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海藻酸钠水凝胶包封卵母细胞结晶性质研究 被引量：1
1
作者 林春燕 张宇琪 周新丽 《制冷学报》 北大核心 2025年第1期157-166,共10页
基于海藻酸钠水凝胶的微囊化技术可用于优化冷冻和复温程序,降低细胞和组织的冷冻损伤。观察了卵母细胞在不同体积分数(0.5%、1.0%、1.5%、2.0%)海藻酸钠水凝胶中的形态,确定其封装的安全浓度;利用低温显微镜系统研究了不同体积分数海... 基于海藻酸钠水凝胶的微囊化技术可用于优化冷冻和复温程序,降低细胞和组织的冷冻损伤。观察了卵母细胞在不同体积分数(0.5%、1.0%、1.5%、2.0%)海藻酸钠水凝胶中的形态,确定其封装的安全浓度;利用低温显微镜系统研究了不同体积分数海藻酸钠水凝胶的结晶温度及结晶行为,并对比卵母细胞在基础溶液、保护剂溶液中降/复温时形态和结晶情况;对比溶剂置换型和物理混合型制备的海藻酸钠抗冻水凝胶包封卵母细胞的冻存效果。结果表明:卵母细胞在0.5%和1.0%体积分数的海藻酸钠凝胶中整体形态与体积维持较好;1.0%体积分数海藻酸钠组和12.5%DMSO+12.5%EG+0.5 mol/L海藻糖的保护剂溶液组中的卵母细胞在降温过程中均未产生胞内冰;相比物理混合型,溶剂置换型组水凝胶中的卵母细胞在降温过程中无胞内冰产生,细胞复温后仍保持正常形态。 展开更多
关键词 海藻酸钠 卵母细胞 微囊化 结晶温度
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人脐带间充质干细胞新型冻存液实验研究
2
作者 张鹏 刘宝林 《制冷学报》 北大核心 2025年第3期158-166,共9页
细胞库普遍使用的二甲基亚砜(Me_(2)SO)对细胞和人体均有较强的副作用,因此亟需一种方案来替代Me_(2)SO并具有与Me_(2)SO产品相当的效果。实验以人脐带间充质干细胞为研究材料,首先通过差示扫描量热仪和低温显微系统测定了海藻糖、葡萄... 细胞库普遍使用的二甲基亚砜(Me_(2)SO)对细胞和人体均有较强的副作用,因此亟需一种方案来替代Me_(2)SO并具有与Me_(2)SO产品相当的效果。实验以人脐带间充质干细胞为研究材料,首先通过差示扫描量热仪和低温显微系统测定了海藻糖、葡萄糖和L-脯氨酸的热物性及其对冰晶生长的调控,在此基础上通过冻存实验确定了冻存液中各组分的浓度,并验证了冻存后细胞的活性和功能。结果显示,使用新型干细胞冻存液(1.25 mol/L乙二醇+10 g/L乳清蛋白+0.1 mol/L海藻糖+Normosol-R注射液)冻存后的细胞存活率(92.42%±0.28%)和回收率(87.80%±4.22%)与传统冻存液(体积分数为10%Me_(2)SO)无显著性差异。冻存细胞培养3 d后细胞数量为(12.42±0.60)×10^(6)个(增殖倍数为4.97),且细胞表型与新鲜细胞无显著性差异。新型干细胞冻存液解决了细胞低温保存中的“Me_(2)SO-free”问题,具有潜在的应用前景。 展开更多
关键词 低温保存 细胞治疗 干细胞 无Me_(2)SO 细胞冻存液
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微载体-肝细胞复合体冻存损伤机制及优化策略
3
作者 郝彬江 庾曾颖 刘宝林 《制冷学报》 北大核心 2025年第4期156-162,共7页
为提高细胞的存活率和贴壁率,优化人工肝支持系统中微载体-肝细胞复合体的冻存方案,通过实验评估了不同冷冻保护剂体积分数、加载温度和方式对细胞冻存效果的影响。研究发现,使用体积分数为5%的二甲亚砜(Me 2SO)在4℃预冷条件下,通过两... 为提高细胞的存活率和贴壁率,优化人工肝支持系统中微载体-肝细胞复合体的冻存方案,通过实验评估了不同冷冻保护剂体积分数、加载温度和方式对细胞冻存效果的影响。研究发现,使用体积分数为5%的二甲亚砜(Me 2SO)在4℃预冷条件下,通过两步加载法,能显著减少细胞毒性和渗透损伤,保持较高的细胞存活率和贴壁率。此外,还研究了降温速率和胞内冰形成对细胞冻存效果的影响,在-6℃植冰可以减轻胞内冰的损伤,提高细胞复苏后的贴壁率。在1℃/min降温速率下,体积分数为10%的Me 2SO尽管存在较高的毒性和渗透损伤,但由于热膨胀差异最小,冻存效果最佳。研究结果可为人工肝支持系统中微载体-肝细胞复合体的冻存提供技术支撑。 展开更多
