基于合成生物学微生物底盘细胞构建与优化的研究进展

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作者 孙天丽 黄明珠 +1 位作者 刘斌 陈雪岚 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2025年第1期394-402,共9页

微生物菌株的改造优化是现代工业生物技术的核心,其中工业微生物底盘细胞的构建已成为合成生物学的研究热点之一。基于合成生物学“设计-构建-测试-学习”策略,对微生物底盘细胞理想设计和改造是优良细胞工厂构建的重要手段,本文对合成... 微生物菌株的改造优化是现代工业生物技术的核心,其中工业微生物底盘细胞的构建已成为合成生物学的研究热点之一。基于合成生物学“设计-构建-测试-学习”策略,对微生物底盘细胞理想设计和改造是优良细胞工厂构建的重要手段,本文对合成生物学和微生物底盘细胞的改造优化策略进行了相关概述,同时总结了基于合成生物学各工业微生物底盘细胞的构建及应用,最后对在构建底盘细胞时所遇到的障碍及未来的前景进行了展望,以推动具有优良性状的微生物细胞工厂的构建。 展开更多

关键词 合成生物学 底盘细胞 基因组精简 工业微生物 微生物细胞工厂

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橡胶树与白粉病菌Oidium heveae亲和互作组织细胞学研究 被引量：20

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作者 万三连 梁鹏 +3 位作者 刘文波 张宇 缪卫国 郑服丛 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期26-36,共11页

白粉病是橡胶树生产中最重要的病害之一,是由粉孢属病菌Oidium heveae Steinm.引起。目前,对该病原菌在寄主中侵染行为及其与寄主互作的组织细胞学尚缺乏系统研究。本文利用显微技术,结合多种染色方法,观察了橡胶树白粉菌侵染橡胶树叶... 白粉病是橡胶树生产中最重要的病害之一,是由粉孢属病菌Oidium heveae Steinm.引起。目前,对该病原菌在寄主中侵染行为及其与寄主互作的组织细胞学尚缺乏系统研究。本文利用显微技术,结合多种染色方法,观察了橡胶树白粉菌侵染橡胶树叶组织的细胞学变化及寄主的抗性反应。O.heveae在寄主上发育要经历5个关键发育时间点,即分生孢子萌发高峰(4hpi)、附着胞形成高峰(8hpi)、侵入结构(初生吸器)形成高峰(15hpi)、次生菌丝形成高峰(24hpi)、分生孢子梗形成高峰(5dpi);分生孢子萌发侵入寄主前,其能量来自自身贮存的能量物质。在互作过程中,病原菌初生吸器形成之后,橡胶树叶组织开始出现明显的氧暴发、胼胝质和乳突等抗性反应,活性氧在橡胶树与病原菌互作中起到了重要的作用,当橡胶树叶片中活性氧积累较低时,有利于O.heveae的发育及入侵,活性氧积累较高时,则引发寄主氧暴发等以阻止病原菌进一步扩展。O.heveae在寄主上发育的5个关键发育时间点分别属于病原菌侵染前期、潜育期和侵染后期,橡胶树叶组织早期亲和互作与中后期非亲和互作保持了专性寄生菌与寄主间发育平衡的进化关系。 展开更多

关键词 橡胶树 橡胶树白粉菌 侵染 细胞学

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固定化基因重组酵母发酵木糖产乙醇 被引量：10

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作者 陈明 王周芳 夏黎明 《浙江大学学报（工学版）》 EI CAS CSCD 北大核心 2008年第2期290-293,共4页

