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重组融合蛋白MBP-PAI的表达、纯化及酶活测定
被引量：
5
1
作者
黄昕畑
张白曦
+2 位作者
陈海琴
张灏
陈卫
《食品与生物技术学报》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第2期10-15,共6页
为了解决亚油酸异构酶(Linoleic Acid Isomerase,PAI)在大肠杆菌中形成包涵体的问题,选择麦芽糖结合蛋白(Maltose-Binding Protein,MBP)标签和低温诱导表达系统pColdV,构建了大肠杆菌重组表达菌株E.coli BL21(pCold-Mpai),并对其诱导表...
为了解决亚油酸异构酶(Linoleic Acid Isomerase,PAI)在大肠杆菌中形成包涵体的问题,选择麦芽糖结合蛋白(Maltose-Binding Protein,MBP)标签和低温诱导表达系统pColdV,构建了大肠杆菌重组表达菌株E.coli BL21(pCold-Mpai),并对其诱导表达条件进行了优化。SDS-PAGE电泳结果显示,融合蛋白MBP-PAI成功表达,重组菌的最佳诱导表达条件为:诱导温度15℃、IPTG添加量0.1 mmol/L、诱导时间12 h,在该诱导条件下,与未融合MBP的PAI相比,MBP-PAI的可溶性表达量为后者的18倍、酶活为后者的1.5倍。经过MBPTrap HP亲和层析柱纯化后,MBP-PAI纯蛋白质的比酶活为1.58 U/mg,能够转化亚油酸形成反10,顺12-共轭亚油酸。
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关键词
亚油酸异构酶
大肠杆菌
包涵体
麦芽糖结合蛋白
蛋白质纯化
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职称材料
中性蛋白酶提取植脂末油脂工艺的研究
被引量：
6
2
作者
凌德娣
周亚楠
+1 位作者
黄昕畑
张白曦
《中国油脂》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第8期119-121,共3页
利用中性蛋白酶将植脂末破乳并对其酶解条件和油脂提取条件进行优化。结果表明:最佳工艺条件为25℃、p H 7.0、中性蛋白酶加酶量6 000 U/g、酶解时间10 min、油脂提取体系为氯仿-甲醇-水(体积比2∶2∶1);在最佳条件下,离心后植脂末提油...
利用中性蛋白酶将植脂末破乳并对其酶解条件和油脂提取条件进行优化。结果表明:最佳工艺条件为25℃、p H 7.0、中性蛋白酶加酶量6 000 U/g、酶解时间10 min、油脂提取体系为氯仿-甲醇-水(体积比2∶2∶1);在最佳条件下,离心后植脂末提油率可达95.36%。中性蛋白酶能够高效破乳从而大幅提高植脂末的提油率。
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关键词
植脂末
中性蛋白酶
油脂提取
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职称材料
共轭亚油酸异构体生理功能的差异
被引量：
8
3
作者
熊文珂
蒋瑜
+1 位作者
黄昕畑
张白曦
《粮食与油脂》
北大核心
2017年第11期8-11,共4页
介绍了共轭亚油酸不同异构体在降低机体脂肪积累、抗肿瘤、抗动脉粥样硬化以及免疫调节方面的研究,讨论了不同共轭亚油酸异构体,尤其是顺9,反11-共轭亚油酸(c9,t11-CLA)和反10,顺12-共轭亚油酸(t10,c12-CLA)在生理功能上的差异,以期更...