关键词 低温保存 肝细胞-微载体复合体 冷冻保护剂 热膨胀损伤
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诱发成核对卵巢组织慢速冷冻的影响
4
作者 叶娜 徐强 +2 位作者 刘晨曦 曹裕坤 周新丽 《制冷学报》 北大核心 2025年第3期151-157,共7页
卵巢组织冻存是女性生育力保存的重要方法,慢速冷冻卵巢组织卵泡存活率较低,自体移植效率低。通过诱发成核对卵巢组织降温程序进行优化,分析了成核温度和成核后降温速率对卵巢组织冷冻保存效果的影响。将程序降温仪与超声波诱发成核设... 卵巢组织冻存是女性生育力保存的重要方法,慢速冷冻卵巢组织卵泡存活率较低,自体移植效率低。通过诱发成核对卵巢组织降温程序进行优化,分析了成核温度和成核后降温速率对卵巢组织冷冻保存效果的影响。将程序降温仪与超声波诱发成核设备结合,实现超声波诱发成核并优化了超声波强度,对复温后的卵巢存活率和组织学形态进行评估。结果表明:引入诱发成核的降温程序对卵巢组织损伤减小,当在-11℃诱发成核,成核后降温速率为1℃/min时,卵泡存活率达88.02%。超声波成核设备可对样品进行无接触式诱发成核,降低了污染风险,提高了成核的成功率,冻存卵巢组织卵泡存活率达88.38%。通过程序的优化以及设备的改进提高了卵巢组织冷冻保存效果,降低了冷冻保存过程中引入污染的风险,为临床上卵巢组织慢速冷冻保存提供了新的方法。 展开更多
关键词 卵巢组织 冷冻保存 慢速冷冻 超声植冰
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节流喷口可调节式冷冻消融针的设计及模拟研究
5
作者 杨迟 宋涛 +1 位作者 常兆华 刘宝林 《制冷学报》 北大核心 2025年第4期149-155,170,共8页
为有效提高在肿瘤冷冻消融治疗中冷冻过程的降温速率,设计了新型节流喷口可调节式冷冻消融针,针杆外壁温度降至-80℃仅需4 s,而传统节流喷口固定式冷冻消融针则需要73 s。三维传热模型仿真结果表明:120 s内冷冻消融针周围温度急剧降至-... 为有效提高在肿瘤冷冻消融治疗中冷冻过程的降温速率,设计了新型节流喷口可调节式冷冻消融针,针杆外壁温度降至-80℃仅需4 s,而传统节流喷口固定式冷冻消融针则需要73 s。三维传热模型仿真结果表明:120 s内冷冻消融针周围温度急剧降至-150℃,瞬时最快降温速率为1500~1575℃/min,达到快速降温的目的;-20℃等温线在60~120 s内变化范围较小(5 mm增至6.5 mm),120 s后温度变化趋于平缓,组织损伤范围增至9 mm,表明组织损伤区域范围明显增加。综合研究表明:节流喷口可调节式冷冻消融针具有更高的降温速率和更大的有效消融范围,对于冷冻消融临床治疗具有重要意义。 展开更多
关键词 肿瘤 冷冻消融 降温速率 生物传热模型
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低温保存血小板临床应用效应研究 被引量：25
6
作者 刘景汉 王青梅 +5 位作者 李锡金 石群 骆群 韩玮 欧阳锡林 高大勇 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期222-223,共2页
对 15 6 0例输注低温保存血小板的临床患者进行了研究。其中急性白血病 5 36例 ;再生障碍性贫血2 85例 ;化疗和放疗及其他原因所致的血小板减少 2 5 3例 ;围手术期患者 438例 ;DIC、肝硬化食管静脉曲张破裂出血 48例。输注的低温保存血... 对 15 6 0例输注低温保存血小板的临床患者进行了研究。其中急性白血病 5 36例 ;再生障碍性贫血2 85例 ;化疗和放疗及其他原因所致的血小板减少 2 5 3例 ;围手术期患者 438例 ;DIC、肝硬化食管静脉曲张破裂出血 48例。输注的低温保存血小板保存时间为 1周～ 8个月居多 ,保存时间最长 13个月。输注的血小板基本上未经洗涤。结果显示 ,输注低温保存的血小板具有升高血小板作用和显著的止血效果 ,且无明显副作用。低温保存血小板在临床应用中 ,从数量保证、供给形式和及时有效等方面都是其他方法获得的血小板所不能比拟的。 展开更多