采用海藻酸钙凝胶包埋法固定基因重组酵母Sacchromyces cerevisiae ZU-10,研究了固定化细胞的发酵特性.结果表明,在30℃、pH 5.5下发酵80 g/L木糖,游离细胞的发酵周期为96 h,乙醇得率为0.37,细胞固定化后发酵周期缩短至60 h,乙醇得率提... 采用海藻酸钙凝胶包埋法固定基因重组酵母Sacchromyces cerevisiae ZU-10,研究了固定化细胞的发酵特性.结果表明,在30℃、pH 5.5下发酵80 g/L木糖,游离细胞的发酵周期为96 h,乙醇得率为0.37,细胞固定化后发酵周期缩短至60 h,乙醇得率提高到0.40.利用固定化细胞重复分批发酵8次,木糖利用率均在95%以上,平均乙醇得率为0.39.与游离细胞相比,固定化细胞对乙酸的耐受性明显增强,当质量浓度低于1.2 g/L时乙酸对木糖发酵的影响很小.利用固定化重组酵母发酵玉米秸秆水解液中的葡萄糖和木糖,36 h内65.0 g/L葡萄糖和27.0g/L木糖被完全利用,生成36.9 g/L乙醇,对葡萄糖和木糖的乙醇得率为0.40. 展开更多

关键词 木糖 乙醇发酵 基因重组酵母 固定化细胞 玉米秸秆 水解液

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活性氧调节单核细胞增生李斯特菌菌膜形成 被引量：4

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作者 张超 陈国薇 +2 位作者 杨玉萍 吴淑燕 刘箐 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2013年第23期189-193,共5页

通过使用可抑制还原型辅酶Ⅱ(NADPH)氧化酶活性、降低细胞内源性活性氧(ROS)的抑制剂二苯基碘(DPI),以及用抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)2种方法降低单核细胞增生李斯特菌(Listeria monocytogenes,LM)中ROS的产生,同时用外源补充H2O2的... 通过使用可抑制还原型辅酶Ⅱ(NADPH)氧化酶活性、降低细胞内源性活性氧(ROS)的抑制剂二苯基碘(DPI),以及用抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)2种方法降低单核细胞增生李斯特菌(Listeria monocytogenes,LM)中ROS的产生,同时用外源补充H2O2的办法来验证ROS对LM菌膜(BF)形成的调控作用。结果表明:DPI和NAC能够通过降低ROS的产生进而抑制LM菌膜的生成,细菌中外源补充活性氧(H2O2)对BF的生成有一定的促进作用。此研究说明,和高等动植物一样,LM中也存在类似于负责产生ROS的NADPH氧化酶,由其介导产生的ROS对LM的BF形成不可或缺,ROS可能是BF形成过程中重要的信号分子。 展开更多

关键词 活性氧 单核细胞增生李斯特菌 菌膜

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食源性致病菌诱导细胞凋亡机理研究进展 被引量：3

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作者 张超 陈国薇 +2 位作者 杨玉萍 吴淑燕 刘箐 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2014年第5期234-238,共5页

细胞凋亡是机体为清理衰老、受损的细胞,维持内环境稳定、确保机体健康而采取的一种有序性"自杀方式"。食源性致病菌进入机体后可通过诱导宿主细胞凋亡以逃离宿主的免疫清除,保证自身生存进而得以在机体内扩散的生存策略。近... 细胞凋亡是机体为清理衰老、受损的细胞,维持内环境稳定、确保机体健康而采取的一种有序性"自杀方式"。食源性致病菌进入机体后可通过诱导宿主细胞凋亡以逃离宿主的免疫清除,保证自身生存进而得以在机体内扩散的生存策略。近年来研究表明,食源性致病菌的毒力因子在致病菌诱导宿主细胞凋亡过程中起到非常重要的作用,许多致病菌通过产生相应的毒力因子与凋亡调控因子相结合,引起细胞凋亡的级联反应。本文主要从致病菌毒力因子对凋亡信号通路的影响和调控方面来阐述食源性致病菌诱导细胞凋亡的机理研究进展。 展开更多

关键词 食源性致病菌 细胞凋亡 毒力因子

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秦皇岛近岸海域大型底栖动物生态位及其分化的研究 被引量：2

