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地西他滨联合丙戊酸钠诱导的骨髓瘤细胞凋亡及其机制研究 被引量:6
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作者 马泳泳 周淑娟 +2 位作者 陈枫煜 蔡芳芳 俞康 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期837-841,共5页
目的探讨地西他滨(DCA)联合丙戊酸钠(VPA)体外诱导骨髓瘤细胞株RPMI 8226凋亡及对死亡相关蛋白激酶(DAPK)基因去甲基化的作用。方法体外培养多发性骨髓瘤RPMI 8226细胞,实验分为5组:DCA组(选取1.5、3μmol/L 2个浓度),VPA组(选取1、2μm... 目的探讨地西他滨(DCA)联合丙戊酸钠(VPA)体外诱导骨髓瘤细胞株RPMI 8226凋亡及对死亡相关蛋白激酶(DAPK)基因去甲基化的作用。方法体外培养多发性骨髓瘤RPMI 8226细胞,实验分为5组:DCA组(选取1.5、3μmol/L 2个浓度),VPA组(选取1、2μmol/L 2个浓度),DCA+VPA组(DCA 3μmol/L+VPA 2μmol/L),PBS组,阴性对照组。上述细胞分别培养24、72h后,MTT法检测细胞存活情况。培养72h后,透射电镜观察DCA+VPA组细胞凋亡形态;流式细胞仪Annexin V法检测上述5组细胞凋亡率;MSP法检测上述5组细胞(DCA组取3μmol/L浓度,VPA组取2μmol/L浓度)处理前后DAPK基因甲基化状态,半定量RT-PCR方法检测DAPK基因表达情况。结果处理72h后,DCA+VPA组MTT值下降最明显,细胞存活率降低,与PBS组及阴性对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);VPA组及DCA组MTT值均下降,DCA 3μmol/L组与PBS组及阴性对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。处理72h后,DCA+VPA、VPA、DCA组G1/G0期细胞增多,S期细胞减少,细胞凋亡率增加,DCA+VPA组凋亡率高于DCA组及VPA组(P<0.05),与PBS组及阴性对照组比较差异亦有统计学意义(P<0.05)。透射电镜下可观察到DCA+VPA组细胞出现核染色质凝聚、固缩、边集、核碎裂等典型的细胞凋亡形态学改变。处理72h后,DCA+VPA、VPA、DCA组细胞DAPK启动子均有去甲基化表现,以DCA+VPA组去甲基化程度为最大,与PBS组及阴性对照组相比差异均有统计学意义(P<0.05)。DCA+VPA、VPA、DCA组DAPK基因mRNA表达量均增加,且DCA+VPA组的相对mRNA比值高于其余4组(P<0.05)。结论DCA联合VPA可诱导骨髓瘤细胞株RPMI 8226凋亡及DAPK基因启动子去甲基化,使DAPK基因表达恢复。 展开更多
关键词 健康行为 健康因素 糖尿病 C反应蛋白
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丙戊酸钠对RPMI822和U266细胞增殖及IL-6/JAK/STAT信号通路的影响 被引量:5
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作者 马泳泳 周淑娟 +3 位作者 葛杭萍 蔡芳芳 章瑜 俞康 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期833-838,共6页
目的:探讨丙戊酸钠(valproic acid sodium,VPA)对人骨髓瘤RPMI8226和U266细胞增殖及IL-6/JAK/STAT信号通路的作用。方法:RPMI8226和U266细胞经不同浓度VPA处理12及24 h后进行实验,MTT法检测VPA对细胞增殖的影响,流式细胞术检测VPA处理... 目的:探讨丙戊酸钠(valproic acid sodium,VPA)对人骨髓瘤RPMI8226和U266细胞增殖及IL-6/JAK/STAT信号通路的作用。方法:RPMI8226和U266细胞经不同浓度VPA处理12及24 h后进行实验,MTT法检测VPA对细胞增殖的影响,流式细胞术检测VPA处理后的细胞周期及凋亡率,ELISA法检测培养细胞上清IL-6的浓度,半定量RT-PCR检测VPA作用后RPMI8226和U266细胞中STAT3、STAT5、Bcl-xL、Mcl-1、c-Myc、CCND1和VEGF mRNA表达水平。Western blotting检测JAK2和STAT5总蛋白及磷酸化蛋白表达水平。结果:(1)10、20及40μmol/L VPA处理RPMI8226和U266细胞12 h及24 h后,细胞存活率值显著下降,与各对照组比较均有显著差异(P<0.05),各对照组之间无显著差异。(2)VPA处理RPMI8226和U266细胞24 h后,G1/G0期细胞增多,S期细胞减少,细胞凋亡率增加,且凋亡率与VPA的作用剂量相关。(3)VPA处理RPMI8226和U266细胞24 h后,上清IL-6浓度与VPA浓度呈负相关。(4)RPMI8226和U266细胞组在40μmol/L VPA处理后其STAT3、STAT5、Bcl-xL、Mcl-1、c-Myc、CCND1和VEGF mRNA表达减低,与未处理组比较有显著差异。(5)与对照组比较,VPA处理组p-JAK2、JAK2、p-STAT5和STAT5蛋白表达均显著降低。结论:(1)VPA对多发性骨髓瘤细胞有体外抑制作用;(2)VPA对骨髓瘤细胞株的体外抑制可能是通过调节IL-6/JAK/STAT信号通路来实现的。 展开更多
