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基于混菌耦合发酵策略合成3′-唾液酸乳糖
被引量：
1
1
作者
游星
郭进
+7 位作者
张洪涛
闫竞宇
chai wengang
周文
刘栗彤
黎玉
吴剑荣
詹晓北
《食品与发酵工业》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第17期8-14,共7页
唾液酸乳糖在婴幼儿配方奶粉产业展现出潜在、广阔的市场前景,但是目前缺少有效、廉价的合成方法。针对该问题,首先构建了2株工程菌JM109(DE3)/pET28a-neuA和JM109(DE3)/pET28a-nst,分别用于合成胞苷单磷酸-N-乙酰神经氨酸(cytidine 5′...
唾液酸乳糖在婴幼儿配方奶粉产业展现出潜在、广阔的市场前景,但是目前缺少有效、廉价的合成方法。针对该问题,首先构建了2株工程菌JM109(DE3)/pET28a-neuA和JM109(DE3)/pET28a-nst,分别用于合成胞苷单磷酸-N-乙酰神经氨酸(cytidine 5′-monophosphate N-acetylneuraminic acid,CMP-Neu5Ac)和3′-唾液酸乳糖;然后优化了JM109(DE3)/pET28a-neuA合成CMP-Neu5Ac体系;最后通过将啤酒酵母、JM109(DE3)/pET28a-neuA和JM109(DE3)/pET28a-nst耦合发酵,实现了3′-唾液酸乳糖的3菌株全细胞耦合催化合成。由于采用混菌耦合发酵策略来进行3′-唾液酸乳糖的生产,其生产模式不再像酶法一样繁琐和价格高昂,并且实现了CMP-Neu5Ac的高效再生和供给,为经济且规模化生产3′-唾液酸乳糖奠定了技术基础。
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关键词
CMP-Neu5Ac
3′-唾液酸乳糖
耦合发酵
生物合成
母乳寡糖
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职称材料
基于双菌耦合发酵策略的烟酰胺单核苷酸合成
2
作者
孙婷
张洪涛
+3 位作者
杨峰
柴文刚
薛皓阳
谭淑引
《食品科学》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2023年第24期201-210,共10页
本研究构建了分别含有烟酰胺核苷激酶(nicotinamideribosidekinase,NRK)和多聚磷酸酶(polyphosphatekinase,PPK)的双菌耦合发酵体系,实现了基于PPK的ATP再生系统在烟酰胺单核苷酸(nicotinamide mononucleotide,NMN)生产中的应用。首先...
本研究构建了分别含有烟酰胺核苷激酶(nicotinamideribosidekinase,NRK)和多聚磷酸酶(polyphosphatekinase,PPK)的双菌耦合发酵体系,实现了基于PPK的ATP再生系统在烟酰胺单核苷酸(nicotinamide mononucleotide,NMN)生产中的应用。首先分别构建表达NRK1和NRK2的工程菌株,筛选得到高活性的大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3)-pET28a-NRK1,NMN产量5.17 g/L,产率77.4%;然后对NRK1的诱导表达条件进行优化,发现低温16℃、异丙基-β-D-硫代半乳糖吡喃糖苷0.7 mmol/L、接种量3%、诱导时长22 h更利于蛋白的可溶性表达;进一步对E. coli BL21(DE3)-pET28a-NRK1合成NMN的最优体系进行探索,发现在菌体质量浓度100 g/L、温度18℃、时间12 h、ATP与烟酰胺核糖(nicotinamide riboside,NR)浓度比1∶1.5时,NMN产量最高为5.73 g/L,产率85.78%;最后,通过对E. coli BL21(DE3)pET28a-PPK和E. coli BL21(DE3)-pET28a-NRK1耦合发酵系统进行优化,得到最优体系为ATP与NR浓度比1∶3.5、菌体质量浓度比1∶2、发酵时间16 h,NMN产量达11.81 g/L。本研究所建立的高密度双菌耦合发酵产NMN工艺为高效、低成本的大规模发酵生产NMN开辟了新途径。
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关键词
烟酰胺单核苷酸
烟酰胺核苷激酶
多聚磷酸酶
ATP再生
耦合发酵
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职称材料
题名
基于混菌耦合发酵策略合成3′-唾液酸乳糖
被引量：
1
1
作者
游星
郭进
张洪涛
闫竞宇
chai wengang
周文
刘栗彤
黎玉
吴剑荣
詹晓北
机构
糖化学与生物技术教育部重点实验室
中国科学院大连物理化学研究所
Glycoscience Laboratory
出处
《食品与发酵工业》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第17期8-14,共7页