6

作者 石伟杰 李莉 +4 位作者 张永丰 王全颖 赵倩倩 张建乐 姚远 《海洋渔业》 CSCD 北大核心 2023年第6期670-679,共10页

为了解秦皇岛近岸海域大型底栖动物的生态位特征,掌握秦皇岛海域底栖生物分布状况,于2017年8月和2021年8月对该海域底栖动物和环境因子进行调查,分析群落结构、生态位宽度和生态位重叠程度,并进一步探讨其与环境因子的关系。结果表明,2... 为了解秦皇岛近岸海域大型底栖动物的生态位特征,掌握秦皇岛海域底栖生物分布状况,于2017年8月和2021年8月对该海域底栖动物和环境因子进行调查,分析群落结构、生态位宽度和生态位重叠程度,并进一步探讨其与环境因子的关系。结果表明,2017年和2021年分别采集到大型底栖动物41种和60种,其中优势种有6种和12种。两次调查生态位宽度值范围分别为0.69~2.31和0.64~2.19。2017年和2021年底栖动物优势种中广生态位种均为2种,分别为梳鳃虫(Terebellides stroemii)和小头虫(Capitella capitata)、豆形短眼蟹(Xenophthalmus pinnotheroides)和经氏壳蛞蝓(Philine kinglipini)。2017年和2021年均仅有1种窄生态位种,分别为海湾扇贝(Argopecten irradias)和中国蛤蜊(Mactra chinensis)。其余均为中生态位种。2017年和2021年生态位重叠值变化范围分别为0.00~0.49和0.00~0.91,其中2017年没有生态位重叠值大于0.6的种对;2021年有3对大于0.6,占总对数的4.5%,其中,日本臭海蛹(Travisia japonica)和青岛文昌鱼(Branchiostoma belohgi tsingtauense)重叠值最高(0.91)。冗余分析结果显示,2017年水温、叶绿素a、无机磷和pH是影响大型底栖动物分布的主要环境因子,2021年水深、盐度、温度、叶绿素a和无机氮对底栖动物分布影响较大。 展开更多

关键词 秦皇岛 底栖动物 生态位宽度 生态位重叠 冗余分析

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天然混合产氢红螺菌培养条件 被引量：2

7

作者 尤希凤 张全国 +1 位作者 杨群发 原玉丰 《太阳能学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2006年第4期331-334,共4页

研究了影响天然混合产氢红螺菌生长速度的主要因素,指出适合天然混合产氢红螺菌生长的最佳温度为28℃～40℃,最佳pH值为6.5～8.5,接种量不低于5%的厌氧环境,较高的光照度有利于天然混合红螺菌的生长,且在2000k恒定光照强度下天然混合红... 研究了影响天然混合产氢红螺菌生长速度的主要因素,指出适合天然混合产氢红螺菌生长的最佳温度为28℃～40℃,最佳pH值为6.5～8.5,接种量不低于5%的厌氧环境,较高的光照度有利于天然混合红螺菌的生长,且在2000k恒定光照强度下天然混合红螺菌的生长速度高于自然光照条件下的生长速度,培养基组成以及是否灭菌对天然混合红螺菌的生长影响较小. 展开更多

关键词 红螺菌 天然混和菌种 产氢 生长条件

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不同方法制备PVA载体进行固定化细胞发酵酒精的研究 被引量：6

8

作者 陈功 王联结 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2007年第6期249-251,共3页

本研究分别用PVA(聚乙烯醇)冷冻法和PVA-H3BO3交联法制备固定化细胞载体进行发酵酒精,结果表明:PVA冷冻法制备的载体多次发酵时性能稳定,酒精含量最高可达8.37%,实现了重复利用,大大降低了生产成本;PVA-H3BO3交联法制备的载体单批次发... 本研究分别用PVA(聚乙烯醇)冷冻法和PVA-H3BO3交联法制备固定化细胞载体进行发酵酒精,结果表明:PVA冷冻法制备的载体多次发酵时性能稳定,酒精含量最高可达8.37%,实现了重复利用,大大降低了生产成本;PVA-H3BO3交联法制备的载体单批次发酵效果较好,酒精含量为8.26%,残糖为0.18%,但多次发酵载体变形严重,不适宜重复利用。 展开更多