关键词 血液保存 成份输血 低温保藏
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皮肤低温保存的方法和工艺研究 被引量：14
7
作者 华泽钊 常兆华 +5 位作者 忻雅雯 邬申义 冯世杰 李映月 孔令雯 史济湘 《中国生物医学工程学报》 CAS CSCD 北大核心 1991年第2期118-126,共9页
本文研究了抗冻剂的种类、浓度、预处理的方法、预处理的时间等因素对皮肤低温保存效果的影响;研究了可控制皮肤最佳降温速率的几种实用的简便方法;提供了能在低温条件下安全使用的盛皮肤塑料袋的材料和制作工艺。为建立皮肤的低温保存... 本文研究了抗冻剂的种类、浓度、预处理的方法、预处理的时间等因素对皮肤低温保存效果的影响;研究了可控制皮肤最佳降温速率的几种实用的简便方法;提供了能在低温条件下安全使用的盛皮肤塑料袋的材料和制作工艺。为建立皮肤的低温保存库,本文完成了较完整的方法和工艺研究。 展开更多
关键词 皮肤 低温保存 方法 工艺
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保护液的玻璃化状态对红细胞冷冻干燥保存后回收率的影响 被引量：15
8
作者 权国波 韩颖 +3 位作者 刘秀珍 刘安 靳鹏 曹伟 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2003年第3期308-311,共4页
为了研究保护液的玻璃化状态对红细胞冷冻干燥 (简称冻干 )保存后回收率的影响 ,采用含有 7%二甲亚砜 (v/v)和 2 0 %、30 %、4 0 %或 5 0 %聚乙烯吡咯烷酮 (PVP) (w/v)的缓冲液作为保护液进行保护液的玻璃化测试和红细胞的冻干保存实验... 为了研究保护液的玻璃化状态对红细胞冷冻干燥 (简称冻干 )保存后回收率的影响 ,采用含有 7%二甲亚砜 (v/v)和 2 0 %、30 %、4 0 %或 5 0 %聚乙烯吡咯烷酮 (PVP) (w/v)的缓冲液作为保护液进行保护液的玻璃化测试和红细胞的冻干保存实验。首先检测溶液的玻璃化状态 ,如果冷冻和解冻过程中任一过程出现白色冰晶即为非玻璃化溶液 ;再将浓集红细胞和不同的保护液按比例混匀 ,预冻后移入冻干机内进行冻干处理 ;冻干完毕后 ,快速水化样品 ,测定红细胞回收率、血红蛋白回收率和上清游离血红蛋白浓度 ,然后对冻干后红细胞形态进行电镜观察。结果表明 :2 0 %PVP +7%DMSO和 30 %PVP +7%DMSO在冷冻和解冻过程中都出现白色冰晶 ;4 0 %PVP +7%DMSO在冷冻过程中无冰晶出现 ,但在解冻过程中出现冰晶 ;而 5 0 %PVP +7%DMSO在冷冻和解冻过程中均无冰晶出现。冻干红细胞再水化后 ,4 0 %PVP +7%DMSO的细胞回收率和血红蛋白回收率分别为 (81.36±14 94 ) %和 (77.5 4± 12 .86 ) % ,显著高于其它 3组 (P <0 .0 1) ;另外 4 0 %PVP +7%DMSO的上清游离血红蛋白浓度也显著低于其它 3组 (P <0 .0 1)。研究表明 :随着溶液中PVP浓度的升高 ,溶液的玻璃化程度也随之增加 ,同时冻干 再水化后红细胞的各项指标也随之改善 。 展开更多
关键词 红细胞 玻璃化 脱玻璃化 冷冻干燥保存
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深低温保存新鲜富含血小板血浆质量分析 被引量：14
9
作者 欧阳锡林 刘景汉 +5 位作者 潘纪春 李锡金 马曙轩 王海宝 赖风雷 高大勇 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2004年第6期841-844,共4页
