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95987例住院患者血小板抗体筛查临床价值分析 被引量：2
1
作者 陈萍 孙杨 +8 位作者 褚晓月 田芬芳 杨颖群 王文华 牛佳萌 赵柏雅 常婧妍 杨江存 马超锋 《细胞与分子免疫学杂志》 北大核心 2025年第2期143-147,共5页
目的分析血小板抗体在住院患者中的分布情况,探讨血小板抗体检测的临床意义。方法收集2021-04-01/2023-12-31西安地区某三级医院住院患者95987例,采用固相凝集法检测血小板抗体。对其在性别、年龄、血型、科室、输血史、妊娠史及疾病类... 目的分析血小板抗体在住院患者中的分布情况,探讨血小板抗体检测的临床意义。方法收集2021-04-01/2023-12-31西安地区某三级医院住院患者95987例,采用固相凝集法检测血小板抗体。对其在性别、年龄、血型、科室、输血史、妊娠史及疾病类型等方面进行统计分析。结果95987例住院患者中,血小板抗体检测阳性率达4.35%,女性住院患者血小板抗体阳性率(5.29%)高于男性患者(3.31%),差异有统计学意义(χ^(2)=224.124)。有妊娠史的血小板抗体阳性率(7.92%)高于无妊娠史(4.19%),差异显著(χ^(2)=292.773);同样,有输血史血小板抗体阳性率(7.79%)高于无输血史(3.97%),差异显著(χ^(2)=300.209)。血小板抗体阳性率与妊娠次数呈现显著相关性(χ^(2)=91.061)。结论95987例住院患者血小板抗体阳性率为4.35%,血小板抗体阳性率与输血史及妊娠史有着密切关系,并随着妊娠次数的增加而增加,对于有多次输血史及妊娠史的患者来说,血小板抗体筛查具有重要的诊断价值。 展开更多
关键词 血小板抗体 血小板输注无效 住院患者
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血小板在肿瘤发展中的动态作用及以其为基础的治疗手段 被引量：2
2
作者 路奇 杜莉莉 孙进 《中国临床药理学与治疗学》 北大核心 2025年第3期290-296,共7页
除凝血功能外,血小板在肿瘤发生、发展及转移等过程中起关键性作用。肿瘤与血小板相互作用可以产生“肿瘤诱导血小板”,并导致血小板多种特征的变化。此外,活化的血小板还会抑制化疗或免疫治疗的效果,因此抑制血小板激活或耗竭血小板能... 除凝血功能外,血小板在肿瘤发生、发展及转移等过程中起关键性作用。肿瘤与血小板相互作用可以产生“肿瘤诱导血小板”,并导致血小板多种特征的变化。此外,活化的血小板还会抑制化疗或免疫治疗的效果,因此抑制血小板激活或耗竭血小板能有效提高肿瘤预后。本文详细介绍了血小板在肿瘤发展过程中的关键性作用,对其在肿瘤诊断及监测治疗中的应用进行了总结,并重点讨论了如何以血小板为基础开发精准的递送策略以实现高效安全的肿瘤治疗。 展开更多
关键词 血小板 肿瘤治疗 临床检测指标 靶向递送
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温度循环保存对血小板聚集率及常规参数的影响分析
3
作者 梁菊玲 邓智豪 +3 位作者 卓创近 黄露 徐静 伍伟健 《中国实验血液学杂志》 北大核心 2025年第1期236-240,共5页
目的:对比分析温度循环保存血小板与4℃冷藏保存、22℃振荡保存血小板的聚集率及血小板常规参数变化,为探讨血小板保存方法提供更多实验数据。方法:对温度循环保存血小板、4℃冷藏保存血小板、22℃振荡保存血小板保存d 1、2、3、4、6共... 目的:对比分析温度循环保存血小板与4℃冷藏保存、22℃振荡保存血小板的聚集率及血小板常规参数变化,为探讨血小板保存方法提供更多实验数据。方法:对温度循环保存血小板、4℃冷藏保存血小板、22℃振荡保存血小板保存d 1、2、3、4、6共5个时间点采集血样,检测其血小板最大聚集率(MAR)及血小板常规参数,包括血小板计数(PLT)、平均血小板体积(MPV)、血小板分布宽度(PDW)和大血小板比率(P-LCR)。结果:3组血小板MAR均随保存时间延长呈显著下降趋势,以22℃组下降最快,4℃组最慢,温度循环组介于两者之间;保存d 3,4℃组MAR仍在正常范围内(MAR>60%),温度循环组约50%,22℃组最低;保存d 4,3组MAR均低于50%,温度循环组MAR显著低于4℃组且高于22℃组(均P<0.05);保存d 6,温度循环组MAR显著低于4℃组(P<0.05),而与22℃组差异无统计学意义(P>0.05)。3组PLT值均随保存时间延长显著下降,保存6 d内3组PLT值均显著低于保存初期(均P<0.05);温度循环组6 d内PDW无显著变化,MPV、P-LCR显著升高;4℃组6 d内MPV、PDW、P-LCR均显著下降,而22℃组显著上升;在相同保存天数下温度循环组PLT值与4℃组、22℃组无明显差异,MPV、PDW、P-LCR值显著高于4℃组、低于22℃组(均P<0.05)。结论:温度循环保存血小板的聚集功能、血小板常规参数变化介于4和22℃保存之间。 展开更多
关键词 温度循环保存 血小板 血小板聚集率 冷藏保存
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m^(6)A去甲基化酶FTO调控BCL2 mRNA稳定性与翻译效率促进血小板前体形成 被引量：1
4
作者 夏文军 卢尧 +2 位作者 吴煌 文爱清 陈卫 《陆军军医大学学报》 北大核心 2025年第6期519-530,共12页
