脑源性神经营养因子DNA甲基化与抑郁

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作者 廖紫云 王孟雨 +3 位作者 乔靖怡 张润 刘培东 陈新旺 《中国药理学通报》 北大核心 2025年第5期825-829,共5页

抑郁症是一种异质性精神疾病,遗传易感性和环境因素之间的相互作用在其发病过程中扮演着关键角色。该病的具体机制仍需深入研究与阐释,但目前已有广泛共识认为,表观遗传标记对其作用机制具有重要影响。脑源性神经营养因子(brain-derived... 抑郁症是一种异质性精神疾病,遗传易感性和环境因素之间的相互作用在其发病过程中扮演着关键角色。该病的具体机制仍需深入研究与阐释,但目前已有广泛共识认为,表观遗传标记对其作用机制具有重要影响。脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)的DNA甲基化,不仅被视为一种有前景的病理学表观遗传生物标志物,还可能有助于预测抗抑郁药的疗效。该文综述了BDNF的基因结构及其DNA甲基化调控机制,同时分析了抑郁症患者及动物模型中该因子DNA甲基化的变化情况,旨在为临床研究提供新的思路和理论支撑。 展开更多

关键词 脑源性神经营养因子 DNA甲基化 基因结构 抑郁 启动子 外显子

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男性不育患者精子DNA损伤与非整倍体精子的研究 被引量：10

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作者 徐秀民 于德新 +7 位作者 张志强 谢栋栋 王毅 张涛 陈磊 闵捷 丁德茂 邹慈 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2013年第11期1355-1359,共5页

目的探讨男性不育患者精子DNA完整性和染色体畸变的发生率及临床意义。方法精液标本来自正常已育男性及不育患者,以WHO标准行精液分析,根据结果及不育史分为对照组、少精症组、弱精症组、少弱精症组。精子染色质扩散实验分析精子DNA损... 目的探讨男性不育患者精子DNA完整性和染色体畸变的发生率及临床意义。方法精液标本来自正常已育男性及不育患者,以WHO标准行精液分析,根据结果及不育史分为对照组、少精症组、弱精症组、少弱精症组。精子染色质扩散实验分析精子DNA损伤率和荧光原位杂交实验分析精子染色体(18、X、Y)非整倍体率。结果少精症组、弱精症组和少弱精症组精子DNA损伤率对照组相比差异有统计学意义(P<0.01);不育组的精子染色体(18、X、Y)非整倍体率与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);精子DNA损伤率与染色体非整倍体率呈明显正相关(r=0.453,P=0.008)。结论不育患者精子DNA损伤率和染色体非整倍体率较对照组明显升高且呈显著正相关。在减数分裂过程中,精子DNA损伤可能是导致非整倍体精子形成的重要原因之一。 展开更多

关键词 不育症 DNA损伤 非整倍体 精子 染色体

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痰液细胞DNA含量分析对肺癌的诊断价值 被引量：9

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作者 操乐杰 翟志敏 +6 位作者 李俊 徐美清 夏淮玲 徐晓玲 马冬春 梅晓冬 崔皖芳 《中国肺癌杂志》 CAS 2004年第3期202-205,共4页

目的　探讨痰液细胞DNA含量分析对肺癌的诊断价值。方法　用流式细胞仪对 44例患者 ( 2 9例肺癌、15例肺良性疾病患者 )痰液细胞DNA含量进行分析 ,并与痰细胞形态学检查结果作比较。对痰细胞学阴性而DNA含量分析阳性的对照患者组织切片... 目的　探讨痰液细胞DNA含量分析对肺癌的诊断价值。方法　用流式细胞仪对 44例患者 ( 2 9例肺癌、15例肺良性疾病患者 )痰液细胞DNA含量进行分析 ,并与痰细胞形态学检查结果作比较。对痰细胞学阴性而DNA含量分析阳性的对照患者组织切片行 p5 3、PCNA、Ki67免疫组化分析。 结果　以最后病理诊断为标准 ,肺癌患者异倍体检出的敏感性为 82 .8%,显著高于痰细胞学的敏感性 ( 2 7.6%) (P <0 .0 0 5 ) ;肺癌晚期异倍体阳性率高于早期肺癌 ( 87.5 %比 76.9%,P <0 .0 0 2 5 ) ,其中 1例肺癌患者提前临床 10月检出异倍体。部分炎性假瘤及结核球患者痰标本检出异倍体 ,其相应的组织切片PCNA、Ki67免疫组化染色亦阳性。结论　痰液细胞DNA含量分析是肺癌诊断有效的辅助方法 ,可能有利于肺癌的早期诊断。 展开更多

