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宁夏枸杞LbALDH3F1基因克隆及耐盐性分析
1
作者
马小霞
胡进红
+5 位作者
梁旺利
麻玉荣
孙雯
王玲霞
秦垦
梁文裕
《植物遗传资源学报》
北大核心
2025年第2期380-393,共14页
宁夏枸杞为著名耐盐药用植物,本研究以宁夏枸杞为材料,采用RACE方法克隆LbALDH3F1基因并进行序列分析,PCR法克隆LbALDH3F1基因启动子序列,构建过表达载体pCAMBIA 2300 EGFP-LbALDH3F1进行拟南芥遗传转化和亚细胞定位,并进行转LbALDH3F1...
宁夏枸杞为著名耐盐药用植物,本研究以宁夏枸杞为材料,采用RACE方法克隆LbALDH3F1基因并进行序列分析,PCR法克隆LbALDH3F1基因启动子序列,构建过表达载体pCAMBIA 2300 EGFP-LbALDH3F1进行拟南芥遗传转化和亚细胞定位,并进行转LbALDH3F1拟南芥耐NaCl胁迫检验及PCR鉴定。结果表明,宁夏枸杞LbALDH3F1基因全长1700 bp,编码序列为1446 bp,编码481个氨基酸残基;上游启动子序列为1850 bp;LbALDH3F1二级结构以α螺旋和无规则卷曲为主,定位于细胞核和细胞膜中。随着NaCl胁迫程度加深,宁夏枸杞的LbALDH3F1表达量呈先升后降的趋势,且在200 mmol/L NaCl胁迫时表达量最高。对LbALDH3F1进行遗传转化,发现转基因拟南芥对NaCl胁迫的耐受能力明显增强,超氧化物歧化酶表现出更高的活性,脯氨酸及叶绿素a含量在300 mmol/L NaCl胁迫下显著升高,而过氧化氢及丙二醛等含量在高盐胁迫下显著低于野生型拟南芥,表明LbALDH3F1具有提高植物抗氧化能力从而增强耐NaCl胁迫的能力。该研究结果为深入探讨宁夏枸杞LbALDH3F1基因功能及其在响应盐胁迫过程中的应答机制奠定了基础。
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关键词
LbALDH3F1
克隆
遗传转化
盐胁迫
基因功能
宁夏枸杞
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职称材料
‘宁杞1号’响应NaCl胁迫相关基因的差异表达分析
2
作者
李晶晶
胡进红
+3 位作者
梁旺利
麻玉荣
梁文裕
王玲霞
《生物技术通报》
北大核心
2025年第2期202-209,共8页
【目的】探究盐胁迫下‘宁杞1号’(Lycium barbarum Ningqi 1)信号转导途径相关基因差异表达规律,为深入解析‘宁杞1号’耐盐碱的分子机理奠定基础。【方法】基于转录组测序技术,对不同浓度NaCl胁迫下‘宁杞1号’叶片信号转导途径相关...
【目的】探究盐胁迫下‘宁杞1号’(Lycium barbarum Ningqi 1)信号转导途径相关基因差异表达规律,为深入解析‘宁杞1号’耐盐碱的分子机理奠定基础。【方法】基于转录组测序技术,对不同浓度NaCl胁迫下‘宁杞1号’叶片信号转导途径相关基因的差异表达进行分析,同时,对信号转导途径相关酶活性进行测定。【结果】(1)在0、100、200和300 mmol/L NaCl胁迫处理7 d时,从‘宁杞1号’叶片中共鉴定到3个信号转导途径和14个信号转导相关基因差异表达。(2)随着NaCl浓度的增加,CIPK6的相对表达量呈下降趋势;MAPKK2的相对表达量呈上升趋势;MAPKKK18和MAPK3的相对表达量呈先升后降的趋势,RTqPCR验证结果与RNA-seq测序结果基本一致。(3)随着NaCl浓度的增加,CIPK6、MAPKK2和MAPKKK18酶活性呈先升高后不变的趋势;MAPK3和PLD酶活性显著高于对照组;钙调素的含量随NaCl浓度增加而增加。【结论】‘宁杞1号’可能通过诱导磷脂酰肌醇、MAPK级联反应及依赖Ca^(2+)的SOS信号转导相关基因的差异表达响应NaCl胁迫,进而提高其耐盐性。
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关键词
宁杞1号
NACL胁迫
信号转导
基因差异表达
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职称材料
题名
宁夏枸杞LbALDH3F1基因克隆及耐盐性分析
1
作者
马小霞
胡进红
梁旺利
麻玉荣
孙雯
王玲霞
秦垦
梁文裕
机构
宁夏大学生命科学学院
林木资源高效生产全国重点实验室
宁夏农林科学院
出处
《植物遗传资源学报》
北大核心
2025年第2期380-393,共14页
基金
2022年度宁夏留学回国人员创新创业项目