关键词 丙戊酸钠 多发性骨髓瘤 白细胞介素6 JAK STAT信号通路
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姜黄素对骨髓瘤细胞迁移和侵袭能力的影响及其机制研究 被引量:3
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作者 马泳泳 黄进 +2 位作者 周淑娟 葛杭萍 俞康 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期170-174,共5页
目的:探讨姜黄素对骨髓瘤细胞迁移侵袭能力的影响及其机制。方法:shRNA表达质粒沉默含IQ模序的RasGTP酶活化蛋白1(IQ motif-containing GTPase-activating protein 1,IQGAP1)后转染RPMI8226细胞,Western blotting法检测RPMI8226-shIQGAP... 目的:探讨姜黄素对骨髓瘤细胞迁移侵袭能力的影响及其机制。方法:shRNA表达质粒沉默含IQ模序的RasGTP酶活化蛋白1(IQ motif-containing GTPase-activating protein 1,IQGAP1)后转染RPMI8226细胞,Western blotting法检测RPMI8226-shIQGAP1组、RPMI8226-shRNA阴性对照组和未转染RPMI8226组细胞IQGAP1表达;不同浓度姜黄素作用于各组细胞后,Transwell迁移实验和Matrigel侵袭实验检测细胞的迁移及侵袭力,RTPCR法检测姜黄素作用后IQGAP1 mRNA的表达,Western blotting检测姜黄素对各组细胞IQGAP1蛋白表达的影响。结果:使用shRNA表达质粒沉默IQGAP1后,RPMI8226细胞IQGAP1表达减少;RPMI8226-shIQGAP1组较RPMI8226-shRNA阴性对照组和未转染RPMI8226组细胞迁移及侵袭力下降,姜黄素可降低RPMI8226-shRNA阴性对照组和未转染RPMI8226组细胞迁移及侵袭力,无浓度相关性,不同浓度的姜黄素对RPMI8226-shIQGAP1组作用后细胞的迁移及侵袭力无明显变化。对于RPMI8226-shRNA阴性对照组及未转染RPMI8226组,姜黄素作用后IQGAP1 mRNA及蛋白的表达下降。结论:姜黄素通过抑制IQGAP1的表达降低骨髓瘤细胞的迁移力和侵袭力。 展开更多
关键词 含IQ模序的GrIp酶活化蛋白1 多发性骨髓瘤 姜黄素 细胞迁移 肿瘤侵袭
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IQGAP1在人骨髓瘤细胞中过表达且与ERK相互作用 被引量:3
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作者 马泳泳 黄进 +2 位作者 周淑娟 葛杭萍 俞康 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第12期2179-2185,共7页
目的:探讨含IQ模序的GTP酶活化蛋白1(IQ motif-containing GTPase-activating protein 1,IQGAP1)在骨髓瘤细胞中的过表达及其机制。方法:RT-PCR和Western blotting检测RPMI8226和U266细胞IQGAP1表达;使用不同的寡核苷酸序列构建沉默人IQ... 目的:探讨含IQ模序的GTP酶活化蛋白1(IQ motif-containing GTPase-activating protein 1,IQGAP1)在骨髓瘤细胞中的过表达及其机制。方法:RT-PCR和Western blotting检测RPMI8226和U266细胞IQGAP1表达;使用不同的寡核苷酸序列构建沉默人IQGAP1的shRNA质粒(clone 1、clone 2、clone 3和clone 4)、转染RPMI8226细胞,RT-PCR和Western blotting检测其IQGAP1表达;Western blotting检测RPMI8226-shIQGAP1组(clone 1)、RPMI8226-shRNA阴性对照组和RPMI8226未转染组细胞p-ERK1/2、ERK1/2、Akt、p-AKT、STAT3和p-STAT3水平,免疫共沉淀确定IQGAP1和ERK的关系。结果:IQGAP1在RPMI8226和U266骨髓瘤细胞株中过表达,使用shRNA表达质粒沉默RPMI8226细胞IQGAP1后,IQGAP1表达减少,在有或无血管内皮生长因子(VEGF)/白细胞介素6(IL-6)作用下检测RPMI8226-shIQGAP1组(clone 1)细胞增殖明显下降。进一步检测3组细胞p-ERK1/2、ERK1/2、AKT、p-AKT、STAT3和p-STAT3蛋白水平,与RPMI8226-shRNA阴性对照组和RPMI8226未转染组相比,RPMI8226-shIQGAP1组ERK1/2磷酸化水平下降70.2%,免疫共沉淀法明确在RPMI8226细胞中IQGAP1和ERK存在相互作用。结论:IQGAP1在骨髓瘤细胞中的过表达可能与MAPK途径的ERK相互作用有关。 展开更多
