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不同条件对肿瘤球制备单细胞效果的评价
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作者 杨璐璐 张永卓 +2 位作者 龚晓云 薛志超 申屠旭萍 《计量学报》 北大核心 2025年第2期298-308,共11页
不同的单细胞分离、制备技术会直接影响着细胞状态和生理功能,最终导致相关研究的偏倚。通过培养一致性较强的肿瘤球作为研究模型,采用4种分离方法包括水浴法、金属浴法、机械法、优化水浴法,和3种分解酶包括胶原酶、胰蛋白酶和人肿瘤... 不同的单细胞分离、制备技术会直接影响着细胞状态和生理功能,最终导致相关研究的偏倚。通过培养一致性较强的肿瘤球作为研究模型,采用4种分离方法包括水浴法、金属浴法、机械法、优化水浴法,和3种分解酶包括胶原酶、胰蛋白酶和人肿瘤温和酶解试剂盒来分离多组单细胞样本群并对单细胞数量、活率、代谢产物、药物通路等关键指标进行研究。结果显示,优化水浴法的单细胞活率最高,为(90.27±8.56)%,而在分解酶方面胰蛋白酶表现最佳,单细胞活率为(93.20±3.84)%,获得的细胞数量最多。胶原酶制备的单细胞增殖克隆能力最强,且与肿瘤球相比表达改变的代谢物数量少,接近肿瘤球的真实状态。胰蛋白酶制备的单细胞中参与甲硫代谢的代谢物表达下调,降低癌细胞对药物的敏感度,影响药物效果的评估。 展开更多
关键词 生物计量 肿瘤球 单细胞制备 质谱 代谢组
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接种数量对细胞生长和药物作用的影响及细胞计数方法对比 被引量:3
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作者 薛志超 曾嘉明 +4 位作者 李永淑 赵佳威 赵洋 戴新华 龚晓云 《计量学报》 CSCD 北大核心 2023年第3期341-349,共9页
以海拉细胞作为研究对象,对细胞数量差异引起的细胞生长速率变化以及对药物效果的影响展开研究。实验结果表明细胞起始数量越多,贴壁后密度越大,生长速率越快,并且药物对其生长的抑制作用越低。因此,准确地细胞计数是生物学实验的关键... 以海拉细胞作为研究对象,对细胞数量差异引起的细胞生长速率变化以及对药物效果的影响展开研究。实验结果表明细胞起始数量越多,贴壁后密度越大,生长速率越快,并且药物对其生长的抑制作用越低。因此,准确地细胞计数是生物学实验的关键。比较了3种常用细胞计数方法:细胞计数板法、细胞计数仪法、流式细胞仪法,结果显示其线性相关系数R^(2)分别为0.983 5,0.999 7和0.996 0,同等条件下,细胞计数仪具有最高的准确性。同时也对结晶紫染色、底面积拍照、蛋白质含量估算和蛋白质内参GAPDH测量等间接方法进行评估,为生物学实验过程中的细胞数量测算提供数据参考。 展开更多
关键词 计量学 细胞计量 细胞数量 生长速率 细胞计数板法 细胞计数仪法 流式细胞仪法
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基于Hela细胞的失巢凋亡现象时序评价模型的建立及测量验证方法研究 被引量:1
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作者 薛志超 曾嘉明 +3 位作者 龚晓云 薛倩 戴新华 赵洋 《计量学报》 CSCD 北大核心 2023年第10期1612-1616,共5页
失巢凋亡作为一种特殊的程序化细胞死亡形式,在机体发育、组织自身平衡、疾病发生和肿瘤转移中起重要作用。利用贴壁增殖表皮细胞系海拉(Hela)细胞作为模型,通过对比贴壁细胞悬浮后悬浮时间对细胞活性的影响,深入探讨了细胞失巢凋亡现... 失巢凋亡作为一种特殊的程序化细胞死亡形式,在机体发育、组织自身平衡、疾病发生和肿瘤转移中起重要作用。利用贴壁增殖表皮细胞系海拉(Hela)细胞作为模型,通过对比贴壁细胞悬浮后悬浮时间对细胞活性的影响,深入探讨了细胞失巢凋亡现象。研究考察了悬浮5 min、30 min、1 h, 2 h, 4 h和8 h后的活细胞数量,以及重新贴壁培养后对细胞活性(即贴壁24 h后活细胞增殖数量)的影响。结果表明:悬浮时间可导致海拉细胞数量减少及活性降低,在细胞实验过程中应当严格控制悬浮细胞接种时长。 展开更多
关键词 计量学 生命科学计量 细胞数量 细胞活性 细胞测量 失巢凋亡 HELA细胞 悬浮时间
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25-羟基维生素D检测方法研究进展 被引量:11