国家自然科学基金项目(32301632)
宁夏自然科学基金项目(2023AAC05024)。
文摘
宁夏枸杞为著名耐盐药用植物,本研究以宁夏枸杞为材料,采用RACE方法克隆LbALDH3F1基因并进行序列分析,PCR法克隆LbALDH3F1基因启动子序列,构建过表达载体pCAMBIA 2300 EGFP-LbALDH3F1进行拟南芥遗传转化和亚细胞定位,并进行转LbALDH3F1拟南芥耐NaCl胁迫检验及PCR鉴定。结果表明,宁夏枸杞LbALDH3F1基因全长1700 bp,编码序列为1446 bp,编码481个氨基酸残基;上游启动子序列为1850 bp;LbALDH3F1二级结构以α螺旋和无规则卷曲为主,定位于细胞核和细胞膜中。随着NaCl胁迫程度加深,宁夏枸杞的LbALDH3F1表达量呈先升后降的趋势,且在200 mmol/L NaCl胁迫时表达量最高。对LbALDH3F1进行遗传转化,发现转基因拟南芥对NaCl胁迫的耐受能力明显增强,超氧化物歧化酶表现出更高的活性,脯氨酸及叶绿素a含量在300 mmol/L NaCl胁迫下显著升高,而过氧化氢及丙二醛等含量在高盐胁迫下显著低于野生型拟南芥,表明LbALDH3F1具有提高植物抗氧化能力从而增强耐NaCl胁迫的能力。该研究结果为深入探讨宁夏枸杞LbALDH3F1基因功能及其在响应盐胁迫过程中的应答机制奠定了基础。
关键词
LbALDH3F1
克隆
遗传转化
盐胁迫
基因功能
宁夏枸杞
Keywords
LbALDH3F1
cloning
genetic transformation
salt stress
gene function
Lycium barbarum
分类号
S567.19 [农业科学—中草药栽培]
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职称材料
题名
‘宁杞1号’响应NaCl胁迫相关基因的差异表达分析
2
作者
李晶晶
胡进红
梁旺利
麻玉荣
梁文裕
王玲霞
机构
宁夏大学生命科学学院
出处
《生物技术通报》
北大核心
2025年第2期202-209,共8页
基金
宁夏自然科学基金项目(2023AAC05024,2024AAC03097)
国家自然科学基金项目(32301632)。
文摘
【目的】探究盐胁迫下‘宁杞1号’(Lycium barbarum Ningqi 1)信号转导途径相关基因差异表达规律,为深入解析‘宁杞1号’耐盐碱的分子机理奠定基础。【方法】基于转录组测序技术,对不同浓度NaCl胁迫下‘宁杞1号’叶片信号转导途径相关基因的差异表达进行分析,同时,对信号转导途径相关酶活性进行测定。【结果】(1)在0、100、200和300 mmol/L NaCl胁迫处理7 d时,从‘宁杞1号’叶片中共鉴定到3个信号转导途径和14个信号转导相关基因差异表达。(2)随着NaCl浓度的增加,CIPK6的相对表达量呈下降趋势;MAPKK2的相对表达量呈上升趋势;MAPKKK18和MAPK3的相对表达量呈先升后降的趋势,RTqPCR验证结果与RNA-seq测序结果基本一致。(3)随着NaCl浓度的增加,CIPK6、MAPKK2和MAPKKK18酶活性呈先升高后不变的趋势;MAPK3和PLD酶活性显著高于对照组;钙调素的含量随NaCl浓度增加而增加。【结论】‘宁杞1号’可能通过诱导磷脂酰肌醇、MAPK级联反应及依赖Ca^(2+)的SOS信号转导相关基因的差异表达响应NaCl胁迫,进而提高其耐盐性。
关键词
宁杞1号
NACL胁迫
信号转导
基因差异表达
Keywords
Lycium barbarum‘Ningqi 1’
NaCl stress
signal transduction
differential expression of genes
分类号
S567.19 [农业科学—中草药栽培]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
宁夏枸杞LbALDH3F1基因克隆及耐盐性分析
马小霞
胡进红
梁旺利
麻玉荣
孙雯
王玲霞
秦垦
梁文裕
《植物遗传资源学报》
北大核心
2025
0
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职称材料
2
‘宁杞1号’响应NaCl胁迫相关基因的差异表达分析
李晶晶
胡进红
梁旺利
麻玉荣
梁文裕
王玲霞
《生物技术通报》
北大核心
2025
0
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职称材料
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