关键词 聚乙烯醇 固定化细胞 酒精发酵

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尼生素协同超高压处理对枯草芽孢杆菌存活率的影响 被引量：1

9

作者 曾庆梅 杨毅 +1 位作者 赵阳楠 殷允旭 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2008年第10期290-294,共5页

目的:本实验研究了尼生素协同超高压处理对枯草芽孢杆菌存活率的影响。方法:采用响应曲面方法中的Pentagonal模式,对超高压处理枯草芽孢杆菌进行了实验优化设计,并进行了实验分析。结果:(1)压力、尼生素是超高压灭活枯草芽孢杆菌显著影... 目的:本实验研究了尼生素协同超高压处理对枯草芽孢杆菌存活率的影响。方法:采用响应曲面方法中的Pentagonal模式,对超高压处理枯草芽孢杆菌进行了实验优化设计,并进行了实验分析。结果:(1)压力、尼生素是超高压灭活枯草芽孢杆菌显著影响因子;(2)在本实验条件范围内建立的超高压杀灭枯草芽孢杆菌的回归模型有效,并可用于预测本实验条件范围内以及附近取值的枯草芽孢杆菌超高压杀菌结果;(3)添加尼生素比增加温度能更有效地协同超高压杀灭枯草芽孢杆菌;(4)在添加0.05mg/ml的尼生素基础上继续增加尼生素浓度,杀灭枯草芽孢杆菌效果不断提高,但增加速度不明显。 展开更多

关键词 超高压 枯草芽孢杆菌 尼生素 响应曲面法 优化 预测

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干酪乳杆菌LC2W原生质体的制备与再生 被引量：1

10

作者 黄茜 杜昭平 +3 位作者 马成杰 潘能庆 刘蕾 马爱民 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2013年第5期167-171,共5页

以干酪乳杆菌LC2W为出发菌株,对其进行原生质体制备与再生。通过单因素试验研究菌龄、溶菌酶质量浓度、酶解时间及酶解温度对干酪乳杆菌LC2W原生质体制备的影响,并对制备条件进行正交设计优化。结果表明:干酪乳杆菌LC2W原生质体制备的... 以干酪乳杆菌LC2W为出发菌株,对其进行原生质体制备与再生。通过单因素试验研究菌龄、溶菌酶质量浓度、酶解时间及酶解温度对干酪乳杆菌LC2W原生质体制备的影响,并对制备条件进行正交设计优化。结果表明:干酪乳杆菌LC2W原生质体制备的最佳条件为:菌龄8h、酶质量浓度10mg/mL、酶解时间75min、酶解温度42℃,在此条件下制备原生质体并进行再生实验,原生质体形成率达到97.15%,再生率可达到31.25%。研究结果可为L.casei LC2W食品级外源表达系统的构建提供初步的基础。 展开更多

关键词 干酪乳杆菌 原生质体 制备 再生

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降低超高压杀菌压力的协同措施研究进展 被引量：15

11

作者 曾庆梅 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2004年第10期346-350,共5页

现有新发展起来的低酸食品保鲜技术中,超高压食品保鲜处理是美国食品药品管理局(FDA,2000年)肯定的能够有效灭活微生物孢子和食品所含酶,同时处理后食品质量达到甚至超过冷冻保鲜食品的唯一一种食品保鲜加工技术。超高压食品保鲜处理具... 现有新发展起来的低酸食品保鲜技术中,超高压食品保鲜处理是美国食品药品管理局(FDA,2000年)肯定的能够有效灭活微生物孢子和食品所含酶,同时处理后食品质量达到甚至超过冷冻保鲜食品的唯一一种食品保鲜加工技术。超高压食品保鲜处理具有保持食品的天然风味和营养、低能耗、高效率、无毒素产生的特点。但高压设备造成的一次性投资成本高和过高压力下运行的安全问题是制约其发展应用的关键所在。研究表明,有许多辅助的办法可以有效降低超高压食品保鲜处理的压力,本文就近年来几种有效降低超高压杀菌压力协同措施的研究进展情况进行简要回顾和介绍。 展开更多

