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粪肠球菌生长曲线的测定及其对小鼠脑组织的影响 被引量:21
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作者 王蒙蒙 张莉 +6 位作者 李慧 汪骁轩 魏殿华 高静雯 高建鹏 张华雷 齐亚银 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2018年第4期1041-1049,共9页
为测定致羔羊脑炎粪肠球菌(Enterococcus faecalis)的生长曲线,寻求一种快速而准确的方法测定不同生长时期粪肠球菌数量,并客观评价其毒性强弱及其对小鼠脑组织的影响,试验采用平板菌落计数法和OD-Monitor振荡比浊法(Dλ值法)测定粪肠... 为测定致羔羊脑炎粪肠球菌(Enterococcus faecalis)的生长曲线,寻求一种快速而准确的方法测定不同生长时期粪肠球菌数量,并客观评价其毒性强弱及其对小鼠脑组织的影响,试验采用平板菌落计数法和OD-Monitor振荡比浊法(Dλ值法)测定粪肠球菌的生长曲线,探究该菌在合适时间段内的吸光值(D600nm)与平板菌落计数法测定的活菌数(CFU)的关系。用粪肠球菌感染小鼠,观察记录小鼠的死亡情况,最后采用Karber法计算粪肠球菌感染小鼠的半数致死量(LD50)。用LD50的剂量感染小鼠,及时采集死亡小鼠脑组织,未死亡的小鼠72h后全部剖杀取脑组织,一部分做涂片染色,制作病理切片,观察病理变化;一部分进行培养,用于PCR方法进行细菌的回收鉴定。结果显示,用两种方法测定此株粪肠球菌的生长曲线基本一致,在2~8h生长迅速,为对数生长期,8~14h生长缓慢,为稳定期,14h之后死亡数增加,进入衰亡期;对12h粪肠球菌D600nm与CFU的关系进行探讨,成功建立回归方程:y=20.769x-1.3422,R2=0.997;其感染小鼠的LD50为7.77×1011个活菌。以此剂量感染小鼠,脑组织涂片染色和培养染色,均能看到革兰氏阳性球菌;PCR结果显示,均出现了大小为112bp的条带。对脑组织进行病理学观察发现该菌可导致脑组织充血、出血、形成微血栓,脑膜充血。通过生长曲线和其D600nm与CFU关系的建立,可实时监测粪肠球菌数量,为后期更深入研究粪肠球菌穿越血脑屏障的机制奠定重要的理论基础。 展开更多
关键词 粪肠球菌 Dλ值法 平板菌落计数法 半数致死量
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急性冷应激对阿勒泰羊HSP60、HSP70和HSP90基因mRNA表达的影响 被引量:6
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作者 魏殿华 高静雯 +2 位作者 汪骁轩 张莉 齐亚银 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2019年第12期3680-3689,共10页
为研究急性冷应激通过影响热休克蛋白含量的变化对阿勒泰羊抗寒性能、生产性能及抗病性能等的影响,试验设置常温组(15℃±2℃)与冷应激组(-25℃±2℃),每组各5只羊,屠宰后分别采集急性冷应激组(冷应激24 h后)和常温组的心脏、... 为研究急性冷应激通过影响热休克蛋白含量的变化对阿勒泰羊抗寒性能、生产性能及抗病性能等的影响,试验设置常温组(15℃±2℃)与冷应激组(-25℃±2℃),每组各5只羊,屠宰后分别采集急性冷应激组(冷应激24 h后)和常温组的心脏、肝脏、脾脏和肾脏组织。采用实时荧光定量PCR技术对HSP60、HSP70和HSP90 mRNA含量变化进行检测,并对HSP 60、HSP 70和HSP 90基因进行同源性分析。结果显示,HSP 70和HSP 90基因与已有绵羊序列同源性高于99%,而HSP 60基因与已有波斯金牛序列同源性高于99%;冷刺激后HSP 60基因在心脏、肝脏、脾脏和肾脏组织中的表达较常温组均升高,且在肾脏中的表达量差异极显著(P<0.01);冷刺激后HSP 70基因在心脏、肝脏、脾脏和肾脏组织中的表达较常温组均升高,且在肝脏和肾脏组织中的表达量差异极显著(P<0.01);冷刺激后HSP 90基因在心脏、肝脏、脾脏和肾脏组织中的表达较常温组均升高,且在肝脏组织中表达量差异显著(P<0.05),而在脾脏和肾脏组织中的表达量差异极显著(P<0.01)。表明急性冷应激极大程度地刺激了机体的产热机能,通过通路中的产热相关基因的相互调节使其能量代谢发生改变,从而提高细胞生存率,增强机体对环境胁迫的耐受力,能更好地适应环境温度的变化。试验结果为进一步深入研究急性冷应激对阿勒泰羊机体的影响提供一定理论依据。 展开更多
关键词 急性冷应激 HSP 60基因 HSP 70基因 HSP 90基因
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北疆某规模化羊场绵羊肺炎支原体感染的血清流行病学调查 被引量:1
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作者 张莉 魏殿华 齐亚银 《中国动物保健》 2019年第11期46-47,共2页
为了查明北疆某规模化羊场绵羊肺炎支原体野毒感染的程度,本试验采集不同日龄绵羊的血液,分离血清,选择绵羊肺炎支原体抗体和抗原检测ELISA试剂盒进行该病的血清流行病学调查。结果表明,该场存在比较严重的绵羊肺炎支原体野毒感染的现象... 为了查明北疆某规模化羊场绵羊肺炎支原体野毒感染的程度,本试验采集不同日龄绵羊的血液,分离血清,选择绵羊肺炎支原体抗体和抗原检测ELISA试剂盒进行该病的血清流行病学调查。结果表明,该场存在比较严重的绵羊肺炎支原体野毒感染的现象,其中成年母羊带菌、不同日龄阶段羔羊的混养可能是该场羔羊多发咳嗽、腹式呼吸等类似绵羊肺炎支原体感染的主要原因。 展开更多
关键词 规模化羊场 绵羊肺炎支原体 血清流行病学
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