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植烟土壤中枯萎病菌和黑胫病菌的快速检测方法
被引量:
5
1
作者
张纪利
齐是
+5 位作者
栾新博
金亚波
黄崇峻
黎平
韦建玉
颜健
《广东农业科学》
CAS
2022年第2期101-108,共8页
【目的】枯萎病和烟草黑胫病是植烟土壤中最为常见的主要土传病害,为害严重,建立植烟土壤中两种病原菌尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)和烟草疫霉菌(Phytophthora parasitica var.nicotianae)快速检测方法,为烟草种植过程中病害流行与...
【目的】枯萎病和烟草黑胫病是植烟土壤中最为常见的主要土传病害,为害严重,建立植烟土壤中两种病原菌尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)和烟草疫霉菌(Phytophthora parasitica var.nicotianae)快速检测方法,为烟草种植过程中病害流行与治理提供技术支持,保障烟草行业的稳定生产。【方法】以采集广西百色地区土传病害土壤与健康土壤为测试材料,以标准病原菌为参考模板建立标准曲线,利用尖孢镰刀菌和烟草疫霉菌的保守区域设计的引物,根据目标条带及荧光定量PCR(qPCR)的溶解曲线与循环阈值(Ct值)筛选出特异性引物;同时,改进土壤中微生物DNA试剂盒提取方法,建立PCR和qPCR检测体系。【结果】分别筛选出一对尖孢镰刀菌和烟草疫霉菌的特异性的引物Pn3和JBR,模板浓度在1×10^(2)~1×10^(-4)ng之间,具有良好的线性关系,两种病原菌的DNA数量在发病土壤高于健康土壤。风干土壤并研磨再加两次洗脱有助于提取土壤中病原菌的DNA,建立了以普通PCR预扩增反应得到的产物作为模板的qPCR检测方法。【结论】PCR和qPCR联用技术能快速地分辨和检测尖孢镰刀菌和烟草疫霉菌,对枯萎病和烟草黑胫病实时监测和前期预警具有重要作用。
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关键词
土传病害
枯萎病
黑胫病
烟草
荧光定量PCR
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职称材料
题名
植烟土壤中枯萎病菌和黑胫病菌的快速检测方法
被引量:
5
1
作者
张纪利
齐是
栾新博
金亚波
黄崇峻
黎平
韦建玉
颜健
机构
广西中烟工业有限责任公司
华南农业大学资源环境学院/农业农村部华南热带农业环境重点实验室/广东省生态循环农业重点实验室/广东省现代生态农业与循环农业工程技术研究中心
出处
《广东农业科学》
CAS
2022年第2期101-108,共8页
基金
广西中烟工业有限公司项目(2020450000340022)。
文摘
【目的】枯萎病和烟草黑胫病是植烟土壤中最为常见的主要土传病害,为害严重,建立植烟土壤中两种病原菌尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)和烟草疫霉菌(Phytophthora parasitica var.nicotianae)快速检测方法,为烟草种植过程中病害流行与治理提供技术支持,保障烟草行业的稳定生产。【方法】以采集广西百色地区土传病害土壤与健康土壤为测试材料,以标准病原菌为参考模板建立标准曲线,利用尖孢镰刀菌和烟草疫霉菌的保守区域设计的引物,根据目标条带及荧光定量PCR(qPCR)的溶解曲线与循环阈值(Ct值)筛选出特异性引物;同时,改进土壤中微生物DNA试剂盒提取方法,建立PCR和qPCR检测体系。【结果】分别筛选出一对尖孢镰刀菌和烟草疫霉菌的特异性的引物Pn3和JBR,模板浓度在1×10^(2)~1×10^(-4)ng之间,具有良好的线性关系,两种病原菌的DNA数量在发病土壤高于健康土壤。风干土壤并研磨再加两次洗脱有助于提取土壤中病原菌的DNA,建立了以普通PCR预扩增反应得到的产物作为模板的qPCR检测方法。【结论】PCR和qPCR联用技术能快速地分辨和检测尖孢镰刀菌和烟草疫霉菌,对枯萎病和烟草黑胫病实时监测和前期预警具有重要作用。
关键词
土传病害
枯萎病
黑胫病
烟草
荧光定量PCR
Keywords
soil-borne disease
fusarium wilt
tobacco black shank
tobacco
fluorescence quantitative PCR
分类号
S432.44 [农业科学—植物病理学]
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作者
出处
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被引量
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1
植烟土壤中枯萎病菌和黑胫病菌的快速检测方法
张纪利
齐是
栾新博
金亚波
黄崇峻
黎平
韦建玉
颜健
《广东农业科学》
CAS
2022
5
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