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哺乳动物早期胚胎体外发育阻滞的研究进展 被引量:16
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作者 王敏康 刘冀珑 +1 位作者 陈永福 陈大元 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期391-395,共5页
哺乳动物胚胎在体外培养中普遍存在早期发育阻滞的现象。对此 ,人们用形态学、生物化学、分子生物学、显微操作等手段开展了磷酸、葡萄糖、次黄嘌呤和细胞质因素对早期胚胎发育阻滞的影响的研究。本文综合分析了共培养系统的优缺点。说... 哺乳动物胚胎在体外培养中普遍存在早期发育阻滞的现象。对此 ,人们用形态学、生物化学、分子生物学、显微操作等手段开展了磷酸、葡萄糖、次黄嘌呤和细胞质因素对早期胚胎发育阻滞的影响的研究。本文综合分析了共培养系统的优缺点。说明了采用完全成分已知的培养液对进行有关研究的必要性。列出了有效运用于克服小鼠、大鼠、仓鼠、兔、猪、羊、牛、猴等动物早期胚胎阻滞的成分已知的培养液的名称。 展开更多
关键词 二细胞阻滞 葡萄糖 磷酸 阻滞机理 共培养 简单培养液 哺乳动物 早期胚胎发育
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松杉类植物体细胞胚发育机理的研究进展 被引量:16
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作者 汪小雄 卢龙斗 +4 位作者 郝怀庆 杨映根 郭仲琛 郭奕明 林金星 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第9期1965-1972,共8页
植物体细胞胚胎发生不仅可作为其繁育的重要手段,而且也是研究胚胎发育过程的一种重要模式系统.体细胞胚在形态和生理上的成熟,直接影响到植株的萌发和再生频率.本文综述了近年来国内外有关裸子植物中几种松杉类植物体细胞胚发育过程的... 植物体细胞胚胎发生不仅可作为其繁育的重要手段,而且也是研究胚胎发育过程的一种重要模式系统.体细胞胚在形态和生理上的成熟,直接影响到植株的萌发和再生频率.本文综述了近年来国内外有关裸子植物中几种松杉类植物体细胞胚发育过程的研究报道,其中主要涉及培养基成分和脱落酸(ABA)对体细胞胚发育的影响,以及体细胞胚发育在细胞学、细胞程序性死亡、相关基因和蛋白质组学等方面的研究进展,并进一步讨论了松杉类植物体细胞胚的发育机理,以及体细胞胚在遗传转化系统中的作用. 展开更多
关键词 松杉类植物 胚性胚柄团 体细胞胚 体细胞胚胎发生
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不同物种输卵管上皮细胞培养、纯度检测及支持小鼠胚胎发育的能力 被引量:14
3
作者 谭秀文 马所峰 +5 位作者 刘新勇 张霞 兰国成 于建宁 张俊功 谭景和 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第9期878-882,共5页
针对不同物种采用不同方法培养小鼠、山羊和鸡输卵管上皮细胞(OECs)并检测上皮细胞纯度,在此基础上比较了它们支持小鼠胚胎发育的能力。结果表明,3种细胞都能很好地生长,培养的细胞几乎全为上皮细胞(Vi-mentin单克隆抗体检测显示,小鼠... 针对不同物种采用不同方法培养小鼠、山羊和鸡输卵管上皮细胞(OECs)并检测上皮细胞纯度,在此基础上比较了它们支持小鼠胚胎发育的能力。结果表明,3种细胞都能很好地生长,培养的细胞几乎全为上皮细胞(Vi-mentin单克隆抗体检测显示,小鼠、山羊和鸡OECs的阳性细胞率分别为2.4±0.3、1.3±0.3和1.8±0.4)。昆明白小鼠原核胚与小鼠、山羊和鸡OECs共培养,发育到囊胚的比例分别为61.7%、57.2%和56.2%,差异不显著(P>0.05)。说明鸡和山羊OECs能很好地支持小鼠胚胎发育。 展开更多
关键词 胚胎 体细胞 共培养 小鼠
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小鼠胚胎干细胞在六种培养体系的培养观察 被引量:18
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作者 黄冰 黄文革 +2 位作者 钟女奇 陈颖青 陈系古 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2000年第1期1-6,共6页