关键词 超高压处理 温度 保鲜剂 脉冲加压 超声波 超临界CO2

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乳腺细胞凋亡及其研究进展 被引量：3

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作者 侯晓明 李庆章 《中国乳品工业》 CAS 北大核心 2006年第10期49-51,共3页

细胞凋亡是21世纪生物学中最受关注的研究热点之一。乳腺细胞凋亡是乳腺生物学重要的研究方向,其在乳腺组织的结构形成、功能分化中发挥重要作用。近年来乳腺细胞凋亡研究已经有了长足进展。本文就细胞凋亡的主要研究方法以及乳腺细胞... 细胞凋亡是21世纪生物学中最受关注的研究热点之一。乳腺细胞凋亡是乳腺生物学重要的研究方向,其在乳腺组织的结构形成、功能分化中发挥重要作用。近年来乳腺细胞凋亡研究已经有了长足进展。本文就细胞凋亡的主要研究方法以及乳腺细胞凋亡的最新成果作一综述。 展开更多

关键词 细胞凋亡 乳腺 TUNEL

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油菜抗菌核病育种研究进展 被引量：1

13

作者 谢妤 姜琼 黄邦全 《宜春学院学报》 2007年第6期1-2,167,共3页

综述了油菜菌核病危害、油菜对菌核病抗性的遗传以及抗菌核病育种研究进展,为抗菌核病油菜育种提供参考.

关键词 油菜 菌核病 遗传 育种

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引水式小水电对重庆东河大型底栖动物多样性的影响 被引量：5

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作者 王强 袁兴中 +2 位作者 刘红 张耀光 王志坚 《淡水渔业》 CSCD 北大核心 2014年第4期48-56,共9页

为研究引水式小水电对山区河流底栖动物群落结构及多样性的影响,2011年6月对重庆东河白里电站和红花电站库尾上游河段、库区河段、引水坝下减水河段、电站出水口上游河段、电站出水口下游河段的底栖动物进行调查。调查共采集到大型底栖... 为研究引水式小水电对山区河流底栖动物群落结构及多样性的影响,2011年6月对重庆东河白里电站和红花电站库尾上游河段、库区河段、引水坝下减水河段、电站出水口上游河段、电站出水口下游河段的底栖动物进行调查。调查共采集到大型底栖动物43种,隶属3门4纲30科。结果表明:各河段底栖动物群落结构差异不大,蜉蝣目、毛翅目昆虫为优势类群,各河段水质并无明显差异;库区河段受泥沙淤积影响,降低了生境多样性和异质性,底栖动物密度、生物量和多样性指数显著低于电站出水口下游河段;坝下河段流量减少,生境适宜性降低,底栖动物密度、生物量和多样性明显降低。 展开更多

