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低氧联合辐照对小鼠骨髓造血细胞的影响作用研究
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作者 杨欣海 陈芳 +6 位作者 全勇 胡梦佳 芦玉凯 陈乃成 许杨 王崧 王军平 《陆军军医大学学报》 北大核心 2025年第7期681-690,共10页
目的探究高原低氧环境联合辐照损伤对小鼠骨髓造血细胞的影响。方法165只C57BL/6雄性小鼠(10~12周,体质量20~25 g)按随机数字表法进行分组:正常对照组(Control组,n=33)、6 Gy单纯辐照组(6 Gy组,n=43)、6 Gy低氧辐照组(Hy-7 d+6 Gy组,n=4... 目的探究高原低氧环境联合辐照损伤对小鼠骨髓造血细胞的影响。方法165只C57BL/6雄性小鼠(10~12周,体质量20~25 g)按随机数字表法进行分组:正常对照组(Control组,n=33)、6 Gy单纯辐照组(6 Gy组,n=43)、6 Gy低氧辐照组(Hy-7 d+6 Gy组,n=43),7 Gy单纯辐照组(7 Gy组,n=12)、7 Gy低氧辐照组(Hy-7 d+7 Gy组,n=12)、7 Gy持续低氧治疗组(Hy-7 d+7 Gy+Hy组,n=12)、6 Gy持续低氧治疗组(Hy-7 d+6 Gy+Hy,n=10);Hy-7 d+6 Gy组、Hy-7 d+7 Gy组、Hy-7 d+7 Gy+Hy组、Hy-7 d+6 Gy+Hy组于常压低氧舱内进行7 d预处理(氧浓度12%),其余组小鼠在正常氧环境中饲养;6 Gy、Hy-7 d+6 Gy组、Hy-7 d+6 Gy+Hy组小鼠在低氧预处理结束后进行^(60)COγ射线全身一次性辐照6 Gy;7 Gy、Hy-7 d+7 Gy组、Hy-7 d+7 Gy+Hy组小鼠在低氧预处理结束后进行^(60)COγ射线全身一次性辐照7 Gy;Control组、6 Gy组、7 Gy组小鼠全程正常氧环境饲养,Hy-7 d+7 Gy组、Hy-7 d+6 Gy组小鼠辐照损伤后继续低氧饲养24 h后恢复正常氧环境饲养,Hy-7 d+7 Gy+Hy组、Hy-7 d+6 Gy+Hy组小鼠辐照后持续低氧环境饲养。Control、6 Gy、Hy-7 d+6 Gy组小鼠制备骨髓细胞悬液,采用全自动细胞计数仪计数小鼠骨髓有核细胞数量,采用HE染色观察小鼠骨髓腔病理形态改变,采用流式细胞术检测造血干/祖细胞(Lin^(-)Sca1^(+)c-Kit^(+),LSK)、髓系祖细胞(myeloid progenitor,MP)以及成熟T/B髓系细胞数量;7 Gy、Hy-7 d+7 Gy、Hy-7 d+7 Gy+Hy组小鼠从低氧预处理后开始持续监测30 d的生存率;6 Gy、Hy-7 d+6 Gy、Hy-7 d+6 Gy+Hy组小鼠采取尾血,使用全自动血液分析仪检测红细胞(red blood cell,RBC)、白细胞(white blood cell,WBC)、血红蛋白(hemoglobin,HGB)、血小板(platelet,PLT)等的动态变化;Control、6 Gy、Hy-7 d+6 Gy组小鼠于辐照后17 d处死后获取骨髓细胞悬液并进行单细胞测序及分析。结果①与Control组相比,6 Gy组小鼠辐照后全骨髓有核细胞数量显著减少(P<0.01),HE染色显示骨髓血窦扩张明显、红细胞溢出;与6 Gy组比较,Hy-7 d+6 Gy组小鼠骨髓腔内细胞密度增加,有核细胞数减少程度明显减轻(P<0.01);②流式细胞术检测结果显示与Control组比较,6 Gy组骨髓LSK、MP与成熟T/B/髓系细胞数量均显著降低(P<0.05);与6 Gy组比较,Hy-7 d+6 Gy组单纯辐照造成的LSK、MP的数量减少能得到显著抑制(P<0.01);③与7 Gy组相比,Hy-7 d+7 Gy组经过低氧辐照后24 h复常氧治疗显著提高了小鼠生存率(P<0.01);与7 Gy组相比,Hy-7 d+7 Gy+Hy组小鼠经持续低氧治疗未能显著改善小鼠生存率;Hy-7 d+7 Gy组与Hy-7 d+7 Gy+Hy组之间的生存率差异虽未达到统计学显著性(P=0.12),但在整个观察周期内Hy-7 d+7 Gy组始终表现出存活数量优势;④血常规检测结果显示,Hy-7 d+6 Gy组小鼠较6 Gy组和Hy-7 d+6 Gy+Hy组WBC水平得到更快的恢复(P<0.05);经低氧预处理后,Hy-7 d+6 Gy组和Hy-7 d+6 Gy+Hy组辐照前RBC及HGB水平更高;而相比于6 Gy组及Hy-7 d+6 Gy+Hy组,Hy-7 d+6 Gy组PLT恢复更显著且迅速(P<0.05);⑤通过单细胞转录组数据分析进行细胞亚群比例推测,相比于6 Gy组Hy-7 d+6 Gy组小鼠长期造血干细胞(long-term hematopoietic stem cell,LT-HSC)、短期造血干细胞(short-term hematopoietic stem cell,ST-HSC)数量减少得到抑制,与流式细胞术结果一致;拟时序分析显示,Hy-7 d+6 Gy组小鼠数据与Control组相似,表现出分化程度低且自我更新能力强的LSK较多;差异基因分析及KEGG通路富集表明,6 Gy组氧化磷酸化通路活跃度显著高于其他组,而Hy-7 d+6 Gy组则富集于染色质重塑和mRNA监视等通路。结论低氧预处理可减轻小鼠骨髓造血细胞放射损伤,辐照后恢复常氧治疗有助于急性放射损伤小鼠的骨髓造血功能重建。 展开更多
