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GnIH对小鼠卵巢颗粒细胞增殖、凋亡和雌激素分泌的影响
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作者 高正婕 罗萍 +1 位作者 李博成 王水莲 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第5期2230-2242,共13页
旨在探究GnIH对小鼠颗粒细胞增殖、凋亡以及雌激素分泌水平的影响。本研究选取健康的21~23 d雌性ICR小鼠,分离小鼠卵巢GCs,利用FSHR进行鉴定,并采用qRT-PCR对小鼠颗粒细胞中GnIH和GnIH-R基因进行检测。构建pshRNA-1,2,3,4干扰质粒载体和... 旨在探究GnIH对小鼠颗粒细胞增殖、凋亡以及雌激素分泌水平的影响。本研究选取健康的21~23 d雌性ICR小鼠,分离小鼠卵巢GCs,利用FSHR进行鉴定,并采用qRT-PCR对小鼠颗粒细胞中GnIH和GnIH-R基因进行检测。构建pshRNA-1,2,3,4干扰质粒载体和pLV-GnIH过表达质粒载体对GnIH基因分别进行干扰和过表达(GnIH干扰组分为:pshNC组和pshRNA1~4组,GnIH过表达组分为:PLV-NC组和PLV-GnIH组)。采用慢病毒滴度检测和qRT-PCR方法检测干扰和过表达效率,利用MTT法检测干扰和过表达GnIH后小鼠颗粒细胞增殖变化情况,采用Annexin V-FITC/PI流式细胞仪检测小鼠卵巢颗粒细胞的凋亡情况,并采用ELISA检测GCs培养液上清中孕酮和雌二醇的分泌水平,以上结果均重复3次。结果发现,在转染48 h和96 h时pshRNA-1,2,3,4均能够极显著地干扰GnIH的表达(P<0.01),而在72 h时只有pshRNA-4能够极显著地下调GnIH的表达(P<0.01);72 h时pLV-GnIH能够极显著上调GnIH的表达(P<0.001)。过表达GnIH后颗粒细胞增殖活力极显著下调(P<0.001),且能促进细胞凋亡(P<0.001),极显著抑制小鼠颗粒细胞雌激素的分泌(P<0.001)。而转染pshRNA-2,472 h和96 h时则极显著上调颗粒细胞增殖活力(P<0.1)和雌激素的分泌(P<0.05),且显著抑制颗粒细胞凋亡(P<0.05和P<0.01)。本研究发现,GnIH能够抑制小鼠卵巢颗粒细胞增殖,促进颗粒细胞凋亡,降低雌激素的分泌水平。 展开更多
关键词 GNIH 颗粒细胞 增殖 凋亡 雌激素分泌
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