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肠易激综合征结肠类器官上皮屏障损伤模型的建立与评价
被引量：
1
1
作者
饶珂寒
徐泳茵
+5 位作者
蓝兆
占凯
郑欢
秦书敏
黄绍刚
吴皓萌
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第8期1559-1568,共10页
目的:建立肠易激综合征(irritable bowel syndrome,IBS)结肠黏膜屏障损伤类器官模型,并对该模型进行评价。方法:取20~22 g雄性C57BL/6小鼠结肠段,分离并提取结肠隐窝,在基质胶中培养,使其增殖和分化成具有结肠上皮样结构的3D空腔球体,...
目的:建立肠易激综合征(irritable bowel syndrome,IBS)结肠黏膜屏障损伤类器官模型,并对该模型进行评价。方法:取20~22 g雄性C57BL/6小鼠结肠段,分离并提取结肠隐窝,在基质胶中培养,使其增殖和分化成具有结肠上皮样结构的3D空腔球体,进而开展以下实验:(1)进行结肠类器官(colonoids)及小鼠结肠组织免疫荧光检测,鉴定结肠类器官。(2)异硫氰酸荧光素葡聚糖(fluorescein isothiocyanate dextran 4,FD4)评估结肠类器官上皮屏障功能。(3)探索不同浓度、不同时点干扰素γ(interferon-γ,IFN-γ)诱导下结肠类器官上皮屏障的变化,运用FD4和HE染色评价屏障功能,RT-qPCR检测结肠类器官类器官闭合蛋白(occludin)和闭锁小带蛋白1(zonula occludens-1,ZO-1)的mRNA表达水平,免疫荧光检测occludin和ZO-1蛋白的分布与定位。结果:(1)结肠类器官与小鼠结肠组织的5-乙炔基-2'-脱氧尿苷(5-ethynyl-2'-deoxyuridine,EdU)增殖和肠上皮细胞谱系标记表达一致。(2)对照组未见FD4渗透进结肠类器官腔内,而乙二醇双(2-氨基乙基醚)四乙酸[ethylene glycol-bis(β-aminoethyl ether)-N,N,N',N'-tetraacetic acid,EGTA]诱导后FD4明显渗透进结肠类器官腔内(P<0.05)。(3)从18 h起,60、100、200和240 ng/mL的IFN-γ均显著可见FD4渗透进结肠类器官空腔内(P<0.05),HE染色可见结肠类器官屏障损伤。18 h各浓度IFN-γ都可诱导occludin和ZO-1的mRNA表达水平显著下降(P<0.05),且occludin和ZO-1的荧光显著减弱(P<0.05)。结论:(1)所培养的类器官为结肠类器官,具有完整的上皮屏障。(2)IFN-γ可诱导结肠类器官上皮紧密连接occludin和ZO-1的转录水平降低,相应蛋白的表达减少及定位分布改变,由此增加结肠类器官上皮通透性。该模型与IBS结肠黏膜屏障损伤这一病理生理状态拟合度较高,为开展IBS结肠黏膜屏障损伤方向研究提供了新的工具和方法。
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关键词
结肠类器官
肠易激综合征
上皮屏障损伤
干扰素Γ
紧密连接
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职称材料
肝硬化并严重乳酸酸中毒2例分析
被引量：
1
2
作者
吕永豪
温伟琴
+3 位作者
曾晶晶
胡小花
饶珂寒
项凤梅
《临床肝胆病杂志》
CAS
2015年第2期278-279,共2页
临床上，肝硬化死亡常与肝衰竭引起的各种并发症相关。严重乳酸中毒导致患者死亡，在临床上相对少见。本文2例晚期肝硬化患者，因出现严重的乳酸中毒而病情迅速恶化而死亡。现报道如下。 1临床资料 病例1：患者男性，65岁，农民。因...
