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大肠杆菌感染对绵羊乳腺成纤维细胞损伤及TLR4表达的影响
被引量：
1
1
作者
马小军
王加冕
+3 位作者
李世瑛
颜丽娇
麻强生
张小丽
《华北农学报》
CSCD
北大核心
2022年第2期231-238,共8页
为研究绵羊大肠杆菌性乳腺炎中乳腺成纤维细胞的损伤情况及TLR4的作用机制,通过体外培养获得原代绵羊乳腺成纤维细胞,大肠杆菌人工感染细胞建立大肠杆菌性乳腺炎细胞模型,分析大肠杆菌对细胞损伤的影响及TLR4在大肠杆菌性乳腺炎中的作...
为研究绵羊大肠杆菌性乳腺炎中乳腺成纤维细胞的损伤情况及TLR4的作用机制,通过体外培养获得原代绵羊乳腺成纤维细胞,大肠杆菌人工感染细胞建立大肠杆菌性乳腺炎细胞模型,分析大肠杆菌对细胞损伤的影响及TLR4在大肠杆菌性乳腺炎中的作用。采用酶消化法结合差速消化法获得原代绵羊乳腺成纤维细胞;MTT法检测细胞活力及TLR4阻断剂CLI-095的细胞毒性作用;乳酸脱氢酶法检测大肠杆菌对绵羊乳腺成纤维细胞的损伤情况并筛选最适MOI比值;qRT-PCR法检测caspase-3、TLR4的mRNA相对表达量及CLI-095的阻断效果;比色法检测细胞焦亡蛋白caspase-4,5的酶活性;WB检测TLR4蛋白的相对表达量;平板活菌计数法检测CLI-095对大肠杆菌黏附绵羊乳腺成纤维细胞的影响。分离获得绵羊乳腺成纤维细胞,MTT测定结果显示,细胞活力良好;大肠杆菌以最适MOI=4∶1感染绵羊乳腺成纤维细胞后,各时间段LDH释放量均显著升高;caspase-3 mRNA的相对表达量在感染1~3 h内显著上升,3 h后表达量显著下降;caspase-4,5酶活性在感染1~3 h内升高,3 h后降低。TLR4的mRNA及蛋白表达量均显著上调,CLI-095可抑制大肠杆菌对细胞的黏附作用。大肠杆菌感染成纤维细胞后LDH释放量增加、caspase-3基因表达上调、caspase-4,5酶活性升高,促进了绵羊乳腺成纤维细胞的损伤、凋亡及焦亡;大肠杆菌感染促进绵羊乳腺成纤维细胞内TLR4 mRNA及蛋白的表达;TLR4阻断剂CLI-095可能通过抑制TLR4的表达抑制E.coli对细胞的黏附作用。
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关键词
绵羊
大肠杆菌
乳腺炎
成纤维细胞
TLR4
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职称材料
PRNP过表达MAC-T细胞的构建及其对细胞黏附侵袭的影响
2
作者
张钊
颜丽娇
+7 位作者
杨宇泽
苟惠天
万学瑞
马小军
丁巨财
彭婕
王川
张小丽
《甘肃农业大学学报》
CAS
CSCD
2023年第4期37-45,共9页
【目的】研究PRNP过表达对牛乳腺上皮细胞系(MAC-T)黏附、侵袭的影响。【方法】利用慢病毒载体技术构建PRNP慢病毒过表达载体并建立稳定PRNP过表达MAC-T细胞系;应用实时荧光定量PCR和Western Blot对过表达MAC-T细胞系进行验证;随后用MRS...
【目的】研究PRNP过表达对牛乳腺上皮细胞系(MAC-T)黏附、侵袭的影响。【方法】利用慢病毒载体技术构建PRNP慢病毒过表达载体并建立稳定PRNP过表达MAC-T细胞系;应用实时荧光定量PCR和Western Blot对过表达MAC-T细胞系进行验证;随后用MRSA感染MAC-T细胞和PRNP过表达MAC-T细胞系,比较PRNP过表达MAC-T细胞和野生型MAC-T细胞在黏附侵袭生理特性的差异。【结果】成功构建pLVML-PRNP慢病毒表达载体和稳定的PRNP+-MAC-T细胞系;黏附侵袭结果表明MRSA对过表达PRNP的MAC-T细胞黏附侵袭能力显著低于对照组,值得注意的是,MRSA在感染PRNP+-MAC-T细胞后的6 h内,未发生明显的侵袭现象,直至感染6 h后其侵袭率才明显上升,8 h达到峰值,但是仍显著低于MRSA对MAC-T细胞的侵袭率。【结论】PRNP过表达能够降低MRSA对细胞的黏附侵袭能力。
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关键词
慢病毒载体
PRNP
MAC-T细胞
MRSA
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职称材料
单方势阱和多重方势阱的能级和波函数
3
作者
盛觉春
颜丽娇
《武汉钢铁学院学报》
1992年第2期212-217,共6页
本文用BASIC语言编程,讨论了单方势阱和多重方势阱的能级和波函数,得到了一些既直观又定量的结论。对于一些有代表性的波函数绘出了波形。
关键词
单方势阱
多重方势阱
波函数
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职称材料
题名
大肠杆菌感染对绵羊乳腺成纤维细胞损伤及TLR4表达的影响
被引量：
1
1
作者
马小军
王加冕
李世瑛
颜丽娇
麻强生
张小丽
机构
甘肃农业大学动物医学院
申联生物股份有限公司
新疆昌吉市大西渠镇农业畜牧业发展服务中心
出处
《华北农学报》
CSCD
北大核心
2022年第2期231-238,共8页
基金
甘肃农业大学学科建设基金(GAU-XKJS-2018-059)。
文摘