为了评价批量制备的深低温保存富含血小板血浆 (cryo FPRP)的效率和效果 ,在优化建立的无偿献血者血小板的批量分离和制备cryo FPRP过程中测定了ACD抗凝的 2 0 0ml全血、FPRP、含 5 %DMSO的FPRP(DM SO PRP)和 - 80℃冰箱然冰冻保存后复... 为了评价批量制备的深低温保存富含血小板血浆 (cryo FPRP)的效率和效果 ,在优化建立的无偿献血者血小板的批量分离和制备cryo FPRP过程中测定了ACD抗凝的 2 0 0ml全血、FPRP、含 5 %DMSO的FPRP(DM SO PRP)和 - 80℃冰箱然冰冻保存后复温的FPRP(Cryo FPRP)的血小板计数 (Plt)、血小板平均体积 (MPV)、血小板分布宽度 (PDW )、血浆内 pH、血浆乳酸 (LA)浓度和乳酸脱氢酶 (LDH)浓度、细菌培养、血小板CD62p阳性率、PAC 1阳性率及抗GPIb Ⅸ Ⅴ荧光强度 ,也测定了FPRP和cryo FPRP的促凝血活性。结果表明 :①血小板的总平均得率为 70 % ;FPRP中残余的红细胞≤ 1× 10 9/袋 ;白细胞≤ 1× 10 7/袋。②血浆pH、LA浓度和PAC 1阳性率在整个制备和保存过程中没有明显变化。③血浆内LDH、血小板CD62 p阳性率和血小板抗GPIb Ⅸ Ⅴ荧光强度在血小板冰冻保存后出现明显升高。④与FPRP比较 ,cryo FPRP诱导的血浆凝固时间明显缩短。结论 :①本研究选择的离心分离制备FPRP条件可高效分离无偿献血者的血小板 ,同时不会导致血小板激活率增加。②深低温保存无偿献血者的新鲜富含血小板血浆可有效防止代谢产物的积累和pH下降 ,并且可以高效预防血小板GPⅡb/Ⅲa的激活。③冰冻保存后部分血小板胞膜受到明显损害。④血小板胞? 展开更多
关键词 低温保存 血小板 FPRP 质量分析
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机采血小板P-选择素在常规和冰冻保存条件下的表达研究 被引量：12
10
作者 赵树铭 成晓玲 +5 位作者 李书武 刁荣华 刘璐 张红 陈寒梅 陈敏 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期525-527,共3页
目的　探讨常规和冰冻保存条件下对血小板功能的影响。方法　 10单位机采血小板分别用常规保存袋和低温保存袋贮存 ,前者贮存 5d ,每天留取标本 ,后者于 -85℃贮存后 5d复苏留样。分别检测血小板聚集率、血小板计数、pH值和血小板膜糖蛋... 目的　探讨常规和冰冻保存条件下对血小板功能的影响。方法　 10单位机采血小板分别用常规保存袋和低温保存袋贮存 ,前者贮存 5d ,每天留取标本 ,后者于 -85℃贮存后 5d复苏留样。分别检测血小板聚集率、血小板计数、pH值和血小板膜糖蛋白P 选择素的变化。结果　常规保存条件下 ,5d内血小板聚集率、pH、血小板计数均无显著性变化 ,血小板P 选择素在 1d后即明显升高 (从 3 .77± 1.86到 10 .87± 4.75 ,达 3倍 ,P <0 .0 1)。冰冻保存时 ,血小板聚集率、pH、血小板计数无显著性变化 ,P 选择素的表达在冰冻后呈显著升高 (从 4.3 7± 1.82到 16.88± 7.2 3 ,达 4倍 ,P <0 .0 1)。结论　血小板P 选择素在常规和冰冻保存条件下的表达变化提示血小板离体后被活化 。 展开更多
关键词 P-选择素 机采血小板 常规保存 冰冻保存
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自制长征-1号多器官保存液的动物实验和部分临床应用研究 被引量：9
11
作者 郑军华 闵志廉 +7 位作者 李玉莉 朱有华 叶廷军 李建秋 潘铁文 丁国善 王孟龙 陈卫平 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第6期341-345,共5页