关键词 引水式小水电 大型底栖动物 东河 生物多样性 泥沙淤积

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江苏海域日本鳗鲡苗资源时空分布特征初步研究 被引量：2

15

作者 张虎 贲成恺 +5 位作者 吉红九 于雯雯 袁健美 胡海生 汤晓鸿 高继先 《海洋渔业》 CSCD 北大核心 2017年第6期611-618,共8页

根据2012~2016年1~5月在东台、如东、启东和海门4个监测区域的捕获数量和渔获规格,研究了江苏海域日本鳗鲡(Anguilla japonica)苗的时空分布特征。结果表明:2012~2016年,江苏海域鳗苗主汛期为2~4月,各区域监测船在主汛期的2~4月捕捞数... 根据2012~2016年1~5月在东台、如东、启东和海门4个监测区域的捕获数量和渔获规格,研究了江苏海域日本鳗鲡(Anguilla japonica)苗的时空分布特征。结果表明:2012~2016年,江苏海域鳗苗主汛期为2~4月,各区域监测船在主汛期的2~4月捕捞数量占该年总捕捞数量的比例为61.96%~100.00%,平均为88.18%。东台、如东、启东三地鳗苗逐旬捕捞量分布形态5年均呈单峰型,而海门除2015年和2016年呈双峰型外,其余3年均为单峰型。单网月捕获数量均值最高的年份为2014年,最高的区域为海门,最高的月份为3月;最低的年份为2013年,最低的区域为如东,最低的月份为1月。白天苗量比夜间苗量高出约30%。江苏海域鳗苗全长平均为56.1 mm,体质量为95.14 mg。为实现江苏海域鳗苗资源可持续利用,建议将捕捞期调整为2~3月,在捕捞价值较低的1月以及处于鱼类繁殖季节的4~5月实施禁捕。 展开更多

关键词 日本鳗鲡 鳗苗 江苏海域 时空分布 捕捞产量

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活性氧影响单核细胞增生李斯特菌对7721肝癌上皮细胞的侵袭 被引量：2

16

作者 陈国薇 吴嫚 +5 位作者 张超 刘武康 丁承超 吴淑燕 李森 刘箐 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2015年第21期117-122,共6页

用还原性烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（nicotinamide-adenine dinucleotide pHospHate,NADPH）氧化酶抑制剂二苯基氯化碘盐（dipHenyleneiodonium chloride,DPI）处理单核细胞增生李斯特菌（Listeria monocytogenes）后,用2’,7’-二氯荧... 用还原性烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（nicotinamide-adenine dinucleotide pHospHate,NADPH）氧化酶抑制剂二苯基氯化碘盐（dipHenyleneiodonium chloride,DPI）处理单核细胞增生李斯特菌（Listeria monocytogenes）后,用2’,7’-二氯荧光素二乙酸酯荧光法测定L.monocytogenes中的活性氧（reactive oxygen species,ROS）,结果显示细胞内源性ROS明显降低且有DPI浓度依赖性。进而用ROS产生能力降低的L.monocytogenes侵袭7721肝癌上皮细胞,结果显示：在1~10μmol/L的DPI浓度范围内,随着L.monocytogenes内ROS水平的降低,L.monocytogenes侵袭7721上皮细胞的能力却随之增长。本研究提示：L.monocytogenes可能和高等动植物一样存在类似于负责产生ROS的NADPH氧化酶,由其介导产生的ROS可能调控L.monocytogenes侵袭细胞的能力。 展开更多

关键词 单核细胞增生李斯特菌 活性氧 侵袭 上皮细胞

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达里湖东北雅罗鱼的生长、死亡和生活史类型的研究 被引量：17

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作者 安晓萍 孟和平 +4 位作者 杜昭宏 张利 高玉奎 柳玉海 李延平 《淡水渔业》 CSCD 北大核心 2008年第6期3-7,共5页

达里湖东北雅罗鱼(Leucisus waleckii)的种群结构参数(体长、体重和年龄)进行测定,估算种群的生长和死亡参数,并研究种群的生活史类型。结果显示:东北雅罗鱼的体长和体重的关系式Wt=0.0281L2t.8152,其vonBertalanffy生长方程各参数为渐... 达里湖东北雅罗鱼(Leucisus waleckii)的种群结构参数(体长、体重和年龄)进行测定,估算种群的生长和死亡参数,并研究种群的生活史类型。结果显示:东北雅罗鱼的体长和体重的关系式Wt=0.0281L2t.8152,其vonBertalanffy生长方程各参数为渐近体长L∞=28.9763 cm,渐近体重W∞=366.95 g,生长系数k=0.2586,t0=-0.3237;自然死亡系数M为0.322,总死亡系数Z为0.9386,捕捞死亡系数F为0.6166;生活类型为r-选择。结果表明:作为渔业管理对策,达里湖东北雅罗鱼的起捕年龄应定为3龄以上。 展开更多

关键词 东北雅罗鱼(Leucisus waleckii) 生长 死亡 生活史类型 达里湖

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noxs基因:病原菌菌膜形成及毒力调控的潜在靶点 被引量：1

