糖萜素对小鼠NK细胞活性影响的研究 被引量：12

1

作者 鲍建芳 邵传森 +1 位作者 沈建根 詹勇 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 2001年第6期261-263,284,共4页

目的 :探讨糖萜素对机体 NK细胞活性的影响。方法 :1体外试验 ,不同浓度糖萜素体外直接作用小鼠脾细胞和 YAC-1细胞 ,用 MTT法测定细胞生长代谢和 NK细胞活性 ;2体内试验 ,以糖萜素饲料和普通饲料分别喂养正常和免疫抑制 (环磷酰胺抑制 ... 目的 :探讨糖萜素对机体 NK细胞活性的影响。方法 :1体外试验 ,不同浓度糖萜素体外直接作用小鼠脾细胞和 YAC-1细胞 ,用 MTT法测定细胞生长代谢和 NK细胞活性 ;2体内试验 ,以糖萜素饲料和普通饲料分别喂养正常和免疫抑制 (环磷酰胺抑制 )小鼠 ,在不同时间段检测 NK细胞活性。结果 :1体外 <5μg/ ml的糖萜素浓度 ,对小鼠脾细胞生长和 NK细胞活性无明显影响 ( P>0 .0 5) ;2以糖萜素饲料喂养的正常小鼠和免疫抑制小鼠 ,各时间段 NK细胞活性明显高于喂养普通饲料的对照小鼠 ( P<0 .0 5)。结论 :口服糖萜素能明显增强小鼠 NK细胞活性 ,且使其稳定维持在高水平。 展开更多

关键词 天然杀伤细胞 药物作用 糖萜素 NK细胞 小鼠

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脐血造血干细胞分离方法的比较 被引量：2

2

作者 鲍建芳 林敏 +3 位作者 杨仁儿 夏大静 沈建根 邵传森 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 1999年第3期114-116,共3页

目的：探讨分离脐血造血干细胞的最佳方法。方法：采用Ｆｉｃｏｌ分层法、３％明胶自然沉降法及６％羟乙基淀粉自然沉降法。结果：３％明胶自然沉降法所获有核细胞（ＮＣ）密度高达９４．６０（±２３．８０）×１０５／ｍｌ，... 目的：探讨分离脐血造血干细胞的最佳方法。方法：采用Ｆｉｃｏｌ分层法、３％明胶自然沉降法及６％羟乙基淀粉自然沉降法。结果：３％明胶自然沉降法所获有核细胞（ＮＣ）密度高达９４．６０（±２３．８０）×１０５／ｍｌ，ＣＦＵＧＭ数为６４．３０（±１２．１８）／１０５ＮＣ，ＣＤ３４＋细胞数为１．２１（±０．３７）×１０５／ｍｌ，均较其它两种方法为高（Ｐ＜０．０５）。结论：３％明胶自然沉降法是一种较理想的分离脐血造血干细胞的方法。 展开更多

关键词 脐血 造血干细胞 细胞分离 CD34 肝素

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低强度微波辐射对小鼠NK细胞活性的影响 被引量：2

3

作者 鲍建芳 王建有 +1 位作者 鲁德强 邵传森 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 2001年第2期79-81,共3页

目的 :观察低强度微波辐射对小鼠 NK细胞活性的影响。方法 :小鼠脾细胞体外经不同强度微波直接辐射不同时间后 ,用 L DH法测定小鼠 NK细胞的活性 ,并用 MTT法测定脾细胞的生长代谢。结果 :1 4种不同强度的微波 (0 .0 5 m W/ cm2 ,0 .1 m... 目的 :观察低强度微波辐射对小鼠 NK细胞活性的影响。方法 :小鼠脾细胞体外经不同强度微波直接辐射不同时间后 ,用 L DH法测定小鼠 NK细胞的活性 ,并用 MTT法测定脾细胞的生长代谢。结果 :1 4种不同强度的微波 (0 .0 5 m W/ cm2 ,0 .1 m W/ cm2 ,0 .2 m W/ cm2 ,0 .4m W/ cm2 )辐射 2 0 min,其 NK细胞活性与假辐射组相比变化不大 (P>0 .0 5 )。2两种强度 0 .1 m W/ cm2和 0 .4m W/ cm2 微波辐射 40 min以上 ,NK细胞活性较假辐射组明显降低 (P<0 .0 5 )。 3脾细胞经两种强度 (0 .1 m W/ cm2 ,0 .4m W/ cm2 ) ,不同时间 (1 0 min、2 0 min、40 min、6 0 min)微波辐射 ,其生长代谢曲线随时间延长而下降。结论 :体外长时间低强度微波辐射能降低小鼠 展开更多