关键词 低氧预处理 骨髓造血干/祖细胞 急性放射损伤 造血功能 单细胞转录组技术
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X线头部照射对大鼠脾细胞ConA刺激反应及IL-2活性的影响 被引量:6
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作者 尉军 刘树铮 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 1989年第2期98-101,共4页
Wistar大鼠头部受10GyX线照射后48小时,脾细胞对ConA刺激反应明显增强。脾细胞浓度为5×10~6个/ml时,头部照射组与全身屏蔽照射组的反应比值平均为3.20(P【0.01),反应增强持续到照后5天(比值为3.09,P【0.05);脾细胞浓度为2.5×1... Wistar大鼠头部受10GyX线照射后48小时,脾细胞对ConA刺激反应明显增强。脾细胞浓度为5×10~6个/ml时,头部照射组与全身屏蔽照射组的反应比值平均为3.20(P【0.01),反应增强持续到照后5天(比值为3.09,P【0.05);脾细胞浓度为2.5×10~6个/ml时,反应比值为1.72(P【0.05),照后5天增强不显著。上述反应增强伴有脾重下降和有核细胞数减少。照后9天,反应达对照水平。头部10Gy照射后5天,脾细胞体外培养24小时的IL-2产量减少。照后2及9天变化不显著。实验结果说明,头部X线照射对机体免疫功能可产生明显影响。讨论了神经和内分泌系统在上述变化发生机理中的可能意义。 展开更多
关键词 X线 淋巴细胞 分袭因子
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同源不同辐射抗拒NPC细胞间总甲基化水平及基因甲基化表达差异的探讨
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作者 罗海丹 王冬辉 +3 位作者 林伟达 苏箔金 赵存友 杨惠玲 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第7期1300-1304,共5页
目的:比较同源不同辐射抗拒能力的鼻咽癌细胞CNE2R/CNE2间总甲基化水平及其区域的差异。方法:采用赵存友博士改良的基于甲基化敏感酶全基因组甲基化法检测CNE2R/CNE2细胞全基因组甲基化水平;同时采用Me DIP-Seq测序法对CNE2R/CNE2细胞... 目的:比较同源不同辐射抗拒能力的鼻咽癌细胞CNE2R/CNE2间总甲基化水平及其区域的差异。方法:采用赵存友博士改良的基于甲基化敏感酶全基因组甲基化法检测CNE2R/CNE2细胞全基因组甲基化水平;同时采用Me DIP-Seq测序法对CNE2R/CNE2细胞进行测序,分析比较DNA甲基化区域(主要包括6个基因功能元件即CDS、intron、downstream2k、upstream2k、3’UTR及5’UTR)的差异。结果:CNE2R细胞全基因组甲基化水平比CNE2细胞低约30%;在CNE2R和CNE2细胞中,虽然分布在6个基因功能元件上的峰值个数和峰值在各基因元件上的覆盖度均无明显差异,但2种细胞的6个基因功能元件上基因甲基化存在差异。结论:同源不同辐射抗拒能力的鼻咽癌细胞间总甲基化水平及基因甲基化存在差异,推测DNA甲基化的差异可能与鼻咽癌辐射抗拒相关。 展开更多
关键词 辐射抗拒 甲基化 鼻咽癌 基因元件
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MCPH1在电离辐射诱导食管癌细胞DNA损伤通路中的作用
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作者 吕心瑞 王保芳 +2 位作者 王葆辉 徐晓 陈明亮 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期924-928,共5页
目的:研究MCPH1在电离辐射诱导食管癌细胞DNA损伤通路中的作用。方法:应用已构建的沉默MDC1的食管癌ECA109细胞株接受8 Gy电离辐射后1 h,检测相关因子核内斑点形成情况。构建沉默MCPH1的食管癌ECA109细胞株,检测此细胞株接受同样照射条... 目的:研究MCPH1在电离辐射诱导食管癌细胞DNA损伤通路中的作用。方法:应用已构建的沉默MDC1的食管癌ECA109细胞株接受8 Gy电离辐射后1 h,检测相关因子核内斑点形成情况。构建沉默MCPH1的食管癌ECA109细胞株,检测此细胞株接受同样照射条件后相关因子核内斑点的形成情况。结果:成功构建沉默MCPH1的食管癌ECA109细胞;电离辐射使MDC1、MCPH1与γ-H2AX蛋白相互作用。沉默MDC1不影响γ-H2AX和MCPH1核内斑点的形成;沉默MCPH1使电离辐射导致的MDC1核内斑点减少,不影响γ-H2AX核内斑点的形成。结论:MCPH1在电离辐射诱导的DNA损伤通路中可能位于H2AX下游、MDC1上游,可以调控MDC1核内斑点形成。 展开更多