目的：研制我国自制的多器官保存液，以满足日益发展的国内器官移植手术的需要。方法：在全面分析国外最先进的多器官保存液ＵＷ液配方的基础上，研制成长征－１号多器官保存液（ＣＺ－１液）。改进有：（１）用低分子右旋糖酐－４０替... 目的：研制我国自制的多器官保存液，以满足日益发展的国内器官移植手术的需要。方法：在全面分析国外最先进的多器官保存液ＵＷ液配方的基础上，研制成长征－１号多器官保存液（ＣＺ－１液）。改进有：（１）用低分子右旋糖酐－４０替代羟乙基淀粉；（２）用蔗糖替代木棉糖；（３）去掉ＵＷ液中添加成分；（４）添加钙离子拮抗剂维拉帕米；（５）使ｐＨ值进一步偏碱性。将ＣＺ－１液用于动物器官（肾、肝、心、肺、胰腺、小肠等）的低温延时保存实验，包括低温延时保存后形态学、生物化学的改变和移植存活率观察，以及部分临床应用研究。结果和结论：ＣＺ－１液对肾、肝、心、胰、小肠等的低温保存效果基本类同于ＵＷ液，部分结果优于ＵＷ液；对肺保存的效果优于Ｅｕｒ－Ｃｏｌｉｎｓ液。临床尸肾经ＣＺ－１液低温保存２４～３１ｈ移植后获得成功。结果证实，ＣＺ－１液不仅增强了保存效果，且大大地降低了成本，国内可自行配制。 展开更多
关键词 器官保存 低温保藏 器官移植 长征-1号
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大规模猪肝细胞低温保存方法的建立 被引量：12
12
作者 周霖 薛毅珑 +2 位作者 田磊 李雁凌 张佐云 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第9期816-818,共3页
目的　建立大规模猪肝细胞的低温保存方法以满足生物型人工肝治疗的需要。方法　用酶法从中国实验用小型猪肝脏分离出猪肝细胞 ;加入本实验室配制的含有 10 %二甲基亚砜 (dimethylsulfoxide,DMSO)的营养液中 ;分别采用两种降温方法使 (1... 目的　建立大规模猪肝细胞的低温保存方法以满足生物型人工肝治疗的需要。方法　用酶法从中国实验用小型猪肝脏分离出猪肝细胞 ;加入本实验室配制的含有 10 %二甲基亚砜 (dimethylsulfoxide,DMSO)的营养液中 ;分别采用两种降温方法使 (12 )× 10 10 猪肝细胞保存在 - 196℃液氮中 ;1个月后复温 ,观察在同一条件下培养不同时间后猪肝细胞形态、存活率和白蛋白、尿素、葡萄糖合成功能及对利多卡因的转化功能。结果　用两种降温方法保存的肝细胞 ,复温后细胞的存活率均较高 (梯度降温组和程控降温组存活率分别较冻存前降低了 4 7%和 8 6 %) ,其中前者肝细胞的尿素、葡萄糖合成功能较后者高。结论　所建立的冻存方法简单易行 ,可保存大量的猪肝细胞。 展开更多
关键词 猪肝细胞 低温保藏 生物型人工肝
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犬脑选择性深低温对全身重要器官生理功能的影响 被引量：7
13
作者 卢洪流 江基尧 +4 位作者 朱诚 杨朋范 包映辉 袁国梁 蔡如珏 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第3期272-274,共3页
目的 :探讨脑选择性降温技术的安全性。 方法 :通过单侧颈总动脉低温灌注法 ,对 10只犬进行了选择性脑部降温。观察了降温过程中生命体征的变化 ,术前及术后血常规、电解质、肝肾功能以及心脏、肝脏酶谱的变化。 结果 :10只犬均实现了... 目的 :探讨脑选择性降温技术的安全性。 方法 :通过单侧颈总动脉低温灌注法 ,对 10只犬进行了选择性脑部降温。观察了降温过程中生命体征的变化 ,术前及术后血常规、电解质、肝肾功能以及心脏、肝脏酶谱的变化。 结果 :10只犬均实现了选择性脑部降温。脑温最低达 (17.8± 1.8)℃ ,直肠温保持在 (32 .5± 2 .0 )℃以上。4只犬于术后 1～ 3d死亡 ,6只长期存活。降温过程中犬的生命体征有明显改变 ,随温度回升而恢复正常。术后血常规、电解质、肝肾功能、酶谱与术前无显著差异。 结论 :采用动脉内低温灌注 ,可选择性快速降低脑温。降温使脑干心血管中枢功能抑制 ,但经开放椎动脉后可迅速纠正。该技术对全身重要器官生理功能无明显损害。 展开更多
关键词 低温灌注 脑深低温 安全性 脑外科手术 犬
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不同保护剂浓度和不同降温速率对脂质体玻璃化转变温度的影响 被引量：13
14
作者 刘占杰 华泽钊 +1 位作者 陶乐仁 刘宝林 《低温工程》 CAS CSCD 北大核心 2000年第6期1-5,共5页
