更多
关键词 病毒性脑炎 ECHO30 VP1基因 分子流行病学
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