目的探究下调m^(6)A去甲基化酶脂肪质量和肥胖相关基因(fat mass and obesityassociated protein,FTO)对MEG-01巨核细胞系血小板前体形成的影响及其机制。方法①分别用1 nmol/L佛波迷酯(phorbol myristate acetate,PMA)组(诱导组)和DMSO... 目的探究下调m^(6)A去甲基化酶脂肪质量和肥胖相关基因(fat mass and obesityassociated protein,FTO)对MEG-01巨核细胞系血小板前体形成的影响及其机制。方法①分别用1 nmol/L佛波迷酯(phorbol myristate acetate,PMA)组(诱导组)和DMSO组(对照组)处理MEG-01细胞72 h,通过Western blot和RT-qPCR检测FTO蛋白和mRNA表达变化情况。②用靶向FTO的病毒液(sh-FTO)和阴性对照病毒液(sh-NC)感染MEG-01细胞,用1 nmol/L PMA诱导sh-NC组和sh-FTO组MEG-01细胞72 h后,Western blot和RT-qPCR检测FTO蛋白和mRNA表达变化情况。碘化丙啶(propidium lodrde,PI)DNA染色检测细胞周期、CCK-8检测细胞活力,Annexin V-FITC/PI双染、TUNEL染色检测细胞凋亡情况,Western blot检测cleaved Caspase-3蛋白表达量,CD41/CD61染色检测巨核细胞成熟情况,明场观察和CD61免疫荧光检测血小板前体形成情况,RT-qPCR检测细胞凋亡相关分子(Caspase-3、BAD、BAK1、BCL2、MCL1)表达量,Western blot检测进一步验证BCL2蛋白变化情况,基因表达综合数据库(gene expression omnibus,GEO)中筛选出数据集;使用加州大学圣克鲁兹分校基因组浏览器(University of California,Santa Cruz genome browser,UCSC)分析比对BCL2 mRNA上的甲基化测序峰;m^(6)A甲基化RNA免疫共沉淀(m^(6)A RNA immunoprecipitation,m^(6)A-RIP)验证MEG-01巨核细胞BCL2 mRNA m^(6)A甲基化富集水平,检测sh-NC组和sh-FTO组BCL2 mRNA m^(6)A甲基化富集水平变化,以mRNA半衰期实验和多聚核糖体分离实验检测BCL2 mRNA翻译效率。结果①与DMSO组相比,PMA组FTO蛋白(P<0.05)和mRNA(P<0.01)表达水平升高;②与sh-NC组相比,sh-FTO组FTO mRNA和蛋白表达水平明显降低(P<0.01),细胞周期发生G1/S期阻滞[(60.80±1.29)%vs(72.13±1.18)%,P<0.01],细胞活力明显降低[(1.17±0.03)%vs(0.69±0.05)%,P<0.05],Annexin V-FITC/PI阳性细胞占比升高[(12.87±0.83)%vs(17.45±1.58)%,P<0.01],TUNEL阳性细胞占比显著升高[(1.03±0.27)%vs(17.49±9.91)%,P<0.01],cleaved Caspase-3蛋白表达水平明显升高(P<0.01),CD41+CD61+阳性率明显降低[(51.63±1.13)%vs(34.08±0.53)%,P<0.01],具有伪足的巨核细胞比率明显降低[(26.49±6.73)%vs(13.31±5.97)%,P<0.01]。③与sh-NC相比,sh-FTO组细胞抗凋亡分子BCL2蛋白和mRNA表达水平显著降低(P<0.01),UCSC GEO测序显示BCL2 mRNA上有m^(6)A甲基化修饰位点,并经m^(6)ARIP实验在MEG-01巨核细胞验证:与GAPDH mRNA相比,BCL2 mRNA有明显的m^(6)A富集信号(P<0.01);与sh-NC相比,BCL2 mRNA上的m^(6)A甲基化修饰明显升高(P<0.01);BCL2 mRNA的稳定性显著降低,翻译效率显著降低(P<0.01)。结论m^(6)A去甲基化酶FTO调控BCL2 mRNA稳定性与翻译效率,促进血小板前体形成。 展开更多
关键词 脂肪质量和肥胖相关基因 血小板前体 m^(6)A甲基化修饰 B淋巴细胞瘤-2基因
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血小板、TNF-α及IL-1β与活动期类风湿关节炎的相关性研究 被引量：37
5
作者 王志中 王勇 +7 位作者 牟方祥 方勇飞 陈军 罗彦 石颖 成娴 吴红 蒋毅 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期469-472,共4页
目的探讨类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者的疾病活动性与炎症相关因子的关系。方法收集363例住院和门诊RA患者的血清及临床数据,包括血沉(ESR)、C反应蛋白(CRP)、血小板计数(PLT)及类风湿因子(RF),ELISA检测抗环瓜氨酸肽抗体... 目的探讨类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者的疾病活动性与炎症相关因子的关系。方法收集363例住院和门诊RA患者的血清及临床数据,包括血沉(ESR)、C反应蛋白(CRP)、血小板计数(PLT)及类风湿因子(RF),ELISA检测抗环瓜氨酸肽抗体(CCP)、葡萄糖6磷酸异构酶(GPI)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及白细胞介素-1β(IL-1β)的表达,按DAS28(ESR)分为疾病高活动及中低活动组,分析PLT、TNF-α及IL-1β在RA疾病高、中低活动组与正常对照组之间的差异,探讨其与临床各指标的相关性。结果 RA疾病高活动组PLT水平明显高于中低活动与正常对照组(P=0.000)。3组间TNF-α、IL-1β计量值分布有显著差异(P<0.05)。根据平均秩次推断,RA疾病高活动组TNF-α、IL-1β中位数分别为[2.97(1.87,13.53)、0.95(0.55,5.47)]pg/ml,中低活动组中位数分别为[2.78(1.91,8.18)、0.72(0.57,5.14)]pg/ml,均显著高于正常对照组(P<0.01),而高活动组与中低活动组之间TNF-α或IL-1β比较计量值分布无统计学差异。PLT与关节压痛数、关节肿胀数、晨僵、VAS、DAS28(4)、CRP及ESR均呈显著正相关(P<0.01),而TNF-α与关节压痛数、VAS、DAS28(4)及ESR呈正相关(P<0.05),IL-1β仅与ESR相关(r=0.179,P=0.001)。PLT、TNF-α及IL-1β均与CCP、RF、GPI无相关性(P>0.05)。结论 PLT及TNF-α可作为RA疾病活动度的灵敏指标之一,IL-1β在一定程度上反应炎症活动程度。 展开更多