临床上，肝硬化死亡常与肝衰竭引起的各种并发症相关。严重乳酸中毒导致患者死亡，在临床上相对少见。本文2例晚期肝硬化患者，因出现严重的乳酸中毒而病情迅速恶化而死亡。现报道如下。 1临床资料 病例1：患者男性，65岁，农民。因头晕，柏油便3d人院。既往嗜酒史40年，600g／d。入院诊断：酒精性肝硬化并食管胃底静脉曲张破裂出血，神经性皮炎。患者人院当天予止血、禁食、抗感染、营养支持等治疗后，未再出血，且生命体征稳定。
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关键词
肝硬化
酸中毒
乳酸性
病例报告
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职称材料
题名
肠易激综合征结肠类器官上皮屏障损伤模型的建立与评价
被引量：
1
1
作者
饶珂寒
徐泳茵
蓝兆
占凯
郑欢
秦书敏
黄绍刚
吴皓萌
机构
广州中医药大学第二附属医院
广州中医药大学第一附属医院
出处
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第8期1559-1568,共10页
基金
国家自然科学基金资助项目(No.81974563)
广东省中医药科学院“优秀青年人才青苗计划”(No.SZ2022QN08)
+1 种基金
广州市科技计划项目(No.202102010207,No.202102010226,No.2023A03J0733)
广州中医药大学学科协同创新团队项目(No.2021xk63)。
文摘
目的:建立肠易激综合征(irritable bowel syndrome,IBS)结肠黏膜屏障损伤类器官模型,并对该模型进行评价。方法:取20~22 g雄性C57BL/6小鼠结肠段,分离并提取结肠隐窝,在基质胶中培养,使其增殖和分化成具有结肠上皮样结构的3D空腔球体,进而开展以下实验:(1)进行结肠类器官(colonoids)及小鼠结肠组织免疫荧光检测,鉴定结肠类器官。(2)异硫氰酸荧光素葡聚糖(fluorescein isothiocyanate dextran 4,FD4)评估结肠类器官上皮屏障功能。(3)探索不同浓度、不同时点干扰素γ(interferon-γ,IFN-γ)诱导下结肠类器官上皮屏障的变化,运用FD4和HE染色评价屏障功能,RT-qPCR检测结肠类器官类器官闭合蛋白(occludin)和闭锁小带蛋白1(zonula occludens-1,ZO-1)的mRNA表达水平,免疫荧光检测occludin和ZO-1蛋白的分布与定位。结果:(1)结肠类器官与小鼠结肠组织的5-乙炔基-2'-脱氧尿苷(5-ethynyl-2'-deoxyuridine,EdU)增殖和肠上皮细胞谱系标记表达一致。(2)对照组未见FD4渗透进结肠类器官腔内,而乙二醇双(2-氨基乙基醚)四乙酸[ethylene glycol-bis(β-aminoethyl ether)-N,N,N',N'-tetraacetic acid,EGTA]诱导后FD4明显渗透进结肠类器官腔内(P<0.05)。(3)从18 h起,60、100、200和240 ng/mL的IFN-γ均显著可见FD4渗透进结肠类器官空腔内(P<0.05),HE染色可见结肠类器官屏障损伤。18 h各浓度IFN-γ都可诱导occludin和ZO-1的mRNA表达水平显著下降(P<0.05),且occludin和ZO-1的荧光显著减弱(P<0.05)。结论:(1)所培养的类器官为结肠类器官,具有完整的上皮屏障。(2)IFN-γ可诱导结肠类器官上皮紧密连接occludin和ZO-1的转录水平降低,相应蛋白的表达减少及定位分布改变,由此增加结肠类器官上皮通透性。该模型与IBS结肠黏膜屏障损伤这一病理生理状态拟合度较高,为开展IBS结肠黏膜屏障损伤方向研究提供了新的工具和方法。
关键词
结肠类器官
肠易激综合征
上皮屏障损伤
干扰素Γ
紧密连接
Keywords
colonoids
irritable bowel syndrome
intestinal barrier dysfunction
IFN-gama
tight junction
分类号
R574.62 [医药卫生—消化系统]
R363.2 [医药卫生—病理学]
R-33 [医药卫生]
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职称材料
题名
肝硬化并严重乳酸酸中毒2例分析
被引量：
1
2
作者
吕永豪
温伟琴
曾晶晶
胡小花
饶珂寒
项凤梅
机构
江西中医药大学附属医院脾胃肝胆科
出处
《临床肝胆病杂志》
CAS
2015年第2期278-279,共2页
文摘
临床上，肝硬化死亡常与肝衰竭引起的各种并发症相关。严重乳酸中毒导致患者死亡，在临床上相对少见。本文2例晚期肝硬化患者，因出现严重的乳酸中毒而病情迅速恶化而死亡。现报道如下。 1临床资料 病例1：患者男性，65岁，农民。因头晕，柏油便3d人院。既往嗜酒史40年，600g／d。入院诊断：酒精性肝硬化并食管胃底静脉曲张破裂出血，神经性皮炎。患者人院当天予止血、禁食、抗感染、营养支持等治疗后，未再出血，且生命体征稳定。
关键词
肝硬化
酸中毒
乳酸性
病例报告
Keywords
liver cirrhosis
acidosis, lactic
case reports
分类号
R575.2 [医药卫生—消化系统]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
肠易激综合征结肠类器官上皮屏障损伤模型的建立与评价
饶珂寒
徐泳茵
蓝兆
占凯
郑欢
秦书敏
黄绍刚
吴皓萌
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2024
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
肝硬化并严重乳酸酸中毒2例分析
吕永豪
温伟琴
曾晶晶
胡小花
饶珂寒
项凤梅
《临床肝胆病杂志》
CAS
2015
1
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