关键词 含IQ模序的GTP酶活化蛋白1 多发性骨髓瘤 MAP激酶信号通路 细胞增殖 细胞外信号调节激酶
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进行性多灶性白质脑病的临床诊治分析:附病例报道 被引量:1
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作者 毕涌 陈国钱 +3 位作者 陈为安 周淑娟 马泳泳 张旭 《中国全科医学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第11期1304-1306,共3页
目的探讨进行性多灶性白质脑病(PML)的临床诊治特点,以早期诊断和治疗。方法回顾性分析温州医科大学附属第一医院2009-12-27收治的1例弥漫大B细胞淋巴瘤并发PML患者的临床资料,并结合文献总结其入院查体、实验室检查、影像学检查、病理... 目的探讨进行性多灶性白质脑病(PML)的临床诊治特点,以早期诊断和治疗。方法回顾性分析温州医科大学附属第一医院2009-12-27收治的1例弥漫大B细胞淋巴瘤并发PML患者的临床资料,并结合文献总结其入院查体、实验室检查、影像学检查、病理学检查结果及诊治经过。结果本例患者临床表现为视觉障碍、认知功能减退和精神行为异常等常见PML症状;脑脊液中检测到JC病毒;颅脑MRI显示两侧半卵圆中心、侧脑室旁多发T1FLAIR低信号、T2WI和弥散加权成像(DWI)高信号病灶,颅脑MRI增强后未见明显强化改变,无占位效应,符合典型的PML影像学表现。给予退热、补液,纠正贫血、低蛋白血症等积极治疗,但患者病情仍迅速进展,自动出院1d后死亡。结论 PML临床表现多样,神经系统表现多为高级皮质功能减退,脑脊液JC病毒及颅脑MRI检查有利于早期诊断。治疗以对症治疗为主,但预后较差。 展开更多
关键词 脑白质病 进行性多灶性 磁共振成像 JC病毒 淋巴瘤
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BCMA-CART治疗复发难治性多发性骨髓瘤的毒性管理及疗效评估 被引量:3
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作者 张筱媛 丁寒怡 +7 位作者 刚东旭 何晓雨 马泳泳 钱红兰 林轩儒 邢冲云 章瑜 江松福 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期466-475,共10页
目的:探讨BCMA-CART细胞治疗复发难治性多发性骨髓瘤(MM)的毒性管理及疗效评估。方法:评估2017年12月至2020年9月在温州医科大学附属第一医院接受BCMA-CART治疗的21例MM患者的疗效及不良反应,对高风险患者和非高风险患者进行疗效评估和... 目的:探讨BCMA-CART细胞治疗复发难治性多发性骨髓瘤(MM)的毒性管理及疗效评估。方法:评估2017年12月至2020年9月在温州医科大学附属第一医院接受BCMA-CART治疗的21例MM患者的疗效及不良反应,对高风险患者和非高风险患者进行疗效评估和生存分析。结果:21例复发难治性MM患者在输注BCMA-CART细胞后,有效例数为17例,其中完全缓解(sCR/CR)10例,部分缓解(VGPR/PR)7例。所有患者中位OS为19.4个月,中位PFS为7.9个月。具有髓外疾病、高风险遗传学和ISSⅢ期的患者分别为5、15和8例,有效例数分别为3、11和6例。3例无高危因素的患者治疗均有效。并发髓外疾病的MM患者中位OS和中位PFS分别为14.2和2.5个月,均短于无髓外疾病的患者(分别为19.4和8.9个月)。具有高风险细胞遗传学因素和ISSⅢ级的患者中位OS和中位PFS与非高危患者均无明显差异。20例患者发生细胞因子释放综合征(CRS),其中1级CRS 14例,2级6例,无≥3级病例。9例患者使用了IL-6受体抑制剂。所有患者的CRS均得到有效控制,没有患者发生神经系统毒性。结论:BCMA-CART治疗复发难治性MM具有一定疗效,且不良反应可控。密切监测和及时处理有助于减少不良反应的发生发展。 展开更多
关键词 B细胞成熟抗原 多发性骨髓瘤 嵌合抗原受体T细胞 复发性难治性 细胞因子释放综合征
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