目的 观察小鼠胚胎干细胞在六种培养体系中的生长情况。方法 小鼠胚胎干细胞 (ESD3细胞株 )在以下六种培养体系中培养 :1 .原代小鼠胚胎成纤维细胞 (MEF)有血清培养 ,2 .MEF无血清培养 ,3.SNL细胞有血清培养 ,4.LIF(白血病抑制因子 )... 目的 观察小鼠胚胎干细胞在六种培养体系中的生长情况。方法 小鼠胚胎干细胞 (ESD3细胞株 )在以下六种培养体系中培养 :1 .原代小鼠胚胎成纤维细胞 (MEF)有血清培养 ,2 .MEF无血清培养 ,3.SNL细胞有血清培养 ,4.LIF(白血病抑制因子 )有血清无饲养层培养 ,5.LIF无血清无饲养层培养 ,6.大鼠肝细胞 (BRL)条件培养基培养。经体外培养 1 0代后 ,观察其克隆形态 ,同时进行碱性磷酸酶检测并将ES细胞接种于裸小鼠皮下 ,观察ESD3的未分化状态和多潜能性。结果 六种培养体系培养的ESD3具有典型的ES细胞克隆形态 :巢状 (集落状 )隆起生长 ,边缘清楚 ,表面平滑 ,结构致密 ;AKP强阳性 ;裸小鼠体内形成了由多种组织构成的畸胎瘤。结论 六种培养体系均能支持ESD3生长 ,并能保持其未分化性和多潜能性 ,为ES细胞的应用研究奠定了良好的基础。 展开更多
关键词 观察 干细胞 血清培养 ES细胞 裸小鼠 饲养层 集落 克隆形态 小鼠胚胎 培养体系
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百合杂种系间杂交障碍的克服及3种幼胚离体培养方法的比较研究 被引量:9
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作者 谢松林 王仙芝 +1 位作者 牛立新 张延龙 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期1573-1578,共6页
分别以麝香百合(Longiflorum,L)White Fox、亚洲百合(Asiatic,A)Conneticut King、东方百合(Oriental,O)Sorbonne及喇叭百合(Trumpet,T)Royal Goden为亲本,用切割柱头法进行杂交,采用离体培养技术对杂种幼胚进行抢救,并运用基... 分别以麝香百合(Longiflorum,L)White Fox、亚洲百合(Asiatic,A)Conneticut King、东方百合(Oriental,O)Sorbonne及喇叭百合(Trumpet,T)Royal Goden为亲本,用切割柱头法进行杂交,采用离体培养技术对杂种幼胚进行抢救,并运用基因组原位杂交技术对所得杂种进行鉴定.结果显示,在所选的6个杂交组合中,切割柱头授粉能不同程度地克服除LL×TT之外的5个杂交组合的受精前障碍;胚、胚乳及胚珠3种外植体的离体培养萌发率分别为100%、21.5%和1%,所得植株占所得杂种的比例分别为9.6%、89.9%和0.5%;基因组原位杂交分析显示,所获植株均为真杂种.结果证明,胚、胚乳及胚珠培养是从幼胚获得百合杂种植株的高效途径,且能有效防止伪杂种混杂,胚乳培养是获得百合杂种一代的主要方式. 展开更多
关键词 百合 系间杂交 胚乳培养 胚培养 胚珠培养 基因组原位杂交(GISH)
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自然周期与替代周期准备内膜对冷冻胚胎移植结局的影响 被引量:16
6
作者 陈华 孙海翔 +1 位作者 王慧焱 王玢 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期245-248,共4页
目的:探讨自然周期与替代周期法准备内膜对冷冻胚胎移植结局的影响。方法:在冷冻胚胎移植周期中,分别采用自然周期(n=149)、替代周期(n=578)准备内膜,比较周期妊娠率、流产率、种植率、多胎妊娠率等指标。结果:2组移植周期临床妊娠率分... 目的:探讨自然周期与替代周期法准备内膜对冷冻胚胎移植结局的影响。方法:在冷冻胚胎移植周期中,分别采用自然周期(n=149)、替代周期(n=578)准备内膜,比较周期妊娠率、流产率、种植率、多胎妊娠率等指标。结果:2组移植周期临床妊娠率分别为39.6%、41.2%(P>0.05);流产率分别为5.4%、5.0%(P>0.05);种植率分别为28.3%、27.6%(P>0.05)。冷冻囊胚移植妊娠率66.7%,分裂期胚胎移植妊娠率39.9%,差异有显著性(P<0.05)。自然周期与替代周期相比单胎、多胎妊娠率差异无显著性(P>0.05)。移植3个胚胎妊娠率较移植2个胚胎显著增加,多胎妊娠率显著增加(P<0.05)。结论:在冷冻胚胎移植周期,采用自然周期或替代周期法准备内膜的妊娠率、流产率无明显差异,对于排卵正常患者采用自然周期法更经济、简单,增加移植胚胎数在提高妊娠率的同时明显提高了多胎妊娠率。 展开更多