关键词 类风湿关节炎 疾病活动性 血小板 肿瘤坏死因子-Α 白细胞介素-1Β
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献血者血小板1-16抗原基因遗传多态性分析及已知HPA型供者数据库的建立 被引量：40
6
作者 孙国栋 段现民 +5 位作者 张彦平 尹志柱 牛小利 李艳凤 牛海江 赵有良 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2005年第5期889-895,共7页
本研究的目的是分析人类血小板抗原(humanplateletantigen,HPA)基因多态性,根据分布频率来判断HPA抗原不配合比率以及抗体产生的机会,确定有临床意义的血小板抗原系统,并建立邯郸地区血小板基因频率数据库和供者库。采用SSPPCR方法对邯... 本研究的目的是分析人类血小板抗原(humanplateletantigen,HPA)基因多态性,根据分布频率来判断HPA抗原不配合比率以及抗体产生的机会,确定有临床意义的血小板抗原系统,并建立邯郸地区血小板基因频率数据库和供者库。采用SSPPCR方法对邯郸地区148名随机献血者进行HPA116抗原32个等位基因的检测分析,并与不同人群的分布频率进行比较。结果表明:每个样本均检测到HPA1a、2a、4a14a、16a基因;HPA4a、7a14a、16a呈现单态性,未检测出相应的等位基因HPAb;对于HPA1、2、5、6主要以a/a纯合子为多,a/a基因型频率分别是0.9595、0.8108、0.9865、0.9797,没有b/b纯合子出现。在HPA116中,具有最高杂合度的是HPA15,基因型HPA15a/15a、HPA15a/15b、HPA15b/15b频率分别是0.2230、0.5270、0.2500;HPA3在其次,基因型HPA3a/3a、HPA3a/3b、HPA3b/3b频率分别是0.3851、0.5135、0.1014。经χ2检验,结果符合HardyWeinberg遗传平衡定律。邯郸地区随机献血者HPA15系统基因频率与石家庄地区相似(P>0.05);与我国台湾人群进行HPA113、HPA15的比较,HPA1、2、6具有明显的不同(P<0.05),其它相似(P>0.05);与韩国人群进行HPA18的比较,除HPA3具有明显不同外(P<0.05),其余均相似(P>0.05);与美国黑人进行HPA15的比较,HPA1、2、5具有明显的差异(P<0.05);与英国人进行HPA111的比较,HPA1、5具有明显的不同(P<0.05)。结论:北方地区中国人群HPA2、3、5、15系统具有多态性,且HPA抗原分布不配合比率较高,这必然造成免疫暴露的机会增加,提示在临床上可能具有重要的免疫学意义。同时,在此次研究数据的基础上建立了邯郸地区血小板基因频率数据库和血小板已知型供者库。 展开更多
关键词 人类血小板抗原 基因频率 基因型频率 血小板抗体 血小板供者库
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平均血小板容积、纤维蛋白原含量及血液流变学在青年脑梗死患者外周血中的变化 被引量：17
7
作者 唐万兵 李梅笑 +3 位作者 李观强 蔡洁丹 韦深 万彦彬 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期390-393,共4页
本研究旨在探讨平均血小板容积(MPV)、纤维蛋白原(FIB)含量及血液流变学改变与青年脑梗死患者梗死体积的相关性,为其临床早期诊断和治疗提供依据。根据头部CT或MRI病灶大小及神经功能受损程度将我院109例脑梗死患者(18-45岁)分为大梗死... 本研究旨在探讨平均血小板容积(MPV)、纤维蛋白原(FIB)含量及血液流变学改变与青年脑梗死患者梗死体积的相关性,为其临床早期诊断和治疗提供依据。根据头部CT或MRI病灶大小及神经功能受损程度将我院109例脑梗死患者(18-45岁)分为大梗死组(梗死体积>10 cm3)、中梗死组(梗死体积4-10 cm3)、小梗死组(梗死体积<4 cm3),30例健康查体正常人作为对照组,进行MPV、FIB及血液流变学指标检查,包括:全血黏度低切(Lηb)、全血黏度中切(Mηb)、全血黏度高切(Hηb)、血浆黏度值(ηP)、全血还原黏度低切(Lηr)、全血还原黏度中切(Mηr)、全血还原黏度高切(Hηr)、血沉方程K值(KVE)、红细胞积聚指数(EAI)、红细胞刚性指数(ERI)、红细胞变形指数(EDI)、红细胞电泳指数(EEI)、红细胞比容、血沉,共计16项指标。结果表明:各组脑梗死患者MPV、FIB含量和血液流变学指标均高于健康对照组(P<0.05);大梗死组MPV、FIB含量和血液流变学指标均高于小梗死组(P<0.05);各组脑梗死患者在病程恢复期MPV、FIB含量和血液流变学指标均有明显下降,但未达到健康对照组水平(P<0.05)。脑梗死体积与MPV、FIB含量及血液流变学水平呈正相关(r=0.36,0.29,0.48)。结论:青年脑梗死病情的严重程度与MPV、FIB及血液流变学水平密切相关,定期检查上述指标对预防青年脑梗死很有价值。 展开更多