关键词 肺肿瘤 流式细胞仪 DNA含量 痰细胞学

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DNA测序对Ⅱ型单纯疱疹病毒进行分型鉴定的方法研究 被引量：6

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作者 汪舟佳 刘意 +4 位作者 贾雷立 任翊 孙岩松 黄留玉 陈泽良 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期99-101,共3页

目的建立一种能够对标本中的Ⅱ型单纯疱疹病毒进行准确鉴定分型的方法。方法从生殖器疱疹(GH)患者病变部位采集标本,将标本接种Vero细胞,待出现细胞病变后收获病毒感染物;提取病毒感染物的基因组。根据HSV-1和HSV-2的gD基因序列,设计合... 目的建立一种能够对标本中的Ⅱ型单纯疱疹病毒进行准确鉴定分型的方法。方法从生殖器疱疹(GH)患者病变部位采集标本,将标本接种Vero细胞,待出现细胞病变后收获病毒感染物;提取病毒感染物的基因组。根据HSV-1和HSV-2的gD基因序列,设计合成了一对能够同时扩增两个型的病毒引物,PCR扩增感染物中病毒的序列,PCR产物克隆到pMD18-T载体,然后进行序列测定,测定序列与数据库比对,根据比对结果确定HSV的型。结果用PCR成功扩增出200bp大小的片段;测定序列与数据库的比对结果显示,该序列与HSV-2的gD基因同源性最高,表明在标本中有HSV-2病毒。测定的gD序列与国外分离株的序列存在一定的差异。结论通过PCR扩增和产物的克隆测序,能够实现对临床上难以区分的HSV-1和HSV-2的分型鉴定。 展开更多

关键词 疱疹病毒2型 人 聚合酶链反应 序列分析 DNA

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从唾液获取人体DNA的简易方法与应用 被引量：8

5

作者 陈嘉昌 张红宇 +3 位作者 彭瑾瑜 付艳艳 叶伟超 常弘 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第B04期171-173,共3页

[目的]探索一种对人体无伤害、无痛苦的获取基因组DNA的方法。[方法]比对①获取口腔黏膜细胞的不同途径,②改进的微量血提取试剂盒和常规的碘化钾法提取唾液中的DNA的效果,③经过不同的储存条件、时间梯度所获得的DNA的得率和纯度,④分... [目的]探索一种对人体无伤害、无痛苦的获取基因组DNA的方法。[方法]比对①获取口腔黏膜细胞的不同途径,②改进的微量血提取试剂盒和常规的碘化钾法提取唾液中的DNA的效果,③经过不同的储存条件、时间梯度所获得的DNA的得率和纯度,④分别以提取的DNA和唾液沉淀作为模板PCR扩增管家基因GAPDH、唾液特异蛋白基因PRB- 3、线粒体D-loop区。[结果]从0.1 mL的唾液中即可以提取出约4.5μg的基因组DNA。从新鲜唾液中获得的DNA得率和纯度最高,但即使唾液经过长时间的保存,直接使用唾液的细胞沉淀也同样能够扩增出各种正确大小的基因片段。[结论]唾液作为获取基因组DNA的简易来源,完全可以取代常规的取血采样,也比棉拭子刮取口腔细胞、滤纸唾液斑法、漱口水收集等方法简便、经济、快速。该法不会对被收集者造成任何不适,容易被接收,因而能最大限度的扩大复杂遗传疾病研究的取样范围,特别适合分子流行病学大面积调查。 展开更多