关键词 冷冻胚胎移植 自然同期 替代周期 妊娠率
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不同品系小鼠的体外受精、胚胎冷冻及移植的比较研究 被引量:18
7
作者 徐平 山村绫子 +5 位作者 唐一岷 陆晔 川野佳代 刘丽均 小川真美 中泻直己 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2004年第3期147-151,共5页
目的 探讨不同品系小鼠的体外受精、胚胎和精子的低温保存效果。方法 本实验分别在中国科学院上海实验动物中心 (SLAC)和日本熊本大学动物资源开发中心 (CARD)对 13个品系小鼠 (C57BL 6J、BALB c、C3H HeJ、ICR、KM、FVB、MRL、NOD、... 目的 探讨不同品系小鼠的体外受精、胚胎和精子的低温保存效果。方法 本实验分别在中国科学院上海实验动物中心 (SLAC)和日本熊本大学动物资源开发中心 (CARD)对 13个品系小鼠 (C57BL 6J、BALB c、C3H HeJ、ICR、KM、FVB、MRL、NOD、CBA、DBA 2、CD 1、BDF1、B6C3F1)的体外受精 (IVF)率、胚胎培养及移植成绩进行了比较研究。结果 各品系小鼠新鲜精子的IVF率 15 1%~ 87 9% ,冻融精子的IVF率 8%~ 80 % ;冷冻胚胎的复苏率4 2 6 %~ 83 9% ;冻融胚胎移植后的产仔率在 17 8%~ 5 1 8%。结论 遗传背景不同的小鼠体外受精率、冷冻胚胎复苏率和胚胎移植的产仔率差异有显著性。但同一品系两个实验室间的新鲜精子的IVF率、冷冻胚胎的复苏率及移植产仔率差异无显著性 (P >0 0 5 ) ;冻融精子的体外受精率CARD明显高于SLAC(P <0 0 1)。 展开更多
关键词 品系 小鼠 体外受精 胚胎移植 精子
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人bcl-xl转基因小鼠外源基因的复制及传代的稳定性观察 被引量:8
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作者 王芙蓉 袁慧 +4 位作者 肖文伍 张苏明 赵浩斌 郑新民 魏庆信 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期615-617,共3页
显微注射法建立转 bcl- xl基因小鼠 ,将 PCR及 Southern- blot检测阳性的小鼠与正常鼠交配并传代 ,然后检测子代中外源基因的遗传情况。结果发现 :10号小鼠传代过程中 PCR阳性率保持稳定 ,符合孟德尔遗传规律 ,外源基因能够稳定遗传。 ... 显微注射法建立转 bcl- xl基因小鼠 ,将 PCR及 Southern- blot检测阳性的小鼠与正常鼠交配并传代 ,然后检测子代中外源基因的遗传情况。结果发现 :10号小鼠传代过程中 PCR阳性率保持稳定 ,符合孟德尔遗传规律 ,外源基因能够稳定遗传。 6号小鼠 PCR阳性率呈轻微下降趋势 ,但能够保持相对稳定遗传。 13号和 5号小鼠 PCR阳性率均呈现明显的下降趋势。该二小鼠存在外源基因遗传丢失现象。结果提示 展开更多
关键词 BCL-XL基因 DNA复制 传代
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狼山鸡-AA肉鸡嵌合体的制作及其转基因鸡研究 被引量:5
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作者 李建许 陈杰 +3 位作者 蔡亚飞 刘健 徐世永 刘红林 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期83-88,共6页
试验Ⅰ:以狼山鸡为供体,AA肉鸡为受体,通过赤道开窗法制作了狼山鸡-AA肉鸡的嵌合体。共操作了108枚鸡蛋,孵化成活19只,孵化成活率17.6%。获得表型嵌合体鸡胚22枚,其中15只孵化成活,嵌合体率为13.9%。对2只嵌合体公鸡解剖发现,有1只的睾... 试验Ⅰ:以狼山鸡为供体,AA肉鸡为受体,通过赤道开窗法制作了狼山鸡-AA肉鸡的嵌合体。共操作了108枚鸡蛋,孵化成活19只,孵化成活率17.6%。获得表型嵌合体鸡胚22枚,其中15只孵化成活,嵌合体率为13.9%。对2只嵌合体公鸡解剖发现,有1只的睾丸发育异常。PCR扩增禽类W染色体特异性的重复序列发现,2只嵌合体公鸡的性腺都嵌合了供体异性的细胞。结果表明所采用的嵌合体制作方法制备转基因鸡是可行的。试验Ⅱ:利用脂质体介导法,在体外将外源pEGFP质粒转入到鸡X期胚胎细胞中,培养8 h开始有外源基因的表达,体外培养12 h后获得了21.43%的转染效率。将转染后的鸡胚盘细胞移入到受体AA肉鸡的胚下腔,孵化6 d后在8个鸡胚中检测到有外源基因的存在,阳性率为40%(8/20)。 展开更多
