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MYCN过表达诱导的视网膜肿瘤发展过程中的细胞特征及关键蛋白
1
作者 盖鑫冉 徐佳爱 +3 位作者 车虹昱 王祥 杨春华 齐东来 《眼科新进展》 北大核心 2025年第3期190-195,共6页
目的 研究MYCN过表达诱导的视网膜肿瘤发展过程中的细胞特征,寻找在此过程中发挥重要作用的关键蛋白。方法 选择在体外培养1年和2年的T-MYCN细胞(分别为T-MYCN Y1细胞和T-MYCN Y2细胞),组成后续实验的T-MYCN Y1组和T-MYCN Y2组细胞。WER... 目的 研究MYCN过表达诱导的视网膜肿瘤发展过程中的细胞特征,寻找在此过程中发挥重要作用的关键蛋白。方法 选择在体外培养1年和2年的T-MYCN细胞(分别为T-MYCN Y1细胞和T-MYCN Y2细胞),组成后续实验的T-MYCN Y1组和T-MYCN Y2组细胞。WERI-Rb-1细胞系从中国科学院上海细胞库获得,作为成熟RB对照组(WERI-Rb-1组);未经处理的人正常视网膜组织作为对照组。将细胞按照每孔1×10~4个细胞接种于24孔板,在显微镜下观察细胞形态并采集图像;在接种后第4、8、12天进行细胞计数。使用免疫荧光染色检测各组细胞增殖标记物Ki67和视锥细胞标记物L/M opsin的表达;采用qRT-PCR检测各组细胞中MYCN、CCNB1、CDK1、SYK和RXRγ的表达情况;通过蛋白质组学分析各组细胞间蛋白表达谱差异并筛选关键调控基因;采用慢病毒敲低OTX2表达后检测各组细胞的生长增殖能力。结果 生长曲线显示,在体外培养第12天,T-MYCN Y1组、T-MYCN Y2组和WERI-Rb-1组细胞数量分别为(59.17±4.01)×10~4个、(85.14±4.54)×10~4个、(100.73±1.99)×10~4个(均为P<0.05)。与对照组相比,T-MYCN Y1组、T-MYCN Y2组和WERI-Rb-1组Ki67和L/M opsin阳性细胞率均增加(均为P<0.001)。与对照组相比,T-MYCN Y1组、T-MYCN Y2组和WERI-Rb-1组细胞的MYCN mRNA相对表达量均显著升高(均为P<0.001),CCNB1和CDK1 mRNA相对表达量亦均升高(均为P<0.01)。与对照组相比,T-MYCN Y1组细胞的SYK mRNA相对表达量无明显变化(P>0.05),RXRγ mRNA相对表达量显著升高(P<0.05);T-MYCN Y2组和WERI-Rb-1组细胞的SYK、RXRγ mRNA相对表达量均显著升高(均为P<0.05)。GO富集分析显示这些差异蛋白富集到蛋白质复合体组装和线粒体等通路;KEGG富集分析显示这些差异蛋白富集到碳代谢、代谢途径和脂肪酸降解等通路。蛋白质组学和Western blot分析结果均显示,OTX2在WERI-Rb-1组细胞中表达水平最高,其次为T-MYCN Y2组细胞,T-MYCN Y1组细胞最低。qRT-PCR结果显示,在T-MYCN Y1组、T-MYCN Y2组和WERI-Rb-1组细胞中,与空载对照组相比,OTX2敲低组的OTX2 mRNA相对表达量均下降(均为P<0.05);细胞生长曲线显示,在三组细胞中敲低OTX2后,细胞的生长增殖能力均下降,差异均有统计学意义(均为P<0.001)。结论 MYCN过表达诱导的视网膜肿瘤发展过程中,细胞逐渐呈现出与WERI-Rb-1细胞类似的视网膜母细胞瘤特征;OTX2在MYCN扩增或高表达RB的生长增殖中发挥重要作用,靶向OTX2可能成为治疗RB新的研究方向。 展开更多
关键词 视网膜母细胞瘤 MYCN WERI-Rb-1 蛋白质组学 OTX2
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中原油田文101区块开窗侧钻钻井液技术 被引量：9
2
作者 杨国涛 马文英 +2 位作者 卢国林 钟灵 齐东来 《钻井液与完井液》 CAS 2011年第6期84-87,97,共4页
针对中原油田文101区块地层压力系数不可靠、砂岩地层掉块、出水和井漏等问题,优选抗盐两性离子磺酸盐聚合物CPS-2000、聚合铝防塌剂AOP-1、防塌润滑剂JHF-2等处理剂配制成了聚合物钻井液。该钻井液性能稳定、抑制性强和润滑性好,且防... 针对中原油田文101区块地层压力系数不可靠、砂岩地层掉块、出水和井漏等问题,优选抗盐两性离子磺酸盐聚合物CPS-2000、聚合铝防塌剂AOP-1、防塌润滑剂JHF-2等处理剂配制成了聚合物钻井液。该钻井液性能稳定、抑制性强和润滑性好,且防塌效果明显,满足开窗侧钻小井眼钻井的需求。在文101-侧17井、文101-侧49井和文284侧井的施工过程中,井壁稳定,井径规则,井径扩大率小,电测和下套管均一次性成功。 展开更多
关键词 小井眼 开窗侧钻 钻井液技术
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壳寡糖铁(Ⅲ)配位产物的合成与表征 被引量：4
3
作者 徐进云 贾辉 +1 位作者 杨俊玲 齐东来 《天津工业大学学报》 CAS 北大核心 2017年第2期25-30,共6页