关键词 脑梗死 血小板容积 纤维蛋白原 血液流变学
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再生障碍性贫血外周血Th17和CD4^+ CD25^+ Treg细胞表达情况研究 被引量：12
8
作者 童来根 吴文忠 +5 位作者 周志刚 张云平 陈亚峰 黄文娟 许欢 苏倩倩 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期974-978,共5页
本研究旨在探讨成人再生障碍性贫血(aplastic anemia,AA)外周血Th17和CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)表达情况。45例初发AA患者分为轻型AA(n=25)和重型AA(n=25)两组,15例正常人作为对照。应用流式细胞术检测AA患者外周血中Th17和CD4+CD25+T... 本研究旨在探讨成人再生障碍性贫血(aplastic anemia,AA)外周血Th17和CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)表达情况。45例初发AA患者分为轻型AA(n=25)和重型AA(n=25)两组,15例正常人作为对照。应用流式细胞术检测AA患者外周血中Th17和CD4+CD25+Treg的比例,ELISA检测血清及刺激后外周血单个核细胞(PBMNC)上清液中的白介素(IL-17)、γ干扰素(IFN-γ)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,并与正常对照组比较。结果表明:重型AA(SAA)组外周血Th17细胞比例,血清中IL-17及IFN-γ表达高于轻型AA(MAA)和正常人组,而重型AA组外周血CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞比例降低。与轻型AA和正常对照相比,重型AA患者单个核细胞培养后上清液中IL-17及IFN-γ表达水平显著增加。AA患者血红蛋白计数与Th17细胞及血清IL-17表达呈负相关,与CD4+CD25+Treg表达成正相关。结论:重型AA患者外周血Th17细胞应答增强,而CD4+CD25+Treg细胞缺乏,贫血的严重程度与外周血Th17/Treg免疫应答失衡密切相关。 展开更多
关键词 再生障碍性贫血 Th17细胞 CD4+CD25+调节性T细胞 IL-17 IFN-γ TNF-α
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血小板TLR4表达介导LPS诱导的血小板活化 被引量：14
9
作者 马丽萍 魏菁 +3 位作者 常建星 张呈 裴智信 杨秋红 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2009年第6期1564-1568,共5页
本研究探讨人血小板Toll样受体4(toll-like receptor 4,TLR4)表达及其在细菌内毒素脂多糖(lipopolysaccsharide,LPS)诱导血小板活化中的作用。对15例健康人肘静脉抽血各20ml,制备富含血小板血浆(PRP)和血小板悬液,在有或无凝血酶作用的... 本研究探讨人血小板Toll样受体4(toll-like receptor 4,TLR4)表达及其在细菌内毒素脂多糖(lipopolysaccsharide,LPS)诱导血小板活化中的作用。对15例健康人肘静脉抽血各20ml,制备富含血小板血浆(PRP)和血小板悬液,在有或无凝血酶作用的基础上加入LPS(0.2μ/ml)孵育30分钟,分别用流式细胞术和免疫印迹(Western blot)方法检测LPS作用前后血小板TLR4、CD62P和CD40L的表达。结果表明:流式细胞术检测静止血小板TLR4表达为25.44%,凝血酶刺激后明显升高(32.34%,p<0.05),LPS继续作用后TLR4的表达进一步增高(39.16%,p<0.01);在无凝血酶刺激下,LPS作用血小板后TLR4的表达接近于凝血酶刺激后结果。Western blot方法检测结果与流式细胞术相符;血小板CD62P和CD40L表达(流式细胞术)在静止血小板分别为6.39%和2.45%,凝血酶刺激后明显增高,分别为42.68%和14.8%,LPS进一步刺激后表达率进一步升高,分别为63.03%和13.94%,均明显高于仅用凝血酶的刺激组(p<0.001);抗TLR4抗体显著抑制了LPS诱导的血小板TLR4、CD62P、CD40L表达,但不影响凝血酶诱导的血小板膜CD62P、CD40L表达。结论:人血小板能够表达功能性TLR4,它直接参与了机体针对细菌的固有免疫反应。 展开更多
关键词 脂多糖 血小板 TLR4 CD62P CD40L
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急性血小板分离制备心脏手术患者富血小板血浆的质量分析 被引量：12
10
作者 魏海燕 丁正年 +2 位作者 史宏伟 葛亚力 陈鑫 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期521-524,共4页