关键词 胚盘细胞 嵌合体 转基因 狼山鸡 AA肉鸡
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牛胚胎体外培养体系的优化 被引量:5
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作者 张志平 张君涛 +2 位作者 安志兴 张锈 张涌 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2006年第6期7-10,15,共5页
将体外受精后的牛卵母细胞随机分组进行培养,比较了胎牛血清(FBS)和发情后7 d牛血清(E 7BS)、不同培养液(CR 1+3 m g/mL BSA、SOF+3 m g/mL BSA和SOF+0.1 m g/mL PVA)、共培养体系和不同培养液体积(0.1,0.5和2.0 mL)对胚胎发育的影响,... 将体外受精后的牛卵母细胞随机分组进行培养,比较了胎牛血清(FBS)和发情后7 d牛血清(E 7BS)、不同培养液(CR 1+3 m g/mL BSA、SOF+3 m g/mL BSA和SOF+0.1 m g/mL PVA)、共培养体系和不同培养液体积(0.1,0.5和2.0 mL)对胚胎发育的影响,优化了牛胚胎体外培养体系,并对该体系的稳定性进行了检验。结果表明,优化后的牛胚胎培养体系为:前48 h用CR 1+3 m g/mL BSA培养液,48 h后用CR 1+体积分数10%E 7BS培养液培养120 h,培养液体积为0.5 mL,并且采用共培养,受精后颗粒细胞保留48 h。用该培养体系培养的牛胚胎发育良好,平均囊胚率为44.9%,表明该优化培养体系较稳定。 展开更多
关键词 体外受精 胚胎培养 囊胚 血清
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由猪囊胚内细胞团分离胚胎干细胞的研究 被引量:4
11
作者 冯秀亮 高志敏 +3 位作者 杨春荣 雷安民 樊敬庄 窦忠英 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2003年第3期5-10,共6页
以 PMEF为饲养层培养猪 7~ 9日龄囊胚分离 ES细胞 ,ICM初次传代时间为 4~ 7d,ES细胞传代时间为 4~ 5 d,ES细胞传至 1~ 5代的胚胎数分别为 1 2 (1 8.8% ) ,8(1 2 .5 % ) ,5 (7.8% ) ,3(4 .7% ) ,2 (3.1 % ) ,并进行体外分化和 AKP染... 以 PMEF为饲养层培养猪 7~ 9日龄囊胚分离 ES细胞 ,ICM初次传代时间为 4~ 7d,ES细胞传代时间为 4~ 5 d,ES细胞传至 1~ 5代的胚胎数分别为 1 2 (1 8.8% ) ,8(1 2 .5 % ) ,5 (7.8% ) ,3(4 .7% ) ,2 (3.1 % ) ,并进行体外分化和 AKP染色鉴定。对影响猪 ES细胞分离与克隆的因素进行比较 ,结果表明 :(1 ) 9和 1 4日龄小鼠胎儿 PMEF饲养层培养 9日龄猪囊胚 ,贴壁率 (83.3% ,88,9% ) ,ICM形成率 (75 .0 % ,77.8% )和 1代 ES细胞克隆率(2 5 .0 % ,2 2 .2 % )无显著性差异 (P>0 .0 5 )。 (2 ) 7,8和 9日龄胚胎随胚龄增加 ,胚胎贴壁率 (5 .9% ,5 7.1 % ,87,9% )和 ICM形成率 (0 .0 % ,2 8.6 % ,81 .8% )升高 ,差异显著 (P<0 .0 1 )。(3) 9日龄囊胚直径 0 .8~ 1 .2 m m培养36~ 4 8h贴壁 ,贴壁率 1 0 0 % ,ICM形成率 1 0 0 % ;直径 >1 .2 mm囊胚贴壁时间为 4 8~ 72 h,贴壁率 5 7.1 % ,ICM形成率 5 7.1 % ,差异显著 (P<0 .0 5 )。去除直径 >1 .2 m m囊胚部分滋养层细胞培养 36~ 4 8h,贴壁率 91 .7% ,ICM形成率 83.3% ;(4 )添加外源 L IF没有提高贴壁率 (86 .4 % ,90 .9% ;P>0 .0 5 )和 ICM形成率 (81 .8% ,81 .8% ;P>0 .0 5 ) 展开更多