玻璃化转变是动力学的非平衡过程，玻璃化转变温度是和过程有关的参数。测量了在降温速率分别为 ５°Ｃ／ｍｉｎ和 １０°Ｃ／ｍｉｎ、升温速率为 １０°Ｃ／ｍｉｎ条件下，葡萄糖、蔗糖、甘露醇、海藻糖浓度为５％（Ｗ／... 玻璃化转变是动力学的非平衡过程，玻璃化转变温度是和过程有关的参数。测量了在降温速率分别为 ５°Ｃ／ｍｉｎ和 １０°Ｃ／ｍｉｎ、升温速率为 １０°Ｃ／ｍｉｎ条件下，葡萄糖、蔗糖、甘露醇、海藻糖浓度为５％（Ｗ／Ｖ）的脂质体悬浮液的玻璃化转变温度 Ｔｇ＇；在降温速率为 ５°Ｃ／ｍｉｎ、升温速率为 １０°Ｃ／ｍｉｎ条件下，测量了葡萄糖、蔗糖、甘露醇、海藻糖浓度为１５％（Ｗ／Ｖ）的脂质体的Ｔｇ＇；并分析了不同降温速率和不同保护剂浓度对脂质体玻璃化转变温度Ｔｇ＇的影响因素。 展开更多
关键词 玻璃化转变温度 脂质体 保护剂 低温冷冻干燥
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人骨髓间充质干细胞原位冷冻保存方法的改进 被引量：10
15
作者 李秀森 范海涛 +2 位作者 原野 侯春梅 毛宁 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2003年第5期530-533,共4页
本研究的目的是分离纯化、大量扩增人骨髓间充质干细胞 (mesenchymalstemcells,MSC)。在细胞原位冻存后通过鉴定其生物学特性有无变化 ,以探讨这种原位冻存方法的可行性。采用常规方法体外分离培养并扩增骨髓MSC ,将培养扩增的细胞用含 ... 本研究的目的是分离纯化、大量扩增人骨髓间充质干细胞 (mesenchymalstemcells,MSC)。在细胞原位冻存后通过鉴定其生物学特性有无变化 ,以探讨这种原位冻存方法的可行性。采用常规方法体外分离培养并扩增骨髓MSC ,将培养扩增的细胞用含 10 %二甲亚砜、3 0 %胎牛血清、DMEM LG的细胞冻存体系 ,以不同的细胞贴壁密度在细胞培养瓶内原位冻存于 -70℃冰箱内。冻存后第 4,8和 12周在 3 8℃至 40℃的水浴中复苏冻存的贴壁细胞 ,通过细胞周期分析并检测其多向分化功能以鉴定该方法的可行性。结果表明 ,MSC不经消化 ,直接在培养瓶内原位冻存于 -70℃低温冰箱 ,3个月内细胞生物学特性没有明显改变 ,细胞仍具有向成骨、脂肪和成软骨细胞多向分化的能力。结论 :体外培养的骨髓MSC原位贴壁冻存于 -70℃ ,至少在 12周内不影响其生物学功能 。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 原位冷冻保存 冷冻保存
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改良血小板添加液低温液态保存血小板的形态及功能研究 被引量：8
16
作者 王昕 史蓉华 +3 位作者 李静 刘凤君 陈寒梅 赵树铭 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2009年第3期797-801,共5页
本研究探讨使用改良的血小板添加液替代70%自体血浆在低温(10℃)液态条件下对血小板的保存效果。采集6名供者单采血小板,每一名供者单采血小板平均分为3组,A组(常规保存组)加入100%血浆、22℃保存;B组(添加液10℃保存组)加入70%PAS-ⅢM/... 本研究探讨使用改良的血小板添加液替代70%自体血浆在低温(10℃)液态条件下对血小板的保存效果。采集6名供者单采血小板,每一名供者单采血小板平均分为3组,A组(常规保存组)加入100%血浆、22℃保存;B组(添加液10℃保存组)加入70%PAS-ⅢM/30%血浆、10℃保存;C组(冰冻保存组)加入100%血浆和海藻糖、-85℃保存;另设D组(血浆4℃保存组)加入100%血浆、4℃保存,作为扫描电子显微镜对照组。A、B组在第1、5、7、9天取样,C组在20天后复苏取样,分别检测CD62p、HSR、PAgT、LDH的变化。血浆常温组、添加液低温组于保存后第3、9天取样扫描电镜观察,血浆低温组于保存后第3天取样观察,冰冻组在20天后复苏取样观察,同时使用新鲜血小板作为对照。结果表明,保存期内随保存时间延长,A组和B组CD62p表达增加,HSR和最大聚集率降低;A组的LDH释放、CD62p表达、HSR、血小板最大聚集率与B组比较有显著统计学差异(p<0.05)。C组LDH释放明显较其他两组增多,但CD62p表达较少(p<0.05)。A、B组血小板形态保持较好,C组血小板形态保持差。结论:改良的PAS-ⅢM保存液能够替代血浆用于血小板的保存,在低温条件下能够很好地保护血小板的功能,保存效果优于血浆常温保存。 展开更多