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作者 陈国薇 张超 +2 位作者 董庆利 吴淑燕 刘箐 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2014年第3期234-237,共4页

noxs基因介导产生的活性氧(reactive oxygen species,ROS)是动植物细胞中普遍存在的"胁迫应答信号分子"。有研究表明细菌中也存在类似的noxs基因,当病原细菌面临不良生存环境时,该基因被激活并通过产生ROS来调控菌膜形成和细... noxs基因介导产生的活性氧(reactive oxygen species,ROS)是动植物细胞中普遍存在的"胁迫应答信号分子"。有研究表明细菌中也存在类似的noxs基因,当病原细菌面临不良生存环境时,该基因被激活并通过产生ROS来调控菌膜形成和细菌毒力因子,本文对noxs基因及其介导产生的ROS在此过程中的作用予以综述。 展开更多

关键词 noxs基因 菌膜形成 毒力调控

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中国药典中5种标准菌生长曲线的测定 被引量：9

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作者 姜兴粲 李冰 +1 位作者 王玮玮 张继瑜 《浙江农业科学》 2020年第1期40-42,共3页

为测定《中国兽药典》(2015版)中5种标准菌的生长曲线,并对其方法的合理性进行讨论,参照《微生物学实验》(第4版)中细菌生长曲线的制作方法,以《中国兽药典》(2015版)规定的5种标准菌株大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、白色... 为测定《中国兽药典》(2015版)中5种标准菌的生长曲线,并对其方法的合理性进行讨论,参照《微生物学实验》(第4版)中细菌生长曲线的制作方法,以《中国兽药典》(2015版)规定的5种标准菌株大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、白色念珠菌、黑曲霉为研究对象,进行了菌株生长曲线的测定。结果表明:大肠埃希菌在1.5~4.5 h处于稳定期,金黄色葡萄球菌在1.0~5.5 h处于稳定期,铜绿假单胞菌在2.0~7.0 h处于稳定期,白色念珠菌在3.0~12.0 h处于稳定期,黑曲霉菌在96.0~110.0 h处于稳定期。多种标准菌株稳定期的测定完成,对相关微生物实验的进行具有重要的参考意义。 展开更多

关键词 标准菌株 生长曲线 细菌 真菌

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罗氏沼虾白斑综合症病毒WSSV ORF147片段的克隆、表达与序列分析

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作者 薛宇醒 曹广力 +6 位作者 王晓兰 贡成良 魏育红 沈卫德 陈辉 张伟明 薛仁宇 《水利渔业》 北大核心 2008年第1期105-108,共4页

白斑综合症病毒WSSV（White Spot Syndrome Virus），是严重危害虾类养殖业的主要病原之一。本实验根据已知南美白对虾WSSV ORF147序列设计1对特异性引物，从患疑似白斑病毒病的罗氏沼虾中提取总DNA，用PCR法扩增得到1特异性片段。将该... 白斑综合症病毒WSSV（White Spot Syndrome Virus），是严重危害虾类养殖业的主要病原之一。本实验根据已知南美白对虾WSSV ORF147序列设计1对特异性引物，从患疑似白斑病毒病的罗氏沼虾中提取总DNA，用PCR法扩增得到1特异性片段。将该片段克隆进pET-28a（＋）载体，测序表明该片段全长1475bp．最大开放式阅读框为1380bp，编码459个氨基酸，预计其相对分子质量为51．9kDa；与GenBank登录的WSSV ORF147序列（登录号AF369029）进行比对，核苷酸同源性为99％，证实为WSSV ORF147片段。将该片段在大肠杆菌Ecoli中进行表达，能获得相应的特异多肽条带。根据测序结果推导WSSV ORF147多肽在N端有信号肽序列，并且在氨基酸序列的122～144区间形成跨膜螺旋区。 展开更多

关键词 罗氏沼虾 白斑综合症 WSSV ORF147片段 克隆 序列分析 表达

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