关键词 囊胚 内细胞团 分离 胚胎干细胞 胚胎日龄 培养基 胚胎处理方法
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供体细胞来源和TSA处理对牦牛iSCNT胚胎重编程的影响 被引量:5
12
作者 熊显荣 高川 +3 位作者 符梅 李键 字向东 钟金城 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2012年第10期9-14,共6页
【目的】探讨不同来源的供体细胞和TSA处理对牦牛异种体细胞核移植(Interspecies nuclear trans-fer,iSCNT)胚胎的影响。【方法】以黄牛卵母细胞为受体,分别以牦牛50日龄胎儿及6和18月龄个体成纤维细胞为供体,构建牦牛iSCNT胚胎,研究供... 【目的】探讨不同来源的供体细胞和TSA处理对牦牛异种体细胞核移植(Interspecies nuclear trans-fer,iSCNT)胚胎的影响。【方法】以黄牛卵母细胞为受体,分别以牦牛50日龄胎儿及6和18月龄个体成纤维细胞为供体,构建牦牛iSCNT胚胎,研究供体细胞来源对牦牛iSCNT胚胎的影响。分别用0(对照),20,40,60和80nmol/L的TSA处理50日龄胎儿成纤维细胞12h,构建iSCNT胚胎,比较其发育情况,确定TSA的最佳处理浓度;用最佳浓度的TSA处理50日龄胎儿成纤维细胞0(对照),6,12和18h,构建iSCNT胚胎,比较其发育情况,确定TSA的最佳处理时间。用最佳TSA作用时间和浓度处理供体细胞,构建牦牛iSCNT,之后用40和80nmol/L的TSA分别处理iSCNT胚胎6和12h,比较不同处理方式对牦牛iSCNT胚胎发育的影响。采用qRT-PCR方法检测40nmol/L TSA处理供体细胞6h的iSCNT胚胎及40nmol/L TSA处理供体细胞6h且处理iSCNT胚胎12h的iSCNT胚胎去乙酰化酶2(HDAC2)基因mRNA的表达水平,以不进行TSA处理的iSCNT胚胎为对照。【结果】以50日龄胎儿成纤维细胞作为供体细胞,牦牛iSCNT胚胎的囊胚率最高,但与其他组差异不显著(P>0.05)。40nmol/L TSA处理供体细胞6h能显著提高牦牛iSCNT胚胎的囊胚率(30.6%),且与对照组差异显著(P<0.05)。用40nmol/L TSA处理牦牛iSCNT胚胎12h组的囊胚率高于80nmol/L TSA处理iSCNT胚胎6h组,2组间差异不显著(P>0.05)。用TSA处理供体细胞和iSCNT胚胎之后,HDAC2mRNA表达水平降低,且与对照组差异显著(P<0.05)。【结论】不同来源的供体细胞对iSCNT胚胎发育的影响不明显;40nmol/L TSA处理供体细胞6h和iSCNT胚胎12h能显著提高牦牛iSCNT胚胎体外发育及重编程能力。 展开更多
关键词 牦牛 异种核移植 胚胎发育 去乙酰化酶2基因
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小鼠体外受精、胚胎培养及胚胎快速冷冻的研究 被引量:6
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作者 张嘉保 任文陟 +3 位作者 宋德光 徐勇 母连志 高晓伟 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2002年第2期108-112,共5页
目的 为扩大胚胎来源并获取特定胚龄胚胎 ,建立小鼠冷冻胚胎库。方法 运用超数排卵、体外受精与胚胎培养及胚胎冷冻技术系统研究了小鼠受精卵的体内发育与运行规律。卵母细胞的体外成熟与受精、单细胞胚胎培养及胚胎快速冷冻。结果  ... 目的 为扩大胚胎来源并获取特定胚龄胚胎 ,建立小鼠冷冻胚胎库。方法 运用超数排卵、体外受精与胚胎培养及胚胎冷冻技术系统研究了小鼠受精卵的体内发育与运行规律。卵母细胞的体外成熟与受精、单细胞胚胎培养及胚胎快速冷冻。结果  (1)注射hCG后 12~ 2 0h受精卵发育至原核期 ,4 2~ 4 8h为 2 细胞期 ,4 8~ 6 0h为 4 细胞期 ,6 0~ 6 8h为 8 细胞期 ,以上各期受精卵均处于输卵管中 ;75~ 78h为桑椹胚 ,78~ 80h为致密桑椹胚 ,90~ 92h为早期囊胚 ,92~ 96h为囊胚 ,以上各期均处于子宫角中。 (2 )培养液中添加促性腺激素 (FSH与hCG) ,能显著提高卵母细胞的体外受精率 ,添加FCS和激素组的体外受精率又显著高于单独添加激素组 ,FCS还能显著提高胚胎发育。 (3)在培养液中添加EDTA ,能有效克服小鼠胚胎的 2 细胞阻断 ,其 2 细胞胚的发育率达 10 0 % ,8 细胞胚发育率达 5 5 %以上 ;牛、羊上皮细胞培养液上清也能有效克服 2 细胞阻断。添加乳酸钠和丙酮酸钠可使 2细胞与 8细胞期胚的发育率显著提高。 (4)以D PBS +甘油 +蔗糖为冷冻液 ,以D PBS +蔗糖为稀释液 ,对小鼠胚胎进行快速冷冻 ,桑椹胚的存活率为 6 9 3% ,早期囊胚的存活率为 6 0 4 %。结论 研究为将生物技术应用于小鼠 。 展开更多
