【目的】目前国内外西尼罗病毒(West Nile virus,WNV)的核酸检测中缺乏安全、稳定的RNA标准参考样品,对检测结果的精确度和可信度造成一定的影响。本研究旨在研制一种安全稳定的WNV核酸检测质控品,为西尼罗热监测提供技术支持。【方法】...【目的】目前国内外西尼罗病毒(West Nile virus,WNV)的核酸检测中缺乏安全、稳定的RNA标准参考样品,对检测结果的精确度和可信度造成一定的影响。本研究旨在研制一种安全稳定的WNV核酸检测质控品,为西尼罗热监测提供技术支持。【方法】将WNV核酸检测靶基因、MS2噬菌体外壳蛋白CP及成熟酶蛋白A基因序列插入到表达载体得到重组质粒pET-CPA-WN,经转化、表达、纯化后,制备WNV装甲RNA质控品,并对其进行实时荧光定量PCR和数字PCR定量、均匀性及稳定性分析,评估其作为标准物质的可能性。【结果】PCR检测、双酶切和基因测序结果均显示已成功构建重组质粒pET-CPA-WN,表达纯化后得到了大小均一、直径为23~28 nm的病毒样颗粒。核酸酶消化后实时荧光定量PCR检测结果显示,颗粒溶液中几乎无核酸残余且形成了包封靶基因的装甲RNA;其定植结果为8.80×10~9拷贝/mL。稳定性试验结果表明,该装甲RNA可在37℃稳定保持20 d,随机抽取10个样本进行均匀性检验证明其均匀性良好。【结论】本研究基于MS2噬菌体制备的装甲RNA拷贝数高,均匀性和稳定性良好,可为WNV分子检测提供安全、稳定的参考样品。展开更多
植草混凝土细观结构是影响混凝土抗压强度的关键因素,研究其物理化学性能,对植生型多孔结构的混凝土性能提升具有重要意义。对植草混凝土进行了Rapid Air 457孔隙结构测定、SEM电镜、XRD衍射、力学性能试验与分析,结果表明:硅灰石粉和...植草混凝土细观结构是影响混凝土抗压强度的关键因素,研究其物理化学性能,对植生型多孔结构的混凝土性能提升具有重要意义。对植草混凝土进行了Rapid Air 457孔隙结构测定、SEM电镜、XRD衍射、力学性能试验与分析,结果表明:硅灰石粉和粉煤灰显著优化了植草混凝土的细观孔隙结构,随着硅灰石粉和粉煤灰掺量的增加,细观孔隙含量分别降低至0.85%和0.22%,平均孔径均可以减小至80μm以下,并引起间距系数发生改变,进而促使植草混凝土的28 d最大抗压强度分别提升至10.1 MPa和11.3 MPa。根据电镜和衍射试验结果,结合DES分析,发现植草混凝土中钙硅比减小,证实了2种掺合料的水化产物使得植草混凝土胶凝材料内部结构更加致密,并对植草混凝土抗压强度产生积极影响,填补了植草混凝土细观孔隙结构研究的空白。展开更多
黄曲霉毒素是花生油加工中的高风险污染物,其全产业链管控对保障食品安全和产业高质量发展具有重要意义。该文系统梳理了花生油全产业链黄曲霉毒素管控应用技术的研究进展,涵盖源头阻控、采购储运管控及加工端脱除等。源头阻控通过企业...黄曲霉毒素是花生油加工中的高风险污染物,其全产业链管控对保障食品安全和产业高质量发展具有重要意义。该文系统梳理了花生油全产业链黄曲霉毒素管控应用技术的研究进展,涵盖源头阻控、采购储运管控及加工端脱除等。源头阻控通过企业自建基地或订单种植模式,应用阻控黄曲霉及其毒素污染和促进结瘤固氮起耦合作用Aspergillus flavus/Aflatoxins and Rhizobia coupling(简称ARC)菌剂等生物防治技术实现。采购储运管控通过产地调研、样品检测和仓储参数优化降低污染风险。加工端脱除采用振动筛分、色选剔除、紫外降解、物理吸附及碱炼脱除等多技术联用实现毒素深度脱除。当前花生油黄曲霉毒素管控技术面临源头阻控稳定性不足、在线检测技术短板及智能化应用缺失等挑战。未来需加强源头生物阻控技术、在线检测技术开发、人工智能技术在全产业链中应用,为花生油质量安全提供系统性解决方案。展开更多
文摘【目的】目前国内外西尼罗病毒(West Nile virus,WNV)的核酸检测中缺乏安全、稳定的RNA标准参考样品,对检测结果的精确度和可信度造成一定的影响。本研究旨在研制一种安全稳定的WNV核酸检测质控品,为西尼罗热监测提供技术支持。【方法】将WNV核酸检测靶基因、MS2噬菌体外壳蛋白CP及成熟酶蛋白A基因序列插入到表达载体得到重组质粒pET-CPA-WN,经转化、表达、纯化后,制备WNV装甲RNA质控品,并对其进行实时荧光定量PCR和数字PCR定量、均匀性及稳定性分析,评估其作为标准物质的可能性。【结果】PCR检测、双酶切和基因测序结果均显示已成功构建重组质粒pET-CPA-WN,表达纯化后得到了大小均一、直径为23~28 nm的病毒样颗粒。核酸酶消化后实时荧光定量PCR检测结果显示,颗粒溶液中几乎无核酸残余且形成了包封靶基因的装甲RNA;其定植结果为8.80×10~9拷贝/mL。稳定性试验结果表明,该装甲RNA可在37℃稳定保持20 d,随机抽取10个样本进行均匀性检验证明其均匀性良好。【结论】本研究基于MS2噬菌体制备的装甲RNA拷贝数高,均匀性和稳定性良好,可为WNV分子检测提供安全、稳定的参考样品。
文摘黄曲霉毒素是花生油加工中的高风险污染物,其全产业链管控对保障食品安全和产业高质量发展具有重要意义。该文系统梳理了花生油全产业链黄曲霉毒素管控应用技术的研究进展,涵盖源头阻控、采购储运管控及加工端脱除等。源头阻控通过企业自建基地或订单种植模式,应用阻控黄曲霉及其毒素污染和促进结瘤固氮起耦合作用Aspergillus flavus/Aflatoxins and Rhizobia coupling(简称ARC)菌剂等生物防治技术实现。采购储运管控通过产地调研、样品检测和仓储参数优化降低污染风险。加工端脱除采用振动筛分、色选剔除、紫外降解、物理吸附及碱炼脱除等多技术联用实现毒素深度脱除。当前花生油黄曲霉毒素管控技术面临源头阻控稳定性不足、在线检测技术短板及智能化应用缺失等挑战。未来需加强源头生物阻控技术、在线检测技术开发、人工智能技术在全产业链中应用,为花生油质量安全提供系统性解决方案。