关键词 唾液 基因组DNA 遗传疾病 大面积调查

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甘草次酸对Bloom解旋酶生物学特性的影响 被引量：11

6

作者 刘金河 许厚强 +1 位作者 孟惠惠 罗霂榃 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期919-926,共8页

甘草次酸(glycyrrhetinic acid,GA)是甘草主要活性组分,可诱导肿瘤细胞凋亡,抑制肿瘤细胞生长.然而,其对BLM解旋酶的抑制作用尚未见报道.本文注视甘草次酸对BLM解旋酶构象、二级结构和生化活性的影响.圆二色光谱和紫外光谱分析显示,GA... 甘草次酸(glycyrrhetinic acid,GA)是甘草主要活性组分,可诱导肿瘤细胞凋亡,抑制肿瘤细胞生长.然而,其对BLM解旋酶的抑制作用尚未见报道.本文注视甘草次酸对BLM解旋酶构象、二级结构和生化活性的影响.圆二色光谱和紫外光谱分析显示,GA可破坏BLM642-1290解旋酶α-螺旋结构,改变其构象,并具有2个结合位点.采用荧光偏振技术和自由磷检测证明,GA以浓度依赖的方式抑制BLM642-1290解旋酶与底物dsDNA及ssDNA的结合,抑制BLM642-1290解旋酶活性及ATP酶活性,且抑制类型为混合抑制.综上所述,本文证明GA可通过结合BLM解旋酶,改变BLM解旋酶构象,抑制BLM解旋酶与DNA的结合,从而抑制BLM解旋酶的生化活性.我们的发现将对深入认识GA的抗肿瘤作用有新的启示. 展开更多

关键词 甘草次酸 BLM解旋酶 生化活性 构象 二级结构 圆二色谱 荧光偏振

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利用肺癌特异性结合多肽ZS-6筛选肺癌相关标志物 被引量：5

7

作者 冯文彬 潘雪刁 +4 位作者 周捷 石磊 罗军强 李询 臧林泉 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期44-47,共4页

目的利用本实验室已获得的与肺癌特异性结合的十二肽ZS-6从人类肺癌cDNA文库中筛选出肺癌相关标志物,为肺癌的临床早期诊断和靶向治疗奠定基础。方法以生物素标记的十二肽ZS-6为探针,筛选人类肺癌cDNA噬菌体展示文库,经过四轮减性筛选后... 目的利用本实验室已获得的与肺癌特异性结合的十二肽ZS-6从人类肺癌cDNA文库中筛选出肺癌相关标志物,为肺癌的临床早期诊断和靶向治疗奠定基础。方法以生物素标记的十二肽ZS-6为探针,筛选人类肺癌cDNA噬菌体展示文库,经过四轮减性筛选后,挑取与ZS-6特异性结合的噬菌体单克隆、扩增、纯化,再通过PCR技术扩增、产物纯化后,进行DNA测序,测序结果经过生物信息学分析。结果筛选出18个与ZS-6特异性结合的噬菌体克隆,测序结果显示其中1个为未知功能的新基因,其余的均已确定为肿瘤相关基因。结论从人类肺癌cDNA噬菌体展示文库中筛选出潜在的肺癌肿瘤标志物,为肺癌的早期诊治奠定基础。 展开更多

关键词 多肽ZS-6 CDNA文库 减性筛选 肺癌 肿瘤标志物

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三维凝胶NAT2基因分型芯片的制备与优化 被引量：6

8

作者 刘存刚 李金恒 +1 位作者 孙胜利 曹晓梅 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期272-276,共5页