为评价心脏直视手术患者急性血小板分离制备的富血小板血浆(platelet-rich plasma,PRP)的效率和效果,对PRP质量进行了分析。20例ASAⅡ-Ⅲ级择期心脏手术患者在麻醉诱导后进行全血采集和血小板分离。分别测定分离前(T1)的全血,分离后(T2)... 为评价心脏直视手术患者急性血小板分离制备的富血小板血浆(platelet-rich plasma,PRP)的效率和效果,对PRP质量进行了分析。20例ASAⅡ-Ⅲ级择期心脏手术患者在麻醉诱导后进行全血采集和血小板分离。分别测定分离前(T1)的全血,分离后(T2)的PRP和回输前(T3)的PRP中的血小板数(Plt)、血小板平均体积(MPV)、血小板分布宽度(PDW)、血浆内pH、血浆乳酸(LA)浓度和乳酸脱氢酶(LDH)浓度、细菌培养结果、血小板CD62p和PAC-1阳性率以及ADP激活后的CD62p和PAC-1阳性率。结果表明:与全血相比,分离后的PRP中的血小板计数为(783±184)×109/L,MPV、PDW和pH值显著降低(P<0.01),LA、LDH浓度及CD62p和PAC-1阳性率无明显变化;回输前PRP血小板计数为(765±167)×109/L,MPV、PDW和pH值与T1相比显著降低(P<0.01),而LDH浓度、CD62p和PAC-1阳性率与T1和T2比较显著增高(P<0.05或P<0.01);ADP激活后的CD62p和PAC-1阳性率各阶段无明显差异。结论:本研究所采取的方法可在术前高效分离心脏手术患者的血小板,而且不引起血小板活化;PRP在术中振荡保存后有部分血小板出现活化,但血小板整体活化功能无明显改变。 展开更多
关键词 富血小板血浆 心脏手术 CIMi2p PAC-1
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流式细胞术联合测定保存血小板表达的磷脂酰丝氨酸和CD62p 被引量：13
11
作者 欧阳锡林 刘景汉 +4 位作者 骆群 石群 韩玮 李锡金 Dayong Gao 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2002年第1期66-69,共4页
人类血小板通过不同的技术进行离体保存后 ,其特性改变差异较大。建立适用于各种保存血小板特性分析的流式细胞术 (FCM)对保存血小板的质量监测和新保存方法研究有重要意义。本研究通过对FCM分析方法主要条件的优化评估 ,建立了联合测... 人类血小板通过不同的技术进行离体保存后 ,其特性改变差异较大。建立适用于各种保存血小板特性分析的流式细胞术 (FCM)对保存血小板的质量监测和新保存方法研究有重要意义。本研究通过对FCM分析方法主要条件的优化评估 ,建立了联合测定血小板膜表面包括磷脂酰丝氨酸在内的多参数FCM定量分析方法。在标本制作中 ,血小板不需要洗涤即可直接进行标记 ,减少了血小板离心洗涤过程中的激活。除了FCM常用的同型对照外 ,文中还将新鲜富含血小板血浆 (FPRP)、凝血酶激活FPRP和液氮处理FPRP作为血小板标准阴性、阳性对照 ,直接应用于FCM分析 ,且效果良好。该方法中Gly Pro Arg Pro乙酸盐 (GPRP)的选择应用 ,既防止了血小板聚集和纤维蛋白的形成 ,同时可稳定血小板 ,减少制备过程中人为激活 ,克服了在血小板、Ca2 + 和血浆共存条件下FCM定量分析血小板的困难 ,尤其是为深低温处理血小板包括PS在内的多参数分析提供了良好的方法基础。研究表明该方法标本处理简单 ,结果分析简便、准确 ,重复性好。作者还通过低温、低渗或激活剂的方法制备了几种膜表面分子标记显著不同的血小板应用于FCM分析 ,不仅证实了所建立的FCM分析方法在各种不同膜表面分子标记的血小板分析中的实用性 ,又表明了文中制备的这 4种不同膜表面分? 展开更多
关键词 流式细胞术 磷脂酰丝氨酸 CD62P 血小板保存
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优化流式细胞术测定保存血小板CD62p表达 被引量：15
12
作者 欧阳锡林 刘景汉 +1 位作者 石群 高大勇 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2002年第5期462-465,共4页
CD62p阳性率是保存血小板质量监测的重要指标之一。为在静脉全血内血小板CD62 p测定方法的基础上优化建立流式细胞术 (FCM)测定保存血小板表达CD62p的方法 ,在血小板检测标本内加入 0 .1mmol/L潘生丁稳定血小板 ;对TBS溶液进行了改良 ,... CD62p阳性率是保存血小板质量监测的重要指标之一。为在静脉全血内血小板CD62 p测定方法的基础上优化建立流式细胞术 (FCM)测定保存血小板表达CD62p的方法 ,在血小板检测标本内加入 0 .1mmol/L潘生丁稳定血小板 ;对TBS溶液进行了改良 ,添加了 1 .1mmol/L的EDTA和 1 0 0 μmol/L潘生丁 ,用以代替PBS ;采用新鲜富含血小板血浆 (FPRP)制备的阴、阳性对照 ;进行方法学评价。结果表明 :加入 0 .1mmol/L潘生丁和 1 .1mmol/L的EDTA可以有效防止实验过程中的血小板人为激活 ;采用新鲜富含血小板血浆 (FPRP)制备的阴、阳性对照既可优化FCM分析方法 ,还可用于检验所购荧光抗体的质量 ,保证实验结果的有效性。采用泛血小板特异性标志物CD61可灵敏特异地识别血小板 ,提高了实验抗干扰能力。制备保存血小板时采用的是专用大号采血针 ,抽血流畅 ,对血小板CD62p表达测定人为影响很小 ,明显优于用注射器采集患者静脉全血的做法。CD62 p测定灵敏度可达 1 % ,制备的标本可稳定 48小时。结论 :利用该流式细胞术可以灵敏而特异地测定保存血小板的CD62P表达率 ;该方法简便易行 ,提高了结果的准确性 。 展开更多
关键词 流式细胞术 血小板保存 CD62p阳性率 质量监测 测定方法
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低温保存的血小板胞内冰晶形成温度测定 被引量：19
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作者 刘景汉 欧阳锡林 +1 位作者 吕留彩 高大勇 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2002年第6期574-576,共3页