关键词 小鼠 体外受精 胚胎培养 胚胎快速冷冻 胚胎冷冻保存
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绵羊体外胚胎对移植受胎率及后代生长性能的影响 被引量:4
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作者 汪立芹 陈大勇 +4 位作者 周云 陈莹 林嘉鹏 吴阳升 黄俊成 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2018年第5期1076-1080,共5页
【目的】为了在不影响后代生产性能的基础上最大限度地提高体内、体外胚胎移植效率,从而为体外胚胎在生产中的应用奠定基础。【方法】从移植胚胎数量方面着手,比较其对体内、体外胚胎移植受胎率和产羔率的影响;并以常用的胚胎移植作为对... 【目的】为了在不影响后代生产性能的基础上最大限度地提高体内、体外胚胎移植效率,从而为体外胚胎在生产中的应用奠定基础。【方法】从移植胚胎数量方面着手,比较其对体内、体外胚胎移植受胎率和产羔率的影响;并以常用的胚胎移植作为对照,研究体外胚胎与其生产效率存在的差距;并对不同来源的后代生产性能进行测定,对比体外胚胎在生产中的生产效率。【结果】(1)移植2枚体外早期胚胎的受胎率(60.42%)显著高于移植1枚胚胎的结果(48.54%)(P<0.05),前者的产羔率也极显著高于后者(74.68%vs 41.96%,P<0.01);(2)移植单枚体外胚胎的受胎率和产羔率皆显著低于体内胚胎(P<0.05);(3)受体移植双枚体内或体外胚胎,受胎率和产羔率都没有差异(P>0.05)。(4)体外胚胎移植后代的公羔比例与体内胚胎没有差异,但显著高于自然繁殖(P<0.05)。(5)体外胚胎的后代虽然初生重要显著低于体内胚胎(4.98 vs 6.2,P<0.01),但其3月龄体重和存活率与体内胚胎后代皆没有差异(P>0.05),且与自然繁殖组间都没有差异(P>0.05)。【结论】相对于早期胚胎,体外胚胎移植2枚,体内胚胎移植1枚的生产效率较高。并且对后代生产性能没有影响。 展开更多
关键词 绵羊 体外胚胎 胚胎移植 受胎率 产羔率
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不同培养液对牛体细胞核移植胚胎发育的影响 被引量:5
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作者 熊显荣 王丽君 +4 位作者 王勇胜 许文兵 张辉 华松 张涌 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期11-16,共6页
旨在为牛体细胞克隆胚胎体外培养体系的建立奠定基础。利用体细胞核移植技术生产牛重构胚,将重构胚随机分成2组,分别用mSOF和G1.5/G2.5培养,统计2种培养液对牛核移植克隆胚胎发育的影响,用TUNEL荧光检测系统检测2个培养组胚胎细胞凋亡情... 旨在为牛体细胞克隆胚胎体外培养体系的建立奠定基础。利用体细胞核移植技术生产牛重构胚,将重构胚随机分成2组,分别用mSOF和G1.5/G2.5培养,统计2种培养液对牛核移植克隆胚胎发育的影响,用TUNEL荧光检测系统检测2个培养组胚胎细胞凋亡情况,同时用Real time RT-PCR检测热应激蛋白基因Hsp70和凋亡相关基因Bax在2个培养组的相对表达水平。两组的卵裂率分别为85.6%和87.0%、囊胚率分别为22.9%和27.1%,差异都不显著(P>0.05),但G1.5/G2.5组的8-细胞形成率显著高于mSOF组(P<0.05);mSOF组凋亡率为12.1%±1.9%,显著高于G1.5/G2.5组(P<0.05),G1.5/G2.5组的Hsp70和Bax相对表达量显著低于mSOF组(P<0.05)。结果表明,G1.5/G2.5培养液更有利于牛体细胞核移植胚胎的体外发育。 展开更多
关键词 体外发育 MSOF G1.5/G2.5 培养液
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β-巯基乙醇对牛孤雌胚胎发育的影响 被引量:4