目的研制N-乙酰化酶2（NAT2）基因分型芯片，以快速、准确检测患者的NAT2单核苷酸基因多态性。方法设计并合成中国人中常见的NAT2酶基因5个突变位点的探针对和包含5个突变位点的两对引物；样本经PCR扩增后，采用丙烯酰胺点样液制备芯片... 目的研制N-乙酰化酶2（NAT2）基因分型芯片，以快速、准确检测患者的NAT2单核苷酸基因多态性。方法设计并合成中国人中常见的NAT2酶基因5个突变位点的探针对和包含5个突变位点的两对引物；样本经PCR扩增后，采用丙烯酰胺点样液制备芯片，并与TEMED反应固化芯片；分别用探针与芯片杂交，采用博奥晶芯LUXSCAN10K微阵列芯片扫描仪分析结果。结果优化了PCR扩增条件，使两组PCR在相同条件下扩增；优化了芯片制备及杂交条件，双链DNA采用碱变性，清除非特异键合采用电泳方法；建立了NAT2酶基因分型标准：信号强度Cy3：Cy5≥5为野生型，Cy3：Cy5为0．6～1．5时为杂合子，Cy3：Cy5≤0．2为突变型；对20例标本的基因分型结果采用直接测序法进行验证，结果均一致。结论三维凝胶NAT2基因点突变分型芯片法是一种特异性强、高通量的NAT2基因分型方法，适用于临床快速基因分型，指导相关药物合理使用。 展开更多

关键词 NAT2 单核苷酸多态性 基因芯片 基因分型

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多吡啶钌配合物[(Phen)_2Ru(dppz)](PF_6)_2的抗菌活性及机制研究 被引量：4

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作者 刘汉杰 付彬 +1 位作者 付爱玲 付琛 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第9期1249-1253,共5页

目的研究多吡啶钌配合物[(Phen)_2Ru(dppz)](PF_6)_2的抗菌活性,并进一步探讨其作用机制。方法采用最小抑菌浓度(MIC)以及最小杀菌浓度(MBC),测定无机配合物[(Phen)_2Ru(dppz)](PF_6)_2的抗菌活性。为了阐明其抗菌机制,首先利用配合物... 目的研究多吡啶钌配合物[(Phen)_2Ru(dppz)](PF_6)_2的抗菌活性,并进一步探讨其作用机制。方法采用最小抑菌浓度(MIC)以及最小杀菌浓度(MBC),测定无机配合物[(Phen)_2Ru(dppz)](PF_6)_2的抗菌活性。为了阐明其抗菌机制,首先利用配合物自身荧光特性和核酸染料对DNA的竞争性结合所导致的荧光强度变化,以确定配合物与DNA的结合能力;然后通过DNA凝胶电泳,检测配合物与细菌基因组DNA结合后产生的效果以检测抗菌活性的机制。结果多吡啶钌配合物[(Phen)_2Ru(dppz)](PF_6)_2对大肠杆菌以及金黄色葡萄球菌具有较强的抗菌活性,最小抑菌浓度达0.2~0.4 g·L^(-1)。荧光检测显示,配合物能够与细菌DNA发生结合,以此为基础,配合物能够干扰细菌的转录过程,抑制细菌生长。结论本研究证明了多吡啶钌配合物[(Phen)_2Ru(dppz)](PF_6)_2的抗菌活性及作用机制,为其进一步开发奠定了基础。 展开更多

关键词 多吡啶钌配合物 抑菌活性 荧光检测 代谢活性 DNA结合 DNA降解

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MAPK通路抑制剂对不同PTEN状态子宫内膜癌细胞作用及机制 被引量：5

10

作者 肖兰 龙腾飞 +1 位作者 何婵 周家德 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2014年第5期613-618,共6页