关键词 微波辐射损伤 NK细胞 活性 小鼠

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半胱氨酰白三烯受体2多克隆抗体制备及其鉴定 被引量：6

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作者 陈丽萍 赵春贞 +8 位作者 史文珍 戚玲玲 卢韵碧 张咏梅 张丽慧 方三华 鲍建芳 沈建根 魏尔清 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期591-597,共7页

目的:制备半胱氨酰白三烯受体2(CysLT2)多克隆抗体,并鉴定其免疫学特性及应用。方法:以KLH偶联的CysLT2受体多肽免疫家兔制备抗体,用间接ELISA法测定抗体效价,以抗原阻断法测定抗体敏感性及特异性;同时,以新制备的抗体进行Western blot... 目的:制备半胱氨酰白三烯受体2(CysLT2)多克隆抗体,并鉴定其免疫学特性及应用。方法:以KLH偶联的CysLT2受体多肽免疫家兔制备抗体,用间接ELISA法测定抗体效价,以抗原阻断法测定抗体敏感性及特异性;同时,以新制备的抗体进行Western blot和免疫组化,检测CysLT2受体的组织表达。结果:ELISA测定显示,获得的家兔抗CysLT2受体抗体的效价大于1/1 047 296,对CysLT2受体的特异性强,对CysLT1受体和GPR17基本无交叉反应。Western blot结果显示,CysLT2受体在大鼠、小鼠肾、脑和肺中有较高的表达,其分子量在40 kD左右。免疫组化结果表明,CysLT2受体主要表达在大鼠神经元,也表达在部分星形胶质细胞。结论:制备的CysLT2受体多克隆抗体具有高效价和高特异性,能满足Western blot和免疫组化检测的要求。 展开更多

关键词 半胱氨酸/遗传 受体 白三烯/遗传 半胱氨酰白三烯受体 CysLT2受体 多克隆抗体

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新型半胱氨酰白三烯受体GPR17的多克隆抗体制备及其鉴定 被引量：5

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作者 戚玲玲 卢韵碧 +8 位作者 史文珍 赵春贞 张咏梅 陈丽萍 张丽慧 方三华 鲍建芳 沈建根 魏尔清 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期357-361,共5页

目的:制备新型半胱氨酰白三烯受体GPR17的多克隆抗体(pAb),并鉴定其免疫学特性。方法:以KLH偶联的GPR17多肽免疫家兔制备其pAb,用间接ELISA法测定抗体效价,阻断ELISA测定抗体敏感性及特异性,同时以新制备的抗体做Western blot,检测GPR1... 目的:制备新型半胱氨酰白三烯受体GPR17的多克隆抗体(pAb),并鉴定其免疫学特性。方法:以KLH偶联的GPR17多肽免疫家兔制备其pAb,用间接ELISA法测定抗体效价,阻断ELISA测定抗体敏感性及特异性,同时以新制备的抗体做Western blot,检测GPR17的组织表达。结果:通过免疫家兔获得的抗GPR17 pAb,ELISA测定显示其抗体效价最高可达到1/16 364,并对CysLT1受体和CysLT2受体基本无交叉反应,具有较好的特异性。Western blot结果显示,GPR17在大鼠脑和心脏组织中有较高的表达,其分子量在43 kD左右。结论:制备的GPR17 pAb具有较高的效价和较好的特异性,能满足Western blot检测GPR17的要求。 展开更多

关键词 受体 白三烯 半胱氨酸 GPR17 半胱氨酰白三烯受体 多克隆抗体

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鼠白细胞介素-12双亚基共表达质粒的构建及在体内外的表达 被引量：3

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作者 陈玮 邵传森 +6 位作者 沈建根 鲍建芳 潘建平 韩伟 寿林 项哨 郑树 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 2002年第1期15-18,共4页