血小板胞内冰晶形成 (IIF)的温度是指导血小板低温保存最重要的物理参数之一。本研究通过生物学和物理学的两种方法同时测定血小板IIF温度范围。在分步降温法中 ,每降 5℃取出血小板样本 ,测定 37℃直接复温(T37℃ )和经液氮处理后再 3... 血小板胞内冰晶形成 (IIF)的温度是指导血小板低温保存最重要的物理参数之一。本研究通过生物学和物理学的两种方法同时测定血小板IIF温度范围。在分步降温法中 ,每降 5℃取出血小板样本 ,测定 37℃直接复温(T37℃ )和经液氮处理后再 37℃复温 (LN)两种方法处理的血小板样本磷脂酰丝氨酸 (PS) ,血浆乳酸脱氢酶 (LDH)和血小板聚集功能的变化。同时利用差式扫描量热计 (DSC)记录加和不加 5 %DMSO的血小板在降温过程中的放热峰。结果表明 ,PS ,LDH和血小板聚集功能在 - 35℃左右不再发生变化。DSC测定结果表明 ,代表血小板IIF的第二个小放热峰在 - 35℃左右。结论 :血小板IIF温度在 - 30℃至 - 4 0℃之间 (- 35℃左右 )。 展开更多
关键词 低温保存 血小板胞内冰晶形成 温度 测定
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冷冻干燥保存血小板的实验研究 被引量：10
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作者 刘景汉 周俊 +3 位作者 王冬梅 欧阳锡林 邢颜超 卢发强 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2007年第5期1098-1101,共4页
本研究探讨冷冻干燥保存血小板的方法,以获得可长期冻干保存的血小板制品,使之能在常温条件下保存、占用空间小、重量轻、便于长距离运输,能够满足突发事件和战伤救治的需要。在冷冻干燥保存过程中添加血小板可逆性激活抑制剂、DMSO和... 本研究探讨冷冻干燥保存血小板的方法,以获得可长期冻干保存的血小板制品,使之能在常温条件下保存、占用空间小、重量轻、便于长距离运输,能够满足突发事件和战伤救治的需要。在冷冻干燥保存过程中添加血小板可逆性激活抑制剂、DMSO和海藻糖等低温保护剂,进行预处理、冷冻、一级干燥、二级干燥,再水化,并同时测定血小板回收率,凝血酶聚集反应,促凝血功能,CD62p表达率和PAC-1表达率等。结果表明:血小板回收率为56.29%,其对凝血酶的聚集反应与对照组无明显差异,对ADP和丙基没食子酸诱导的聚集反应较对照组分别降低49.34%和26.25%,促凝血功能与对照组比较也无统计学差异;冻干血小板CD62p表达率为42.36%,PAC-1表达率为2.12%,凝血酶激活后CD62p再表达率为50.88%,PAC-1再表达率为54.55%。结论:添加血小板可逆性激活抑制剂,海藻糖和DMSO后的冻干血小板,其聚集活性和促凝血功能与新鲜血小板无明显差异,血小板可逆性激活抑制剂降低了冻干血小板的CD62p表达,增强了冻干血小板的生存能力,因而延长了其生存时间,因此可以该冻干方法为基础进一步提高冻干保存血小板的效率。 展开更多
关键词 血小板 冷冻干燥 可逆性激活抑制剂 海藻糖 DMSO
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磷酯酶C对家兔血小板聚集和超微结构的影响 被引量：11
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作者 宋建华 陈明锴 +2 位作者 王常高 孙松柏 陈涛 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期146-149,共4页
目的　应用电镜研究磷酯酶C(phospholipaseC ,PLC)对家兔血小板聚集和超微结构的影响 ,以探讨用药后PLC抗血小板聚集作用的机制。方法　家兔颈动脉插管取血 ,制备PRP ,将其分为 4组 :①空白对照组 ;②生理盐水组 ;③ 0 5UPLC组 ;④ 2 ... 目的　应用电镜研究磷酯酶C(phospholipaseC ,PLC)对家兔血小板聚集和超微结构的影响 ,以探讨用药后PLC抗血小板聚集作用的机制。方法　家兔颈动脉插管取血 ,制备PRP ,将其分为 4组 :①空白对照组 ;②生理盐水组 ;③ 0 5UPLC组 ;④ 2 5UPLC组。 2～ 4组分别用ADP诱导聚集 ,测出其聚集抑制率 ,各组分别制成超薄切片样品进行电镜观察、摄片。结果　 0 5、2 5UPLC明显抑制血小板聚集反应 ,聚集抑制率分别为 86 0 3 %± 12 6%和 82 47%±5 49% ;0 5UPLC抑制血小板形成伪足 ,α颗粒和致密颗粒较多 ,OCS管腔较小 ,其超微结构较生理盐水组变化小 ;2 5UPLC处理血小板的形态结构和超微结构与空白对照组无差异 ,血小板呈圆形或椭圆形 ,边缘光滑 ,无伪足样突起 ,α颗粒、致密颗粒、OCS等正常分布于胞质中。结论　PLC明显抑制ADP诱导的血小板聚集反应及其超微结构的改变 。 展开更多
关键词 磷酯酶C 血小板 超微结构 抗血小板聚集作用
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TEG技术在血小板保存过程中功能评价的应用研究 被引量：12
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作者 于洋 林子林 +9 位作者 冯倩 潘纪春 张婷 孙桂香 张小娟 马春娅 葛国峰 汪德清 骆群 田亚平 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2008年第4期926-929,共4页