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作者 舒建洪 张志鹏 +3 位作者 李向臣 华松 曹俊伟 张涌 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2008年第12期24-28,共5页
【目的】研究β-巯基乙醇(β-ME)对牛卵母细胞核成熟和孤雌胚胎发育的影响。【方法】向OMM和SOF中添加0,0.05,0.10和0.15mmol/L β-ME,并在牛卵母细胞激活后,分别于1-细胞期、8~16细胞期、桑葚胚期向SOF中添加0.1mmol/L β... 【目的】研究β-巯基乙醇(β-ME)对牛卵母细胞核成熟和孤雌胚胎发育的影响。【方法】向OMM和SOF中添加0,0.05,0.10和0.15mmol/L β-ME,并在牛卵母细胞激活后,分别于1-细胞期、8~16细胞期、桑葚胚期向SOF中添加0.1mmol/L β-ME,通过比较胚胎体外发育水平确定添加β-ME的最佳时期。【结果】β-ME对牛卵母细胞核成熟无显著影响(P〉0.05);0.05和0.10mmol/L β-ME均可显著提高牛孤雌胚胎的卵裂率及囊胚发育水平,但以0.10mmol/Lβ-ME添加组的效果较佳;牛孤雌胚胎发育到1-细胞期和8~16细胞期前,添加0.10mmol/L的β-ME,均可显著提高囊胚的发育水平(P〈0.05),但1-细胞期添加β-ME时的囊胚率、囊胚细胞数显著高于8~16细胞期组(P〈0.05),故1-细胞期是添加β-ME的最佳时机。【结论】β-ME对牛卵母细胞核成熟无促进作用,但可提高牛孤雌胚胎的卵裂率并促使囊胚发育,且在8~16细胞期前添加β-ME均可提高囊胚发育水平,但以1-细胞添加0.10mmol/Lβ-ME的促进效果最佳。 展开更多
关键词 β-巯基乙醇 孤雌激活 卵母细胞 胚胎培养
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肉苁蓉及淫羊藿对小鼠早期胚胎体外发育的影响 被引量:5
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作者 谢安 厉世伟 +1 位作者 李龙 况玲 《江西农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期955-959,1011,共6页
研究肉苁蓉及淫羊藿对小鼠早期胚胎体外发育的影响。试验选取6~8周龄昆明小鼠早期胚胎,以不添加中药培养液组为空白对照,分以下试验组:I组:早期胚胎在纯培养液M16+5%FBS(M1)与M16+5%FBS+EDTA+牛磺酸(M2)中的体外发育情况;Ⅱ组:早期胚... 研究肉苁蓉及淫羊藿对小鼠早期胚胎体外发育的影响。试验选取6~8周龄昆明小鼠早期胚胎,以不添加中药培养液组为空白对照,分以下试验组:I组:早期胚胎在纯培养液M16+5%FBS(M1)与M16+5%FBS+EDTA+牛磺酸(M2)中的体外发育情况;Ⅱ组:早期胚胎添加至中药体积浓度为0.1%的M1与M2培养液中。Ⅲ组:早期胚胎添加至不同体积浓度中药成分的培养液中。Ⅳ组:将早期胚胎加入中药不同组合体积浓度培养液中。试验结果:(1)M2液优于M1液,特别是在克服2细胞发育阻滞上。(2)添加0.1%肉苁蓉桑葚胚率与囊胚率高于0.1%淫羊藿组,差异极显著(P<0.01),中药组桑葚胚率与囊胚率显著高于培养液空白对照,差异极显著(P<0.01)。(3)高浓度中药会对胚胎活力产生副作用,抑制胚胎后阶段发育,与其他组对比差异极显著(P<0.01)。(4)添加高浓度中药组合培养液对早期胚胎成活率、2细胞发育率,与低浓度组合中药和空白组相比有显著差异性(P<0.05),与低浓度组合中药和空白对照相比桑葚胚及囊胚发育率差异极显著(P<0.01)。在小鼠胚胎体外培养液中添加一定浓度EDTA、牛磺酸能克服2细胞阻滞;0.1%肉苁蓉能有效促进胚胎体外发育,同时添加低浓度中药及低浓度组合中药也有促进作用。 展开更多
关键词 肉苁蓉 淫羊藿 卵母细胞 体外培养
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平皿-微滴法玻璃化冷冻保存小鼠胚胎 被引量:6
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作者 王果 马燕琳 +3 位作者 吕祁峰 郑多 戴和平 夏昆① 《湖南医科大学学报》 CSCD 北大核心 2002年第4期299-301,共3页