目的探讨PTEN缺失和表达下p38MAPK通路抑制剂(SB203580)对子宫内膜癌细胞Ishikawa及HEC-1A的作用及其机制。方法 PTEN小分子干扰RNA及PTEN基因转染后,激光共聚焦显微镜检测PTEN蛋白表达;SB203580干预48 h,流式细胞术、MTT法及Western b... 目的探讨PTEN缺失和表达下p38MAPK通路抑制剂(SB203580)对子宫内膜癌细胞Ishikawa及HEC-1A的作用及其机制。方法 PTEN小分子干扰RNA及PTEN基因转染后,激光共聚焦显微镜检测PTEN蛋白表达;SB203580干预48 h,流式细胞术、MTT法及Western blot法分别检测细胞干预后子宫内膜癌细胞早期凋亡、细胞增殖活性、p38MAPK通路的磷酸化水平及其下游底物4E-BP1蛋白的磷酸化情况。结果 PTEN小分子干扰RNA封闭与PTEN稳定转染使两株子宫内膜癌细胞(Ishikawa,HEC-1A)PTEN表达水平改变。SB203580干预使PTEN缺失Ishikawa及HEC-1A细胞生长显著抑制,细胞发生早期凋亡;p38MAPK通路磷酸化水平和磷酸化4E-BP1蛋白表达均显著下降;与PTEN表达两种细胞比较,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论内外源性PTEN缺失使两株子宫内膜癌细胞中p38MAPK通路活化,对SB203580敏感性增加,其机制可能与PTEN缺失导致PTEN对p38MAPK信号通路负性调控功能丧失,引发p38MAPK信号通路下游底物4E-BP1激活导致p38MAPK通路活化有关。 展开更多

关键词 子宫内膜癌 PTEN p38MAPK通路抑制剂 敏感性

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一种从唾液中快速提取基因组DNA的方法 被引量：4

11

作者 杨泽民 林静 +2 位作者 陈龙辉 张敏 陈蔚文 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期548-553,共6页

目的探索一种快速、有效且对人体无创伤的基因组DNA提取方法。方法比较碘化钾法和口腔拭子基因组DNA提取试剂盒法对新鲜和室温放置1周的唾液标本的基因组DNA提取和TP53、PRB-3基因PCR扩增效果。同时采集99名健康儿童和成人的唾液标本验... 目的探索一种快速、有效且对人体无创伤的基因组DNA提取方法。方法比较碘化钾法和口腔拭子基因组DNA提取试剂盒法对新鲜和室温放置1周的唾液标本的基因组DNA提取和TP53、PRB-3基因PCR扩增效果。同时采集99名健康儿童和成人的唾液标本验证碘化钾法提取唾液基因组DNA的稳定性。结果两种DNA提取方法都能从新鲜唾液标本中获得高质量的基因组DNA,其中碘化钾法的得率和D260/D280分别为(1.91±0.15)μg和1.99±0.05,试剂盒法分别为(2.64±0.34)μg和1.81±0.02。对于室温放置1周的唾液标本,两种提取方法获得的DNA虽然降解明显,但是对TP53和PRB-3基因都能扩增正确大小的目的片段。碘化钾法提取的99名健康儿童和成人的唾液基因组DNA虽然个体差异明显[得率为(1.89±0.46)μg],但是DNA质量稳定可靠(D260/D280为1.96±0.10)。结论碘化钾法提取唾液基因组DNA不仅廉价、高效,而且对人体无创伤,非常适合大范围分子流行病学研究。 展开更多

关键词 唾液 碘化钾DNA提取 聚合酶链反应

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狼疮模型鼠体内氧化/抗氧化指标与抗dsDNA抗体水平以及肾脏病变的相关性 被引量：3

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作者 金伟 方雪辉 +1 位作者 苏虹 叶冬青 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2008年第1期24-28,共5页