基金
江苏省研究生科研与实践创新计划项目(SJCX20-0744)
国家自然科学基金面上项目(21778022)
+2 种基金
国家博士后特别资助项目(2014T70472)
国家博士后基金项目(2012M20996)
江苏省博士后基金项目(1301011B)。
文摘
唾液酸乳糖在婴幼儿配方奶粉产业展现出潜在、广阔的市场前景,但是目前缺少有效、廉价的合成方法。针对该问题,首先构建了2株工程菌JM109(DE3)/pET28a-neuA和JM109(DE3)/pET28a-nst,分别用于合成胞苷单磷酸-N-乙酰神经氨酸(cytidine 5′-monophosphate N-acetylneuraminic acid,CMP-Neu5Ac)和3′-唾液酸乳糖;然后优化了JM109(DE3)/pET28a-neuA合成CMP-Neu5Ac体系;最后通过将啤酒酵母、JM109(DE3)/pET28a-neuA和JM109(DE3)/pET28a-nst耦合发酵,实现了3′-唾液酸乳糖的3菌株全细胞耦合催化合成。由于采用混菌耦合发酵策略来进行3′-唾液酸乳糖的生产,其生产模式不再像酶法一样繁琐和价格高昂,并且实现了CMP-Neu5Ac的高效再生和供给,为经济且规模化生产3′-唾液酸乳糖奠定了技术基础。
关键词
CMP-Neu5Ac
3′-唾液酸乳糖
耦合发酵
生物合成
母乳寡糖
Keywords
CMP-Neu5Ac
3′-sialyllactose
coupling fermentation
biosynthesis
human milk oligosaccharides
分类号
TS201.3 [轻工技术与工程—食品科学]
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职称材料
题名
基于双菌耦合发酵策略的烟酰胺单核苷酸合成
2
作者
孙婷
张洪涛
杨峰
柴文刚
薛皓阳
谭淑引
机构
江南大学工业生物技术教育部重点实验室
海军军医大学药学系无机化学教研室
伦敦帝国理工学院医学院
江南大学化工学院
出处
《食品科学》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2023年第24期201-210,共10页
基金
解放军后勤保障部开放课题(ZZCWS21J2001)。
文摘
本研究构建了分别含有烟酰胺核苷激酶(nicotinamideribosidekinase,NRK)和多聚磷酸酶(polyphosphatekinase,PPK)的双菌耦合发酵体系,实现了基于PPK的ATP再生系统在烟酰胺单核苷酸(nicotinamide mononucleotide,NMN)生产中的应用。首先分别构建表达NRK1和NRK2的工程菌株,筛选得到高活性的大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3)-pET28a-NRK1,NMN产量5.17 g/L,产率77.4%;然后对NRK1的诱导表达条件进行优化,发现低温16℃、异丙基-β-D-硫代半乳糖吡喃糖苷0.7 mmol/L、接种量3%、诱导时长22 h更利于蛋白的可溶性表达;进一步对E. coli BL21(DE3)-pET28a-NRK1合成NMN的最优体系进行探索,发现在菌体质量浓度100 g/L、温度18℃、时间12 h、ATP与烟酰胺核糖(nicotinamide riboside,NR)浓度比1∶1.5时,NMN产量最高为5.73 g/L,产率85.78%;最后,通过对E. coli BL21(DE3)pET28a-PPK和E. coli BL21(DE3)-pET28a-NRK1耦合发酵系统进行优化,得到最优体系为ATP与NR浓度比1∶3.5、菌体质量浓度比1∶2、发酵时间16 h,NMN产量达11.81 g/L。本研究所建立的高密度双菌耦合发酵产NMN工艺为高效、低成本的大规模发酵生产NMN开辟了新途径。
关键词
烟酰胺单核苷酸
烟酰胺核苷激酶
多聚磷酸酶
ATP再生
耦合发酵
Keywords
nicotinamide mononucleotide
nicotinamide nucleoside kinase
polyphosphate kinase
ATP regeneration
coupled fermentation
分类号
Q815 [生物学—生物工程]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
基于混菌耦合发酵策略合成3′-唾液酸乳糖
游星
郭进
张洪涛
闫竞宇
chai wengang
周文
刘栗彤
黎玉
吴剑荣
詹晓北
《食品与发酵工业》
CAS
CSCD
北大核心
2021
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
基于双菌耦合发酵策略的烟酰胺单核苷酸合成
孙婷
张洪涛
杨峰
柴文刚
薛皓阳
谭淑引
《食品科学》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2023
0
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