为了探究壳寡糖铁(Ⅲ)的配位结构和最佳合成条件,通过自制壳寡糖(黏均相对分子质量<1 000)与FeCl_3溶液的反应,合成了壳寡糖铁(Ⅲ)配合物.采用可见分光光度计测定反应前后溶液中Fe^(3+)浓度的变化,探究溶液pH值、反应温度以及反应时... 为了探究壳寡糖铁(Ⅲ)的配位结构和最佳合成条件,通过自制壳寡糖(黏均相对分子质量<1 000)与FeCl_3溶液的反应,合成了壳寡糖铁(Ⅲ)配合物.采用可见分光光度计测定反应前后溶液中Fe^(3+)浓度的变化,探究溶液pH值、反应温度以及反应时间对Fe^(3+)与壳寡糖配位反应的影响.利用紫外光谱(UV)、红外光谱(IR)、差热与热重分析(TGA-DSC)、元素分析(EI)等方法对配合物进行表征.结果表明:Fe^(3+)参与反应的配位量随着pH增加而增大,当pH>3.5时Fe^(3+)形成沉淀导致配位反应无法进行;Fe^(3+)参与反应的配位量随着反应时间的延长和反应温度的提高而增大,直至配位反应趋于平衡,考虑到实际生产周期和能源消耗,选择最佳反应时间为60 min,最适宜反应温度为40℃;形成的配合物热稳定性较壳寡糖本身的热稳定性有所提高,配合物中壳寡糖与Fe^(3+)的摩尔配位比为3∶1,并由此确定了配合物的结构式. 展开更多
关键词 壳寡糖铁(Ⅲ)配合物 pH值影响 Fe^3+浓度 表征 配位比
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喷丝板脱模剂的合成工艺 被引量：3
4
作者 杨俊玲 徐明明 齐东来 《天津工业大学学报》 CAS 北大核心 2017年第2期42-47,共6页
为获得绿色环保的喷丝板脱模剂,以环己烷代替传统工艺中的苯作为溶剂,以二甲基硅油、含氢硅油和苯基硅油为原料,合成喷丝板脱模剂,研究了喷丝板脱模剂的最佳合成工艺,并测试其应用性能,同时用傅里叶红外光谱仪及核磁共振仪对喷丝板脱模... 为获得绿色环保的喷丝板脱模剂,以环己烷代替传统工艺中的苯作为溶剂,以二甲基硅油、含氢硅油和苯基硅油为原料,合成喷丝板脱模剂,研究了喷丝板脱模剂的最佳合成工艺,并测试其应用性能,同时用傅里叶红外光谱仪及核磁共振仪对喷丝板脱模剂的结构进行表征.结果表明:环己烷与催化反应原料有很好的相容性,可替代传统工艺中毒性较大的苯作为绿色环保型溶剂;喷丝板脱模剂的最佳合成工艺条件为温度265℃,时间3 h,催化剂用量为0.2 g,二甲基硅油90 mL,苯基硅油20 mL,含氢硅油3 mL,环己烷50 mL;所合成的喷丝板脱模剂热失重率为3.11%(<5%),闪点330℃,成膜时间20 s以下,实际保板时间72 h,雾化效果好,高温下成膜迅速,可较好地应用于实际生产中. 展开更多
关键词 二曱基硅油 喷丝板脱模剂 合成工艺
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不同类型人工晶状体植入术后双眼视功能差异分析 被引量：1
5
作者 李锦玉 孙斌 +2 位作者 杨春华 齐东来 姜善好 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2024年第7期544-548,共5页
目的比较植入不同类型人工晶状体(IOL)后双眼视功能的差异。方法选择2021年10月至2023年6月于滨州医学院烟台附属医院行白内障超声乳化联合IOL植入术的年龄相关性白内障患者63例(126眼)为研究对象,其中双眼均植入单焦点IOL患者22例(44眼... 目的比较植入不同类型人工晶状体(IOL)后双眼视功能的差异。方法选择2021年10月至2023年6月于滨州医学院烟台附属医院行白内障超声乳化联合IOL植入术的年龄相关性白内障患者63例(126眼)为研究对象,其中双眼均植入单焦点IOL患者22例(44眼)为单焦点组,双眼分别植入单焦点和多焦点IOL患者21例(42眼)为混合组,双眼均植入多焦点IOL患者20例(40眼)为多焦点组,选择同期本院健康体检中心生理性老视受试者22例(44眼)作为对照组。术后随访3个月,记录并对比4组受试者双眼裸眼远视力(UDVA)、裸眼近视力(UNVA)、离焦曲线、调节幅度(AMP)、正相对调节(PRA)、负相对调节(NRA)、调节反应(BCC)、调节性集合/调节比值(AC/A)、集合近点(NPC)破裂点、远/近距离正融像性聚散(PFV)和负融像性聚散(NFV)破裂点以及立体视。结果随访3个月,4组受试者UDVA差异无统计学意义(P>0.05),多焦点组和混合组患者的UNVA优于对照组和单焦点组(均为P<0.05)。混合组和多焦点组患者离焦曲线呈双峰状。4组受试者的AMP、NRA、PRA和BCC差异均具有统计学意义(均为P<0.05);4组受试者的AC/A和远距离NFV、PFV破裂点差异均无统计学意义(均为P>0.05),NPC破裂点和近距离NFV、PFV破裂点差异均有统计学意义(均为P<0.05)。4组受试者间远距离立体视正常人数占比差异无统计学意义(P>0.05),混合组患者近距离立体视正常人数占比显著低于其他3组受试者(均为P<0.05)。结论多焦点IOL能够有效改善白内障患者术后UDVA和UNVA,双眼植入多焦点IOL有利于白内障患者术后在远距离和近距离条件下双眼视功能的重建,双眼混合植入单焦点和多焦点IOL短期内可影响患者近距离立体视功能的恢复。 展开更多
关键词 白内障 人工晶状体 视功能 离焦曲线 双眼视功能
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