目的探讨狼疮样模型小鼠体内的氧化/抗氧化状态,及其与抗dsDNA抗体以及肾脏病变的关系。方法应用分光光度法测定血浆氧化/抗氧化指标,ELISA法测定血浆抗dsDNA抗体浓度。应用两样本t检验,比较狼疮模型鼠与正常对照组间氧化/抗氧化指标以... 目的探讨狼疮样模型小鼠体内的氧化/抗氧化状态,及其与抗dsDNA抗体以及肾脏病变的关系。方法应用分光光度法测定血浆氧化/抗氧化指标,ELISA法测定血浆抗dsDNA抗体浓度。应用两样本t检验,比较狼疮模型鼠与正常对照组间氧化/抗氧化指标以及干预组与非干预组间氧化/抗氧化指标以及自身抗体指标间的差异,采用pearson相关分析比较机体氧化/抗氧化指标与抗体指标间相关性。光镜和电镜下观察肾脏的病理改变,并比较干预组和非干预组间病理改变的差异。结果狼疮模型鼠的丙二醛高于正常对照组(t=4.92,P<0.01),其抗dsNDA抗体水平也高于正常对照组(t=6.53,P<0.01),而总体抗氧化能力水平则低于正常对照组(t=-4.15,P<0.01)。丙二醛和抗dsDNA抗体呈现正相关(r=0.647,P<0.05)总体抗氧化能力与抗dsDNA抗体呈现负相关(r=0.877,P<0.01),总体抗氧化能力与丙二醛呈现负相关(r=0.773,P<0.01)。干预组丙二醛低于非干预组(t=-2.46,P<0.05),组织病理学观察表明,干预组的肾脏病变程度轻于非干预组。结论狼疮模型鼠体内氧化程度较正常对照组高;狼疮模型鼠体内氧化程度与抗dsDNA抗体水平以及肾脏病变之间存在相关性。 展开更多

关键词 红斑狼疮 系统性 DNA/免疫学 肾/损伤 抗氧化剂 模型 动物

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大鼠BDNF基因复制缺陷型重组腺病毒的构建与鉴定 被引量：2

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作者 王鹏 吴燕峰 +4 位作者 黄文林 唐勇 黄霖 杨睿 沈慧勇 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期135-139,共5页

【目的】构建携带大鼠脑源性神经营养因子(brainderivedneurotrophicfactor,BDNF)目的基因的复制缺陷型重组腺病毒,并初步检测其体外表达目的基因的能力。【方法】提取大鼠脑组织总RNA,使用RT-PCR方法扩增BDNF目的基因并将其克隆入pMD18... 【目的】构建携带大鼠脑源性神经营养因子(brainderivedneurotrophicfactor,BDNF)目的基因的复制缺陷型重组腺病毒,并初步检测其体外表达目的基因的能力。【方法】提取大鼠脑组织总RNA,使用RT-PCR方法扩增BDNF目的基因并将其克隆入pMD18-TSimple载体测序,将测序完全正确的BDNF目的基因克隆入pShuttle2中,然后利用体外连接法将BDNF目的基因克隆入Adeno-XTM腺病毒骨架中,LipofectamineTM2000法转染HEK293细胞包装携带BDNF目的基因的重组腺病毒,少量提取重组腺病毒DNA检测证实为复制缺陷型BDNF基因重组腺病毒后大量扩增,蛋白电泳及Westernblot法初步检测BDNF目的基因在HEK293细胞中的表达。【结果】成功构建了携带大鼠BDNF目的基因的复制缺陷型重组腺病毒,并证实其在HEK293细胞中可高水平表达BDNF目的基因。【结论】利用体外连接法可方便、快捷地构建携带BDNF目的基因的复制缺陷型重组腺病毒,并可在体外高水平表达表达其所携带的目的基因。 展开更多

关键词 脑源性神经营养因子 基因重组 腺病毒载体

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肾脏疾病中的表观遗传修饰:从功能解析到临床转化

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作者 张萌萌 锁孝国 +3 位作者 葛庆琳 李超 汪佳男 孟晓明 《中国药理学通报》 北大核心 2025年第9期1601-1607,共7页