为研究绵羊大肠杆菌性乳腺炎中乳腺成纤维细胞的损伤情况及TLR4的作用机制,通过体外培养获得原代绵羊乳腺成纤维细胞,大肠杆菌人工感染细胞建立大肠杆菌性乳腺炎细胞模型,分析大肠杆菌对细胞损伤的影响及TLR4在大肠杆菌性乳腺炎中的作用。采用酶消化法结合差速消化法获得原代绵羊乳腺成纤维细胞;MTT法检测细胞活力及TLR4阻断剂CLI-095的细胞毒性作用;乳酸脱氢酶法检测大肠杆菌对绵羊乳腺成纤维细胞的损伤情况并筛选最适MOI比值;qRT-PCR法检测caspase-3、TLR4的mRNA相对表达量及CLI-095的阻断效果;比色法检测细胞焦亡蛋白caspase-4,5的酶活性;WB检测TLR4蛋白的相对表达量;平板活菌计数法检测CLI-095对大肠杆菌黏附绵羊乳腺成纤维细胞的影响。分离获得绵羊乳腺成纤维细胞,MTT测定结果显示,细胞活力良好;大肠杆菌以最适MOI=4∶1感染绵羊乳腺成纤维细胞后,各时间段LDH释放量均显著升高;caspase-3 mRNA的相对表达量在感染1~3 h内显著上升,3 h后表达量显著下降;caspase-4,5酶活性在感染1~3 h内升高,3 h后降低。TLR4的mRNA及蛋白表达量均显著上调,CLI-095可抑制大肠杆菌对细胞的黏附作用。大肠杆菌感染成纤维细胞后LDH释放量增加、caspase-3基因表达上调、caspase-4,5酶活性升高,促进了绵羊乳腺成纤维细胞的损伤、凋亡及焦亡;大肠杆菌感染促进绵羊乳腺成纤维细胞内TLR4 mRNA及蛋白的表达;TLR4阻断剂CLI-095可能通过抑制TLR4的表达抑制E.coli对细胞的黏附作用。
关键词
绵羊
大肠杆菌
乳腺炎
成纤维细胞
TLR4
Keywords
Sheep
E.coli
Mastitis
Fibroblast
TLR4
分类号
S826 [农业科学—畜牧学]
S432.4 [农业科学—植物病理学]
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职称材料
题名
PRNP过表达MAC-T细胞的构建及其对细胞黏附侵袭的影响
2
作者
张钊
颜丽娇
杨宇泽
苟惠天
万学瑞
马小军
丁巨财
彭婕
王川
张小丽
机构
甘肃农业大学动物医学院
北京市畜牧总局
出处
《甘肃农业大学学报》
CAS
CSCD
2023年第4期37-45,共9页
基金
甘肃农业大学动物医学院学科建设基金项目(GSAU-XKJS-2018-074)。
文摘
【目的】研究PRNP过表达对牛乳腺上皮细胞系(MAC-T)黏附、侵袭的影响。【方法】利用慢病毒载体技术构建PRNP慢病毒过表达载体并建立稳定PRNP过表达MAC-T细胞系;应用实时荧光定量PCR和Western Blot对过表达MAC-T细胞系进行验证;随后用MRSA感染MAC-T细胞和PRNP过表达MAC-T细胞系,比较PRNP过表达MAC-T细胞和野生型MAC-T细胞在黏附侵袭生理特性的差异。【结果】成功构建pLVML-PRNP慢病毒表达载体和稳定的PRNP+-MAC-T细胞系;黏附侵袭结果表明MRSA对过表达PRNP的MAC-T细胞黏附侵袭能力显著低于对照组,值得注意的是,MRSA在感染PRNP+-MAC-T细胞后的6 h内,未发生明显的侵袭现象,直至感染6 h后其侵袭率才明显上升,8 h达到峰值,但是仍显著低于MRSA对MAC-T细胞的侵袭率。【结论】PRNP过表达能够降低MRSA对细胞的黏附侵袭能力。
关键词
慢病毒载体
PRNP
MAC-T细胞
MRSA
Keywords
lentiviral vector
PRNP
MAC-T cells
MRSA
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
单方势阱和多重方势阱的能级和波函数
3
作者
盛觉春
颜丽娇
机构
武汉钢铁学院物理教研室
出处
《武汉钢铁学院学报》
1992年第2期212-217,共6页
文摘
本文用BASIC语言编程,讨论了单方势阱和多重方势阱的能级和波函数,得到了一些既直观又定量的结论。对于一些有代表性的波函数绘出了波形。
关键词
单方势阱
多重方势阱
波函数
Keywords
singlet potential well
multiplet potential well
wave function
eigenvalue
eigenfunction
分类号
O413.1 [理学—理论物理]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
大肠杆菌感染对绵羊乳腺成纤维细胞损伤及TLR4表达的影响
马小军
王加冕
李世瑛
颜丽娇
麻强生
张小丽
《华北农学报》
CSCD
北大核心
2022
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
PRNP过表达MAC-T细胞的构建及其对细胞黏附侵袭的影响
张钊
颜丽娇
杨宇泽
苟惠天
万学瑞
马小军
丁巨财
彭婕
王川
张小丽
《甘肃农业大学学报》
CAS
CSCD
2023
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
单方势阱和多重方势阱的能级和波函数
盛觉春
颜丽娇
《武汉钢铁学院学报》
1992
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
已选择
0
条
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参考文献
引证文献
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