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作者 曾伟杰 谢洁 +8 位作者 龚晓云 翟睿 黄泽建 刘梅英 徐锐峰 江游 戴新华 方向 时国庆 《食品安全质量检测学报》 CAS 2019年第11期3419-3429,共11页
维生素D(vitamin D,VD)是人体内一种重要的调节因子,除参与人体内钙磷代谢,其在高血压、心血管疾病、肿瘤及糖尿病等疾病中也扮演着重要角色。25羟基维生素D(25-hydroxy vitamin D,25(OH)D)是VD在人体内的主要存在形式,性质稳定(半衰期2... 维生素D(vitamin D,VD)是人体内一种重要的调节因子,除参与人体内钙磷代谢,其在高血压、心血管疾病、肿瘤及糖尿病等疾病中也扮演着重要角色。25羟基维生素D(25-hydroxy vitamin D,25(OH)D)是VD在人体内的主要存在形式,性质稳定(半衰期2周),其水平能充分反映食物摄入和自身合成VD总量,在精准药物治疗与营养膳食理念方面具有重要意义,因此,需要高准确测定25(OH)D浓度水平。本文综述了25(OH)D的前处理方法和检测方法,主要包括放射免疫法、酶联免疫吸附法、化学发光免疫测定法、高效液相色谱法和液相色谱-串联质谱法,并展望了其发展趋势。 展开更多
关键词 25-羟基维生素 D 合成及代谢途径 前处理方法 检测方法
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动物源性食品中喹噁啉类药物及其代谢物残留检测技术研究进展 被引量:9
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作者 谢洁 龚晓云 +6 位作者 翟睿 江游 黄泽建 张晶 戴新华 邵兵 方向 《食品安全质量检测学报》 CAS 2018年第15期3958-3963,共6页
喹噁啉类药物是一类具有抗菌活性的物质,同时具有促进蛋白质同化,增加瘦肉率,促进畜禽生长以及提高饲料转化率的作用,曾被用于猪、牛、鸡、羊的促生长。这类药物残留在畜禽产品中,可通过食物链进入人体。毒理学研究表明,喹乙醇(olaquind... 喹噁啉类药物是一类具有抗菌活性的物质,同时具有促进蛋白质同化,增加瘦肉率,促进畜禽生长以及提高饲料转化率的作用,曾被用于猪、牛、鸡、羊的促生长。这类药物残留在畜禽产品中,可通过食物链进入人体。毒理学研究表明,喹乙醇(olaquindox,OLA)和卡巴氧(carbadox,CBX)具有明显的致癌、致畸、致突变的三致作用,严重威胁动物和人的健康安全。本文对喹噁啉类药物及其代谢物的危害和动物源性食品中的残留检测技术进行了综述及展望。 展开更多
关键词 喹噁啉类药物 代谢物 动物源性食品 残留检测
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液相色谱-串联质谱法同时测定猪肉中3种β-受体激动剂的残留量 被引量:2
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作者 易可可 谢洁 +8 位作者 江游 乔晓婷 龚晓云 黄泽建 翟睿 彭涛 戴新华 方向 时国庆 《食品安全质量检测学报》 CAS 2020年第16期5562-5568,共7页
目的建立液相色谱-串联质谱法(liquid chromatography-tandem mass spectrometry,LC-MS/MS)同时测定猪肉中3种β-受体激动剂类药物(沙丁胺醇、莱克多巴胺、克伦特罗)的检测方法。方法制备的样品用含1%乙酸的乙腈提取,正己烷去脂后,采用Z... 目的建立液相色谱-串联质谱法(liquid chromatography-tandem mass spectrometry,LC-MS/MS)同时测定猪肉中3种β-受体激动剂类药物(沙丁胺醇、莱克多巴胺、克伦特罗)的检测方法。方法制备的样品用含1%乙酸的乙腈提取,正己烷去脂后,采用ZORBAX SB-C18色谱分离,采用乙腈-0.1%甲酸(含5 mmol/L乙酸铵)梯度洗脱,多反应监测模式定量。结果本方法在12 min内完成3种目标化合物的分离分析。方法的检出限为0.003~0.015μg/kg,定量限为0.01~0.05μg/kg。在0.01~5μg/kg的添加范围内,动物肌肉组织中添加回收率为71.6%~112.6%,相对标准偏差为7.2%~16.9%。结论该方法快速、准确、灵敏,适合同时定量猪肉中3种β-受体激动剂类药物残留测定。 展开更多
关键词 动物源性食品 液相色谱-串联质谱法 禁用兽药
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