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题名落叶松LkTCTP启动子的克隆及表达分析
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作者
黄雨芹
张如鑫
张馨元
王俊臣
齐力旺
张立峰
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机构
中国林业科学研究院林业研究所
河北农业大学生命科学学院
北京林业大学林学院
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出处
《林业科学研究》
北大核心
2025年第2期48-57,共10页
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基金
农业生物育种国家科技重大专项(2023ZD04058)
国家自然基金项目(32171811)
中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金项目(CAFYBB2019SY011)。
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文摘
[目的]通过研究落叶松LkTCTP及其启动子的表达特性,揭示该基因在体细胞胚发育中的功能,评估它作为组成型启动子的可行性。[方法]利用染色体步移技术,获得LkTCTP启动子序列;采用qRT-PCR检测其在不同温度、激素处理下的表达模式;构建2.0 kb的LkTCTP启动子融合GUS载体,在模式植物及落叶松中研究其启动子活性及组织定位。[结果]获得了长度约为3.0 kb的LkTCTP启动子序列,生物信息学预测该区域含有多个与激素和抗逆相关的顺式作用元件,如AuxRR-core/TGA-element、TATC-box、TCA-element、LTR、MBS/TC-rich repeats等;高温(42、37℃)和激素(75μmol·L^(-1)ABA、50μmol·L^(-1)GA、50μmol·L^(-1)IAA、50μmol·L^(-1)SA)处理均可诱导LkTCTP上调;LkTCTP 2.0 kb启动子在拟南芥中驱动GUS呈组成型表达,也可用于目的蛋白的亚细胞定位研究;落叶松胚性细胞瞬时侵染6 d时表现出明显的GUS染色,引入P19蛋白可增加外源基因的表达强度;转基因体细胞胚苗的子叶、下胚轴以及根部均可观察到GUS染色,且子叶基部表达量明显高于叶尖,但在落叶松中的表达具有组织特异性。[结论]本文克隆了LkTCTP的启动子序列,发现其表达水平受温度、激素影响;在拟南芥幼苗及落叶松体细胞胚发育阶段均呈组成型表达,但在落叶松幼苗的表达具有组织特异性。上述结果表明LkTCTP参与落叶松体细胞胚发育,揭示了其启动子作为组成型启动子的应用潜力。本研究为开发适用于落叶松的基因工程元件提供理论依据。
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关键词
落叶松
TCTP
启动子克隆
体细胞胚
表达分析
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Keywords
Larix
TCTP
promoter cloning
somatic embryogenesis
expression analysis
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分类号
S791.223
[农业科学—林木遗传育种]
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题名轻基质类型及配比对闽楠嫩枝扦插生根的影响
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作者
黄雨芹
徐振鑫
董佳文
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机构
湖南应用技术学院
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出处
《南方农业》
2024年第9期144-149,154,共7页
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基金
湖南省教育厅科研项目(178998)。
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文摘
闽楠是中国特有的Ⅱ级濒危保护树种,其野生资源日渐枯竭。扦插繁殖技术具有操作简单、成本低等特点,已逐渐成为闽楠的主要繁殖手段之一。试验设置泥炭、蛭石、河沙和椰糠等4种轻基质及其不同组合配比共10组处理和1组对照(CK),分析不同基质及其配比对闽楠扦插生根的影响。通过测定闽楠扦插苗的各项生长指标,并进行主成分分析及综合评价,筛选出进行闽楠扦插的理想基质。结果表明:1)不同轻基质处理对闽楠扦插的生根率、生根数、最大根长、最大根粗、根鲜重和抽梢高均有显著影响;扦插所使用的基质不同,闽楠扦插生根表现各异;泥炭100%基质扦插的生根率、最大根长、最大根粗和抽梢高这4个指标中排第1位,分别为71.11%、5.9 cm、1.21 mm、6.74 cm;泥炭50%+河沙50%基质扦插的生根数和根鲜重最大,泥炭100%基质次之。2)主成分分析方法综合评价显示泥炭100%基质的扦插效果最佳,河沙100%基质最差。3) 11组基质在容重、总孔隙度、通气孔隙度、毛管孔隙度、pH值和电导率这些理化性质均有显著性差异。4)通过对基质理化性质和扦插生根指标进行典型性相关分析,可得出基质的总孔隙度对扦插生根的影响最大,其次是通气孔隙度及容重。
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关键词
闽楠
基质
不同配比
扦插
生根
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分类号
S723.132.5
[农业科学—林木遗传育种]
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