目的 :使用平皿 微滴法玻璃化冷冻小鼠 8~ 12细胞胚胎 ,检验该方法对胚胎的冻存效果。方法 :胚胎在EG2 0 中平衡 3min ,EFS4 0 中平衡 1min ,将含有胚胎的小于 0 .5 μl的EFS4 0 微滴吹于 35mm平皿上并立即直接浸入液氮保存。结果 :解... 目的 :使用平皿 微滴法玻璃化冷冻小鼠 8~ 12细胞胚胎 ,检验该方法对胚胎的冻存效果。方法 :胚胎在EG2 0 中平衡 3min ,EFS4 0 中平衡 1min ,将含有胚胎的小于 0 .5 μl的EFS4 0 微滴吹于 35mm平皿上并立即直接浸入液氮保存。结果 :解冻后胚胎回收率达到 98.1% ,透明带无破损 ,冷冻后存活率为 95 .2 %。冻融胚胎体外发育和体内发育能力与对照组胚胎比较差异无显著性 (84 .3%对 90 .1% ,12 .1%对 13.5 % ,P >0 .0 5 )。结论 :小鼠 8~ 12细胞胚胎可以用平皿 微滴法有效地进行玻璃化冻存。 展开更多
关键词 平皿-微滴法 玻璃化 冷冻保存 小鼠 胚胎
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猪卵泡液和胎牛血清对猪小腔卵泡卵母细胞体外成熟的影响 被引量:7
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作者 卢晟盛 杨秀荣 卢克焕 《河北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期100-104,共5页
本研究探讨了猪卵泡液(pFF)和胎牛血清(FCS)对猪小腔卵泡卵母细胞体外成熟的影响。将猪小腔卵泡(直径<2mm)卵母细胞-卵丘复合体(COCs)以15~35枚为一组随机置于添加不同浓度(0、5%、10%、20%)pFF(试验一)或不同浓度(0、5%、10%、20%)... 本研究探讨了猪卵泡液(pFF)和胎牛血清(FCS)对猪小腔卵泡卵母细胞体外成熟的影响。将猪小腔卵泡(直径<2mm)卵母细胞-卵丘复合体(COCs)以15~35枚为一组随机置于添加不同浓度(0、5%、10%、20%)pFF(试验一)或不同浓度(0、5%、10%、20%)FCS(试验二)的改良TCM-199成熟液中培养44~48h,观察卵母细胞的核成熟率和卵丘扩散情况。试验一结果显示,成熟液中添加10%pFF与对照组和添加5%、20%pFF组相比,显著提高猪小腔卵泡卵母细胞的核成熟率(28 2%比20 5%、20 9%、22 3%;p<0 05);添加5%和20%pFF组与对照组相比,它们的小腔卵泡卵母细胞核成熟率之间差异不显著(p>0 05);添加5%pFF组的COCs卵丘细胞呈现第3类扩散,添加10%和20%pFF组的COCs卵丘细胞呈现第4类扩散,而不添加pFF的对照组的COCs卵丘细胞呈现第2类扩散。试验二结果显示,成熟液中添加10%FCS与对照组和添加5%、20%FCS组相比,明显提高猪小腔卵泡卵细胞的核成熟率(60 0%比37 5%、40 2%、43 9%;p<0 05);添加5%和20%FCS组与对照组相比,它们的小腔卵泡卵细胞核成熟率之间差异不显著(p<0 05);FCS在COCs体外成熟培养的前22~24h促进了卵丘扩散(3个处理组的COCs卵丘细胞呈现第3类扩散,而对照组COCs的卵丘细胞呈现第2类扩散)。研究结果表明:(1) 展开更多
关键词 卵泡 卵母细胞 体外成熟
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东北主栽玉米自交系胚叶再生体系的建立 被引量:5
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作者 闵丽 李茫雪 +1 位作者 苍晶 赫福霞 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 2005年第4期412-416,共5页
取不同基因型的东北主栽玉米自交系胚叶3mm接种在诱导培养基上,研究东北主载的玉米胚叶再生体系的建立。结果表明,玉米胚叶愈伤组织的形成能力因其形态学部位的不同而呈显著差异,从基部向上依次递减;愈伤组织的形成还与基因型和植物激... 取不同基因型的东北主栽玉米自交系胚叶3mm接种在诱导培养基上,研究东北主载的玉米胚叶再生体系的建立。结果表明,玉米胚叶愈伤组织的形成能力因其形态学部位的不同而呈显著差异,从基部向上依次递减;愈伤组织的形成还与基因型和植物激素配比有关,其中,2,4-D是最重要的因素,加入一定浓度的AgNO3有利于愈伤组织的诱导。探讨了影响不定芽分化的因素,初步建立了玉米胚叶的再生体系。 展开更多
关键词 玉米胚叶 胚性愈伤组织 再生植株 基因型
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