目的 :构建双亚基共表达鼠白细胞介素 - 12 (m IL- 12 )真核表达质粒 ,并观察其在体内外的表达。方法 :将m IL - 12 p35和 p4 0全长编码 c DNA构建在 pc DN A 3.1载体上 ,然后把 p35表达单元 (CMV- p35 - BGH PA)插入pc DNA 3.1/ p4 0载... 目的 :构建双亚基共表达鼠白细胞介素 - 12 (m IL- 12 )真核表达质粒 ,并观察其在体内外的表达。方法 :将m IL - 12 p35和 p4 0全长编码 c DNA构建在 pc DN A 3.1载体上 ,然后把 p35表达单元 (CMV- p35 - BGH PA)插入pc DNA 3.1/ p4 0载体 ,使两个目的基因均受各自的启动子 CMV控制 ,构建成 m IL - 12双亚基共表达质粒 p Cm IL -12 ,并进行体内外表达。结果 :p Cm IL - 12在体外转染 COS- 7细胞后 ,经 EL ISA证实有 m IL- 12表达 ,其表达上清能在体外明显增强小鼠 NK细胞活性。小鼠皮内注射 p Cm IL - 12亦能增强小鼠 NK细胞活性。结论 :所构建的质粒在体内外均能表达有生物学活性的 m IL- 展开更多

关键词 白细胞介素-12 生物合成 质粒 基因表达 MIL-12 天然杀伤细胞 遗传载体 分子克隆 双亚基共表达 小鼠

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斑点免疫金渗滤试验检测淋球菌抗原的应用研究 被引量：5

7

作者 沈建根 朱永良 +3 位作者 董玉娥 程东庆 鲍建芳 邵传森 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 2000年第2期61-62,66,共3页

目的 :建立一种简易快速的斑点免疫金渗滤试验 (DIGFA)用于检测淋球菌抗原。方法 :用抗淋球菌单克隆抗体为包被抗体 ,以胶体金标记兔抗淋球菌IgG作探针 ,制成DIGFA反应盒。结果 :该反应盒特异性强 ,与脑膜炎球菌、葡萄球菌、肺炎球菌、... 目的 :建立一种简易快速的斑点免疫金渗滤试验 (DIGFA)用于检测淋球菌抗原。方法 :用抗淋球菌单克隆抗体为包被抗体 ,以胶体金标记兔抗淋球菌IgG作探针 ,制成DIGFA反应盒。结果 :该反应盒特异性强 ,与脑膜炎球菌、葡萄球菌、肺炎球菌、大肠杆菌等无交叉反应 ,淋球菌抗原最低检出量为 63 .0 0ng/ml。经 5 1例临床分离株测定 ,敏感性为 98.0 4% ,特异性 1 0 0 %。 结论 :检测淋球菌抗原的DIGFA是一种简易快速、敏感、特异的方法。 展开更多

关键词 淋病奈琴氏球菌 斑点免疫金 渗滤试验 抗原

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抗淋球菌单克隆抗体的制备及其生物学特性研究 被引量：1

8

作者 沈建根 鲍建芳 +1 位作者 邵传森 董玉娥 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 1999年第2期49-52,共4页

目的：研制抗淋球菌单克隆抗体，为建立新的淋病诊断方法奠定基础。方法：以淋球菌２９１０６－５株作抗原，按常规淋巴细胞杂交瘤技术制备单克隆抗体。并采用ＥＬＩＳＡ双抗体夹心法研究单抗的特异性和敏感性。结果：建立了５个持续分... 目的：研制抗淋球菌单克隆抗体，为建立新的淋病诊断方法奠定基础。方法：以淋球菌２９１０６－５株作抗原，按常规淋巴细胞杂交瘤技术制备单克隆抗体。并采用ＥＬＩＳＡ双抗体夹心法研究单抗的特异性和敏感性。结果：建立了５个持续分泌抗淋球菌单抗的杂交瘤细胞株。他们所分泌的抗体效价可达１∶８１９２～１∶３２７８６。５株单抗均能与淋球菌发生特异性结合，但对脑膜炎球菌、葡萄球菌、大肠杆菌等１５种其他微生物不起反应。淋球菌的最小检测量为１×１０４个／ｍｌ。 展开更多

关键词 抗淋球菌单克隆抗体 制备 生物学特性 淋病 诊断

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抗衣原体单克隆抗体的制备及其生物学特性鉴定

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作者 沈建根 蔡挺 +2 位作者 鲍建芳 董玉娥 尹秀 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 1999年第3期97-100,共4页