随着基因组学、生物化学和遗传学方法的日益成熟,表观遗传机制对生命、遗传和进化的影响程度也愈发重要,这将使生物医学界向个性化精准医疗的方向迈进。肾脏疾病,特别是慢性肾脏病(chronic kidney disease,CKD)和急性肾损伤(acute kidne... 随着基因组学、生物化学和遗传学方法的日益成熟,表观遗传机制对生命、遗传和进化的影响程度也愈发重要,这将使生物医学界向个性化精准医疗的方向迈进。肾脏疾病,特别是慢性肾脏病(chronic kidney disease,CKD)和急性肾损伤(acute kidney injury,AKI),由于其临床症状不显著且早期诊断困难,治疗选择有限,因此亟需新的治疗策略,而表观遗传修饰在肾脏疾病中的机制研究和临床应用正处于快速发展之中,成为肾脏疾病治疗的新兴领域。通过从作用机制研究到临床转化的逐步推进,表观遗传修饰有望为肾脏疾病的早期诊断、个性化治疗及精准医学提供强有力的支持。 展开更多

关键词 肾脏疾病 表观遗传修饰 表观遗传治疗策略 诊断标志物 临床转化 未来策略

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人类UGT2B17基因缺失的多重PCR分型方法 被引量：1

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作者 沈杰 谢海棠 +3 位作者 张伟 王果 贾元威 钟民 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第9期1251-1253,共3页

目的建立一种快速有效的人类UGT2B17基因缺失型的PCR分型方法。方法针对人类基因组UGT2B17基因缺失型和外显子序列设计引物,采用多重PCR法进行分型。结果成功建立了一种多重PCR基因分型方法,并以普通PCR法和测序法验证。对安徽皖南地区... 目的建立一种快速有效的人类UGT2B17基因缺失型的PCR分型方法。方法针对人类基因组UGT2B17基因缺失型和外显子序列设计引物,采用多重PCR法进行分型。结果成功建立了一种多重PCR基因分型方法,并以普通PCR法和测序法验证。对安徽皖南地区健康人群UGT2B17基因分布进行了初步分析。结论所建立的多重PCR方法为一种有效便捷的UGT2B17基因缺失分型方法。 展开更多

关键词 UGT2B17 多态性缺失 基因分型 多重PCR 基因频率 安徽皖南

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大劣按蚊成蚊cDNA文库的构建与质量鉴定 被引量：2

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作者 郝宏兴 徐文岳 +2 位作者 段建华 况明书 黄复生 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第11期971-973,共3页

目的　构建大劣按蚊成蚊cDNA文库 ,为进一步筛选、克隆按蚊免疫及疟原虫发育相关基因奠定基础。方法　分离大劣按蚊成蚊mRNA ,用Stratagene公司的ZAPExpress文库构建试剂盒构建cDNA文库并鉴定其质量。结果　所建文库滴度达 2 1× 1... 目的　构建大劣按蚊成蚊cDNA文库 ,为进一步筛选、克隆按蚊免疫及疟原虫发育相关基因奠定基础。方法　分离大劣按蚊成蚊mRNA ,用Stratagene公司的ZAPExpress文库构建试剂盒构建cDNA文库并鉴定其质量。结果　所建文库滴度达 2 1× 10 6pfu/ml,重组效率达 98%以上 ,插入片段长度平均为 1kb以上。 展开更多

关键词 大劣按蚊 CDNA文库

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单细胞凝胶电泳技术检测小鼠成纤维细胞DNA的氧化损伤及修复 被引量：13

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作者 陈忻 西田浩志 小西徹也 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期25-27,共3页