关键词 血小板 血小板添加液 低温保存 海藻糖
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人红细胞对糖类摄取的规律性研究 被引量：7
17
作者 权国波 吕翠翠 +3 位作者 刘敏霞 扈文博 王艳 韩颖 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2006年第3期592-596,共5页
人红细胞冰冻干燥保存在临床应用中具有重要意义。一些糖类,特别是海藻糖,能提高一些低等生物或细胞对干燥环境的耐受性,但如何将糖类导入细胞内又是一个挑战。本研究探讨人红细胞对糖类摄取的规律性。于不同温度(4、25和37℃)、不同浓... 人红细胞冰冻干燥保存在临床应用中具有重要意义。一些糖类,特别是海藻糖,能提高一些低等生物或细胞对干燥环境的耐受性,但如何将糖类导入细胞内又是一个挑战。本研究探讨人红细胞对糖类摄取的规律性。于不同温度(4、25和37℃)、不同浓度(0、0.2、0.4、0.6、0.8、1mol/L)及不同培育时间(1、3、5、7、9小时)条件下检测了红细胞对海藻糖和葡萄糖的吸收率及游离血红蛋白量,并测定了红细胞变性指数。结果表明:随着温度的上升和细胞外糖浓度的增加,红细胞的糖吸收率也随之上升,细胞内的海藻糖和葡萄糖浓度分别可以达到30mmol/L和40mmol/L以上。但孵育时间对海藻糖和葡萄糖的吸收率影响不同,随着时间的延长,细胞内海藻糖浓度呈先升高而后降低的趋势,而葡萄糖吸收率则呈稳定上升的趋势。但是糖吸收过程对红细胞的游离血红蛋白和变形性产生不利的影响,尤其是海藻糖,这主要来源于渗透压伤害。结论:红细胞的糖吸收率与孵育温度、外源糖浓度和孵育时间的关系密切,而且在一定条件下的糖吸收效率也较高,但此过程对红细胞有一定的伤害,这可能会影响糖类在红细胞冰冻干燥保存研究中的应用前景。今后的研究工作应集中于如何处理细胞伤害和糖吸收效率的关系。 展开更多
关键词 人红细胞 海藻糖 葡萄糖 冰冻干燥
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纳米颗粒对猪GV期卵母细胞低温保存效果的影响 被引量：6
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作者 李维杰 周新丽 +4 位作者 刘宝林 戴建军 吕福扣 张德福 徐利 《中国生物医学工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期601-605,共5页
纳米低温保存技术很可能是新一代低温保存技术的重要发展方向,但纳米颗粒应用于卵母细胞玻璃化保存的报道较少。本研究将羟基磷灰石(HA)、二氧化硅、三氧化二铝、二氧化钛等4种纳米颗粒添加到低温保护剂中,使用Cryotop法冷冻猪GV期卵母... 纳米低温保存技术很可能是新一代低温保存技术的重要发展方向,但纳米颗粒应用于卵母细胞玻璃化保存的报道较少。本研究将羟基磷灰石(HA)、二氧化硅、三氧化二铝、二氧化钛等4种纳米颗粒添加到低温保护剂中,使用Cryotop法冷冻猪GV期卵母细胞,使用形态观察和荧光染色的方法,研究其对细胞存活率和发育率的影响。结果显示在实验浓度范围内,HA较其它纳米颗粒对猪卵母细胞的毒性低,当浓度低于0.5%时,细胞发育率为100%;低温保护剂中添加0.1%HA纳米颗粒,发育率比其它组显著提高,可以达到22%,且HA的粒径对结果影响不大;当低温保护剂中添加0.05%粒径为60 nm的HA颗粒时,卵母细胞冷冻复温后发育率会进一步从14.7%提高达到30.4%。在低温保护剂中添加适宜浓度的HA纳米颗粒,可以减少复温过程中的重结晶现象,促进细胞的冷冻存活率和发育率,保存效果与浓度相关,而与纳米颗粒的粒径关系不大。 展开更多
关键词 纳米微粒 卵母细胞 低温保存 发育率