本研究旨在通过血栓弹力图(thrombelastography,TEG)技术探讨血小板保存过程中功能的变化。随机选择各项指标均符合国家标准的单供者机采血小板12个单位并在(22±2)℃条件下振荡保存。分别在保存1、2、3、4、5天检测血栓弹力图参数... 本研究旨在通过血栓弹力图(thrombelastography,TEG)技术探讨血小板保存过程中功能的变化。随机选择各项指标均符合国家标准的单供者机采血小板12个单位并在(22±2)℃条件下振荡保存。分别在保存1、2、3、4、5天检测血栓弹力图参数,包括反应时间(R)、凝血时间(K)、α角(ANG)和最大振幅(MA),同时检测血小板计数、平均血小板体积、低渗休克反应(HSR)水平、CD62p阳性率及凝血酶激活CD62p再表达率的变化,综合评价血小板保存过程中体外功能的变化情况。结果显示:平均血小板体积随保存时间延长而轻度增大,但无统计学差异(p>0.05);血小板膜表面CD62p表达率随保存时间延长而显著升高(p<0.01);凝血酶激活后CD62p再表达率随保存时间的延长而显著下降(p<0.01);血小板低渗休克反应水平在1-5天无明显变化(p>0.05);R值随保存时间延长而明显延长(p<0.01),K值无明显变化(p>0.05),α角虽呈轻度下降趋势,但无显著差异(p>0.05);MA值在保存1-4天无显著变化,保存5天时仅有轻度下降(p<0.05)。结论:虽然血小板随保存时间延长激活率明显升高,但反映血小板综合凝血功能的最大振幅(MA值)和HSR水平在整个保存期内并无显著变化,说明保存期末的血小板仍然具有良好的止血功能;血栓弹力图参数MA值可以作为一项重要指标用于血小板保存过程中的功能评价。 展开更多
关键词 血栓弹力图 血小板保存 低渗休克反应 CD62P
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细菌筛检在预防和控制血小板细菌污染方面的有效性 被引量：12
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作者 林俊杰 徐忠 +6 位作者 陈敏 邱颖婕 张晰 孔祥荣 周筱嫣 马庆 钱开诚 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2008年第1期189-191,共3页
本研究探讨用血小板细菌筛检及24小时锁定的方法预防和控制血小板细菌污染的有效性。用BacT/A-LERT细菌培养仪对保存24小时后(22℃振荡保存)的单采血小板(机器采集的血小板)进行细菌筛检。在无菌条件下抽取5袋样品,并合并成1袋后分别接... 本研究探讨用血小板细菌筛检及24小时锁定的方法预防和控制血小板细菌污染的有效性。用BacT/A-LERT细菌培养仪对保存24小时后(22℃振荡保存)的单采血小板(机器采集的血小板)进行细菌筛检。在无菌条件下抽取5袋样品,并合并成1袋后分别接种于需氧培养液和厌氧培养液中,同时将被抽检的血小板进行锁定。接种后的培养液置培养箱中培养24小时后,如结果为阴性,则该血小板可放行。如出现阳性,对阳性结果进行菌种鉴定,并取留样样品进行复试。结果表明:8017袋单采血小板中,初筛为阳性的16袋(0.2%),复筛确认阳性的4袋(0.05%);进一步菌种分析显示3袋为金黄色葡萄球菌,1袋为耳状葡萄球菌。结论:血小板细菌筛检、24小时锁定作为血小板常规检测项目是非常必要的,它对于预防和控制血小板细菌污染是有效而且适宜的。 展开更多
关键词 血小板 细菌筛检 24小时锁定 血小板细菌污染
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人血小板冻干前负载海藻糖技术的研究 被引量：9
18
作者 卢发强 刘景汉 +3 位作者 欧阳锡林 李锡金 周俊 庄远 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2006年第1期156-161,共6页
为研究人血小板冻干前负载海藻糖技术与方法,筛选出最佳负载海藻糖实验条件并进一步研究血小板在温度37℃条件下、负载海藻糖4小时后的平均体积、体外激活程度和聚集反应性的变化,绘制血小板胞内海藻糖负载效率及浓度随温度、时间、胞... 为研究人血小板冻干前负载海藻糖技术与方法,筛选出最佳负载海藻糖实验条件并进一步研究血小板在温度37℃条件下、负载海藻糖4小时后的平均体积、体外激活程度和聚集反应性的变化,绘制血小板胞内海藻糖负载效率及浓度随温度、时间、胞外海藻糖浓度变化曲线,筛选合适的负载条件,分别以凝血酶、ADP、胶原、瑞斯托霉素4种物质作为血小板激活诱导剂,用血小板聚集仪分别检测血小板负载海藻糖前后的聚集反应性,用流式细胞仪检测分析血小板负载海藻糖前后其膜表面糖蛋白分子CD62p、PAC-1的表达率,加可逆性激活抑制剂PGE-1、腺苷后血小板激活被抑制的程度。结果表明:海藻糖负载效率与孵育时间(2小时后)、温度(30-40℃)呈良好线性关系,在37℃条件下经4小时孵育后负载效率可达60%,载入到胞内海藻糖浓度随胞外海藻糖浓度(<50mmol/L)的升高而递增;同负载前相比较,血小板平均体积(MPV)、血小板对4种激活诱导剂的最大聚集率均无显著性差别(P>0.01),经4小时负载海藻糖后血小板膜表面CD62p表达率升高,但联合添加可逆性激活抑制剂PGE-1、腺苷后CD62p表达率显著下降。结论:37℃、4小时、胞外海藻糖浓度小于50mmol/L为合适负载条件,添加可逆性血小板激活抑制剂后,冻干前负载海藻糖过程对血小板的体外激活和聚集活性没有显著影响。 展开更多
关键词 海藻糖 冻干血小板 血小板激活 血小板聚集 可逆性激活抑制剂
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不同状态下血栓弹力图与凝血功能、血小板数关系的探讨 被引量：50