目的观察小鼠成纤维细胞由过氧化氢(H2O2)引起的DNA损伤及其修复,并详细介绍单细胞凝胶电泳技术。方法培养NIH3T3细胞,H2O2造成细胞氧化损伤,单细胞凝胶电泳技术(SCGE,Comet Assay)检测细胞DNA的损伤情况。结果①建立了H2O2致NIH3T3细胞... 目的观察小鼠成纤维细胞由过氧化氢(H2O2)引起的DNA损伤及其修复,并详细介绍单细胞凝胶电泳技术。方法培养NIH3T3细胞,H2O2造成细胞氧化损伤,单细胞凝胶电泳技术(SCGE,Comet Assay)检测细胞DNA的损伤情况。结果①建立了H2O2致NIH3T3细胞DNA损伤的分级图谱;②H2O2引起的小鼠成纤维细胞DNA单链断裂与H2O2的浓度呈依赖性关系;③细胞在除去H2O2后15 min已出现明显修复,多数修复可在1 h内完成,但少数修复可能需要较长时间才能完成。结论单细胞凝胶电泳技术是一种简便、敏感的检测DNA氧化损伤的方法。 展开更多

关键词 单细胞凝胶电泳 DNA单链断裂 DNA氧化损伤 DNA修复

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对LHRH受体在靶细胞上表达量的分析 被引量：1

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作者 李亘松 邓欣 张国利 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第7期977-978,共2页

关键词 促黄体激素释放激素受体-绿脓杆菌外毒素 LHRH受体 靶细胞 IC50 细胞毒性 MTT

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慢性阻塞性肺疾病的气道上皮细胞衰老机制研究进展

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作者 栗兆靓 王略力 +5 位作者 仪倩 马若秋 郭蓉 徐长莉 杜晓华 杨为民 《中国药理学通报》 北大核心 2025年第5期805-810,共6页

气道上皮细胞(airway epithelial cells,AECs)是分隔呼吸系统内外环境之间的物理屏障,作为呼吸系统的第一道防线对肺部的天然免疫功能至关重要。小气道病变是慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)的重要早期病... 气道上皮细胞(airway epithelial cells,AECs)是分隔呼吸系统内外环境之间的物理屏障,作为呼吸系统的第一道防线对肺部的天然免疫功能至关重要。小气道病变是慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)的重要早期病理,当AECs长期暴露于有害颗粒或气体后,上皮屏障受损,参与分化、修复和促炎反应的信号通路异常,导致上皮细胞周期停滞从而加速衰老。研究发现,COPD患者的AECs表达高水平的衰老标志物,提示AECs衰老与COPD密切相关。该文讨论了COPD中AECs衰老的潜在机制,AECs衰老对疾病发展和严重程度的影响,并强调了调节AECs衰老作为COPD治疗方法的潜在靶点。 展开更多

关键词 慢性阻塞性肺疾病 气道上皮细胞 衰老 DNA损伤 表观遗传修饰 慢性炎症 氧化应激 线粒体自噬 衰老细胞治疗

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具有独特表型的LHON家系及其线粒体基因突变的初步分析

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作者 胡慧敏 陈先文 +3 位作者 高宗良 周青 汪渊 左莉 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2006年第1期74-76,共3页

目的探讨一个5代遗传的具有独特表型的Leber遗传性视神经病(LHON)家系的线粒体基因突变。方法对LHON的常见致病突变位点(3460、11778、14484、14459等)、线粒体遗传病Leigh病常见突变位点8893和线粒体脑肌病伴Leigh病表型的常见突变位点... 目的探讨一个5代遗传的具有独特表型的Leber遗传性视神经病(LHON)家系的线粒体基因突变。方法对LHON的常见致病突变位点(3460、11778、14484、14459等)、线粒体遗传病Leigh病常见突变位点8893和线粒体脑肌病伴Leigh病表型的常见突变位点13513进行聚合酶链反应(PCR)、单链构象多态性(SSCP)和DNA测序分析。结果SSCP和测序结果均为阴性。结论该家系是新的LHON突变亚型。为明确该家系的诊断,需要进行线粒体DNA的全长序列分析。 展开更多

关键词 DNA 线粒体/遗传学 视神经疾病/遗传学 突变

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