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人参提取液在离体肾脏低温灌注与保存中的作用 被引量：5
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作者 周洪澜 那万里 +2 位作者 王伟华 崔成国 邢广君 《白求恩医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期175-177,共3页
目的 :研究人参提取液对离体犬肾低温灌注及保存中缺血再灌注损伤的影响。方法 :以常规的HCA肾保存液为对照组 ,以 HCA肾保存液添加人参提取液为实验组 ,分别对离体犬肾进行低温灌注保存 ,通过光镜、电镜观察肾组织结构变化 ,建立犬肾... 目的 :研究人参提取液对离体犬肾低温灌注及保存中缺血再灌注损伤的影响。方法 :以常规的HCA肾保存液为对照组 ,以 HCA肾保存液添加人参提取液为实验组 ,分别对离体犬肾进行低温灌注保存 ,通过光镜、电镜观察肾组织结构变化 ,建立犬肾移植模型 ,检测移植前后生化指标变化 ,综合分析。结果 :实验组保存的犬肾组织超微结构损伤明显轻于对照组。移植肾早期功能指标检测 ,实验组血肌酐值明显低于对照组 ,而内生肌酐清除值明显高于对照组 ,二者差异均有显著意义 ( P<0 .0 5)。结论 :人参用于肾脏低温灌注保存中 ,对缺血再灌注损伤的肾脏有一定保护作用。 展开更多
关键词 低温灌注 肾保存 人参提取液 肾移植 犬
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骨髓细胞液氮保存21-25年后的细胞活力体外研究 被引量：6
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作者 黄友章 沈建良 +6 位作者 宫立众 郑培浩 刘毅 尹文杰 岑坚 王宁 赵德峰 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2010年第1期224-229,共6页
为探讨适合临床应用的骨髓细胞保存方法,揭示细胞长期低温保存效果,将20人份骨髓加入DMSO-AuP(10%二甲亚砜、10%自体血浆)或DMSO-HES-HuA(5%DMSO、6%羟乙基淀粉、4%人血白蛋白)保护剂,分装2毫升/管,600-800管/人份,自控程序降温仪或-80... 为探讨适合临床应用的骨髓细胞保存方法,揭示细胞长期低温保存效果,将20人份骨髓加入DMSO-AuP(10%二甲亚砜、10%自体血浆)或DMSO-HES-HuA(5%DMSO、6%羟乙基淀粉、4%人血白蛋白)保护剂,分装2毫升/管,600-800管/人份,自控程序降温仪或-80℃低温冰箱预冻降温、液氮中保存21-25年。取冷冻骨髓细胞于38℃复温,检测细胞相关指标。结果表明:加保护剂的细胞标本在-80℃低温冰箱中为低速降温,-30℃前,与自控程序降温仪设定1℃/min的低降温速率接近。DMSO-HES-HuA与DMSO-AuP比较,红细胞形态畸形率分别为(3.5±1.5)%和(12.6±4.8)%;溶血率分别为(3.3±1.6)%和(23.1±5.1)%(p<0.05);前者渗透性脆性不变,后者减低;红细胞、血小板、粒单系造血祖细胞、长期培养起始细胞回收率,前后者对比分别为(96.1±1.8)%、(70.0±9.5)%、(49.2±10.9)%、(54.2±13.8)%vs(76.3±5.6)%、(52.7±8.1)%、(43.5±12.3)%、(47.2±13.6)%。用上述保护剂配合上述降温法保存后,细胞在间充质干细胞培养上,生长特性良好。同一保护剂用上述两种降温法保存后,细胞各种回收效果差异不显著(p>0.05)。结论:细胞在液氮中保存21-25年,其细胞形态和回收活力(率)良好;保存如骨髓这种细胞成分并非单一的标本时,用5%DMSO-6%HES-4%HuA为保护剂的-80℃冰箱预冻降温后液氮保存,方法简便、经济、易操作,适合临床应用。 展开更多
关键词 骨髓细胞 低温保护剂 程控降温 -80℃低温冰箱降温
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