目的：制备抗衣原体的单克隆抗体，为研制衣原体快速检测卡作准备。方法：用沙眼衣原体和鹦鹉热衣原体分别免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，按常规淋巴细胞杂交瘤技术制备单克隆抗体。结果：获得抗沙眼衣原体及抗鹦鹉热衣原体单克隆抗体各３株，... 目的：制备抗衣原体的单克隆抗体，为研制衣原体快速检测卡作准备。方法：用沙眼衣原体和鹦鹉热衣原体分别免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，按常规淋巴细胞杂交瘤技术制备单克隆抗体。结果：获得抗沙眼衣原体及抗鹦鹉热衣原体单克隆抗体各３株，经检测６株单抗均具有较高的属特异性，不与其他微生物发生交叉反应。结论：本研究为进一步研制衣原体快速检测卡奠定了基础。 展开更多

关键词 单克隆抗体 制备 生物学特性 鉴定 沙眼衣原体

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IL-12联合小剂量IL-2对人外周血单个核细胞增殖及杀瘤活性的影响

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作者 夏大静 鲍建芳 +1 位作者 沈建根 邵传森 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 1999年第6期248-252,共5页

目的：探讨ＩＬ－１２与ＩＬ－２ 的最佳剂量配伍，以充分发挥两种细胞因子的抗肿瘤作用，从而减少使用剂量和降低毒副作用。方法：静止的或用小剂量ＩＬ－２ 激活的人外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ），以含不同浓度ＩＬ－１２ 和（或）... 目的：探讨ＩＬ－１２与ＩＬ－２ 的最佳剂量配伍，以充分发挥两种细胞因子的抗肿瘤作用，从而减少使用剂量和降低毒副作用。方法：静止的或用小剂量ＩＬ－２ 激活的人外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ），以含不同浓度ＩＬ－１２ 和（或）ＩＬ－２ 的培养液培养后，分别用３Ｈ－ＴｄＲ掺入法和ＬＤＨ释放法测定ＰＢＭＣ的增殖作用及杀瘤活性。结果：①５～５０ ＩＵ／ｍ ｌＩＬ－１２ 单独不能诱导ＰＢＭＣ增殖，但能与小剂量（１０ ＩＵ／ｍ ｌ）ＩＬ－２ 协同而促进ＰＢＭＣ的增殖，且能延长增殖作用时间。②经ＩＬ－１２ 作用后，ＰＢＭＣ对ＮＫ敏感的Ｋ５６２细胞及ＮＫ抵抗的Ｒａｊｉ细胞均产生明显的杀伤活性。激活的ＰＢＭＣ经ＩＬ－１２ 和ＩＬ－２ 各１０ ＩＵ／ｍ ｌ联合培养后，对Ｋ５６２ 细胞和Ｒａｊｉ细胞的杀伤率达最大值，分别为７２．０±４．２％ 和６５．４±５．８％ ，显示出明显的协同作用。结论：人ＰＢＭＣ在体外经１０ ＩＵ／ｍ ｌＩＬ－２激活后，再加入ＩＬ－１２ 和ＩＬ－２各１０ ＩＵ／ｍ ｌ共同刺激。 展开更多

关键词 白细胞介素2/投药和剂量 白细胞介素12/投药和剂量 药物协同作用 单核细胞/药物作用 免疫疗法 肿瘤/治疗

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新鲜蔬菜水果提取液对小鼠细胞免疫功能的增强作用

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作者 潘建平 鲍建芳 +1 位作者 祝文娴 陈剑英 《科技通报》 1999年第3期223-225,共3页

新鲜蔬菜水果提取液（ＥＦＶＦ）含有人体必需的多种维生素、微量元素和氨基酸．本文研究了其对小鼠脾细胞ＮＫ活性、ＩＬ－２、ＴＮＦ－β以及ＩＦＮ－γ诱生水平的影响．结果表明，口服ＥＦＶＦ能显著增强脾细胞ＮＫ活性及ＩＬ－２、... 新鲜蔬菜水果提取液（ＥＦＶＦ）含有人体必需的多种维生素、微量元素和氨基酸．本文研究了其对小鼠脾细胞ＮＫ活性、ＩＬ－２、ＴＮＦ－β以及ＩＦＮ－γ诱生水平的影响．结果表明，口服ＥＦＶＦ能显著增强脾细胞ＮＫ活性及ＩＬ－２、ＴＮＦ－β、ＩＦＮ－γ诱生水平．其机制可能与ＥＦＶＦ中富含ＶｉｔＥ、Ｖｉ－ｔＡ、ＶｉｔＣ及锌等微量元素有关． 展开更多

关键词 蔬菜 水果 脾细胞 EFVF 提取液 免疫功能

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