-
题名刺梨及其近缘种PCR实验体系的建立与优化
被引量：23
- 1
-
-
作者
文晓鹏
2邓秀新
-
机构
华中农业大学作物遗传改良国家重点实验室
贵州大学农学院
-
出处
《果树学报》
CAS
CSCD
北大核心
2003年第1期35-39,共5页
-
基金
国家自然科学基金
贵州省自然科学基金资助项目。
-
文摘
以刺梨及其近缘种月季为试材,进行了RAPD-PCR实验参数的确立和优化试验。结果表明,刺梨及月季25μL反应体系的最优组成为2.5μL10×反应缓冲液,2mmol/LMg2+,0.2mmol/LdNTP,1.6mg/L模板DNA,0.4μmol/L随机引物和1.2UTaqDNA多聚酶。经PCR扩增验证,此反应体系亦适宜于刺梨的部分近缘种,可有效用于RAPD分析;通过将退火温度提高至50℃或采用“Touchdown”扩增程序,并在50μL反应体系中适当增加特异引物对浓度(1.0μmol/L),模板DNA(4.0mg/L)和TaqDNA多聚酶(3.0U/管)的使用量,建立起适合于刺梨特异DNA片段检测及回收的特异PCR扩增实验体系,为刺梨的分子克隆奠定了技术基础。
-
关键词
刺梨
近缘种
PCR扩增
实验体系
-
Keywords
Rosa roxburghii Tratt
Relatives
PCR amplification
Experimental system
-
分类号
S661.2
[农业科学—果树学]
-