关键词 MCPH1 电离辐射 MDC1 DNA双链损伤
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γ线诱发的白血病小鼠胸腺细胞SHP-2 mRNA变化的研究 被引量:3
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作者 黄定德 陈杞 +1 位作者 韩玲 蔡建明 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第20期1809-1811,共3页
目的 探讨蛋白酪氨酸磷酸酶SHP 2mRNA在γ射线体外诱发的白血病小鼠胸腺细胞中的变化情况 ,为进一步从细胞信号转导途径入手研究辐射致癌的分子机制奠定一定的基础。方法 实验分为癌变组、未癌变组及对照组 ,应用PCR SSCP、DNA测序、... 目的 探讨蛋白酪氨酸磷酸酶SHP 2mRNA在γ射线体外诱发的白血病小鼠胸腺细胞中的变化情况 ,为进一步从细胞信号转导途径入手研究辐射致癌的分子机制奠定一定的基础。方法 实验分为癌变组、未癌变组及对照组 ,应用PCR SSCP、DNA测序、荧光定量PCR法分别检测各组胸腺细胞SHP 2mRNA的突变及含量变化情况。结果 ①PCR SSCP示 9/14例癌变组胸腺细胞SHP 2mRNA的第 70 0~ 10 96bp间可能发生突变 ,但DNA测序结果不支持 ;②癌变组胸腺细胞SHP 2mRNA的含量与对照组及未癌变组比无明显变化。结论 在γ射线诱发的白血病小鼠胸腺细胞中存在SHP 2的翻译异常 ,表现为翻译增强现象。 展开更多
关键词 辐射致癌 信号转导 SHP-2 小鼠 白血病
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电离辐射对大鼠下丘脑和垂体内亮脑啡肽含量的影响
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作者 郭冰芳 张晓东 郭鹞 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 1995年第1期106-108,共3页
本文应用放射免疫分析(radioimmunoassay,RIA)方法检测4,8和25Gy_60CoY射线照射后大鼠下丘脑和垂体内亮脑啡肽(leucine-eukephalin,L-ENK)含量的变化。发现8Gy照射后... 本文应用放射免疫分析(radioimmunoassay,RIA)方法检测4,8和25Gy_60CoY射线照射后大鼠下丘脑和垂体内亮脑啡肽(leucine-eukephalin,L-ENK)含量的变化。发现8Gy照射后24和72小时下丘脑L-ENK含量分别为138.23±18.32pg/mg和210.68±28.99pg/mg,前者明显低于正常对照组(177.92±24.68pg/mg)(P<0.01),后者明显高于正常对照组(P<0.05)。25Gy照射后24和48小时下丘脑L-ENK含量分别为131.65±10.64pg±mg和152.66±14.07pg/mg,均明显低于正常对照组(前者P<0.01,后者P<0.05)。25Gy照射后48小时垂体L-ENK含量为96.37±15.74pg/mg,明显低于正常对照组(121.41±1.94pg/mg)(P<0.01)。 展开更多
关键词 脑啡肽 亮氨酸 下丘脑 垂体 电离辐射 Γ射线
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放射性肺损伤中细胞死亡方式的研究进展 被引量:5
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作者 李轩 乔田奎 《复旦学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期462-466,共5页
放射性肺损伤(radiation-induced lung injury,RILI)的发病率高,防治困难,细胞死亡是其发生过程中关键的病理过程。电离辐射直接损伤细胞DNA造成的细胞凋亡被认为是RILI中细胞死亡的主要方式,通过P62-Keap1-NRF2信号通路调控细胞的铁死... 放射性肺损伤(radiation-induced lung injury,RILI)的发病率高,防治困难,细胞死亡是其发生过程中关键的病理过程。电离辐射直接损伤细胞DNA造成的细胞凋亡被认为是RILI中细胞死亡的主要方式,通过P62-Keap1-NRF2信号通路调控细胞的铁死亡在RILI的发生发展过程中发挥作用。射线可以诱导细胞形成经典炎性小体,引起细胞自身焦亡,导致RILI。这些新发现都为RILI新药开发提供了新的思路。 展开更多
关键词 放射性肺损伤(RILI) 细胞凋亡 细胞铁死亡 细胞焦亡
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