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作者 文贤慧 张军华 桂嵘 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期1793-1799,共7页
目的:探讨机体在不同凝血状态下(低凝﹑高凝和正常凝血)血栓弹力图实验(thromboelastography,TEG)与凝血4项﹑血小板数值之间的相关性和一致性,评价2种方法在低凝﹑高凝和正常凝血状态下对于临床应用的参考价值。方法:回顾性分析中南大... 目的:探讨机体在不同凝血状态下(低凝﹑高凝和正常凝血)血栓弹力图实验(thromboelastography,TEG)与凝血4项﹑血小板数值之间的相关性和一致性,评价2种方法在低凝﹑高凝和正常凝血状态下对于临床应用的参考价值。方法:回顾性分析中南大学湘雅三医院2015年1月至2017年12月409例进行TEG、凝血4项和血常规检测的病人临床资料,将TEG的主要参数凝血因子激活时间(R)、血块形成速率参数(K)、弹力图最大切角(Angle)和弹力图最大振幅(MA)与凝血常规检测中的凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、纤维蛋白原(Fib)、凝血酶时间(TT)以及血小板计数进行不同凝血情况下的Pearson相关性分析,并进行Kappa一致性分析和配对卡方检验,同时对2种方法指导的临床用血情况进行比较。结果:R值与PT呈正相关,在低凝﹑高凝和正常凝血状态下相关系数分别为r=0. 376﹑r=0. 316和r=0. 276(P <0. 05); Kruskal-Wallis检验两两比较,相关系数两两比较无差别(P> 0. 05);一致性分别为0. 208﹑0. 227和0. 131。R值和APTT呈正相关,在低凝﹑高凝和正常凝血状态下相关系数分别为r=0. 418﹑r=0. 258和r=0. 458(P <0. 05); Kruskal-Wallis检验两两比较,低凝和正常凝血相关系数无差别(P> 0. 05),其他两两比较有差别(P <0. 05);一致性分别为0. 338﹑0. 291和0. 161,一致性总体有差异(P <0. 05)。K值与Fib呈负相关,在低凝﹑高凝和正常凝血状态下分别为r=-0. 611﹑r=-0. 411和r=-0. 311(P <0. 05); Kruskal-Wallis检验两两比较均有差别(P <0. 05);一致性分别为0. 432﹑0. 481和0. 323,一致性总体有差异(P <0. 05)。K值与Plt呈负相关,在3种凝血状态下相关系数分析为r=-0. 278﹑r=-0. 238和r=-0. 278; Kruskal-Wallis检验两两比较均无差别(P> 0. 05);一致性分别为0. 401﹑0. 312和0. 279,一致性总体有差异(P <0. 05)。Angle角与Fib显正相关,相关系数在低凝﹑高凝和正常凝血状态下分别为r=0. 638﹑r=0. 538和r=0. 438(P <0. 05),Kruskal-Wallis检验两两比较均有差别(P <0. 05);一致性分别为0. 323﹑0. 357和0. 288,一致性总体有差异(P <0. 05)。MA与Fib呈正相关,在低凝﹑高凝和正常凝血状态下分别为r=0. 351﹑r=0. 381和r=0. 211 (P <0. 05),Kruskal-Wallis检验两两比较,低凝和高凝血相关系数无差别(P> 0. 05),其他两两比较有差别(P <0. 05);一致性分别为0. 510﹑0. 467和0. 427,一致性总体有差异(P <0. 05)。MA与Plt数呈正相关,在低凝﹑高凝和正常凝血状态下相关系数分别为r=0. 478﹑r=0. 515和r=0. 378; Kruskal-Wallis检验两两比较均有差别(P <0. 05);一致性分别为0. 581﹑0. 461和0. 350,一致性总体有差异(P <0. 05)。结论:TEG与凝血试验及Plt检测结果相关;在不同情况下,常规凝血4项﹑Plt数与TEG的相关性和一致性有差别。因此建议在临床实际工作中对可能存在病理状态的高凝和低凝的患者进行TEG检测,这样能动态观测体内凝血情况,指导临床合理用药和输血,降低病人栓塞和输血风险。 展开更多
关键词 血栓弹力图 凝血4项 凝血功能
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定期多次单采血小板捐献者血清铁蛋白状况分析 被引量：14
20
作者 马春会 郭如华 +7 位作者 伍伟健 严军雄 余晋林 朱业华 何其通 罗益红 黄露 叶瑞云 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2011年第2期508-510,共3页
本研究分析定期多次捐献单采血小板对血清铁的影响。随机抽取本站男性首次单采血小板捐献者24例和定期多次单采血小板捐献者69例,用ELISA法检测其血清铁蛋白(SF)含量。结果表明,首次单采血小板捐献者和定期多次单采血小板捐献者的SF含... 本研究分析定期多次捐献单采血小板对血清铁的影响。随机抽取本站男性首次单采血小板捐献者24例和定期多次单采血小板捐献者69例,用ELISA法检测其血清铁蛋白(SF)含量。结果表明,首次单采血小板捐献者和定期多次单采血小板捐献者的SF含量分别为91.08±23.38μg/L和57.16±35.48μg/L,但均在正常值范围内,两者之间的差异具有统计学意义(p<0.05)。SF含量随血小板捐献频率的增加而下降,但各捐献频率组之间的差异均不具有统计学意义(p>0.05)。随血小板捐献次数的增加,SF含量呈现波动性的变化。结论:定期多次捐献单采血小板可导致SF减少。 展开更多
关键词 单采血小板 血小板捐献者 血清铁蛋白
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