介绍了共轭亚油酸不同异构体在降低机体脂肪积累、抗肿瘤、抗动脉粥样硬化以及免疫调节方面的研究,讨论了不同共轭亚油酸异构体,尤其是顺9,反11-共轭亚油酸(c9,t11-CLA)和反10,顺12-共轭亚油酸(t10,c12-CLA)在生理功能上的差异,以期更有效地利用不同CLA异构体实现特有的生理功能。
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关键词
共轭亚油酸
异构体
不饱和脂肪酸
生理功能
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职称材料
题名
重组融合蛋白MBP-PAI的表达、纯化及酶活测定
被引量：
5
1
作者
黄昕畑
张白曦
陈海琴
张灏
陈卫
机构
江南大学食品学院
出处
《食品与生物技术学报》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第2期10-15,共6页
基金
国家自然科学基金青年基金项目(31501457)。
文摘
为了解决亚油酸异构酶(Linoleic Acid Isomerase,PAI)在大肠杆菌中形成包涵体的问题,选择麦芽糖结合蛋白(Maltose-Binding Protein,MBP)标签和低温诱导表达系统pColdV,构建了大肠杆菌重组表达菌株E.coli BL21(pCold-Mpai),并对其诱导表达条件进行了优化。SDS-PAGE电泳结果显示,融合蛋白MBP-PAI成功表达,重组菌的最佳诱导表达条件为:诱导温度15℃、IPTG添加量0.1 mmol/L、诱导时间12 h,在该诱导条件下,与未融合MBP的PAI相比,MBP-PAI的可溶性表达量为后者的18倍、酶活为后者的1.5倍。经过MBPTrap HP亲和层析柱纯化后,MBP-PAI纯蛋白质的比酶活为1.58 U/mg,能够转化亚油酸形成反10,顺12-共轭亚油酸。
关键词
亚油酸异构酶
大肠杆菌
包涵体
麦芽糖结合蛋白
蛋白质纯化
Keywords
linoleic acid isomerase
Escherichia coli
inclusion body
maltose binding protein
protein purification
分类号
Q786 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
中性蛋白酶提取植脂末油脂工艺的研究
被引量：
6
2
作者
凌德娣
周亚楠
黄昕畑
张白曦
机构
无锡超科食品有限公司
无锡超科食品有限公司-江南大学联合研究所
江南大学食品学院
出处
《中国油脂》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第8期119-121,共3页
文摘
利用中性蛋白酶将植脂末破乳并对其酶解条件和油脂提取条件进行优化。结果表明:最佳工艺条件为25℃、p H 7.0、中性蛋白酶加酶量6 000 U/g、酶解时间10 min、油脂提取体系为氯仿-甲醇-水(体积比2∶2∶1);在最佳条件下,离心后植脂末提油率可达95.36%。中性蛋白酶能够高效破乳从而大幅提高植脂末的提油率。
关键词
植脂末
中性蛋白酶
油脂提取
Keywords
non -dairy creamer
neutral protease
oil extraction
分类号
Q814 [生物学—生物工程]
TS224 [轻工技术与工程—粮食、油脂及植物蛋白工程]
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职称材料
题名
共轭亚油酸异构体生理功能的差异
被引量：
8
3
作者
熊文珂
蒋瑜
黄昕畑
张白曦
机构
无锡超科食品有限公司
无锡超科食品有限公司-江南大学联合研究所
江南大学食品学院
出处
《粮食与油脂》
北大核心
2017年第11期8-11,共4页
基金
江苏省自然科学基金青年基金项目(BK20150144)
文摘
介绍了共轭亚油酸不同异构体在降低机体脂肪积累、抗肿瘤、抗动脉粥样硬化以及免疫调节方面的研究,讨论了不同共轭亚油酸异构体,尤其是顺9,反11-共轭亚油酸(c9,t11-CLA)和反10,顺12-共轭亚油酸(t10,c12-CLA)在生理功能上的差异,以期更有效地利用不同CLA异构体实现特有的生理功能。
关键词
共轭亚油酸
异构体
不饱和脂肪酸
生理功能
Keywords
conjugated linoleic acid
isomer
unsaturated fatty acid
physiological function
分类号
TS201.2 [轻工技术与工程—食品科学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
重组融合蛋白MBP-PAI的表达、纯化及酶活测定
黄昕畑
张白曦
陈海琴
张灏
陈卫
《食品与生物技术学报》
CAS
CSCD
北大核心
2020
5
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
中性蛋白酶提取植脂末油脂工艺的研究
凌德娣
周亚楠
黄昕畑
张白曦
《中国油脂》
CAS
CSCD
北大核心
2018
6
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
共轭亚油酸异构体生理功能的差异
熊文珂
蒋瑜
黄昕畑
张白曦
《粮食与油脂》
北大核心
2017
8
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职称材料
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